CZ200152A3 - Antivirové makrocyklické sloučeniny - Google Patents

Abstract

Předkládané řešení se týká nových antivirových sloučenin, farmaceutických prostředků, které je obsahují ajejich použití. Konkrétněji se týká derivátů monocyklických polyamidů, které mají aktivitu v standardních testech proti buňkám infikovaným HIV nebo FIV a rovněž další biologickou aktivitu vztaženou k vazbě ligandů na chemokinové receptory, které zprostředkují řadu savčích zárodečných vývojových procesů.

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nových antivirových sloučenin, farmaceutických prostředků, které je obsahují a jejich použití. Konkrétněji, vynález se týká derivátů monocyklických polyaminů, které mají aktivitu v standardních testech proti buňkám infikovaným HIV a rovněž další biologickou aktivitu vztaženou k vazbě ligandů na chemokinové receptory, které zprostředkují řadu savčích zárodečných vývojových procesů. Předkládaný vynález se dále týká způsobů léčby různých nemocí „ zprostředkovaných vazbou chemokinový receptor-ligand.

Dosavadní stav techniky

Bylo popsáno přibližně 40 lidských chemokinů, které působí, alespoň částečně, modulací komplexních a překrývajících se sad biologických aktivit důležitých pro pohyb lymfoidních buněk a výron a infiltraci leukocytů do tkání v odezvě na vyvolávající činidla (viz. například: P. Ponath, Exp. Op/n. Invest. Drugs, 7:1-18, 1998). Tyto chemotaktické cytokiny, nebo chemokiny tvoři rodinu proteinů, přibližně o velikosti 8-10 kDa. Zdá se, že chemokiny sdílejí obecnou strukturu, která se skládá ze 4 Zachovalých cysteinů podílejících se na udržování terciární struktury. Existují dvě hlavní subrodiny chemokinů: „CC“ nebo β-chemokiny a „CXC“ nebo achemokiny. Receptory těchto chemokinů se klasifikují podle chemokinů, který tvoří přirozený ligand receptoru. Receptory β-chemokinů jsou označeny „CCR“, zatímco receptory α-chemokinů jsou označeny „CXCR“.

> Předpokládá se, že chemokiny jsou základními mediátory při vyvolání a udržování zánětu. Konkrétněji, bylo zjištěno, že chemokiny hrají důležitou úlohu při regulaci endotheliální buněčné funkce, zahrnující proliferaci, migraci a diferenciaci během angiogenéze a re-endothelizace po zranění (Gupta a kol., J. Biol. Chem., 7:4282-4287, 1998). Dva specifické chemokiny byly obsaženy v etiologii infekce virem deficitu imunity u lidí (HIV).

Ve většině případů, se HIV na počátku váže přes svůj gp120 obalový protein k receptoru CD4 cílové buňky. Předpokládá se, že ke konformačním změnám dochází v gp120, což vede k jeho následné vazbě k chemokinovému receptoru, jako • · ···· · · • · · · je CCR-5 (Wyatt a kol., Science, 280: 1884-1888 (1998)). Izoláty HIV-1, zvyšující se následně v průběhu infekce se váží k chemokinovému receptoru CXCR-4. Vzhledem k tomu, že virus deficity imunity u koček a další příbuzné retroviry se váží k chemokinovému receptoru bez nutnosti se vázat nejprve k receptoru CD4, navrhuje se, že chemokinové receptory mohou být původními obligátními receptory pro retroviry deficitu imunity (Richardson a kol., J. Virol., 73:661 (1999)).

Po vazbě HIV k CD4, dojde ke spojení virus-buňka, které je zprostředkováno členy chemokinové receptorové rodiny s různými členy, sloužícími jako kofaktory spojení makrofág-tropních (M-tropic) a T buněčná linie-tropních (T-tropic) izolátů HIV1 (Carroll a kol. Science, 276: 273-276 1997). V průběhu nemoci u pacienta se zdá, že většina částic HIV se mění z M-tropního na agresivnější T-tropní virový fenotyp (Miedema a kol.. Immune. Rew., 140:35 (1994)). Kuriózně, M-tropní virový fenotyp je v souladu se schopností viru vstupovat do buňky po vazbě na CCR-5 receptor, zatímco T-tropní virový fenotyp je v souladu se vstupem viru do buňky po vazbě a membránové fůzi s CXCR-4 receptorem. Klinická pozorování prokazují, že pacienti, kteří vykazují genetické mutace v CCR-5 jsou odolní nebo méně náchylní k infekci HIV.

Nicméně, zdá se, že vazba chemokinových receptorů k jejich přirozeným ligandům plní spíše evoluční a centrální úlohu než pouze úlohu mediátorů infekce HIV. Chemokinový receptor, CXCR-4 byl nalezen jako základ pro vaskularizaci gastrointestinálního traktu (Tachibana a kol, Nátuře, 393:591-594 (1998)) a rovněž hemautopoézu a cerebelární vývoj (Zou a kol., Nátuře, 393:591-594 (1998)). Interference kterékoliv z těchto důležitých funkcí způsobená vazbou PBSF/SDF-1 (pre-B-cell growth-stimulating factor/stromal derived factor) k CXCR-4 chemokinovému receptoru způsobí letální deficit ve vaskulárním vývoji, hematopoéze a kardiogenézi. Podobně, předpokládá se, že cerebelární vývoj je závislý na účinnosti migrace CXCR-4 v nervové buněčné migraci a na modelování v centrálním nervovém systému. Tento na G-protein kopulovaný chemokinový receptor hraje důležitou úlohu v zajištění nezbytných modelů migrace granulárních buněk v cerebelárním primordiu. Interakce SDF-1 a CXCR4 je rovněž důležitá k udržování rodiny buněk B a k zadržování buněčného kmene v kostní dřeni (Peled a kol.,

Science 283: 845 (1999); Springer a kol; Immunity 10: 463 (1999))

K lepšímu pochopení vztahu mezi chemokiny a jejich receptory byly provedeny nedávno pokusy blokovat vazbu HIV k chemokinovému receptoru CXCR* · · • · za použití monoklonálních protilátek nebo malých molekul, které ukazují užitečnou terapeutickou strategii (Schols a kol., J. Exp. Med. 186: 1383-1388 (1997); Schols a kol., Antiviral Research 35: 147-156 (1997)). Malé molekuly jako bicyclamy specificky brání vazbě CXCR-4 a nikoliv vazbě CCR-5 (Donzella a kol., Nátuře Medicine, 4: 72-77 (1998)). Tyto experimenty demonstrují interferenci v počáteční fázi HIV a membránové fůzi k cílové buňce in vitro. Další experimenty monitorující tok vápníku nebo uvolnění Ca'² demonstrují, že bicyclam také působí jako antagonista k přenosu signálu vznikajícího z vazby SDF-1a, přirozeného chemokinu k CXCR-4.

Dále, etiologie nebo asociace vazby chemokinového receptoru při proliferaci glioblastomových nádorových buněk popsal Sehgal a kol., J. ofSurg. Ocolo. 69: 99104 (1998) („Sehgal I“) a Sehgal a kol., J ofSurg. Ocolo. 69: 239-248 (1998) („Sehgal II“). Úloha CXCR4, jeho vazby k jeho receptoru hraje důležitou úlohu v tvorbě a/nebo proliferaci glioblastomových buněk. Inhibice vazby pomocí CXCR4 kjeho přirozenému receptorovému ligandu sloučeninami podle předkládaného vynálezu, jako je AMD 3100 poskytuje nová léčiva pro léčbu nádorů centrálního nervového systému, které jsou zprostředkovány nebo spojovány s chemokiny, jako je CXCR4.

Dále, bylo zjištěno, že chemokiny CXC regulují nebojsou spojovány s regulací angiogenéze v nikoliv malých buňkách při rakovině plic (viz. Arenberg a kol., J. of Leukocyte Biol.; 62:554562 (1997); a Moore a kol., TCM, díl 8(2): 51-58 (1998) Elsevier Science, Inc.). Úloha chemokinú CXC a vazba k jejich příslušným receptorům hraje důležitou roli v tvorbě a/nebo proliferaci u rakoviny nikoliv malých plicních buněk. Inhibice vazby těchto CXC chemokinú k jejich přirozeným receptorovým ligandům sloučeninami podle vynálezu, jako je AMD 3100 poskytuje nová léčiva k léčbě nádorů, jako rakovina nikoliv malých plicnJch buněk, které jsou zprostředkovány nebo spojovány se zvýšenou úrovní chemokinú.

U.S. patent č. 5 583 131, U.S. patent č. 5 698 546 a U.S. patent č. 5 817 807 popisují cyklické sloučeniny, které jsou aktivní proti HIV-1 a HIV-2 v testech in vitro. Nyní jsme zjistili, že tyto sloučeniny vykazují aktivitu proti viru deficitwrcnréíi (anti-HIV aktivitu) a aktivitu proti viru deficitu imunity u koček (anti-FIV aktivita) v důsledku jejich vazby k chemokinovémuieceptoru 4 (CXCR-4 nebo Fusin receptoru), exprimovaných na povrchu určitých buněk imunitního systému (Este a kol., Mol. Pharmacol., 55:67 (1999); Egberink a kol. J. Virol, v tisku (1999)). Tato kompetitivní

9 9999 99 9999 99

999 9999

999 9999 9··

0 9 9 9 99 99 ··· vazba tím chrání tyto cílové buňky před infekcí HIV virem, který používají k nákaze CXCR-4 receptor. Nyní jsme zjistili, že sloučeniny podle vynálezu také antagonizují vazbu, signalizaci a chemotaktické účinky přirozeného CXC chemokinu pro CXCR-4 (SDF-1a). Dále j^ňe nalezli nové sloučeniny, které demonstrují ochranné účinky proti HIV infekci cílových buněk inhibicí vazby in vitro k receptoru CC-5 (CCR-5).

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje nové sloučeniny, které demonstrují ochranné účinky na cílové buňky z HIV infekce a rovněž demonstruji další biologické vlastnosti vztažené ke schopnosti těchto sloučenin inhibovat vazbu přirozeným ligandem k jeho chemokinovému receptoru.

Předkládaný vynález poskytuje makrocyklickou sloučeninu obecného vzorce I:

V-CR¹R²-Ar-CR³R⁴-N(R⁵)-(CR⁶R⁷)_X-R⁸ (I) kde V je cyklický polyaminový zbytek mající celkem 9 až 24 členů a 2 až 6, výhodně 3 až 6 případně substituovaných aminových dusíkových atomů oddělených dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku mezi nimi a který může případně zahrnovat kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh;

R¹ až R⁷ mohou být stejné nebo různé a jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje vodík, přímý, rozvětvený nebo cyklický Ci^alkyl;

R⁸ je heterocyklické skupina, substituovaná aromatická skupina nebo merkaptoskupina; Ar je aromatický nebo heteroaromatický kruh případně substituovaný v jedné nebo více polohách skupinami, které dodávají nebo odebírají elektrony;

x je 1 nebo 2;

a její adiční soli nebo komplexy s kovy.

Výhodně je V 14- až 17 členný kondenzovaný nebo nekondenzovaný kruhový systém, jako je cyklámový systém nebo 4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1]heptadeka1 (17),13,15-trienový systém nebo jeho deriváty a zejména cyklámový systém nebo jeho deriváty. Zbytek V může být substituován na C nebo N nevazebných atomech, • · · «·· · 9 · ··· ·· ·· · · 9 ···· • · · * · · 9 9 · 9 · ··· ···· 99 9 ·· · · 9 99 99 999 vhodně, hydroxylem, alkoxyskupinou, thiolem, thioalkylem nebo kterýmkoliv atomem nebo skupinou, která nemá nepříznivý vliv na aktivitu nebo toxicitu sloučenin, ale která může snižovat bazicitu aminů, jako je například halogen, nitroskupina, karboxyskupina, karboxyamidoskupina, kyselina sulfonová nebo fosfát. Vhodný kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh je fenyl, pyridin, pyrimidin, pyrazin, imidazol nebo thiazol. Výhodně je kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh fenyl nebo pyridin.

Výhodně jsou R¹ až R⁷ vždy vodík.

Výhodně se R⁸ zvolí ze souboru, který zahrnuje pyridin, pyrimidin, pyrazin, imidazol, thiofen, thiofenyl, aminobenzyl, piperidinyl, piperazinyl nebo merkaptanová skupina.

Výhodně je Ar fenyl. Výhodné substituenty jsou alkyl, aminoskupina, alkoxyskupina, hydroxyskupina, halogen, karboxyl a karboxamidoskupina.

Vynález také zahrnuje látky, které mohou být označeny jako „proléčiva“, což jsou chráněné formy léčiv, které uvolňují sloučeninu po jejich podání pacientovi. Například sloučenina může nést ochrannou skupinu, která se odštěpí hydrolýzou v tělních tekutinách, například v krevním řečišti a tak dojde k uvolnění aktivní sloučeniny nebo se oxiduje nebo redukuje v tělních tekutinách za uvolnění sloučeniny. Diskusi o proléčivech lze najít v „Smith and Williams, Introduction to the Principles of Drug Design“, H. J. Smith, Wright, 2. vydání, Londýn 1988.

Kyselé adiční soli, jako jsou například hydrochloridy a netoxické labilní kovové komplexy sloučenin obecného vzorce I jsou také aktivní sloučeniny podle vynálezu. Netoxicita v uvedeném kontextu musí být uvažována s ohledem na prognózu infikovaných pacientů bez léčení. Komplexy mědi a zinku jsou výhodné, ačkoliv mohou být použity kovy jako je nikl, zatímco méně labilní kovy, jako je kobalt nebo rhodium jsou méně výhodné, neboť mají pravděpodobně nižší selektivitu.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou nové. Proto je dalším aspektem vynálezu poskytnutí postupu pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, který zahrnuje následující kroky:

·· ···· «· ···· ·· ·· · · * ···· (i) nukleofilní atak cyklickým polyaminem V majícím jeden nechráněný aminový dusík, přičemž ostatní atomy dusíku jsou chráněny, na přebytek sloučeniny obecného vzorce II

Y-CR¹R²-Ar-CR³R⁴-Y (II) kde R¹ až R⁴ mají význam uvedený shora a každé Y je aktivní substituent, který může být nahrazen nechráněným dusíkem polyaminu V a výhodně se zvolí ze souboru, který zahrnuje Br, Cl, I, merthansulfonát, 4-toluensulfonát, trifluormethansulfonát.

Jak chránit aminové dusíky cyklických polyaminů je odborníkům dobře známo.

Výhodně se použije k substituci methansulfonyl a/nebo toluensulfonyl a/nebo diethoxyfosforyl (viz: Bridger a kol., J. Med. Chem. , 38: 366-378 (1995); Bridger a kol., U.S. patent 5 583 131 nebo Bridger a kol., U.S. patent 5 698 546) a/nebo nitrobenzensulfonyl (Fukuyama a kol., Tetrahedron Lettrs, 1995, 36, 6373-6374).

V

Chráněný polyamin nejprve reaguje s 5- az 10-násobným přebytkem sloučeniny obecného vzorce II v rozpouštědle, jako je acetonitril nebo dimethylformamid, tetrahydefuran nebo dioxan, a v přítomnosti báze, například uhličitanu sodného nebo uhličitanu draselného. Reakce se obvykle provádí při teplotě místnosti nebo pří zvýšené teplotě a získá se cyklický polyamin, ve kterém jsou všechny aminové dusíky chráněny. Obecně se získá směs produktů a my jsme zjistili, že produkt se může výhodně čistit chromatografií na silikagelu nebo krystalizací.

Nukleofilní atak sloučeniny obecného vzorce III

R⁵NH-(CR⁶R⁷)_x-R⁸ kde R⁵-R⁸ a x mají význam definovaný shora na produkt reakce popsané v (I) shora a následným odstraněním aminových dusíků. Reakce s přebytkem sloučeniny vzorce III se provede za podobných podmínek jako reakce s polyaminem V.

Chránící skupiny se výhodně odstraní zahříváním chráněné molekuly při zpětném toku ve směsi vodné HBr a kyseliny octové nebo koncentrované kyseliny (lil) ·· ···· ·· ···· ··

v sirové, nebo připadle diethoxyfosforylu v přítomnosti plynného chlorovodíku nebo plynného bromovodíku v kyselině octové; v případě nitrobenzensulfonové deprotekce se použije merkaptan jako je thiofenol nebo merkaptooctová kyselina v přítomnosti vhodné báze, jako je uhličitan draselný, uhličitan česný, hydroxid sodný nebo hydroxid litný v rozpouštědle, jako je dimethylformamid, acetonitril, tetrahydrofuran nebo dioxan. Tato reakce se obecně provádí při teplotě místnosti nebo při zvýšené teplotě za vzniku polyaminu, ve kterém je na atomech dusíku odstraněna chránící skupina. Alternativně a podle dalšího aspektu vynález poskytuje postup přípravy sloučenin obecného vzorce I, který zahrnuje následující stupně:

(i) nukleofilní atak cyklickým polyaminem V majíc^jeden nechráněný aminový dusík, přičemž ostatní atomy dusíku jsou chráněny, na přebytek sloučeniny obecného vzorce IV

Y-CR¹ R²-Ar-CR³R⁴-N(R⁵)-(CR⁶R⁷)_X-R⁸ (IV) kde R¹ až R⁴, a x, R⁶ až R⁸ a Ar mají význam uvedený shora a každé Y je aktivní substituent, který může být nahrazen nechráněným dusíkem polyaminu V jak je popsáno shora. V tomto případě zamýšlený substituent R⁵ je vodík, dusík je výhodně chráněn jako nitrobenzensulfonylová nebo diethoxyfosforylová skupina.

Chráněný polyamin V nejprve reaguje se sloučeninou obecného vzorce IV za použití podobných podmínek jak při reakcích se sloučeninami obecného vzorce II a vzorce III jak je popsáno shora a produkt reakce se podrobí deprotekci aminových dusíků na polyaminu a v R⁵

Stupně k odstranění chránící skupiny se provedou jak je popsáno shora. Výhodně se sekvenční kombinace těchto reakcí k odstranění chránící skupiny mohou použít když je přítomna směs kteréhokoliv z následujících substituentů: methansulfonyl; toluensulfonyl; diethoxyfosforyl; nebo nitrobenzensulfonové skupina.

Nové sloučeniny dále zahrnují makrocyklickou sloučeninu obecného vzorce V:

V²-CR⁹R^W-Ar² (V) kde V² je cyklický polyaminový zbytek mající celkem 9 až 24 členů a 2 až 6, výhodně 3 až 6 případně substituovaných aminových dusíkových atomů oddělených

9·9· ·· ···· 99 • 9 9 «9 9 9 9 9

999 999· 99 9 • 9 9 99 99 99 999 dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku mezi nimi a který může případně zahrnovat kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh; R⁹ až R¹⁰ mohou být stejné nebo různé a jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje vodík, přímý, rozvětvený nebo cyklický Ci^alkyl; dále, kde Ar² je aromatický, kondenzovaný aromatický, heterocyklický, kondenzovaný heterocyklický kruh, každý případně substituovaný v jedné nebo více polohách skupinami, které dodávají nebo odebírají elektrony a/nebo aromatickými a heterocyklickými skupinami a jejích alkylovými deriváty; a jejich kyselé adiční soli a kovové komplexy.

Tyto nové sloučeniny demonstrují anti-HIV aktivitu v in vitro zkoušce, jak je uvedeno v tabulce 1. Tyto nové sloučeniny také demonstrují biologickou účinnost při inhibici vazby monoklonální protilátky specifické k CXCR-4 (12G5) k CXCR-4 na SUP-T1 buňkách sloučeninami AMD. Tato data jsou uvedena v tabulce 2 pro AMD3100 (1,1 '-[1,4-fenylenbis(methylen)]bis-1,4,8,11 -tetraacacyklotetradekan), AMD3465 (N-[1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin) a šest nových sloučenin: AMD 7049; AMD 7050; AMD 7051; AMD 7058; AMD 7059; a AMD 7063.

Data ukazující inhibici zvýšeného toku Ca²⁺ indukovaného SDF-1 v buňkách SUP-T1 (inhibice přenosu signálu) sloučeninami AMD jsou uvedena v tabulce 3 pro AMD 3100, AMD 3465 a sloučeniny: AMD 7049; AMD 7050, AMD 7051; AMD 7058; AMD 7059; a AMD 7063.

Několik nových sloučenin také inhibovalo infekci buněčné linie U87.CD4.CCR5 M-tropním HIV-1 kmenem BaL, který exkluzivně využívá pro vstup co-receptor CCR-5. Tato data jsou uvedena v tabulce 4.

Experimentální postupy pro zkoušku na vazbu mAb, inhibici toku Ca²⁺ a inhibici infekce pomocí HIV-1 BaL kmenem v buňkách U87.CD4.CCR5 bude odborníkem snadno pochopeno. Například viz: Schols a kol., J. Exp. Med. 186: 13831388 (1997); Schols a kol., Antiviral Research 35: 147-156 (1997); Donzella a kol., Nátuře Medicine, 4: 72-77 (1998). Rovněž je popsána charakterizace CXCR-4 specifické monoklonální protilátky 12G5, viz. Hoxie a kol., Cell, 87: 745-756 (1996).

Citace shora uvedených dokumentů nelze chápat jako připuštění, že souvisí se stavem techniky. Všechny údaje, pokud se týká dat nebo obsahu těchto dokumentů jsou založeny na informacích, které jsou přístupné přihlašovateli a nevytváří jakékoliv přiznání, pokud se týká správnosti těchto dat nebo obsahu těchto • · ··· · · · ··· · · · • · · · · ···· dokumentů. Dále, všechny dokumenty uváděné v předkládané přihlášce jsou zde uváděny jako odkaz.

Vynález bude snadněji pochopen odkazy na dále uvedené příklady. Tyto příklady jsou uvedeny pouze pro ilustraci a v žádném případě neomezují předkládaný vynález, pokud není uvedeno jinak.

Jak je uvedeno shora, sloučeniny podle vynálezu jsou aktivní vůči virovým nemocím, zejména retrovirovým infekcím a specificky HIV. Proto další aspekt předkládaného vynálezu poskytuje sloučeninu obecného vzorce I nebo V pro použití v lékařství. Konkrétněji, předkládaný vynález poskytuje použití sloučeniny obecného vzorce I nebo V pro přípravu léčiva pro léčbu pacientů infikovaných HIV. Alternativně, předkládaný vynález poskytuje způsob léčení pacientů infikovaných HIV, zahrnující podání uvedenému pacientovi farmaceuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I nebo vzorce V. Ačkoliv sloučeniny obecného vzorce I nebo vzorce

V mohou být podávány jako surový materiál, je vhodné je podávat ve formě farmaceutického prostředku zahrnujícího sloučeninu obecného vzorce I nebo vzorce

V jako aktivní složku, ve směsi s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem a případně jednou nebo více ostatními terapeutickými složkami. Tyto prostředky poskytují další aspekt předkládaného vynálezu.

Je třeba vzít v úvahu, že do rozsahu vynálezu jsou zahrnuty také mezoformy, enantiomery a rozštěpené opticky aktivní formy sloučenin obecného vzorce I nebo V. Rovněž jsou do rozsahu vynálezu zahrnuty i sloučeniny obecného vzorce I nebo vzorce V zředěné s netoxickými nebo ostatními aktivními látkami.

Stručný popis výkresů

Obrázek 1 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3465.

Obrázek 2 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3538.

Obrázek 3 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3500.

Obrázek 4 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3499.

Obrázek 5 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3498.

Obrázek 6 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3497.

Obrázek 7 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3516.

Obrázek 8 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3530.

Obrázek 9 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3517.

Obrázek 10 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3544.

·· ··*· ♦♦ ···· ··

Obrázek 11 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3543.

Obrázek 12 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3529.

Obrázek 13 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7049.

Obrázek 14 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7050.

Obrázek 15 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7051.

Obrázek 16 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7059.

Obrázek 17 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7063.

Obrázek 18 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7058.

Obrázek 19 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7032.

Obrázek 20 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7048.

Obrázek 21 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7060.

Obrázek 22 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7061.

Obrázek 23 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3451.

Obrázek 24 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3454.

Obrázek 25 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3472.

Obrázek 26 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3526.

Obrázek 27 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3100.

Obrázek 28 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 3484.

Obrázek 29 ukazuje kumulativní výskyt kolagenem indukované artritidy u laboratorních zvířat po léčbě nebo imunizaci se sloučeninou AMD 3100.

Obrázek 30 ukazuje změnu v tělesné hmotnosti u laboratorních zvířat po léčbě nebo imunizaci se sloučeninou AMD 3100.

Obrázek 31 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 8630.

Obrázek 32 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7097.

Obrázek 33 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 8631.

Obrázek 34 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD-Exp. 1.

Obrázek 35 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7450.

Obrázek 36 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD-Exp. 2.

Obrázek 37 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD 7463.

Obrázek 38 ukazuje strukturní vzorec sloučeniny AMD-Exp 3.

Výrazy jak se zde používají jsou založeny na jejich významech používaných ve stavu techniky pokud není uvedeno jinak a měly by být snadno pochopeny odborníkem. Předkládaný vynález je dále ilustrován následujícími preparativními příklady.

Příklady provedení vynálezu

Obecný postup A

-[1 -Methylen-4-(brommethylen)fenylen]-4,8,11 -tris(diethoxyfosforyl)-1,4,8,11 tetraazacyklotetradekan

K míchané roztoku 4,8,11 -tris(diethoxyfosforyI)-1,4,8,11 -tetraazacyklotetradekanu (viz Bridger a kol. J. Med. Chem. 1995, 38, 366 - 378) (6,1 g, 0,01 mol) a K2CO3 (1,89 g, 0,013 mol) v CH₃CN (150 ml) se přidá α,α'-dibrom-p-xylen (13,2 g, 0,05 mol) a reakční směs se míchá při teplotě 70 °C po dobu 1 hodiny. Roztok se ochladí na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi solanku (50 ml) a CH2CI2 (100 ml). Organická fáze se oddělí, suší (Na₂SO4) a koncentruje na minimální objem. Pevná látka se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se surový materiál jako světle žlutý olej. Čištěním sloupcovou chromatografií na silikagelu (ΟΗ₂ΟΙ₂/ΟΗ₃ΟΗ, 25:1) se získá 1-[1methylen-4-(brommethylen)fenylen]-4,8,11 -tris(diethoxyfosforyl-1,4,8,11 tetraazacyklotetradekan (4,7 g, 59 %) jako bledě žlutý olej.

¹H NMR (CDCI3) δ 1,21 -1,37 (m, 18H), 1,66-1,74 (m, 2H), 1,82-1,91 (m, 2H), 2,30 - 2,35 (m, 2H), 2,58 - 2,63 (m, 2H), 2,99 - 3,16 (m, 12H), 3,48 (s, 2H), 3,95 4,07 (m, 12H), 4,48 (s, 2H), 7,21 -7,35 (4H).

Obecný postup B

Druhá alkylace bromobenzylcyklamového meziproduktu s aminem (viz například: Bridger a kol. J. Med. Chem. 1995, 38, 366 - 378)

K roztoku vhodného aminu (5,0 ekviv.) v suchém CH3CN (5 ml) obsahujícímu suspenzi K₂CO₃ (1.5 ekviv.) se při teplotě 80 °C po kapkách a za míchání přidá roztok 1 -[1 -methylen-4-(brommethylen)fenylen]-4,8,11 -tris(diethoxyfosforyl-1,4,8,11 tetraazacyklotetradekanu (0,6 mmol) v CH₃CN (10 ml), a to v průběhu 15 až 20 minut. Poté se roztok míchá další 1 hodinu při teplotě 80 °C, koncentruje se do sucha a zbytek se rozdělí mezi 0Η₂Ο₂ a vodu. Organická vrstva se oddělí a promyje vodou

9999 99 ···· 99 • · · 9 · 9 9 · ·

999 9 9 9 99

9 9 9 9 9 99 999 (3x), poté suší (MgSOJ a odpaří. Surový zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití 5-15% směsi MeOH/CH₂CI₂ jako eluentu a získá se viskózní olej.

Obecný postup C

De-protekce diethoxyfosforamidátových skupin za použití HBr/HOAc při teplotě místnosti (viz například Bridger a kol. J. Med. Chem. 1995, 38, 366 - 378)

K míchanému roztoku chráněného derivátu cyklámu z postupu B (0,1 - 0,5 mmol) v kyselině octové (3 ml) se přidá 30% HBr v kyselině octové (Aldrich, 5 ml) a roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 14 hodin. Výsledná sraženina se sebere filtrací a promyje nejprve kyselinou octovou a poté Et₂O. Pevná látka se rozpustí v H₂O (3 ml) a zpracuje s dřevěným uhlím (100 mg) a směs se zahřívá při teplotě 80 °C po dobu 30 minut. Horký roztok se filtruje přes celit a filtrát se koncentruje na přibližně 1 ml a přidá se kyselina octová a okamžitě se začne tvořit bílá sraženina. Bílá pevná látka se sebere filtrací a suší ve vakuu.

Následující sloučeniny se připraví těmito metodami:

Příklad 1

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridinhexahydrobromid (AMD 3465)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 200 až 205 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 2,04 (m, 4H), 3,20 - 3,40 (m, 8H), 3,40 - 3,60 (m, 8H), 4,34 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 7,50 (m, 4H), 7,75 (t, 1H, J = 6,6 Hz), 7,82 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,26 (t, 1H, J = 7,9 Hz), 8,63 (d, 1H, J = 5,3 Hz);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,30, 18,96, 37,04, 37,28, 37,40, 40,92, 41,13, 41,49, 44,26, 47,61,48,01, 51,29, 58,88, 127,46, 127,75, 130,40, 131,05, 131,23, 131,47, 132,10, 132,44, 144,95, 145,81, 146,01;

FAB MS m/z 493 (M+H⁸¹Br, 7), 491 (M+H⁷⁹Br, 7), 411 (M+H, 100).

Analýza (C₂4H₃8N₆.6HBr); vypočteno C, 32,36; H, 4,98; N, 9,44; Br, 53,21. Nalezeno C, 32,20; H, 5,00; N, 9,30; Br, 53,10.

Příklad 2

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)-N-methyl-2(aminomethyl)pyridinhexahydrobromidhydrát (AMD 3538)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 220 až 225 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 2,06 (m, 4H), 2,76 (s, 3H), 3,20 - 3,65 (m, 16H), 4,47 (bs, 4H), 4,65 (s, 2H), 7,54 (bs, 4H), 7,80 (t, 1H), 7,87 (d, 1H), 8,28 (t, 1H), 8,68 (d, 1H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,14, 18,75, 18,89, 36,74, 37,04, 37,15, 37,62, 40,38, 40,72, 40,91,41,28, 44,05, 47,50, 56,98, 58,88, 60,28, 127,60, 128,86, 130,78, 130,96, 132,16, 132,64, 144,91, 145,04, 146,12;

FAB MS m/z 507 (M+H⁸¹Br, 27), 507 (M+H⁷⁹Br, 22), (M+H, 100).

Analýza (C₂₅H4oN₆.6HBr.1,5 H₂O); vypočteno C, 32,04; H, 5,27; N, 8,97; Br, 51,16. Nalezeno C, 31,88; H, 5,30; N, 8,93; Br, 51,00.

Příklad 3

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4-)aminomethyl)pyridinhexahydrobromid (AMD 3500)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 201 až 204 °C (rozkl.);

¹H NMR (D2O) δ 1,91 - 2,12 (m, 4H), 3,00 - 3,49 (m, 16H), 4,13 (s, 2H), 4,34 (s, 2H) 4,53 (s, 2H), 7,39 - 7,57 (m, 4H), 8,02 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,74 (d, 2H, J = 6,3 Hz); ¹³C NMR (D2O) δ 18,26, 18,88, 36,94, 37,29, 37,36, 40,89, 41,06, 41,44, 44,21, 47,61,49,17, 51,43, 59,02, 127,84, 130,21, 131,64, 132,15, 132,45, 142,19, 151,67; FAB MS m/z 493 (M+H^s1Br, 8), 491 (M+H⁷⁹Br, 10), 411 (M+H, 83), 320 (37), 247 (58), 201 (100).

·· ···· ·· ···· ·· • · · · 9 · · · ·

9·· 999 99

9·· 999· ·· · ·· · »· ·· ·· ···

Analýza (C24H38N6.6HB1·); vypočteno C, 32,17; H, 4,95; N, 9,34; Br, 53,50; Nalezeno C, 32,16; H, 5,03; N, 9,41; Br, 53,28.

Příklad 4

N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-3-(aminomethyl)pyridinhexahydrobromid (AMD 3499)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 198 až 202 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂) δ 1,83-2,07 (m, 4H), 2,96-3,47 (m, 16H), 4,11 (s, 2H), 4,32 (s, 2H), 4,49 (s, 2H), 7,38 - 7,56 (m, 4H), 8,04 (t, 1H, J = 6,4 Hz), 8,63 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,76 (d, 1H, J = 5,6 Hz), 8,86 (s, 1H);

¹³C NMR (D₂O) 6 18,23, 18,87, 36,92, 37,29 (2C), 40,88, 41,05, 41,43, 44,17, 47,22 47,60, 51,18, 59,04, 128,29, 130,01, 131,49, 132,14, 132,66 (2C), 142,55, 142,76, 148,98;

FAB MS m/z 493 (M+H⁸¹Br, 7), 491 (M+H⁷⁹Br, 6), 411 (M+H, 100), 320 (33), 247 (24).

Analýza (C24H3₈N6.6HBr); vypočteno C, 32,17; H, 4,95; N, 9,34; Br, 53,50, Nalezeno C, 32,08; H, 5,02; N, 9,25; Br, 53,28.

Příklad 5

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-(2-aminomethyl-5methyl)pyrazinpentahydrobromid (AMD 3498)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 194 až 197 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,93-2,12 (m, 4H), 2,42 (s, 3H), 3,25 (s, 8H), 3,48 (s, 8H), 4,28 (s, 2H), 4,30 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 7,44 (s, 4H), 8,33 (s, 1H), 8,46 (s, 1H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,01, 18,72, 19,80, 36,66, 37,05, 37,13, 40,70, 40,89, 41,27, 43,99, 47,47, 48,14, 50,61, 59,06, 129,97, 131,43, 132,04, 132,99, 140,93, 144,98, 146,49, 153,51;

·· ·»·· • 4 ····

4· ·

4* · 44 4 4444 • 44 444 444

444 444 4444 4

444 4444 44 4

4 44 44 44 444

FAB MS m/z 509 (M+H⁸¹Br, 17), 507 (M+H⁷⁹Br, 15), 426 (M+H, 100), 320 (21), 247 (20).

Analýza (C₂₄H₃9N₇.5,5HBr); vypočteno C, 33,10; H, 5,15; N, 11,26; Br, 50,47. Nalezeno C, 32,80; H, 5,41; Ν, 11,00; Br, 50,58.

Příklad 6

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminoethyl)pyridinhexahydrobromid (AMD 3497)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 195 až 198 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,98 - 2,17 (m, 4H), 3,20 - 3,38 (m, 8H), 3,38 - 3,63 (m, 12H), 4,27 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 7,50 (s, 4H), 7,80 - 7,89 (m, 2H), 8,42 (m, 1H), 8,58 (d, 1H, J = 5,8 Hz);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,51, 19,14, 29,85, 37,56 (3C), 41,21,41,41,41, 82, 44,57, 45,27, 47,83, 51,10, 58,74, 126,35, 127,93, 130,66, 131,27, 131,99, 132,69, 141,89,

147,79, 150,91;

FAB MS m/z 507 (M+H⁸¹Br, 40), 505 (M+H⁷⁹Br, 34), 425 (M+H, 100).

Analýza (C₂5H4oN₆.6HBr); vypočteno C, 32,99; H, 5,09; Ν, 9,23; Br, 52,67. Nalezeno C, 32,79; H, 5,34; N, 9,11; Br, 52,45.

Příklad 7

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)thiofenpetahydrobromid (AMD 3516)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 245 až 248 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,87 - 2,12 (m, 4H), 3,02 - 3,51 (m, 16H), 4,17 (s, 4H), 4,38 (s, 2H), 6,97 (t, 1H, J = 3,9 Hz), 7,13 (d, 1H, J = 3,1 Hz), 7,41 (s, 5H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,80, 19,52, 38,03 (3C), 41,59 (2C), 42,21, 44,89 (2C), 48,15, 49,83, 58,52, 128,13, 129,12, 131,15, 131,47, 131,50, 131,90, 132,42, 132,87;

·· ···· φ* ··«· • » · φ · ·<*·· • •Ο « 9 · ··· ··· ··· 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 ·· * ·· ·9 99 999

FAB MS m/z 498 (M+H⁸¹Br, 11), 496 (M+H⁷⁹Br, 9), 416 (Μ+Η, 53), 218 (100), 201 (64).

Analýza (C₂₃H₃7N5S.5HBr); vypočteno C, 33,68; H, 5,16; N, 8,54; Br, 48,71. Nalezeno C, 33,85; H, 5,22; N, 8,50; Br, 48,52.

Příklad 8

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminoethyl)merkaptanpentahydrobromíddihydrát (AMD 3530)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 234 až 236 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,75 - 2,05 (m, 4H), 2,75 - 3,45 (m, 20H), 4,05 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 7,35 (s, 4H);

FAB MS m/z 462 (MH+H⁸¹Br, 15), 460 (MH+H⁷⁹Br, 15), 380 (M+H, 100), 300 (64), 279 (47), 239 (49).

Analýza (C₂₀H₃₇N5S.5HBr.2H₂O.0,5HOAc) vypočteno C, 29,67; H, 5,69; N, 8,24; Br, 46,99. Nalezeno C, 29,31; H, 5,72; N, 8,25; Br, 46,64.

Příklad 9

N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-aminobenzylaminpentahydrobromid (AMD 3517)

Bílá pevná látka:

Teplota tání: 203 až 206 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,85 - 2,13 (m, 4H), 3,02 - 3,58 (m, 16H), 4,23 (s, 2H), 4,31 (s, 4H), 7,23-7,54 (m, 8H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,03, 19,29, 37,78 (3C), 41,37 (2C), 42,00, 44,82, 46,25, 47,96, 51,16, 58,68, 124,04, 124,40, 129,40, 130,75, 131,21 (2C), 131,88, 131,96, 132,46, 132, 83;

FAB MS m/z 507 (M+H⁸¹Br, 15), 505 (M+H⁷⁹Br, 18), 425 (M+H, 100), 320 (30), 201 (51).

·· ···· · · ·· · · ··

Analýza (C₂₅H4oN6.5,75HBr.O,5H₂0). Vypočteno C, 33,42; H, 5,19; N, 9,35; Br, 51,14. Nalezeno C, 33,69; H, 5,35; N, 9,00; Br, 51,13.

Příklad 10

N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4-aminobenzylaminhexahydrobromid (AMD 3544)

Žlutá pevná látka:

Teplota tání: 120 až 125 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,8 - 2,0 (m, 4H), 2,9 - 3,4 (m, 16H), 4,1 (s, 2H), 4,18 (s, 4H), 7,2 7,5 (m, 8H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,86, 19,57, 38,14, 41,76, 43,74, 45,14, 48,24, 50,14, 50,42, 51,49, 58,38, 124,13, 131,13, 131,30, 131,83, 131,92, 131,96, 132,67;

FAB MS m/z 507 (M+H⁸¹Br, 5), 505 (M+H⁷⁹Br, 5), 425 (M+H, 45), 201 (47), 155 (75), 106(100).

Analýza (C₂₅H₄oN₆.6HBr.HOAc) vypočteno C, 33,43; H, 5,19; N, 8,66; Br, 49,42; O, 3,30. Nalezeno C, 33,42; H, 5,49; N, 8,62; Br, 49,23.

Příklad 11

N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4-(aminoethyl)imidazolhexahydrobromid (AMD 3543)

Ne zcela bílá pevná látka:

Teplota tání: 135 až 140 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,75 (m, 2H), 1,90 (m, 2H), 2,70 - 3,27 (m, 20H), 3,77 (s, 2H), 4,14 (s, 2H), 7,18 (s, 1H), 7,25 (d, 2H, J = 7,97 Hz), 7,37 (d, 2H, J = 7,97 Hz), 8,48 (s, 1H); FAB MS m/z 496 (M+H⁸¹Br, 5), 494 (M+H⁷⁹Br, 5), 414 (M+H, 17), 201 (15).

Analýza (C₂3H39N₇.6HBr) vypočteno C, 30,73; H, 5,04; N, 10,91; Br, 53,32. Nalezeno C, 30,39; H, 5,41; N, 10,41; Br, 53,66.

Příklad 12 • · · ·

N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]benzylaminpentahydrobromid (AMD 3529)

Ne zcela bílá pevná látka:

Teplota tání: 245 až 250 °C (rozkl.);

¹H NMR (D₂O) δ 1,9 - 2,1 (m, 4H), 3,2 - 3,6 (m, 16H), 4,12 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 7,30 (s, 5H), 7,41 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,46 (d, 2H, J = 8,3 Hz);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,43, 19,06, 37,29, 37,46, 37,63, 41,09, 41,32, 41,68, 44,46, 47,74, 50,18, 51,00, 58,79, 129,53, 129,97, 130,18, 130,35, 130,68, 131,18, 131,92, 133,14;

FAB MS m/z 492 (M+H⁸¹Br, 13), 490 (M+H⁷⁹Br, 13), 410 (M+H, 100), 201 (36). Analýza (C₂sH39N5.5HBr); vypočteno C, 36,88; H, 5,45; N, 8,60; Br, 49,07. Nalezeno C, 36,79; H, 5,56; N, 8,48; Br, 48,79.

Sloučeniny podle vynálezu byly testovány metodou MTT (J. Virol. Methods 120:309321 (1988)). Buňky MT-4 (2,5 x 10⁴/jamku) byly exponovány HIV-1 (HTLV-IIIB) nebo HIV-2 (LAV-2 ROD) v koncentraci 100 CCID₅o a byly inkubovány v přítomnosti různých koncentrací testovaných sloučenin, které byly přidány ihned po expozici virem. Po 5 dnech kultivace při 37 °C v CO₂ inkubátoru se počet životaschopných buněk zkoumal MTT (tetrazolium) metodou. Protivirová aktivita a cytotoxicita sloučenin je uvedena v tabulce 1 dále jako EC50 (pg/ml) a CC50 (pg/ml). Potenciální terapeutická užitečnost byla vypočtena jako index selektivity (SI) odpovídající poměru CC50 k EC50.

Tabulka 1
Data aktivity anti-HIV
Sloučenina	CC50 (Mg/ml)	EC50 (Mg/ml)	SI
HIV-1 (IIIB)	HIV-2	HIV-1
1 AMD3465	>250	0,008	0,032	3x104
2 AMD3538	209	0,1	6,7	2,0x103
3 AMD3500	>250	0,6	10,3	417

• · · · • ·

4 AMD3499	>250	1,8	28,5	138
5 AMD3498	>250	0,2	7,1	1,2x103
6 AMD3497	>250	1,8	3,8	138
7 AMD3516	158	0,7	9,8	225
8 AMD3530	175	0,5	2,0	350
9AMD3517	153	0,8	10,6	191
10 AMD3544	222	0,7	3,7	317
11 AMD3543	239	0,2	1,0	1 x103
12 AMD3529	130	0,4	2,6	325

V této oblasti studie se považuje jakákoliv sloučenina, která vykazuje index selektivity větší než 100 za potenciální pro další studii. HIV je jeden z nejexponovanějších virů který má být zničen a výsledky uvedené shora poskytují indikaci aktivity proti jiným retrovirům a proti jiným virům obecně.

Příklad 13

N-[4-(1,4,7-Triazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD 7049)

N,N'-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,7-heptandiamin

K míchanému roztoku 1,7-heptandiaminu (5,01 g, 38,5 mmol) a Et₃N (13,5 ml, 96,9 mmol) v CH2CI2 (70 ml) se přidá roztok 2-nitrobenzensulfonylchloridu (18,80 g, 84,83 mmol) v CH2Cl2(40 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem po dobu 72 hodin a poté koncentruje ve vakuu. Zbytek se míchá v diethyletheru (100 ml), a sraženina se sebere filtrací a promyje H₂O (300 ml) a poté diethyletherem (300 ml) a získá se šedivá pevná látka (18,5 g, 96 %):

¹H NMR (DMF-dy) δ 1,21 (m, 6H), 1,49 (m, 4H), 3,04 (m, 4H), 7,87 (m, 2H), 7,95 (m, 4H), 8,04 (m, 2H), 8,15 (m, 2H).

Obecný postup D • · · · • · ·· · ·

4-Diethoxyfosforyl-17-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekan

K míchanému roztoku N,N'-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,7-heptandiaminu (9,00 g, 18,0 mmol) a Cs₂CC>3 (17,8 g, 54,6 mmol) v DMF (500 ml) pod dusíkem, udržovaným při teplotě 80 °C, se přidá během 8 hodin po kapkách roztok N-(diethoxyfosforyl)O,O'-bis(2-methylsulfonyl)diethanolaminu (Bridgera kol., J.Med. Chem. 1995, 38, 366 - 378 ) (7,95 g, 20,0 mmol) v DMF (50 ml). Zahřívání pokračuje po dobu dalších 17 hodin a směs se poté nechá ochladit a koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi CHCI3 (140 ml) a H₂O (80 ml) a vodná vrstva se oddělí a extrahuje CHCI3 (3 x 40 ml). Spojené organické extrakty se suší (MgSO₄) a koncentrují ve vakuu a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (ethylacetát) a získá se žádaný makrocykl jako žlutá krystalická pevná látka (2,85 g, kontaminována s DMF).

K odstranění nežádané nečistoty DMF se zbytek rozpustí v EtOAc (75 ml), a roztok se promyje postupně 5% NaHCO3 (2 x 10 ml) a solankou (5x10 ml), suší (MgSO₄) a odpaří a získá se žlutá amorfní pevná látka (2,52 g, 20 %):

¹H NMR (CDCI3) δ 1,32 (t, 6H, J = 7,1 Hz), 1,51 (m, 6H), 1,61 (m, 4H), 3,33 (m, 12H), 4,03 (m, 4H), 7,61 (m, 2H), 7,71 (m, 4H), 8,03 (m, 2H).

Obecný postup E

Syntéza 1,7-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanu

K míchané suspenzi výše uvedeného makrocyklu (1,88 g, 2,66 mmol) v kyselině octové (5 ml) se přidá čerstvě připravený roztok nasyceného plynného HBr v kyselině octové (20 ml) a výsledný homogenní roztok se míchá při teplotě místností po dobu dalších 22 hodin. Přidáním diethyletheru (250 ml) k reakční směsi se získá sraženina, která se usazuje na spodku baňky a kapalina nad sedlinou se dekantuje. Sraženina se promyje etherem dekantací (opakuje se 3x) a zbytek se poté rozdělí mezi CH2CI2 (40 ml) a 1N vodný NaOH (25 ml). Oddělená vodná vrstva se extrahuje CH2CI2 (2 x 20 ml) a spojené organické extrakty se promyjí solankou (20 ml), poté suší (MgSO₄) a koncentrují ve vakuu a získá se žlutá amorfní pevná látka (1,23 g, 81 %):

¹H NMR (CDCI₃) δ 1,46 - 1,67 (m, 10H), 2,90 (m, 4H), 3,34 (m, 8H), 7,61 (m, 2H), 7,70 (m, 4H), 7,97 (m, 2H).

4-Brommethylbenzylalkohol

K roztoku methyl 4-brommethylbenzoátu (5,73 g, 25 mmol) v suchém CH2CI2 (150 ml) ochlazenému na teplotu -78 °C se za míchaní a pod dusíkem přidá po kapkách roztok DIBAL-H (82,5 ml, 1,0 M roztok v THF). Míchání pokračuje po dobu 1,5 hodiny při teplotě -78 °C a reakční směs se poté nechá ohřát na teplotu 0 °C a reakce se zastaví H₂O. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje CH2CI2 (2 x 100 ml). Spojené organické extrakty se suší (MgSO₄) a odpaří a získá se žádaný alkohol (5,0 g, 100 %) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (CDCI3) δ 1,84 (široký, 1H), 4,49 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 7,33 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,38 (d, 2H, J = 8,2 Hz).

N-(2-Nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridin

Roztok 2-nitrobenzensulfonylchloridu (16,62 g, 0,075 mol) v suchém CH₂CI₂ (120 ml) se přidá po kapkách přes kanylu k míchanému roztoku 2-(aminomethyl)pyridinu (5,41 g, 0,05 mol) a Et₃N (13,9 ml, 0,10 mol) v suchém CH₂CI₂ (150 ml) pod dusíkem. Reakční směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě místnosti a poté se reakce zastaví vodou (20 ml). Vodná vrstva se oddělí a extrahuje EtOAc (5 x 80 ml).

Spojené organické extrakty se suší (MgSO₄) a odpaří na malý objem a získá se bílá sraženina, která se sebere filtrací a promyje studeným CH₂CI₂ a získá se žádaný produkt (11,37 g, 78 %) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (aceton-de) δ 4,46 (s, 2H), 7,19 (dd, 1H, J = 7,4, 4,5 Hz), 7,25 - 7,35 (široký s, 1H), 7,39 (d, 1Η, J = 7,7 Hz), 7,68 (ddd, 1H, J = 7,7, 7,5, 1,8 Hz), 7,76 - 7,88 (m, 2H), 7,94 (dd, 1H, J = 7,7, 1,5 Hz), 8,04 (dd, 1H, J = 7,5, 1,8 Hz), 8,38 (d, 1H, J = 4,5 Hz).

N-[1-Methylen-4-(hydroxymethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridin

Směs N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (5,87 g, 20 mmol), 4brommethylbenzylalkoholu (4,02 g, 20 mmol) a K2CO3 (5,53 g, 40 mmol) v suchém CH3CN (150 ml) se zahřívá se při teplotě 60 °C po dobu 4 hodin, za míchání pod dusíkem. Směs se poté nechá ochladit na teplotu místnosti, rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozdělí mezi vodu a CH₂CI₂. Oddělená vodná fáze se extrahuje CH₂CI₂ a spojené organické extrakty se suší (MgSOJ a odpaří. Zbytek se suspenduje ve směsí ethylacetátu a hexanu (1:1) a sebere filtrací a získá se žádaný materiál (6,87 g, 83 %) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (CDCI₃) δ 1,78 (t, 1H, J = 5,8 Hz), 4,58 (s, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,64 (d, 2H, J = 5,8 Hz), 7,13 - 7,26 (m, 6H), 7,54 - 7,59 (m, 2H), 7,66 - 7,68 (m, 2H), 7,98 (d, 1H, J = 7,4 Hz), 8,40 (d, 1H, J = 3,8 Hz).

N-[1-Methylen-4-(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridin

K míchanému roztoku výše uvedeného alkoholu (1,91 g, 4,62 mmol) a Et₃N (2,0 ml, 14 mmol) v CH₂CI₂ (20 ml), ochlazenému v ledové lázni pod dusíkem, se přidá methansulfonylchlorid (0,73 ml, 9,4 mmol) a reakční směs se poté zahřívá při zpětném toku po dobu dalších 6 hodin. Roztok se zředí CH₂CI₂ (60 ml) a promyje 10% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (2 x 20 ml), 5% vodným NaHCO₃ (20 ml), a H₂O (25 ml), poté suší (MgSOJ a koncentruje ve vakuu a získá se oranžový olej (1,95 g, 98 %):

¹H NMR (CDCI3) δ 4,52 (s, 2H), 4,60 (s, 4H), 7,12 - 7,26 (m, 6H), 7,55 (m, 2H), 7,67 (d, 2H, J = 4,0 Hz), 7,94 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 8,41 (d, 1H, J = 4,8 Hz). Tento olej se použije bez dalšího čištění.

Obecný postup F

N-[4-[1,7-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanyl]-1,4fenylenbis(methylen)]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridin

Směs 1,7-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanu (1,1 g, 1,9 mmol), chloridu ze shora uvedené sloučeniny (0,98 g, 2,3 mmol) a K₂CO₃ (0,85 g, 6,2 mmol)

se zahřívá při zpětném toku v CH₃CN (30 ml) pod dusíkem po dobu 62 hodin. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi CH2CI2 (100 ml) a solanku (70 ml). Vodná fáze se oddělí a extrahuje CH2CI2 (40 ml) a spojené organické extrakty se suší (MgSCb) a koncentrují ve vakuu. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (3% MeOH/ChbCb) a odpařené frakce obsahující žádaný produkt se podrobí druhé sloupcové chromatografií na silikagelu (ethylacetát) a získá se bledá amorfní pevná látka (940 mg, 49 %):

¹H NMR (CDCb) δ 1,44 (široký s, 6H), 1,60 (široký s, 4H), 2,75 (m, 4H), 3,23 - 3,33 (m, 8H), 3,59 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 7,08 - 7,20 (m, 6H), 7,55 - 7,70 (m, 10H), 7,82 (dd, 2H, J = 7,6, 1,6 Hz), 7,99 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 8,40 (d, 1H, J =4,7 Hz).

Dihydrát pentahydrobromidu N-[4-(1,4,7-triazacyklotetradekanyl)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridinu

Výše uvedený meziprodukt (870 mg, 0,90 mmol), K2CO3 (1,15 g, 8,32 mmol), a thiofenol (0,33 ml, 3,2 mmol) se míchají v DMF (12 ml) po dobu 7,5 hodin při teplotě místnosti. Směs se koncentruje ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi CH2CI2 (30 ml) a H₂O (15 ml). Organická fáze se oddělí, promyje 5% NaHCO3 (10 ml), poté H2O (10 ml), poté se suší (MgSOzi) a koncentruje ve vakuu. Žlutý zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na bazické alumině (CH₂CI₂, 1% MeOH/CH2CÍ2, a 10%

MeOH/CH2CI₂) a získá se volná báze jako žlutý olej (134 mg, 36 %):

¹H NMR (CDCb) δ 1,48 (široký s, 6H), 1,60 (široký s, 4H), 2,61 (m, 12H), 3,56 (s,

2H), 3,83 (s, 2H), 3,92 (s, 2H), 7,16 (m, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,32 (m, 3H), 7,79 (m,

1H), 8,56 (d, 1H, J = 4,7 Hz).

Volná báze (134 mg, 0,33 mmol) se rozpustí v EtOH (4 ml) a přidá se čerstvě připravený roztok nasyceného plynného HBr v EtOH (9 ml) a získá se bílá sraženina. Směs se míchá po dobu 5 minut a přidá se diethylether (15 ml). Sraženina se usadí na dně baňky a supernatantní roztok se dekantuje. Pevná látka se poté rozpustí v MeOH (5 ml) a znovu se sráží s velkým množstvím etheru, promyje se dekantaci etherem (15 x) a nakonec se poslední stopy etheru odstraní odpařením za sníženého tlaku (teplota místnosti). Sušením pevné látky ve vakuu při teplotě 40 °C po dobu 16 hodin se získá žádaný materiál jako pevná látka (178 mg, 63 %):

• · · · · · · ·

4·· · · · · · • · · · · · · · · ·

9/1 · · · ···· ·

Z.“ 99 9 99 99 99 ¹H NMR (DMSO-ds) δ 1,44 (široký s, 6H), 1,75 (široký s, 4H), 3,04 (široký s, 8H),

3,37 (m, 4H), 4,06 (široký s, 2H), 4,31 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 7,52 - 7,68 (m, 6H), 8,01 (m, 1H), 8,70 (d, 1H, J = 5,0 Hz);

FAB-MS m/z 492 (MH + H⁸¹Br), 490 (MH + H⁷⁹Br), 410 (Μ + H).

Analýza vypočtena pro C25H39N5.5HBr.0,1Et2O.2,3H2O: C, 35,35; H, 5,79; N, 8,11;

Br, 46,29. Nalezeno: C, 35,55; H, 5,70; N, 8,18; Br, 46,17.

Příklad 14

N-[7-(4,7,10,17-T etraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I )-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7050)

2.6- Bis(2-aminoethyl)pyridín se připraví podle postupu popsaného Bridger-em a kol.,

U.S. pat. č. 5,698,546, který je zde uváděn jako odkaz.

2.6- Bis[N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-aminoethyl]pyridin

K míchanému roztoku 2,6-bis(2-aminoethyl)pyridinu (2,7 g, 16 mmol) a Et₃N (5,7 ml, mmol) v CH₂CI₂ (35 ml) se přidá 2-nitrobenzensulfonylchlorjd (8,01 g, 36,1 mmol) v CH₂CI₂ (20 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti pod dusíkem po dobu 42 hodin. Směs se promyje solankou (25 ml) a organická fáze se suší (MgSO₄) a koncentruje ve vakuu. Hnědý zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu (50%, poté 60% směs THF a hexanu) a získá se bledě žlutá pevná látka (5,2 g, 59 %):

¹H NMR (CDCI₃) δ 3,01 (m, 4H), 3,53 (m, 4H), 6,38 (m, 2H), 6,94 (d, 2H, J = 7,7 Hz),

7,47 (t, 1H, J = 7J Hz), 7,72 (m, 4H), 7,82 (m, 2H), 8,13 (m, 2H).

7-Diethoxyfosforyl-4,10-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trien

Použití obecného postupu D: Reakcí 2,6-bis[N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2aminoethyljpyridinu (5,2 g, 9,7 mmol) a N-(diethoxyfosforyl)-O,O'-bis(2methylsulfonyl)diethanolaminu (4,25 g, 10,7 mmol), následovanou čištěním reakčních • · ···· produktů (60%, poté 90% směs THF a hexanu) na sloupci silikagelu se získá sloučenina uvedená v názvu jako žlutá amorfní pevná látka (1,48 g, 21 %):

¹H NMR (CDCb) δ 1,23 (t, 6H, J = 7,1 Hz), 2,60 (m, 4H), 2,98 - 3,08 (m, 8H), 3,84 3,94 (m, 8H), 7,11 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 7,56 - 7,74 (m, 7H), 8,07 (m, 2H).

4,10-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1 jheptadeka1 (17),13,15-trien

Použití obecného postupu E: Reakcí 7-diethoxyfosforyl-4,10-bis(2nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trienu (1,04 g, 1,4 mmol) se získá sloučenina uvedená v názvu jako žlutá amorfní pevná látka (744 mg, 88 %):

¹H NMR (CDCI₃) δ 2,81 (m, 4H), 3,08 (m, 4H), 3,33 (m, 4H), 3,88 (m, 4H), 7,07 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,54 - 7,71 (m, 7H), 8,02 (m, 2H).

N-[7-[4,10-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1 jheptadeka1 (17), 13,15-trienyl]-1,4-fenylenbis(methylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridin

Použití obecného postupu F: Reakcí 4,10-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17tetraazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1(17),13,15-trienu (740 mg, 1,2 mmol) a N-[1methylen-4-(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridinu (610 mg, 1,4 mmol), následovanou čištěním reakčních produktů (50%, poté 80% směs THF a hexanu) na sloupci silikagelu se získá sloučenina uvedená v názvu jako žlutá amorfní pevná látka (648 mg, 54 %):

¹H NMR (CDCb) δ 2,26 (m, 4H), 3,03 (m, 8H), 3,37 (s, 2H), 3,94 (m, 4H), 4,56 (s, 2H), 4,57 (s, 2H), 6,95-7,17 (m, 8H), 7,52-7,72 (m, 11H), 7,85 (m, 2H), 7,98 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 8,39 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

Obecný postup G

Trihydrát hexahydrobromidu N-[7-(4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1 jheptadeka1(17), 13,15-trieny I )-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-aminomethyl)pyridinu • φφφ * φ φφφ φ φφφ ♦ φ φφφφ

Κ roztoku Ν-[7-[4,10-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17tetraazabicyklo[ 13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trieny l]-1,4-fenylenbis(methylen)-N-(2nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (640 mg, 0,64 mmol) v DMF (9 ml) obsahujícím K₂CO₃ (806 mg, 5,83 mmol) se přidá thiofenol (0,24 ml, 2,3 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Směs se koncentruje ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát (30 ml) a vodu (10 ml). Organická fáze se oddělí a extrahuje 5% NaHCO₃ (3x5 ml) a poté solankou (5 ml). Spojené vodné fáze se extrahují CH₂CI₂ (3x10 ml). Spojené organické extrakty se suší (MgSO^ a odpaří a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na alumině (CH₂CI₂, poté 10% roztoku MeOH/CH₂CI₂) a získá se volná báze uvedená v názvu jako žlutý olej (83 mg, 29 %): ¹H NMR (CDCIs) δ 2,57 (m, 8H), 3,01 (s, 8H), 3,36 (s, 2H), 3,78 (s, 2H), 3,92 (s, 2H), 6,64 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,07 (m, 4H), 7,18 (m, 1H), 7,33 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,67 (m, 2H), 8,58 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

Volná báze (74 mg, 0,17 mmol) se rozpustí v MeOH (3 ml) a přidá se čerstvě připravený roztok nasyceného plynného HBr v MeOH (7 ml) a získá se bílá sraženina. Směs se míchá po dobu 5 minut a přidá se diethylether (10 ml), pevná látka se usadí na dně baňky a supernatantní roztok se dekantuje. Pevná látka se promyje dekantaci MeOH (5x5 ml), poté etherem (10 x 5 ml) a poslední stopy etheru se odstraní odpařením ve vakuu, po kterém následuje sušení ve vakuu při teplotě 40 °C po dobu 17,5 hodin a získá se sloučenina uvedená v názvu jako bílá pevná látka (153 mg, 93 %):

¹H NMR (DMSO-d₆) δ 2,81 (široký s, 4H), 3,28 (m, 8H), 3,61 (široký s, 4H), 3,85 (s, 2H), 4,27 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 7,29 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,36 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,53 (m, 3H), 7,63 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,80 (t, 1H, J = 7,7 Hz), 7,99 (m, 1H), 8,69 (d, 1H, J = 5,3 Hz);

FAB-MS m/z 527 (MH + H⁸¹Br), 525 (MH + H⁷⁹Br), 445 (Μ + H).

Analýza vypočtena pro C₂7H₃₆N₆.6HBr.3H₂O: C, 32,95; H, 4,92; N, 8,54; Br, 48,72. Nalezeno: C, 32,75; H, 4,89; N, 8,39; Br, 48,61.

Příklad 15 •9 9999

9999

N-[7-(4,7,10-Triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I )-1,4fenylenbis(methylen)-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7051)

1,3-Fenylenbis(ethylen)diamin

K roztoku 1,3-fenylendiacetonitrilu (9,37 g, 60 mmol) v CH3OH (nasycený s NH3, 150 ml) se přidá Raney-Ni (cca 20 g, předběžně několikrát promytý CH3OH) a směs se hydrogenuje při 0,31 MPa na Parrově aparatuře po dobu 48 hodin. Reakční směs se filtruje přes celit a filtrát se odpaří a získá se syrový produkt (9,45 g, 96 %) jako světlý zelený olej:

¹H NMR (CDCb) δ 0,80 - 1,50 (široký s, 4H), 2,70 - 2,76 (m, 4H), 2,94 - 2,99 (m, 4H), 7,01 - 7,07 (m, 3H), 7,18 - 7,26 (m, 1H). Tento olej se použije v dalším kroku bez dalšího čištění.

N,N'-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,3-fenylenbis(ethylen)diamin

Roztok 2-nitrobenzensulfonylchloridu (19,94 g, 0,090 mol) v suchém CH2CI2 (70 ml) se přidá po kapkách přes kanylu k míchanému roztoku 1,3fenylenbis(ethylen)diaminu (4,92 g, 0,030 mol) a EtsN (16,7 ml, 0,12 mol) v suchém CH2CI2 (80 ml) pod dusíkem. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a poté se reakce zastaví vodou (20 ml). Sraženina se sebere filtrací a promyje H₂O, CH3OH a Et₂O a získá se žádaný produkt (9,22 g, 58 %) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (DMSO-ds) δ 2,66 (t, 4H, J = 7,7 Hz), 3,08 - 3,18 (široký s, 4H), 6,94 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 6,98 (s. 1H), 7,12 (dd, 1H, J = 6,4, 6,4 Hz), 7,78 - 7,84 (široký m, 4H), 7,90 - 7,64 (široký m, 4H), 8,16 (široký s, 2H).

7-Diethoxyfosforyl-4,10-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trien

Použití obecného postupu D: Reakcí N,N'-bis(2~nitrobenzensulfonyl)-1,3fenylenbis(ethylen)diaminu (8,74 g, 16,4 mmol) s N-(diethoxyfosforyl)-O,O'-bis(2methylsulfonyl)diethanolaminu (6,50 g, 16,4 mmol), a následným čištěním reakčních ·· 9999 ·*> ····

9 · 9 · · · · 9

9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 ·· · ·· ·· ·· · produktů na sloupci silikagelu (1:15:35 CH3OH-Et2O-CH2Cl2) se získá sloučenina uvedená v názvu (4,03 g, 33 %) jako žlutá pěna:

¹H NMR (CDCI₃) δ 1,21 (t, 6H, J = 6,4 Hz), 2,39 - 2,46 (široký m, 4H), 2,83 - 2,97 (široký m, 8H), 3,68 - 3,72 (m, 4H), 3,80 - 3,92 (m, 4H), 7,16 (d, 2H, J = 6,5 Hz),

7,18 (s, 1H), 7,24 (dd, 1H, J = 6,5, 6,5 Hz), 7,60 - 7,74 (m, 6H), 8,04 - 8,08 (m, 2H).

4,10-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15trien

Použití obecného postupu E: Reakcí 7-diethoxyfosforyl-4,10-bis(2nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trienu (1,27 g, 1,72 mmol), a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (1:15:25 CH₃OH-EtOAc-CH₂Cl2, poté 20% CH₃OH v CH₂CI₂) se získá sloučenina uvedená v názvu (574 mg, 57 %) jako světlá žlutá pěna:

¹H NMR (CDCI3) δ 1,42 - 1,50 (široký s, 1H), 2,01 (t, 4H, J = 5,4 Hz), 2,90 - 3,10 široký m, 4H), 3,08 (t, 4H, J = 5,4 Hz), 3,56 - 3,60 (široký m, 4H), 7,16 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,31 (dd, 1H, J = 6,8, 6,8 Hz), 7,36 (s, 1H), 7,61 - 7,63 (m, 2H), 7,70 - 7,73 (m,

4H), 8,01 -8,04 (m, 2H).

N-[7-[4,10-Bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-tri aza b icy klo [ 13.3.1 jheptadeka1(17),13,15-tri enyl] -1,4-fenylenbis(methylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridin

Použití obecného postupu F: Reakcí 4,10-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10triazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1(17),13,15-trienu (420 mg, 0,7 mmol) s N-[1 methylen-4-(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridinem (302 mg, 0,7 mmol), a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (1:3 Et₂O-CH2Cl2) se získá sloučenina uvedená v názvu (491 mg, 70%) jako bledá žlutá pevná látka:

¹H NMR (CDCb) δ 1,97 - 2,02 (široký m, 4H), 2,73 - 2,78 (široký m, 4H), 2,90 - 2,94 (široký m, 4H), 3,32 (s, 2H), 3,64 - 3,67 (široký m, 4H), 4,55 (s, 2H), 4,58 (s, 2H),

6,93 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,04 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,09 - 7,16 (široký m, 4H), 7,23 (s,

9999 «9 9999 • · 9 ··· <··

999 999 99

999 9999 9 9 ·· · ·· 99 .9 9

Η), 7,29 (dd, 1 Η, J = 7,9, 7,9 Hz), 7,51 - 7,72 (m, 10H), 7,80 - 7,83 (m, 2H), 7,98 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 8,39 (m, 1H).

Dihydrát pentahydrobromidu N-[7-(4,7,10-triazabicyklo[13.3.1]heptadeka1 (17),13,15-trienyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridinu

Použití obecného postupu G: Reakcí N-[7-[4,10-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10tri azabi cyklo[ 13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-tri eny l]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-(2nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (380 mg, 0,38 mmol), a následným čištěním reakčních produktů na sloupci bazické aluminy (1:20 CH3OH-CH2CI2) se získá volná báze sloučeniny uvedené v názvu.

Přeměnou volné báze na sůl hydrobromidu za použití roztoku plynného HBr v CH3OH, a následným sušením ve vakuu přes noc se získá sloučenina uvedená v názvu (100 mg, 34 % celkem) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (DMSO-de) δ 2,80 - 2,88 (široký s, 4H), 3,02 - 3,06 (široký s, 4H), 3,10 3,16 (široký s, 4H), 3,38 - 3,44 (široký s, 4H), 3,80 - 3,86 (široký s, 2H), 4,25 - 4,30 (široký s, 2H), 4,33 - 4,37 (široký s, 2H), 7,27 - 7,32 (široký s, 4H), 7,42 - 7,63 (široký s, 6H), 7,96 (dd, 1H, J = 7,7, 7,7 Hz), 8,10-8,30 (široký s, 3H), 8,69 (d, 1H, J = 4,9 Hz), 9,45 - 9,62 (široký s, 2H);

FAB-MS m/z 526 (MH + H⁸¹Br), 524 (MH + H⁷⁹Br), 444 (Μ + H, 100);

Analýza vypočtena pro C28H42NsBr5.2H2O; C, 38,03; H, 5,24; N, 7,92; Br, 45,18.

Nalezeno: C, 38,37; H, 5,28; N, 7,76; Br, 45,36.

Příklad 16

N-[1 -(1,4,7-Triazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD 7059)

Obecný postup H

4-Diethoxyfosforyl-7-(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekan • 9 9999 •v ···· ·

9*

9 9 • 9 9

9 • · 9 9 9 9

9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

99 99 9

K míchanému roztoku 4-diethoxyfosforyl-1,7-bis(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7triazacyklotetradekanu (1,32 g, 1,87 mmol) a K2CO3 (654 mg, 4,73 mmol) v DMF (11 ml) pod dusíkem se přidá během 1 hodiny po kapkách roztok thiofenolu (0,15 ml,

1,46 mmol) v DMF (8 ml). Směs se míchá po další 3 hodiny a poté se koncentruje ve vakuu. Zbytek se rozdělí mezi CHCl3(50 ml) a H2O (25 ml). Vodná fáze se oddělí a extrahuje CHCI3 (3 x 20 ml) a spojené organické extrakty se suší (MgSCU) a koncentrují ve vakuu. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na bazické alumině (CHCI3, poté 3% MeOH/CHCb) a získá se sloučenina uvedená v názvu jako žlutý olej (178 mg, 23 %):

¹H NMR (CDCb) δ 1,31 (t, 6H, J = 7,0 Hz), 1,40-1,67 (m, 10H), 2,65 (m, 2H), 2,78 (m, 2H), 3,12 (m, 2H), 3,26 - 3,37 (m, 4H), 3,48 (m, 2H), 3,97 - 4,09 (m, 4H), 7,61 (m, 1H), 7,68 (m,2H), 8,06 (m, 1H).

N-[1 -[4-Diethoxyfosforyl-7-(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanyl]-1,4fenylenbis(methylen)-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridin

Použití obecného postupu F: Reakcí 4-diethoxyfosforyl-7-(2-nitrobenzensulfonyl)1,4,7-triazacyklotetradekanu (236 mg, 0,453 mmol) a N-[1-methylen-4(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (238 mg, 0,551 mmol) a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (50%, poté 80% směs THF a hexanu) se získá sloučenina uvedená v názvu jako žlutá amorfní pevná látka (305 mg, 73 %):

¹H NMR (CDCI3) δ 1,27 (t, 6H, J = 7,1 Hz), 1,43 (široký s, 8H), 1,63 (široký s, 2H), 2,32 (široký s, 2H), 2,55 (m, 2H), 3,13 - 3,41 (m, 8H), 3,49 (s, 2H), 3,85 - 4,02 (m, 4H), 4,57 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 7,07-7,22 (m, 6H), 7,51 -7,71 (m, 7H), 7,98 (d, 1H,

J = 7,4 Hz), 8,04 (m, 1H), 8,41 (d, 1H, J = 4,0 Hz).

N-[1 -[7-(2-Nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanyl]-1,4fenylenbis(methylen)]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridin

Použití obecného postupu E: Reakcí N-[1-[4-diethoxyfosforyl-7-(2nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanyl]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-(2• · ···· ·· · ·· ·· nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (300 mg, 0,328 mmol) se získá sloučenina uvedená v názvu jako žlutá amorfní pevná látka (214 mg, 84 %):

¹H NMR (CDCb) δ 1,34 - 1,44 (m, 8H), 1,69 (široký s, 2H), 2,34 (m, 2H), 2,52 (m,

2H), 2,62 (m, 2H), 2,82 (m, 2H), 3,42 (m, 6H), 4,58 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 7,08 - 7,24 (m, 6H), 7,52 - 7,71 (m, 7H), 8,01 (m, 2H), 8,42 (d, 1H, J = 4,1 Hz).

Dihydrát pentahydrobromidu N-[1-(1,4,7-triazacyklotetradekanyl)-1,4fenylenbis(methylen]-2-(aminomethyl)pyridinu

Směs N-[ 1 -[7-(2-nitrobenzensulfonyl)-1,4,7-triazacyklotetradekanyl]-1,4fenylenbis(methylen)]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (209 mg, 0,268 mmol), K₂CO₃ (298 mg, 2,16 mmol), a thiofenolu (0,17 ml, 1,7 mmol) v acetonitrilu (3 ml) se zahřívá při teplotě 50 °C po dobu 16,5 hodin. Reakční směs se zředí s CH₂CI₂ (10 ml) a promyje solankou (10 ml). Oddělené vodné fáze se extrahují CH₂CI₂ (3x5 ml) a spojené organické extrakty se suší (MgSO₄) a odpaří. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na bazické alumině (CHCI₃, poté 10% MeOH/CHCI₃) a získá se volná báze sloučeniny uvedené v názvu jako žlutý olej (92 mg, 84 %):

¹H NMR (CDCb) δ 1,21 - 1,62 (m, 10H), 2,40-2,49 (m, 4H), 2,60 (m, 6H), 2,79 (m, 2H), 3,49 (s, 2H), 3,82 (s, 2H), 3,91 (s, 2H), 7,14 (m, 1H), 7,28 (m, 5H), 7,62 (m, 1H), 8,54 (d, 1H, J = 4,4 Hz).

Přeměnou volné báze (86 mg, 0,21 mmol) na hydrobromidovou sůl, za použití nasyceného roztoku plynného HBr v MeOH (viz obecný postup G) a následným sušením ve vakuu při teplotě 40 °C po dobu 15,5 hodin se získá sloučenina uvedená v názvu jako bílá pevná látka (128 mg, 70 %):

¹H NMR (D₂O) δ 1,48 (široký s, 6H), 1,82 (m, 4H), 3,22-3,36 (m, 10H), 3,50 (široký s, 2H), 4,48 (s, 4H), 4,64 (s, 2H), 7,62 (s, 4H), 7,88 (m, 1H), 7,94 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 8,38 (m, 1H), 8,77 (d, 1H, J = 5,2 Hz);

FAB-MS m/z 492 (MH + H⁸¹ Br), 490 (M + H⁷⁹Br), 410 (m + H).

Analýza vypočtena pro C₂5H₃gN5.5HBr.2,5H₂0.0,1Et₂0: C, 35,20; H, 5,82; N, 8,08;

Br, 46,10. Nalezeno: C, 35,48; H, 5,66; N, 8,10; Br, 46,05.

Příklad 17

Ν-[4-[4,7,10,17-Tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trieny l]-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7063)

7-Diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trien

Použití obecného postupu H: Reakcí 7-diethoxyfosforyl-4,10-bis(2nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trienu (1,48 g, 2,00 mmol) s thiofenolem (s dalším zahříváním reakční směsi při teplotě 50 °C po dobu 1,5 hodiny po přidání) a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (8% MeOH/CHCI₃) se získá sloučenina uvedená v názvu jako světlý žlutý olej (423 mg, 52 %):

¹H NMR (CDCI₃) δ 1,23 (t, 6H, J = 7,0 Hz), 2,50 (široký s, 2H), 2,79 (široký s, 2H), 3,02 - 3,15 (m, 10H), 3,92 - 3,98 (m, 6H), 7,06 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 7,54 - 7,63 (m, 2H), 7,70 (m, 2H), 8,01 (široký s, 1H).

N-[4-[7-Diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10,17tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-tri eny I]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-(2nitrobenzensulfonyl)-2-(amínomethyl)pyridin

Použití obecného postupu F: Reakcí 7-diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1(17),13,15-trienu (410 mg, 0,738 mmol) a N-[1-methylen-4-(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridinu (397 mg, 0,919 mmol) a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (50%, 80% a poté 90% směs THF a hexanu) se získá sloučenina uvedená v názvu jako amorfní bílá pevná látka (441 mg, 63 %):

<H NMR (CDCI₃) δ 1,15 (t, 6H, J = 7,0 Hz), 2,42 (m, 4H), 2,77 (m, 2H), 2,93-3,02 (m, 6H), 3,10 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,66 - 3,91 (m, 6H), 4,58 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 6,94 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,07 - 7,14 (m, 6H), 7,22 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,51 - 7,72 (m, 8H), 8,00 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 8,04 (m, 1H), 8,42 (d, 1H, J = 4,0 Hz).

·· · · · · ·· * • · « ·· · Λ · · · ••.•.Jí *. ·ϊϊ I __ · · · »······ «· « «* ·· ·· ··

Ν-[4-[7-D iethoxyfosfory 1-4,7,10,17-tetraazab icy klo [ 13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15trienyl]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-2-(aminomethyl)pyridin

Směs N-[4-[7-diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7, W, 17tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trieny l]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-(2nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridirtu(434 mg, 0,456 mmol), K2CO3 (508 mg, 3,68 mmol) a thiofenolu (0,28 ml, 2,7 mmol) se zahřívá při teplotě 50 °C v CH3CN (3,5 ml) pod dusíkem po dobu 15 hodin. Po ochlazení se reakční směs rozdělí mezi CHCI3 (15 ml) a solanku (15 ml) a vodná vrstva se oddělí a extrahuje CHCI3 (3x5 ml). Spojené organické extrakty se suší (MgSO₄) a koncentrují ve vakuu a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na bazické alumině (CHCI3, poté 10% MeOH/CHCI₃) a získá se žlutý olej (218 mg, 82 %):

¹H NMR (CDCI3) δ 1,16 (t, 6H, J = 7,1 Hz), 2,35 (m, 2H), 2,55 (m, 2H), 2,75 (m, 2H),

2.82 (m, 2H), 2,96 - 3,08 (m, 6H), 3,16 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,69 - 3,88 (m, 4H),

3.82 (s, 2H), 3,93 (s, 2H), 6,95 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 7,15 7,34 (m, 6H), 7,50 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 8,56 (d, 1H, J = 4,7 Hz).

Hydrát hexahydrobromidu N-[4-[4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1]heptadeka1(17),13,15-trienyl]-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridinu

K míchanému roztoku N-[4-[7-diethoxyfosforyl-4,7,10,17tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-tri eny I]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-2(aminomethyl)pyridinu (211 mg, 0,36 mmol) v kyselině octové (0,6 ml) se přidá čerstvě připravený roztok nasyceného plynného HBr v kyselině octové (6 ml) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Přidáním diethyletheru (10 ml) se získá bílá sraženina, která se usazuje na dně baňky a supernatantní roztok se dekantuje. Pevná látka se promyje dekantaci s MeOH (4x5 ml) a etherem (6x5 ml) a zbývající stopy etheru se odstraní odpařením za sníženého tlaku.

Produkt se suší ve vakuu při teplotě 40 °C po dobu 17 hodin a získá se sloučenina uvedená v názvu jako bledě žlutá pevná látka (223 mg, 63 %):

¹H NMR (D₂O) δ 3,14 - 3,36 (m, 10H), 3,55 (m, 4H), 3,75 (m, 2H), 4,45 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 4,64 (s, 2H), 7,22 (m, 2H), 7,53 (s, 4H), 7,70 (m, 1H), 7,95 (m, 1H), 8,00 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,46 (m, 1H), 8,79 (d, 1H, J = 3,9 Hz);

·* * ·* ’’

FAB-MS m/z 527 (MH + H⁸¹ Br), 525 (MH + H⁷⁹Br), 445 (Μ + H).

Analýza vypočtena pro C27H36N6.6HBr.1,5H2O.0,2Et2O: C, 34,35; H, 4,87; N, 8,65;

Br, 49,33. Nalezeno: C, 34,57; H, 5,04; N, 8,68; Br, 49,09.

Příklad 18

N-[4-[4,7,10-Triazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny l]-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7058)

7-Diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-triazabicyklo[13.3.1 jheptadeka1 (17),13,15-trien

Použití obecného postupu H: Reakcí 7-diethoxyfosforyl-4,10-bis(2nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trienu (1,11 g, 1,5 mmol) a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (2:5:20 CH3OH-Et2O-CH2Cl2, poté 1:5 CH3OH-CH2CI2) se získá sloučenina uvedená v názvu jako bledě žlutý olej (300 mg, 54 %):

¹H NMR (CDCI₃) δ 1,21 (t, 6H, J = 7,1 Hz), 1,78-1,92 (široký s, 1H), 2,31 -2,38 (široký m, 2H), 2,56 - 2,60 (široký m, 2H), 2,81 - 2,98 (široký m, 10H), 3,60 - 3,64 (široký m, 2H), 3,75 - 3,91 (m, 4H), 7,05 - 7,12 (m, 2H), 7,24 - 7,29 (m, 2H), 7,60 7,63 (m, 1H), 7,68 - 7,71 (m, 2H), 8,02 - 8,06 (m, 1H).

N-[4-[7-Diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trieny I]-1,4-fenylenbis(methylen)-N-(2nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridin

Použití obecného postupu F: Reakcí 7-diethoxyfosforyl-10-(2-nitrobenzensulfonyl)4,7,10-triazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1(17),13,15-trienu (290 mg, 0,52 mmol) s N[1-methylen-4-(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2(aminomethyl)pyridinem (271 mg, 0,63 mmol) a následným čištěním reakčních produktů na sloupci silikagelu (1:12:12 CH₃OH-Et₂O-CH2Cl2) se získá sloučenina uvedená v názvu (298 mg, 60%) jako bledě žlutá pevná látka:

• · *·· ···· • * · ··· · ♦ · · • · · · · · · · ·

....... ·’ ’ ¹H NMR (CDCb) δ 1,17 (t, 6H, J = 7,0 Hz), 2,29 - 2,45 (široký m, 4H), 2,55 - 2,65 (široký m, 2H), 2,71 - 2,75 (široký s, 4H), 2,85 - 2,91 (široký m, 2H), 2,96 - 2,98 (široký m, 2H), 3,57 (s, 2H), 3,67 - 3,84 (široký m, 6H), 4,57 - 4,61 (široký s, 4H),

7,07 - 7,28 (široký m, 10H), 7,55 - 7,71 (široký m, 7H), 7,99-8,02 (m, 2H) 8,42 - 8,46 (m, 1H).

N-[4-[10-(2-Nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15trienyl]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridin

Použití obecného postupu E: Reakcí N-[4-[7-diethoxyfosforyl-10-(2nitrobenzensulfonyl)-4,7,10-triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trieny I ]-1,4fenylenbis(methylen)]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (290 mg,

0,31 mmol) se získá sloučenina uvedená v názvu (240 mg, 95 %) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (CDCb) δ 1,65 - 1,79 (široký s, 1H, shoda s vrcholem H₂O), 2,15-2,19 (široký m, 4H), 2,44 - 2,48 (široký m, 2H), 2,61 - 2,65 (široký m, 2H), 2,67 - 2,71 (široký m, 2H), 3,00 - 3,04 (široký m, 2H), 3,10 - 3,14 (široký m, 2H), 3,56 - 3,60 (široký m, 4H), 4,55 (s, 2H), 4,61 (s, 2H), 6,96 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,02 - 7,10 (široký m, 6H), 7,22 - 7,28 (široký m, 3H), 7,52 - 7,72 (široký m, 7H), 7,96 - 7,99 (m, 2H),

8,42 - 8,46 (m, 1H). Tato pevná látka se použije bez dalšího čištění.

Dihydrát pentahydrobromidu N-[4-[4,7,10-triazabicyklo[13.3.1]heptadeka1(17),13,15-trienyl]-1,4-fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridinu

Použití obecného postupu G: Reakcí N-[4-[10-(2-nitrobenzensulfonyl)-4,7,10triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny l]-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-(2nitrobenzensulfonyl)-2-(aminomethyl)pyridinu (236 mg, 0,29 mmol) a následným čištěním reakčních produktů na sloupci aluminy (1:99 CH3OH-CH2CI2, poté 1:10 CH3OH-CH2CI2) se získá volná báze sloučeniny uvedené v názvu (111 mg, 86 %) jako bledě žlutý olej:

¹H NMR (CDCb) δ 2,24 - 2,28 (široký s, 3H), 2,43 - 2,50 (široký m, 4H), 2,58 - 2,62 (široký m, 2H), 2,73 - 2,79 (široký m, 8H), 2,95 - 2,98 (široký m, 2H), 3,50 (s, 2H),

3,77 (s, 2H), 3,90 (s, 2H), 6,83 - 6,87 (široký m, 3H), 7,05 - 7,33 (široký m, 7H), 7,63 - 7,67 (m, 1H), 8,54 - 8,56 (m, 1H).

Přeměnou volné báze (104 mg, 0,23 mmol) na sůl hydrobromidu za použití nasyceného roztoku plynného HBr v CH₃OH a následným sušením materiálu ve vakuu se získá sloučenina uvedená v názvu (101 mg, 52%) jako bílá pevná látka:

¹H NMR (D₂O) δ 2,90 - 2,94 (široký m, 2H), 2,97 - 3,01 (široký m, 2H), 3,12 - 3,16 (široký m, 2H), 3,17 - 3,21 (široký m, 2H), 3,24 - 3,28 (široký m, 4H), 3,47 - 3,51 (široký m, 2H), 3,57 - 3,61 (široký m, 2H), 4,38 - 4,42 (m, 6H), 7,34 - 7,40 (m, 2H), 7,46 - 7,60 (m, 8H), 7,90 - 7,94 (m, 1H), 8,58 - 8,62 (m, 1H);

FAB-MS m/z 526 (MH + H⁸¹Br), 524 (MH + H⁷⁹Br), 444 (Μ + H, 100);

Analýza vypočteno pro C28H42N₅Br5.2,5H₂O: C, 37,65; H, 5,30; N, 7,84; Br, 44,73. Nalezeno: C, 37,53; H, 5,26; N, 7,79; Br, 44,75.

Tabulka 2

Sloučenina	Inhibice vazby mAb 12G5 IC50 a (ng/ml)
AMD3100	27
AMD3465	3
AMD7049	52
AMD7050	1
AMD7051	7
AMD7058	>1000
AMD7059	>1000
AMD7063	9
SDF-1ab	270

^a Inhibice vazby mAb 12G5 k CXCR-4 v buňkách SUP-T1 ^b Přírodní ligand pro CXCR-4 (Bleul a kol., Nátuře, 382: 829 - 832 (1996); Oberlin a kol., Nátuře, 382: 833 - 835 (1996))

Tabulka 3 • · ····

Sloučenina	% Inhibice toku Ca2+konc. nebo ICsoa (ng/ml)
AMD3100	5
AMD3465	1
AMD7049	100% (1 pg/ml)
AMD7050	100% (1 pg/ml)
AMD7051	100% (1 pg/ml)
AMD7058	44% (1 pg/ml)
AMD7059	36% (1 pg/ml)
AMD7063	100% (1 pg/ml)

^a Inhibice přenosu signálu (zvýšení nitrobuněčného toku Ca²⁺) indukovaného vazbou SDF-1a k CXCR-4 na buňkách SUP-T1

Každá z dále uvedených sloučenin, včetně AMD 3484 (viz. Obr. 12) se připraví podle potupu, který byl popsán Bridger -em a kol. J. Med. Chem. 1995, 38, 366-378; J. Med. Chem. 1996, 39, 109-119 a US patentu č. 5 583 131, US patentu č. 5 698 546 a US patentu č. 5 817 807, uváděné zde jako odkaz.

Příklad 19

Tetrahydrobromid 1 -[2,6-dimethoxypyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11 tetraazacyklotetradekanu (AMD 7032) ¹H NMR (D₂O) δ 1,78 (m, 2H), 1,88 - 1,92 (m, 2H), 2,59 - 3,03 (m, 16H), 3,60 (s, 2H), 3,91 (s, 6H), 6,44 (s, 2H);

¹³C NMR (D₂O) δ 26,75, 27,91, 48,34, 49,21, 49,89, 50,96, 52,01, 52,86, 54,88, 57,15, 57,53, 59,42, 142,65, 157,42, 166,42;

FAB MS m/z 352 (M+H);

Analýza (C₁₈H33N₅O₂.4,1HBr.0,25H₂O); vypočteno C, 31,44; H, 5,51; N, 10,18; Br, 47,64. Nalezeno C, 31,17; H, 5,61; N, 9,92; Br, 47,54.

Příklad 20

Monohydrát tetrahydrochloridu 1-[2-chlorpyrid-4-yl(methylen)-1,4,8,11tetraazacyklotetradekanu (AMD (7048) ¹H NMR (D₂O) δ 1,92 (m, 2H), 2,12 (m, 2H), 2,77 - 2,80 (m, 4H), 2,96 - 3,39 (m, 12H), 3,85 (s, 2H), 7,33 (d, 1H, J = 5,4 Hz), 7,44 (s, 1H), 8,40 (d, 1H, J = 5,4 Hz);

¹³C NMR (D₂O) δ 24,75, 27,59, 47,40, 47,55, 49,11, 49,23, 52,12, 52,40, 53,81, 54,42, 56,98, 126,97, 128,30, 151,90, 152,34, 153,78;

FAB MS m/z 326 (M+H);

Analýza (Ci₆H₂₈N₅CI.4,2HCj.0,5HOAc.1,1H₂O); vypočteno C, 38,61; H, 6,94; N, 13,24; Cl, 34,86. Nalezeno C, 38,63; H, 6,94; N, 13,52; Cl, 34,61.

Příklad 21

Dihydrát pentahydrobromidu 1-[2,6-dimethyIpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11tetraazacyklotetradekanu (AMD 7060) ¹H NMR (D₂O) δ 1,77 (m, 2H), 1,93 (m, 2H), 2,48 (s, 6H), 2,61-3,00 (m, 16H), 3,61 (s, 2H), 7,07 (s, 2H);

¹³C NMR (D₂O) δ 25,30, 26,22, 27,49, 47,75, 48,65, 49,43, 50,41, 51,58, 52,19, 54,09, 56,63, 58,46;

FAB MS m/z 320 (M+H);

Analýza (Ci8H₃3N₅.5HBr.0,5HOAc.1,7H₂O); vypočteno C, 29,08; H, 5,57; N, 8,92; Br, 50,91. Nalezeno C, 29,04; H, 5,60; N, 8,73; Br, 50,87.

Příklad 22

Dyhidrát pentahydrobromidu 1-[2-methylpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11tetraazacyklotetradekanu (AMD 7061) • φ • · · φ φ · · · · · « · · 4» Φ Φ ΦΦΦΦ

Φ Φ Φ 9 9 9 9 ·· φ φ · ΦΦ 9 9 ΦΦ Φ ¹Η NMR (D₂0) δ 2,01 - 2,08 (m, 2Η), 2,22 (m, 2Η), 2,70 - 2,72 (m, 2Η), 2,77 (s, 3H),

2,91 - 2,92 (m, 2H), 3,33 - 3,52 (m, 12H), 4,00 (s, 2H), 7,86 - 7,89 (m, 2H), 8,56 (d,

1H, J = 5,7 Hz);

FAB MS m/z 306 (M+H);

Analýza (Ci₇H₃iN₅.4,9HBr.0,3HOAc.2,1H₂O); vypočteno C, 27,9; H, 5,49; N, 9,24; Br,

51,67. Nalezeno C, 28,08; H, 5,50; N, 9,56; Br, 51,56.

Příklad 23

Bishydrát trihydrochloridu 1-[2,6-dichlorpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11tetraazacyklotetradekanu (AMD 3451) ¹H NMR (D₂0) δ 1,83 - 1,88 (m, 2H), 2,04 - 2,08 (m, 2H), 2,58 - 2,62 (m, 2H), 2,79 - 2,81 (m, 2H), 3,12 - 3,44 (m, 12H), 3,69 (s, 2H), 7,30 (s, 2H);

¹³C NMR (D₂O) δ 36,26, 37,69, 55,26, 56,18, 58,33, 58,56, 58,92, 59,23, 63,57,

65,44, 70,72, 140,37, 166,14, 167,37;

FAB MS m/z 360 (M+H).

Analýza (Ci6H₃4N5Cl5O₂): vypočteno C, 38,00; H, 6,78; N, 13,85; Cl, 35,05.

Nalezeno: C, 38,33; H, 6,42; N, 13,88; Cl, 35,43.

Příklad 24

Hemihydrát tetrahydrochloridu 1 -[2-chlorpyrid-5-yl(methylen)]-1,4,8,11tetraazacyklotetradekanu (AMD 3454) ¹H NMR (D₂O) δ 1,96 - 2,09 (široký m, 4H), 3,02 - 3,17 (m, 4H), 3,19- 3,28 (široký m, 8H), 3,40 (s, 4H), 4,10 (s, 2H), 7,40 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,80 (d, 1H, J = 8,2 Hz),

8,27 (s, 1H);

¹³C NMR (D₂O) δ 19,36, 19,47, 38,17, 38,64, 39,06, 41,74, 41,88, 42,18, 45,66,

48,29, 54,62, 125,59, 126,69, 142,79, 150,77, 151,75;

FAB MS m/z 326 (Μ + H).

0 0 · 0 0 ·· ···· ·· • · · · 0 0 0 0 * • 00 · · 0 · 00 0 •00 0000 00 000

Analýza: vypočteno pro Ci6H₂8N5CI.4HCI.0,5H₂O: C, 39,98; H, 6,92; N, 14,57; Cl, 36,87. Nalezeno: C, 40,36; H, 7,06; N, 14,56; Cl, 36,92.

Obecné postupy A, B a C se použijí pro přípravu následujících sloučenin:

Příklad 25

Dihydrát pentahydrobromidu N-[1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanyl-1,4fenylenbis(methylen)]-purinu (AMD 3472) ¹H NMR (D₂O) δ 1,88 - 2,05 (široký m, 4H), 3,06 - 3,22 (široký m, 8H), 3,27 - 3,44 (široký m, 8H), 4,22 (s, 2H), 5,59 (s, 2H), 7,29 (s, 4H), 8,80 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 9,28 (s, 1H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,39, 19,25, 37,24, 37,55, 37,71, 41,13, 41,37, 41,71,44,41, 47,73, 54,87, 129,45, 131,81, 132,53, 136,67, 140,96, 147,88, 152,46, 154,37; FAB-MS m/z 423 (Μ + H).

Analýza: vypočteno pro C₂₃H₃₄N₈.5HBr.2H₂O.0,5CH₃CO₂H: C, 32,27; H, 5,07; N, 12,54; Br, 44,73. Nalezeno: C, 32,66; H, 4,81; N, 12,41; Br, 44,58.

Příklad 26

Hydrát pentahydrobromidu 1 -[1,4,8,11 -tetraazacyklotetradekanyl-1,4fenylenbis(methylen)]-4-fenylpiperazinu (AMD3526) ¹H NMR (D₂O) δ 1,88 - 2,06 (široký s, 4H), 3,11 - 3,53 (široký m, 24H), 4,30 (s, 2H), 4,32 (s, 2H), 6,89 - 6,97 (m, 3H), 7,19 - 7,24 (m, 2H), 7,49 (s, 4H);

¹³C NMR (D₂O) δ 18,74, 19,37, 37,34, 41,47, 41,76, 42,03, 44,31,47,45, 48,26, 51,16, 58,48, 59,29, 118,18, 122,34, 129,99, 130,37, 131,53, 131,85, 132,62,

148,47;

FAB-MS m/z 547 (M + H³¹ Br), 545 (M + H⁷⁹Br), 465 (Μ + H).

Analýza: vypočteno pro C₂8H44N₆.5HBr.H₂O: C, 37,90; H, 5,79; N, 9,47; Br, 45,03. Nalezeno: C, 37,72; H, 5,98; N, 9,38; Br, 46,78.

·· ···· • · · Λ · 9 • · · · · ♦ · ·· •· * «· «· tt

Tabulka 4

Sloučenina	IC50 a (pg/ml)
AMD3451	8,9
AMD3472	45,4
AMD3454	32,3
AMD3526	82
AMD3100	>100

^a 50% Inhibiční koncentrace (IC50) (pg/ml) vykazovaná sloučeninami AMD vůči infekci U87.CD4.CCR5 virem HIV-1 Bal.

Příklad 27

Inhibice kolagenem indukované artritidy

Sloučeniny podle vynálezu vykazují inhibici kolagenem indukované artritidy (CIA) v mutantním myším modelu.

Metodologie

Experimentální živočich

Deset myší zařazených do kontrolní skupiny bylo injektováno kolagenem jak je uvedeno dále. Skupina osmi myší byla rovněž injektována kolagenem a dále byla ošetřena podáním sloučeniny (1,r-[1,4-fenylenbis(methylen))]bis-1,4,8,11tetraazacyklotetradekanu) (AMD 3100; viz. obr. 27) intravenózně za použití osmotické pumpy (200 μΙ, Alza, 0,5 μΙ/hod) při koncentraci 5 mg/ml během 14-denní periody po kolagenové injekci.

Mutantní myši ···♦ • *

Generace a základní charakteristiky kmene mutantní myši (129/SV/Ev) s přerušením v genovém kódování pro a-řetězec lFN-γ receptoru (IFN-γ RKO) byly popsány (Huang S. a kol. Science 259: 1742, (1993)). Tato IFN-γ RKO myš byla zpětně křížena s přírodní myší DBA/1 po 10 generací pro získání DBA/1 IFN-γ RKO myši použité v této studii. IFN-γ RKO a přírodní myši byly pěstovány v Experimental Animal Centre of the University of Leuven. Tyto pokusy byly provedeny na myších stáří 8 až 12 týdnů, ale v každém pokusu byly mutantní a přirozené myši vybrány tak, aby se ve stáří nelišily více než o 5 dnů. V každé zkoušené skupině byl udržován poměr samců k samicím mezi 0,8 a 1,3.

Indukce kolagenem indukované artritidy a klinické zkoušky artritidy

Kolagenem indukovaná artritida se provedla následujícím způsobem (viz. Vernwe a kol., Int. J. Immunol. 158: 5507-5513, (1997)). Přirozený drůbeží kolagen typu II (EPC, Owensville, MO) se rozpustil v 0,05 M kyselině octové při 2 mg/ml mícháním přes noc při teplotě 6 °C a emulgoval se ve stejném objemu nekompletního (IFA) nebo kompletního Freudova adjuvantu (CFA), obsahujícího 1,5 mg/ml za tepla usmrcených Mycobacterium butyricum (Difco, Detroit, Ml). Myši byly sensitizovány jednou 100 μΙ intradermální injekcí emulze do kořene ocasu. Myši byly zkoumány denně pro znaky na artritidu. Vážnost nemoci se zaznamenala pro každou končetinu. Označení 0: normální; označení 1: zčervenání a/nebo otok jednoho kloubu; označení 2: zčervenání a/nebo otok více než jednoho kloubu; označení 3: zčervenání a/nebo otok celé tlapičky; označení 4: deformování a/nebo ankylóza.

Histologické zkoumání

Sleziny a přední a zadní končetiny byly fixovány v pufrovém fyziologickém roztoku - fixativ B5 (10% formalin se rtutí). Alternativně se tkáně fixovaly v 10% formalinu nebo čistém methanolu (viz.: Vernwe a kol., J. Immunol., 158, 5507-5513, 1997). Končetiny byly následně dekalcifikovány přes noc kyselinou mravenčí. Čtyři mikrony silné parafinové řezy byly obarveny hematoxylinem a Cosinem. Vážnost artritidy se hodnotila za použití tří parametrů: infiltrace mono- a polymorfonukleárních ·· ···· • · · fi 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 ♦· · ......

buněk, hyperplazie kloubního mazu a tvorba parmu. Každý parametr se zaznamenal na škále od 0 do 3 (nepřítomen; slabý; střední nebo vážný).

Zkoumání protilátky in vivo

Monoklonální protilátky se získaly z hybridomů intraperitoneální inokulací v Pristan-primárně imunizovaných atymických holých myších (nu/nu prostředí NMRI). Neutralizační monoklonální protilátka proti MulFN-γ (F3, druh lgG₂4) se čistila afínitní chromatografií na monoklonální protilátce s myším anti-krysím κ řetězcem (Billiau a kol. J. Immunol. 140:1506, (1988)). Neutralizační titr (konečný bod zředění odpovídá 50% neutralizaci protivirového účinku 30 jednotek/ml myšího IFN-γ na myší buňky I929 exponované s mengovirem) byl 10⁵³ U/ml (obsah IgG, 1,4 mg/ml). Neutralizační protilátka lgG24 proti myšímu IL-12 se získala za použití hybridomů C17.8 (laskavě poskytl Dr. G. Trinchieri, Wistar Institut, Filadelfie, PA). Protilátka se čistila afínitní chromý,tografií na G proteinu (Pharmacia, Uppsala, Švédsko). Protilátka proti myšímu IL-6 se připravila z ascitézní kapaliny z brzlíku zbavené holé myši inokulované s hybridomem 20F3 (American Type Culture Collection, Rockville, MD). Tato krysí IgG protilátka se čistila afínitní chromatografií na koloně obsahující kombinaci Sepharosamonoklonální protilátka s anti-krysím κ řetězcem. Neutralizační titr (konečný bod zředění odpovídající 50% neutralizaci účinnosti buněčného růstu 10 U myšího IL-6 na ml) byl 10⁵⁵ (obsah IgG: 2,9 mg/ml). Nerelevantní krysí lgG24 se použil jako izotopní kontrola a připravil se z ascitézní kapaliny krysího plasmocytomu (získaný od Dr. H. Bazin-a, University of Louvain, Medical School, Brussels, Belgie). IgG se čistil aniontovou výměnnou chromatografií na Hiload Q Sepharóze a gelovou filtrací na Superdex 200 (Pharmacia). Dávky anti-IFN-γ, anti-IL-12, anti-IL-6 a nerelevantního lgG₂4 se zkoušely na obsah endotoxinu chromogenní Limulus amoebocytovou lysátovou zkouškou (KabiVitrum, Stockholm, Švédsko) a bylo zjištěno, že obsahují méně než 2 ng/ml endotoxinu. Injekce byly podávány v 200 μΙ nepyrogenního fyziologického roztoku.

Výsledky

Po 14 dnech léčby se projevila u 7 z 10 myší kontrolní skupiny artritida, zatímco pouze u jednoho z osmi léčených zvířat se projevila nemoc. Viz obrázek 29.

• 9 »99

999 9999 9

9 99 99

Jeden z léčených živočichů nevykazoval žádnou artritickou patologii ani 20 dnů po léčbě. Dále, léčená zvířata nevykazovala, ve srovnání s kontrolní skupinou zvířat, žádnou podstatnou ztrátu hmotnosti. Viz obrázek 30. Dále, léčená zvířata udržovala tělesnou hmotnost konzistentní se zdravými zvířaty, která nebyla injektována kolagenem (křivka se neuvádí).

Příklad 28

Léčba glioblastomu

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu, jako je AMD 3100 se mohou použít k léčbě glioblastomu, fibromů, astrocytomů nebo myelomů, působících na centrální nervový systém.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou použít podle standardní klinické praxe a postupů, za použití dávek, jak je uvedeno ve shora uvedených příkladech a podle klinických konečných výsledků, jako je celkový dojem, imunologie a další metodologie.

Například etiologie nebo asociace vazby chemokinového receptoru v proliferaci glioblastomových nádorových buňkách byla popsána Sehgal-em a kol.,

J. of Surg. Oncolo. 69: 99-104 (1998) („Sehgal I“) a Sehgal a kol. J. ofSurg. Oncolo. 69: 239-248 (1998) („Sehgal II“). Úloha CXCR4, jeho vazby kjeho receptoru hraje důležitou roli v tvorbě a/nebo proliferaci glioblastomových buněk. Inhibice vazby pomocí CXCR4 kjeho přirozenému receptorovému ligandu sloučeninami podle vynálezu, jako je AMD 3100 poskytuje nové léčivo v léčbě nádorů centrálního nervového systému, které jsou zprostředkovány chemokiny, jako je CXCR4.

Příklad 29

Léčba rakoviny nikoliv malých buněk plic

Sloučeniny podle vynálezu, jako je AMD 3100 se mohou požít při léčbě rakoviny nikoliv malých buněk plic. Sloučeniny podle vynálezu se mohou použít podle standardní klinické praxe a postupů, za použití dávek, jak je uvedeno ve shora ·· »··· ·· ··

AC · · · * · · * ·· · ·· ·♦ uvedených příkladech a podle klinických konečných výsledků, jako je celkový dojem, imunologie a další metodologie.

Například u chemokinů CXC bylo zjištěno, že regulují nebo jsou spojeny s regulací angiogenéze u rakoviny nikoliv malých buněk plic (viz.: Arenberg a kol. J. ofLeukocyte Biol.: 62: 554562 (1997); a Moore a kol., TCM, díl 8(2): 51-58 (1998) Elsevier Science, Inc.). Úloha CXC chemokinů a vazba k jejich příslušným receptorům hraje důležitou úlohu ve formaci a/nebo proliferaci při rakovině nikoliv malých buněk plic podporované zvýšením angiogenní aktivity. Inhibice vazby těchto CXC chemokinů k jejich přirozeným receptorovým ligandům sloučeninami podle vynálezu , jako je AMD 3100 poskytuje nové léčivo v léčbě nádorů, jako je rakovina nikoliv malých buněk plic které jsou spojovány zvýšenou úrovní chemokinů.

Příklad 30

N-[4-(1,7-Diazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)-2-(aminomethyl)pyridin

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu dále zahrnují sloučeniny obecného vzorce I, kde V má 2 až 6 případně substituovaných aminových dusíků navzájem oddělených dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku. Příklad takové sloučeniny zahrnuje:

N[4-(1,7-Diazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD-Exp 1; viz. obr. 34).

AMD-Exp 1, Exp 2 a Exp 3 se mohou připravit modifikací dříve popsaných postupů (Bridger a kol. J. Med. Chem. 1995, 38, 366) pro přípravu C-vázaných azamakrocyklů a může být stručně shrnut následovně: Shora uvedený meziprodukt, N-[1-methylen-4-(chlormethylen)fenylen]-N-(2-nitrobenzensulfonyl)-2aminomethyl)pyridin (nebo Dep-chráněný meziprodukt) reaguje se sodnou solí diethylmalonátu za vzniku odpovídajícího diesteru.

Redukce diesteru na odpovídající diol, následovaná derivatizací methansulfonylchloridem poskytuje dimesylát. Nukleofilní vytěsnění dimesyíátu kyanidem sodným poskytuje požadovaný dinitril, který se redukuje na diamin s boranem.THF a derivatizuje se 2-nitrobenzensulfonylchloridem pro následující makrocyklizační reakci.

····

Makrocyklizací s vhodně derivatizovaným diolem (jako je 1,7-heptandiol di-ptosylát) a následným odstraněním chránící skupiny jak je popsáno v příkladech shora se získá například AMD-Exp 1. Podobně, 1,3-fenylendiethanol a 2,6-pyridindiethanol poskytují AMD-Exp 2 a AMD-Exp 3.

Dále, AMD-Exp 1, AMD-Exp 2 a AMD-Exp 3 se mohou formulovat do formy farmaceutických prostředků, obsahujících terapeuticky účinné množství sloučeniny podle vynálezu a farmaceuticky přijatelný nosič.

Dále, AMSD-Exp 1, AMD-Exp 2 a AMD-Exp 3 se mohou také být použity podle shora uvedených metod pro léčbu řady nemocí a stavů zprostředkovaných chemokinem, zahrnující: infekci HIV nebo FIV; nemoci regulací funkce endotheliální buňky; nemoci vztahující se k vaskularizaci gastrointestinálního traktu; hematopoézu; nebo cerebelární vývoj; nemoci vztahující se k pohybu bazálních leukocytů nebo extravazaci a tkáňové infiltraci leukocytů, jako odezvu na podněcující antigeny; sloučeniny které se efektivně vážou k chemokinovému receptoru; zánětlivá nemoc; rakovina; choroby centrálního nervového systému; HIV; FIV; choroba spojená s vaskularizaci; choroba spojená kardiogenézí, hematopoéza a jiné choroby spojené s chemokinem;

Další příklady takových specifických chorob nebo stavů, které se mohou léčit za použití AMD-Exp 1 dále zahrnují: zánět v důsledku artritidy nebo násobné sklerózy, rakovinu spojenou s: pevnými nádory, lymfomem, metastázovými nádory, glioblastovými nádory a ostatními rakovinovými nádory, rakovinou nikoliv malých buněk plic, rakovinou plic, rakovinou prostaty a rakovinou jiných orgánů. Dále, choroby, které mohou být léčeny za použití AMD-Exp 1, zahrnují: choroby, léčené inhibici nebo podporou angiogenéze nebo indukcí stáze angiogenéze.;

Příklad 31

N-[7-(4.10-Diazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1 (17),13,15-trienyl)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu dále zahrnují sloučeniny obecného vzorce I, kde V má 2 až 6 případně substituovaných aminových dusíků navzájem oddělených dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku. Příklad takové sloučeniny zahrnuje:

φφφφ φφ φ φφφφ t

φφ φφφφ φφφ φ φ φ φφ φ

Ν-[7-(4.10-D i azab i cy kl o [ 13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I )-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD-Exp 2; viz. obr. 36).

AMD-Exp 2 a AMD-Exp 3 se mohou připravit podle příkladu 30 shora. Dále, AM-Exp 2 se může formulovat do formy farmaceutických prostředků, obsahujících terapeuticky účinné množství sloučeniny podle vynálezu a farmaceuticky přijatelný nosič.

Dále, AMD-Exp 2 se může také být použit podle shora uvedených metod pro léčbu řady nemocí a stavů zprostředkovaných chemokinem, zahrnující: infekci HIV nebo FIV; nemoci regulací funkce endotheliální buňky; nemoci vztahující se k vaskularizaci gastrointestinálního traktu; hematopoézu; nebo cerebelární vývoj; nemoci vztahující se k pohybu bazálních leukocytů nebo extravazaci a tkáňové infiltraci leukocytů, jako odezvu nad podněcující antigeny; sloučeninu která se efektivně váže k chemokinovému receptoru; zánětlivou nemoc; rakovinu; choroby centrálního nervového systému; HIF; FIV; choroby spojené s vaskularizaci; choroby spojené s kardiogenézí, hematopoéza a jiné choroby spojené s chemokinem;

Další příklady takových specifických chorob nebo stavů, které se mohou léčit za použití AMD-Exp 1 dále zahrnují: zánět v důsledku artritidy nebo násobné sklerózy, rakovinu spojenou s pevnými nádory, lymfomem, metastázovými nádory, glioblastovými nádory a ostatními rakovinovými nádory, rakovinou nikoliv malých buněk plic, rakovinou plic, rakovinou prostaty a rakovinou jiných orgánů. Dále, choroby, které mohou být léčeny za použití AMD-Exp 1, zahrnují: choroby, léčené inhibici nebo podporou angiogenéze nebo indukcí stáze angiogenéze.

Aktivní sloučeniny mohou být podávány ve formě farmaceutického prostředku formulovaného podle známého postupu a inkorporací sloučeniny, výhodně v jednotkové dávkové formě, do farmaceutického prostředku s farmaceuticky přijatelným ředidlem, nosičem nebo pomocnou látkou. Takové prostředky mohou být ve formě roztoků nebo suspenzí pro injekce nebo irigaci nebo mohou být ve formě kapsle, tablety, dražé nebo ostatních pevných dávkových forem, nebo jako roztok nebo suspenze pro orální podání nebo mohou být formulovány do pesarů nebo čípků nebo do formulací se zpožděným uvolňováním nebo mohou být ve formě implantátů. Vhodná ředidla, nosiče, pomocné látky a ostatní složky jsou velmi dobře známé. Může být také žádoucí formulovat prostředek do formy pro topické podání, jako je ·· 999· •9 ····

999 9 9 · 99 999 999 9999

999 9999 99 * ** ** *· * mast nebo krém. Sloučeniny podle vynálezu se mohou použít ve formě prostředku nebo samotné.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být formulovány do jednotkových dávek určených podle konvenčních farmaceutických metod, vhodně tak, aby poskytovaly aktivní sloučeninu v dávce pro lidi nebo zvířata v rozsahu od 0,01 do 100 mg/kg tělesné hmotnosti za den v jedné dávce nebo v několika menších dávkách. Výhodné rozsahy dávek jsou od 0,01 do 30 mg/kg tělesné hmotnosti denně intravenózně (iv) nebo inraperitoneálně (ip). V průběhu léčby se mohou použít rovněž další aktivní sloučeniny nebo může být použita další dodatečná léčba. Farmaceutické prostředky jsou užitečné pro léčbu pacienta, přičemž léčba zahrnuje podání účinného terapeutického množství nové sloučeniny, kde se uvedená sloučenina účinně váže na chemokinový receptor.

Předkládaný vynález rovněž zahrnuje použití těchto prostředků pro přípravu léčiva pro léčení HIV- nebo FlV-infikovaných pacientů a/nebo pro léčbu nemoci regulací endotheliální buněčné funkce a/nebo léčbu nemoci vztahující se k vaskularizaci gastrointestinálního traktu, hematopoézy; nebo cerebelárního rozvoje.

Při léčení pacienta infikovaného HIV nebo FIV se prostředek podá uvedenému pacientovi jako terapeuticky účinné množství prostředku ve farmaceuticky přijatelném nosiči. Při léčbě pacienta s nemocí, která se vztahuje k regulaci endotheliální buněčné funkce se prostředek podá uvedenému pacientovi jako terapeuticky účinné množství prostředku ve farmaceuticky přijatelném nosiči. Předkládaný vynález také zahrnuje způsoby léčby pacienta s nemocí vztahující se k vaskularizaci gastrointestinálního traktu, hematopoéze, nebo cerebelárnímu vývoji podáním uvedenému pacientovi terapeuticky účinného množství prostředku ve farmaceuticky přijatelném nosiči.

Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení pacienta s nemocí vztahující se k pohybu bazálních leukocytů nebo k extravazaci a tkáňové infiltraci leukocytů v odezvě na vyvolání antigeny, podáním uvedenému pacientovi terapeuticky účinného množství prostředku ve farmaceuticky přijatelném nosiči. Předkládaný vynález dále zahrnuje léčbu pacienta, přičemž léčba zahrnuje podání terapeuticky účinného množství farmaceutického prostředku ve farmaceuticky přijatelném nosiči, kde se uvedená sloučenina účinně váže na chemokinový receptor.

Předkládaný vynález se dále týká farmaceutických prostředků a způsobu jejich použití k léčbě lidí nebo zvířat pro: odmítnutí renálního aloimlantátu; zánětlivou

• 4 ···· ·· • · · · · • Φ · · · • · · * · · · ♦ · ♦ <· · · ·· ·» ·· nemoc; rakovinu; chorobu centrálního nervového sytému; HIV; choroby rozvoje vaskulatury; hematopoézu a jiné choroby nebo nemoci zprostředkované chemokinem. Vynález dále poskytuje léčbu nemocí, které zahrnují, nikoliv však s omezením: artritidu, násobnou sklerózu, demenci spojenou s infekcí HIV nebo FIV, Parkinsonovu chorobu, Alzheimrovu chorobu a zánětlivé nemoci. Farmaceutické prostředky a způsoby použití předkládaného vynálezu dále poskytují léčbu rakoviny, která zahrnuje, nikoliv však s omezením spojenou s: pevnými nádory, lymfomem, metastázovými nádory, glioblastovými nádory a ostatními rakovinovými nádory. Farmaceutické prostředky podle vynálezu jsou užitečné pro léčbu rakovin, které zahrnují, nikoliv však s omezením: rakovinu nikoliv malých buněk plic, rakovinu plic, rakovinu prostaty a rakovinu jiných orgánů.

Další choroby a nemoci, které mohou být léčeny farmaceutickými prostředky podle vynálezu zahrnují, nikoliv však s omezením: choroby, léčené inhibici nebo podporou angiogenéze nebo indukcí stáze angiogenéze; vývoj chorob zprostředkovaných chemokiny.

Předkládaný vynález dále poskytuje způsoby prevence nemoci nebo choroby u pacienta, podáním terapeuticky účinné dávky farmaceutických prostředků podle předkládaného vynálezu po dobu, která je dostatečná k účinné prevenci nemoci nebo choroby.

Claims (45)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použití sloučeniny obecného vzorce I:

   V-CR¹ R²-Ar-CR³R⁴-N(R⁵)-(CR⁶R⁷)_X-R⁸ (I) kde V je cyklický polyaminový zbytek mající celkem 9 až 24 členů a 2 až 6, případně substituovaných aminových dusíkových atomů oddělených dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku mezi nimi a který může případně zahrnovat kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh;

   R¹ až R⁷ mohou být stejné nebo různé a jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje vodík, přímý, rozvětvený nebo cyklický Ci_₆atkyl;

   R⁸ je heterocyklické skupina, substituovaná nebo nesubstituovaná aromatická nebo heteroaromatická skupina nebo merkaptanová skupina;

   Ar je aromatický nebo heteroaromatický kruh případně substituovaný v jedné nebo více polohách skupinami, které dodávají nebo odebírají elektrony;

   xje 1 nebo 2;

   a její adiční soli s kyselinami a komplexů s kovy, pro přípravu léčiva pro léčbu stavů zprostředkovaných receptory CXCR4 nebo CCR5, jiných než infekce HIV.
2. 2. Použití podle nároku 1, kde V je 14 až 20 členný kondenzovaný nebo nekondenzovaný kruhový systém.
3. 3. Použití podle nároku 1, kde V je 4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1(17), 13,15-trienylový systém nebo 1,4,7-triazacyklotetradekanyl nebo 4,7,10triazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1 (17),13,15-trienylový systém nebo 1,4,8,11tetraazacyklotetradekanylový systém nebo jejich deriváty.
4. 4. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde R¹, R², R³, R⁴ jsou H a R⁵ je H nebo CH3.

   ··

   00 0000

   0 0

   0 0

   0 0

   0 0

   00 0

   00 0000 » 0 0 • 0 ·

   0 0 0 ·

   0 0 0

   00 0

   0 0 0

   0 · 0 0 0 0 • 0 0 0 • 0 00
5. 5. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde Ar je 1,3 nebo 1,4 nesubstituovaný fenylen.
6. 6. Použití podle nároku 4, kde Ar je 1,3 nebo 1,4 nesubstituovaný fenylen.
7. 7. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde R⁸ je SH, nesubstituovaný nebo substituovaný fenyl, nesubstituovaný nebo substituovaný pyridyl, thiofenyl nebo 1,4pyridyl.
8. 8. Použití podle nároku 4, kde R⁸je SH, nesubstituovaný nebo substituovaný fenyl, nesubstituovaný nebo substituovaný pyridyl, thiofenyl nebo 1,4-pyridyl.
9. 9. Použití podle nároku 1, kde sloučenina obecného vzorce 1 je:

   N-[4-(1,4,7-Triazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD 7049);

   N-[7-(4,7,10,17-Tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny l)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7050);

   N-[7-(4,7,10-T riazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7051);

   N-[4-[4,7,10-Triazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny l]-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7058);

   N-[1 -(4,7,10-Triazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD 7059);

   N-[4-(4,7,10,17-T etraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trieny I )-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7063);

   N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD 3465);

   N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-N-methyl-2(aminomethyl)pyridin (AMD 3538);

   N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4(aminomethyl)pyridin (AMD 3500);

   N-[1,4,8,11 -T etraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-3(aminomethyl)pyridin (AMD 3499);

   N-[1,4,8,11 -T etraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-(2aminomethyl-5-methyl)pyrazin (AMD 3498);

   N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminoethyl)pyridin (AMD 3497);

   N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)thiofen (AMD 3516);

   N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)merkaptan (AMD 3530);

   N-[ 1,4,8,11 -T etraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-2aminobenzylamin (AMD 3517);

   N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4aminobenzylamin (AMD 3544);

   N-[1,4,8,11 -Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4(aminoethyl)imidazol (AMD 3543); nebo

   N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-benzylamin (AMD 3529);

   N-[3-(3,6,17-T riazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I )-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 8630);

   N-[3-(3,6,17-T riazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I)-1,3fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 8631);

   N-[4-(4,7,17-T riazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny l)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7450);

   N-[7-(4,7,17-Triazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny l)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7463);

   N-[6-(3,6,9-T riazabicyklo[ 11.3.1 ]pentadeka-1 (15), 11,13-trieny I)-1,3fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD 7097); nebo

   N-[4-(1,7-Diazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD-Exp 1), nebo

   N-[7-(4,10-Diazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I )-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD Exp 2); nebo • · • · · · • · · · • ·

   53)

   Ν - [7-(4,10,17-T riazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17),13,15-trien y I)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD Exp 3); nebo

   AMD 3100; nebo jejich adiční soli s kyselinami a kovové komplexy.
10. 10. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, kde uvedený stav je artritida.
11. 11. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, kde uvedený stav je roztroušená skleróza.
12. 12. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, kde uvedený stav je rakovina.
13. 13. Použití podle nároku 12, kde uvedená rakovina je spojena s pevnými nádory; lymfomem; metastázovými nádory; glioblastovými nádory; a ostatními rakovinovými nádory.
14. 14. Použití podle nároku 12, kde uvedená rakovina je nemalobuněčná rakovina plic; rakovina plic; rakovina prsu; rakovina prostaty; a rakovina jiných orgánů.
15. 15. Sloučenina obecného vzorce V,

    V^CR^^Ai-² (V) kde V² je cyklický polyaminový zbytek mající celkem 9 až 24 členů a 3 až 6 případně substituovaných aminových dusíkových atomů oddělených dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku mezi nimi a který může případně zahrnovat kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh;

    R⁹ až R¹⁰ mohou být stejné nebo různé a jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje vodík, přímý, rozvětvený nebo cyklický Ci_₆alkyl;

    Ar² je aromatický nebo heterocyklický kruh, každý případně substituovaný v jedné nebo více polohách skupinami vybranými ze souboru, který zahrnuje halogen, alkyl nebo alkoxy, neboje 4-fenylpiperazinyl methyl nebo purin-1 -yl methyl; a její adiční soli s kyselinami a kovové komplexy.

    • · ·
16. 16. Sloučenina podle nároku 15, kde V² je cyklámový nebo substituovaný cyklámový systém nebo 1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanylový systém nebo 4,7,10,17tetraazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trienylový systém.
17. 17. Sloučenina podle nároku 16, kde Ar² je heterocyklický kruh nebo substituovaný heterocyklický kruh nebo fenylen nebo substituovaný fenylen.
18. 18. Sloučenina podle nároku 17, kterou je:

    1-[2,6-Dimethoxypyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (AMD 7032); 1-[2-Chlorpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (AMD 7048);

    1-[2,6-Dimethylpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (AMD 7060);

    1 -[2-Methylpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11 -tetraazacyklotetradekan (AMD 7061);

    1 -[2,6-Dichlorpyrid-4-yl(methylen)]-1,4,8,11 -tetraazacyklotetradekan (AMD 3451); nebo

    1-[2-Chlorpyrid-5-yl(methylen)]-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (AMD 3454); N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-purin (AMD 3472); N-[1,4,8,11-Tetraazacyklotetradekanyl-1,4-fenylenbis(methylen)]-4-fenylpiperazin (AMD 3526); nebo

    7-[4-Methylfenyl (methylen)]-4,7,10,17-tetraazabicyklo[13.3.1 jheptadeka1(17), 13,15-trien (AMD 3484), nebo jejich adiční soli s kyselinami nebo kovové komplexy.
19. 19. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné terapeutické množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 15 až 18.
20. 20. Prostředek podle nároku 19 v jednotkové dávkové formě.
21. 21. Použití sloučeniny podle nároků 15 až 18 při způsobu léčby HIV nebo FIVinfikovaných subjektů.
22. 22. Použití sloučeniny podle nároků 15 až 18 pro léčbu stavů zprostředkovaných receptorem CXCR4 nebo CCR5.

    • · · · • · • · · · · · • · · · · • 9 * · · · • · · · · · • · · · · ♦ ·
23. 23. Použití podle nároku 22, kde uvedený stav je artritida.
24. 24. Použití podle nároku 22, kde uvedený stav je roztroušená skleróza.
25. 25. Použití podle nároku 22, kde uvedený stav je rakovina.
26. 26. Použití podle nároku 25, kde uvedená rakovina je spojena s pevnými nádory; lymfomem; metastázovými nádory; glioblastovými nádory; a jinými rakovinovými nádory.
27. 27. Použití podle nároku 25, kde uvedená rakovina je nemalobuněčná rakovina plic; rakovina plic; rakovina prsu; rakovina prostaty; a rakovina jiných orgánů.
28. 28. Sloučenina obecného vzorce

    V-CR¹ R²-Ar-CR³R⁴-N (R⁵)-(CR⁶R⁷)_x-R⁸ (I) kde V je cyklický polyaminový zbytek mající celkem 9 až 24 členů a 2 případně substituované aminové dusíkové atomy oddělené dvěma nebo více případně substituovanými atomy uhlíku mezi nimi a který může případně zahrnovat kondenzovaný aromatický nebo heteroaromatický kruh;

    R¹ až R⁷ mohou být stejné nebo různé a jsou nezávisle vybrány ze souboru, který zahrnuje vodík, přímý, rozvětvený nebo cyklický Ci.₆alkyl;

    R⁸je heterocyklická skupina, substituovaná nebo nesubstituované aromatická nebo heteroaromatická skupina nebo merkaptanová skupina;

    Ar je aromatický nebo heteroaromatický kruh případně substituovaný v jedné nebo více polohách skupinami, které dodávají nebo odebírají elektrony;

    x je 1 nebo 2;

    a její adiční soli s kyselinami a komplexy s kovy.
29. 29. Sloučenina podle nároku 28, kde V je 14 až 16 členný kondenzovaný nebo nekondenzovaný kruhový systém.

    • · • · · · • · · · • · · ♦ · · · · ·

    9 9 9 9 9 9 9 9 9

    99 9 99 99 99 ·
30. 30. Sloučenina podle nároku 28, kde V je 1,7-diazacyklotetradekanyl nebo 4,10diazabicyklo[13.3.1]heptadeka-1 (17),13,15-trienylový systém.
31. 31. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 28 až 30, kde R¹, R², R³, R⁴, jsou H a R⁵ je H nebo CH3.
32. 32. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 28 až 30, kde Ar je 1,3 nebo 1,4 nesubstituovaný fenylen.
33. 33. Sloučenina podle nároku 31, kde Ar je 1,3 nebo 1,4 nesubstituovaný fenylen.
34. 34. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 28 až 30, kde R⁸ je SH, nesubstituovaný nebo substituovaný fenyl, nesubstituovaný nebo substituovaný pyridyl, thiofenyl nebo 1,4-pyridyl.
35. 35. Sloučenina podle nároku 31, kde R⁸je SH, nesubstituovaný nebo substituovaný fenyl, nesubstituovaný nebo substituovaný pyridyl, thiofenyl nebo 1,4-pyridyl.
36. 36. Sloučenina podle nároku 28, kterou je

    N-[4-(1,7-Diazacyklotetradekanyl)-1,4-fenylenbis(methylen)]-2(aminomethyl)pyridin (AMD-Exp 1), nebo

    N-[7-(4,10-Diazabicyklo[13.3.1 ]heptadeka-1 (17), 13,15-trieny I)-1,4fenylenbis(methylen)]-2-(aminomethyl)pyridin (AMD Exp 2); nebo jejich adiční soli s kyselinami a kovové komplexy.
37. 37. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné terapeutické množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 28 až 36.
38. 38. Prostředek podle nároku 37 v jednotkové dávkové formě.
39. 39. Použití sloučeniny podle nároků Z.^až ..í ípři způsobu léčby HIV nebo FIVinfikovaných subjektů.
40. 40. Použití sloučeniny podle nároků 28 až 36 pro léčbu stavů zprostředkovaných receptorem CXCR4 nebo CCR5.
41. 41. Použití podle nároku 40, kde uvedený stav je artritida.
42. 42. Použití podle nároku 40, kde uvedený stav je násobná skleróza.
43. 43. Použití podle nároku 40, kde uvedený stav je rakovina.
44. 44. Použití podle nároku 43, kde uvedená rakovina je spojena s pevnými nádory; lymfomem; metastázovými nádory; glioblastovými nádory; a jinými rakovinovými nádory.
45. 45. Použití podle nároku 43, kde uvedená rakovina je nemalobuněčná rakovina plic; rakovina plic; rakovina prsu; rakovina prostaty; a rakovina jiných orgánů.