CZ2000878A3 - Pyrrolopyrrolonové deriváty - Google Patents

Abstract

Sloučeniny vzorce (1), kde skupiny R1, R2 aR3 jsou definovány v nárocích. Sloučeniny vzorce (I)jsou použitelné mj. při léčení zánětlivých onemocnění respiračního traktu

Description

Pyrrolopyrrolonové deriváty

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká terapeuticky účinných bicyklických sloučenin, způsobů jejich výroby, farmaceutických prostředků s jejich obsahem a jejich použití při chemoterapii. Autoři vynálezu zvláště nalezli skupinu nových bicyklických sloučenin, které jsou účinné při léčení zánětlivých onemocnění.

Dosavadní stav techniky

Zánět je primární odpověď na poranění tkáně nebo mikrobiální invazi a je charakterizován cirkulací leukocytů, které se vážou na vaskulární endotelium a vystupují z něj. Mezi cirkulující leukocyty patří neutrofily, eosinofily, basofily, monocyty a lymfocyty. U různých forem zánětů dochází k různým typům infiltrace leukocyty.

Zánětlivý proces může být spuštěn řadou způsobů, včetně infekce, poškození tkáně a autoimunitních reakcí. Součástí zánětlivého procesu je pohyb neutrofilů z krevního řečiště do tkáně v místě jejího poškození. Neutrofily obsahují velké počty různých intracelulárních granulí a při aktivaci na místě zánětu se obsahy těchto granulí sekrenují do tkáně. Různé granule obsahují celou řadu enzymů a jiných proteinů, z nichž mnohé mají antibakteriální vlastnosti.

Jeden z enzymů, který se nalézá v azurofilních granulích, je neutrofilní elastáza. Neutrofilní elastáza má v těle široké spektrum působení. Například v plicích zvyšuje tento enzym produkci hlenu a mění buněčné složení epitelia. Enzym také způsobuje v mnoha tkáních změny vaskulární permeability v rámci mikrocirkulace a je silným destrukčním činidlem působícím proti řadě složek pojivové tkáně.

9« 9 9·«

Ačkoliv v těle jsou přítomny endogenní inhibitory elastázy včetně antitrypsinu a inhibitoru leukocytové proteázy, předpokládá se, že elastázová aktivita se účastní při patogenezi řady stavů onemocnění včetně zánětlivých onemocnění dýchacích cest, kloubů a kůže. Enzym je také odpovědný za některé nebo většinu příznaků syndromu akutní respirační nedostatečnosti (ARDS) a jiných akutních zánětlivých stavů spojených s poraněním a/nebo sepsí.

Autoři vynálezu nyní objevili skupinu nových sloučenin, které inhibují neutrofilní elastázu. Tyto sloučeniny mají proto potenciální terapeutické prospěšné vlastností při léčení a odstraňování příznaků onemocnění, u kterých se předpokládá účast aktivity elastázy.

Podstata vynálezu

V jednom provedení vynálezu' se tedy poskytuje sloučenina vzorce (I)

(I) kde ve vzorci je naznačena relativní stereochemická konfigurace, kde:

R¹ znamená C^alkyl;

R² znamená C₂.₄alkyl nebo C₂.₄alkenyl;

- 3 • 9 a znamená 1 nebo 2;

R³ znamená C-|.₈alkyl nebo (CH₂)_nAr; n znamená 1 nebo 2;

Ar znamená popřípadě substituovaný fenyl;

a její soli a solváty (dále „sloučeniny podle vynálezu“).

Ve vzorci (I) je ukázána relativní stereochemická konfigurace chirálních center. Vynález zahrnuje sloučeniny podle vynálezu v racemické formě stejně jako ve formě, u které převažuje jeden enantiomer nebo je výlučně přítomen jeden enantiomer. Výhodně se poskytují sloučeniny vzorce (I) v enantiomerně čisté formě, zvláště pak jako enantiomer, který má absolutní stereochemickou konfiguraci ukázanou ve vzorci (I).

Předkládaný vynález také zahrnuje fyziologicky přijatelné soli sloučenin vzorce (I). Mezi vhodné fyziologicky přijatelné soli sloučenin vzorce (I) patří soli s anorganickými a Organickými kyselinami jako například hydrochlorid a tartrát.

Příklady skupin, kterými může být substituována fenylová skupina skupiny Ar, jsou například halogen, Ci.₄alkyl, C₁.₄alkoxy, nitro, hydroxy, amin (popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma skupinami Ci.₄alkyl), CF₃, COOH, COOCi.₄alkyl a CONH₂ (popřípadě substituovaná jednou nebo dvěma skupinami Ci_₄alkyl).

Jak se zde používá, „alkyl“ označuje rozvětvený i přímý alkylový řetězec a jestliže jsou přítomny tři nebo více atomů uhlíku, může také znamenat cykloalkyl.

Mezi vhodné alkylové skupiny R¹ patří methyl, ethyl a propyl.

Mezi vhodné Cvsalkylové skupiny R³ patří n-butyl, cyklopropyl a t-butyl.

Výhodné je, jestliže skupina R¹ znamená methyl nebo ethyl, zvláště methyl.

·· · ··· • · * «·· ···

··

Výhodné je, jestliže skupina R² znamená izopropyl nebo propyl, zvláště izopropyl.

Výhodné je, jestliže a je 1.

Výhodné je, jestliže skupina R³ znamená Ci-ealkyl nebo CH₂Ar. Mezi výhodné skupiny Ar patří fenyl a fenyl substituovaný jednou nebo více skupinami halogenu.

Schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat aktivitu neutrofilní elastázy může být ukázána například následujícími testy in vitro a in vivo.

Testy na lidskou neutrofilní elastázu in vitro

Reakční směs pro test obsahuje:

mM Tris/HCI (pH 8,6)

150 mM Nad

11,8 nM čištěná lidská neutrofilní elastáza

Vhodné koncentrace testované sloučeniny se získají zředěním 10 mM zásobního roztoku v dimethylsulfoxidu vodou. Výše uvedené hodnoty jsou konečné koncentrace po přidání roztoku substrátu (viz dále).

« Výše uvedená směs se inkubuje 15 minut při 30 °C a v tomto čase se 10 min měří zbývající elastázová aktivita na odečítacím zařízení na destičky BioTek 340i po přidání 0,6 mM MeO-sukcinylalanyl-alanyl-prolyl-valyl-p-nitroanilidu. Rychlost zvyšování absorbance při 405 nm je úměrná aktivitě elastázy. Aktivita enzymu se vynese proti koncentraci inhibitoru a pomocí software pro prokládání křivek se určí hodnota IC50.

·· φφ • · φ φ · • · · • · φ · • » φ φφφφ ΦΦΦ· ** φφφφ • · • ·ΦΦ

Aktivita inhibitorů lidské neutrofilní elastázy in vivo:

Orální model in vivo s použitím plicních infiltrátů indukovaných 1L-8 pro testování inhibice intracelulární elastázy

Dospělí křečci (100 až 150 g) se náhodně rozdělí do skupin (n = 4) a přes noc se ponechají hladovět. Při anestézii plynem (3% isofluoran) se zvířatům orálně podává 1 ml/100 g vody jako vehikulum nebo stejné množství obsahující rozpuštěné sloučeniny. Buď současně nebo po anestézii se zvířatům intratracheálně podá 1 pg rekombinantního lidského IL-8 ve 100 pl sterilního fyziologického roztoku. Šest hodin po podání IL-8 se zvířata usmrtí intraperitoneálním podáním pentobarbitonu. Plíce se vypláchnou 2 x 2,5 ml sterilního fyziologického roztoku a vyjmou se stehenní kosti.

Intracelulární elastáza se připraví z neutrofilů získaných výplachem a z femorální kostní dřeně. Uvolnění elastázy se dosáhne působením ultrazvuku na neutrofily a centrifugací za získání intracelulárních granulí. Ty se rozbijí zmražením/táním a sonikací. Potom se na vzorcích provedou stanovení elastázy a myeloperoxídázy pro zjištění účinnosti sloučenin a pro normalizaci postupu izolace neutrofilů.

Test inhibice elastázy v úplné lidské krvi

Do vhodně zředěných vzorků (10 pl) testovaných sloučenin se přidají v tripíikátech alikvoty čerstvé heparinizované úplné lidské krve (200 μΙ). Kontrolní vzorky (šest opakování) obsahují namísto sloučeniny vodu. Vzorky se důkladně smíchají pipetou a potom se inkubují 30 minut při 37 °C. Potom se přidá chladný pufr pro lyžování červených krvinek (750 μί 155 mM chloridu amonného, 0,12 mM EDTA, 10 mM hydrogenuhličitan draselný, pH 7,4). Zkumavky se uzavřou, několikrát převrátí a 15 min udržují při 4 °C při převrácení každých 5 minut. Po centrifugací 10 min při 250 g při 4 °C se získané zcentrifugované buňky promyjí. Promývá se fyziologickým roztokem (300 μΙ) s následnou centrifugací při 100 g 10 min při 4 °C. Centrifugát se ještě dvakrát promyje před resuspendováním konečného buněčného centrifugátu v pufru (200 μΙ 100 mM Tris, 300 mM NaCI, % hmotnost/objem HTAB, pH 8,6). Vzorky se skladují při -20 °C. Po čtyřnásobném zmražení/roztátí vzorků se stanovuje aktivita elastázy kolorimetrickým testem ve směsi 50 mM Tris, 150 mM NaCI, 0,6 mM MeO-Succ-Ala-Ala-Ala-Pro-Val-pNA při pH 8,6 měřením rychlosti přibývání absorbance při 405 nm.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají potenciální terapeutické prospěšné účinky při léčbě a odstraňování příznaků onemocnění, při kterých se předpokládá účast elastázy. Mezi tato onemocnění patří zvláště bronchitida včetně chronické bronchitidy. Patří sem také chronické obstruktivní plicní onemocnění (COPD).

Příklady stavů onemocnění, u kterých mohou mít sloučeniny podle vynálezu prospěšné účinky, zahrnují zánětlivá onemocnění respiračního traktu, jako je bronchitida (včetně chronické bronchitidy), bronchiektázie, astma a hyperreaktivní stavy plic, syndrom akutní respirační nedostatečnosti a septický šok, zánětlivé nebo destruktivní stavy plic, jako je emfyzém a cystická fibróza a zánětlivé nebo destruktivní stavy vnější tkáně, jako jsou kožní onemocnění (například lupus a psoriáza) a onemocnění dásní včetně gingivitidy.

Další příklady onemocnění a stavů, u kterých mohou mít sloučeniny podle vynálezu prospěšné účinky, jsou například hojení poranění a léčení popálenin, kardiovaskulární onemocnění jako je infarkt myokardu a mrtvice, onemocnění periferních cév včetně přerušovaného kulhání při tepenné neprůchodnosti dolních končetin, ateroskleróza, reperfuzní poranění, kardiovaskulární změny, ke kterým dochází při kardiopulmonárním bypassu a septikémii.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být také, používány při léčení poruch pojivové tkáně jako je revmatoidní ·» • · * *· • · · • · ···· ···· ** ···» • · • ··* • · · •9 · ·· 999 ··

9 · * • 9 9 t • · · 9 • 9 9 9

99 artritida, osteoartritida a spondylitida a zánětlivých stavů ledvin jako je glomerulonefritida.

Mohou být také použitelné při léčení některých druhů leukémie včetně akutní myelogenní leukémie, akutní myelomonocytové leukémie a chronické monocytové leukémie a při prevenci nebo inhibicí metastáz pevných nádorů, například plic, prsu, prostaty a žaludku a melanomů.

Zvláštním provedením předkládaného vynálezu je použití sloučenin vzorce (i) při léčení chronické bronchitidy. Chronická bronchitida je stav, který vzniká v důsledku expozice povrchu dýchacích cest škodlivým chemikáliím nebo látkám nebo je sekundárním onemocněním po jiné nemoci. Příznaky stavu jsou způsobeny nadbytečnou sekrecí hlenu na povrchu dýchacích cest. Tento nadbytek hlenu nemůže být účinně odstraněn a důsledkem je snížená výměna plynů v plicích, což vede k namáhavému dýchání a hypoxemii, recidivujícím mikrobiálním infekcím a přetrvávajícímu kašli spojenému s vykašláváním hlenovitého materiálu. Jako mechanismus nadměrné sekrece hlenu se navrhuje přechod neutrofilů do dýchacích cest po vystavení epitelia dráždivým materiálům; neutrofily vylučují na povrchu dýchacích cest elastázu a enzym způsobuje jak zvýšení množství hlenu vylučovaného na povrchu dýchacích cest, tak i dramatickou změnu ve složení buněk epitelu dýchacích cest. Inhibice aktivity elastázy podáváním sloučenin podle předkládaného vynálezu je proto jeden z možných přístupů k léčení chronické bronchitidy. Snížená funkce plic při COPD (např. při chronické bronchitidě s obstrukcí dýchacích cest) je také způsobena poškozením plic způsobeným elastázou, které vede k zúžení dýchacích cest a k zánětu. Inhibitor elastázy tedy zlepší funkci plic.

Jak je uvedeno výše, sloučeniny podle vynálezu jsou použitelné v humánním nebo veterinárním lékařství, zvláště jako inhibitory enzymu neutrofilní elastázy.

····

9

-8Další provedení předkládaného vynálezu tedy poskytuje sloučeninu vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelnou sůl nebo solvát pro použití v humánním nebo veterinárním lékařství, zvláště při léčení stavů, u kterých se předpokládá účast aktivity elastázy, jako je chronická bronchitida.

Bude zřejmé, že používané odkazy na léčení se budou týkat i prevence stejně jako léčení již vzniklých stavů.

Podle dalšího provedení vynálezu se poskytuje použití sloučeniny vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelné soli nebo solvátu pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení stavů, u kterých se předpokládá účast aktivity elastázy, zvláště u chronické bronchitidy.,

Jako další alternativní provedení se poskytuje způsob léčení člověka nebo zvířete trpícího stavem způsobeným nebo podmíněným aktivitou elastázy, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelné soli nebo solvátu člověku nebo zvířeti v případě potřeby.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být pro podávání formulovány jakýmkoli vhodným způsobem a vynález tedy zahrnuje ve svém rámci také farmaceutické prostředky pro použití v lékařství, které obsahují sloučeninu vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelnou sůl nebo solvát ve směsi s jedním nebo více fyziologicky přijatelnými ředivy nebo nosiči.

Podle vynálezu se také popisuje způsob výroby takového farmaceutického prostředku, který zahrnuje míšení složek.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být formulovány například pro orální, bukální, parenterální, místní nebo rektální podávání.

Tablety a kapsle pro orální podávání mohou obsahovat běžné pomocné látky jako jsou pojivá, například sirup, akácie, želatina, sorbitol, tragakant, škrobový maz nebo polyvinylpyrrolidon; plniva, například laktózu, mikrokrystalickou celulózu, cukr, kukuřičný škrob, • · • · · · ·· ·· ··· fosforečnan vápenatý nebo sorbitol; kluzné látky, například stearan hořečnatý, kyselinu stearovou, talek, polyethylenglykol nebo oxid křemičitý; rozvolňovadla, například bramborový škrob, sodnou sůl kroskarmelózy nebo sodnou sůl glykolátu škrobu; nebo smáčedla jako je laurylsulfát sodný. Tablety mohou být v oboru běžnými způsoby potahovány. Orální kapalné prostředky mohou být ve formě například vodných nebo olejových suspenzí, roztoků, emulzí, sirupů nebo elixírů nebo mohou být ve formě suchého produktu pro rekonstituci s vodou nebo jiným vhodným vehikulem před použitím. Tyto kapalné prostředky mohou obsahovat běžná aditiva jako jsou suspendující látky, například sorbitolový sirup, methylcelulózu, glukózo-cukerný sirup, želatinu, hydroxymethylcelulózu, karboxymethylcelulózu, gel stearanu hořečnatého nebo hydrogenované rostlinné tuky; emulgátory, například lecitin, sorbitanmónooleát nebo akácii; nevodná vehikula (mohou zahrnovat jedlé oleje), například mandlový olej, frakcionovaný kokosový olej, estery olejů, propylenglykol nebo ethylakohol; nebo ochranné látky, například methyl- nebo propyl-p-hydroxybenzoáty nebo kyselinu sorbovou. Prostředky mohou také obsahovat podle potřeby pufrační soli, příchuti, barviva a/nebo sladidla (například mannitol).

Pro bukální podávání mohou být prostředky ve formě tablet nebo pastilek formulovaných běžným způsobem.

Prostředky mohou být také formulovány jako čípky, například mohou obsahovat běžné čípkové základy jako je kakaové máslo nebo jiné glyceridy.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být také formulovány pro parenterální podávání jednorázovou injekcí nebo kontinuální infuzí a mohou být ve formě jednotkových dávek, například jako ampule, lahvičky, nízkoobjemové infuze nebo předem naplněné stříkačky, nebo v zásobnících na více dávek s přidanou ochrannou látkou. Prostředky mohou být také ve formě roztoků, suspenzí nebo emulzí ve vodných

nebo nevodných vehikulech a mohou obsahovat pomocné formulační prostředky jako jsou antioxidanty, pufry, antimikrobiální prostředky a/nebo prostředky pro snížení toxicity. Účinná složka může být alternativně ve formě prášku pro rekonstituci vhodným vehikulem, například sterilní apyrogenní vodou před použitím. Suchý pevný farmaceutický prostředek může být připraven plněním sterilního prášku za aseptických podmínek do jednotlivých sterilních nádobek nebo aseptickým plněním sterilního roztoku do každé nádobky a lyofilizací.

Pod místní podání, jak se zde používá, patří podávání insuflací a inhalací. Příklady různých typů prostředku pro místní podávání jsou například masti, krémy, roztoky, prášky, spreje, aerosoly, kapsle nebo zásobníky pro použití v inhalátoru nebo insuflátoru nebo kapky (například oční nebo nosní kapky).

Masti a krémy mohou být například formulovány pomocí vodného nebo olejového základu s přidáním vhodných zahušťujících a/nebo gelujících prostředků a/nebo rozpouštědel. Mezi tyto základy může tedy patřit například voda a/nebo olej jako je kapalný parafinový olej nebo rostlinný olej jako je podzemnicový olej nebo ricinový olej nebo rozpouštědlo jako je polyethylenglykol. Mezi použitelné zahušťující látky patří měkký parafin, stearan hlinitý, cetostearylalkohol, polyethylenglykoly, mikrokrystalický vost a včelí vosk.

Pleťové vody mohou být formulovány pomocí vodného nebo olejového základu a budou také obecně obsahovat jeden nebo více emuígátorů, stabilizačních prostředků, dispergačních prostředků, suspendujících prostředků nebo zahušťujících prostředků.

Prášky pro vnější použití mohou být vytvořeny pomocí jakéhokoliv vhodného práškového základu, například talku, laktózy nebo škrobu. Kapky mohou být formulovány s vodným nebo nevodným základem a mohou také obsahovat jeden nebo více dispergačních • · prostředků, solubilizačních prostředků nebo suspendujících prostředků.

Prostředky ve formě sprejů mohou být formulovány například jako vodné roztoky nebo suspenze nebo aerosoly dodávané z tlakových zásobníků pomocí vhodného hnacího plynu, jako je například dichlordifluormethan, trichlorfluormethan, dichlortetrafluorethan, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropan, 1,1,1,2-tetrafluorethan, oxid uhličitý nebo jiný vhodný plyn.

Kapsle a zásobníky pro použití v inhalátorech nebo insuflátorech například ze želatiny mohou být vyrobeny tak, aby obsahovaly práškovou směs sloučeniny podle vynálezu a vhodný práškový základ, jako je laktóza nebo škrob.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být také používány v kombinaci s jinými léčebnými látkami, například s protizánětlivými látkami jako jsou kortikosteroidy nebo látky NSAID, bronchodilatačními látkami jako jsou beta-2-adrenergní agonisté a xanthiny (například theofylin), mukolytickými látkami, antimuskarinovými látkami, antileukotrieny, inhibitory buněčné adheze (například antagonisty ICAM), antioxidanty (například Nacetylcysteinem), plicními povrchově aktivními látkami a/nebo antimikrobiálními a antivirovými látkami. Prostředky podle vynálezu mohou být také použity v kombinaci s genovou náhražkovou terapií.

Vynález tedy v dalším provedení poskytuje kombinaci zahrnující v

sloučeninu vzorce (I) nebo její fyziologicky přijatelnou sůl nebo solvát spolu s dalším terapeuticky účinným prostředkem.

Výše uvedená kombinace může být vhodně přítomna pro použití ve formě farmaceutického prostředku a farmaceutické prostředky obsahující výše definovanou kombinaci spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem těchto látek budou tedy tvořit další provedení vynálezu.

- 12 Jednotlivé složky těchto kombinací mohou být podávány buď postupně nebo současně v oddělených nebo kombinovaných farmaceutických prostředcích. Vhodné dávky známých terapeutických prostředků může odborník v oboru snadno určit.

Sloučenina podle vynálezu může být vhodně podávána v množství například 0,01 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti, vhodně 0,5 až 25 mg/kg tělesné hmotnosti orálně, jednou nebo vícekrát denně. Přesná dávka bude samozřejmě záviset na věku a stavu pacienta, konkrétní cestě podávání a léčeném onemocnění. Sloučenina se s výhodou podává pro léčení bronchitidy orálně. Pro jiné indikace mohou být potřebné i jiné cesty podávání, například i.v. v případě ARDS.

Sloučeniny podle vynálezu mají trvání účinku vhodné pro použití.

Sloučeniny vzorce (I) a jejich soli a solv-áty mohou být vyrobeny dále popsanými způsoby, které tvoří další provedení předkládaného vynálezu.

Způsob podle předkládaného vynálezu pro výrobu sloučeniny vzorce (I) zahrnuje následující kroky;

(i) sloučenina vzorce (II) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací:

se kondenzuje se sloučeninou vzorce (XXXX) • · (XXXX)

COOH

- 13 • · · • · · • · · ♦ • · ·

R³-N /<CH₂)_a \(CH₂)_a nebo kyselinovým derivátem této sloučeniny, například halogenidem kyseliny jako je chlorid kyseliny nebo jejím chráněným derivátem, nebo (ii) se sloučenina vzorce (III) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací:

nebo její chráněný derivát suifonyluje sloučeninou YO2SR¹, kde Y je reaktivní skupina jako je halogen, například atom chloru; nebo se (iii) sloučenina vzorce (IV) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací • · ·

(IV) nebo její ester s karboxylovou kyselinou cyklizuje; nebo se (iv) odpovídající sloučenina vzorce (V) s naznačenou relativní

(V) kde X_a je atom síry nebo skupina SO oxiduje; nebo se (v) provede reakce odpovídající sloučeniny vzorce (VI) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací

(VI)

- 15 • ··· ···· se sloučeninou vzorce R³-L, kde L je odštěpitelná skupina; nebo se (vi) odstraní ochranná skupina z chráněného derivátu sloučeniny vzorce (I); nebo se (vii) provede čištění jednoho enantiomeru sloučeniny vzorce (I) ze směsi enantiomeru;

a kde se v případě potřeby nebo nutnosti převede získaná volná báze sloučeniny vzorce (I) na formu fyziologicky přijatelné soli nebo naopak nebo se převede jedna forma soli na jinou formu fyziologicky přijatelné soli.

Způsob (i)

Tato kondenzační reakce se vhodně provádí v přítomnosti vazebného činidla jako je EDC, HATU nebo TBTU, s výhodou také v přítomnosti HOBT, a v přítomnosti rozpouštědla jako je dichlormethan, DMF, MeCN nebo tetrahydrofuran při teplotě vhodně nižší než 0 °C a pokojové teplotě. Bude zřejmé, že jako alternativa k použití karboxylové kyseliny je možno použít kyselinové deriváty jako je chlorid kyseliny, aktivovaný ester, anhydrid kyseliny nebo směsný anhydrid. Reakční podmínky je možno vhodně modifikovat, například použitím báze.

Způsob (ii)

Sulfonylační reakce se vhodně provádí v přítomnosti LHMDS nebo NaH v rozpouštědle jako je tetrahydrofuran při teplotě vhodně mezi -78 °C a 0 °C.

• · ·· ··♦· « · • · · ·

- 16 Způsob (iii)

Cyklizační reakce se vhodně provádí v přítomnosti 2-chlor-1methylpyridiniumjodidu nebo EDC v rozpouštědle jako je dichlormethan při teplotě vhodně mezi 0 °C a teplotou varu pod zpětným chladičem. Při této reakci mohou být také použity deriváty kyselin včetně halogenidů kyselin (například chloridů kyselin) (s výhodou v přítomnosti báze), anhydridů, thioesterů.

Způsob (iv)

Tato oxidační reakce může být prováděna běžným způsobem, jako například oxidací perkyselinou.

Způsob (v)

Mezi výhodné odštěpitelné skupiny patří halogen Qako je atom chloru, bromu nebo jodu), mesylát a tosylát. Reakci je možno provádět spojením reakčních činidel popřípadě v přítomnosti báze jako je triethylamin nebo uhličitan draselný v inertním aprotickém rozpouštědle jako je DMF nebo MeCN.

Způsob (vi)

Ochranné skupiny, zvláště ochranné skupiny atomu dusíku, a prostředky pro odstraňování ochranných skupin se popisují v publikaci T. W. Green, „Protective Groups in Organic Synthesis“, 2. vydání (1991), J. Wiley & Sons.

Způsob (vii)

Čištění jediného enantiomeru může být prováděno běžnými způsoby, jako je chirální chromatografie (například chirální HPLC) i“' • ·' a krystalizací použitím homochirální kyseliny (například kyseliny vinné).

Fyziologicky přijatelné soli sloučeniny vzorce (I) s kyselinou jako je hydrochlorid nebo vínan mohou být vyrobeny působením požadované kyseliny na bazickou sloučeninu vzorce (I).

Sloučeniny vzorce (I), ve kterých R³ znamená C2-salkyl nebo -(CH₂)_nAr mohou být také vyrobeny redukční aminací sloučeniny vzorce (VI).

Pro tuto reakci redukční aminace se může nejprve působit na sloučeninu vzorce (VI) odpovídajícím aldehydem s následnou redukcí redukčním činidlem jako je triacetoxyborohydrid typicky v přítomnosti kyseliny octové nebo v inertním rozpouštědle jako je DCM.

Meziprodukty sloučenin vzorce (II) mohou být pohodlně připraveny způsoby popsanými v následujícím schématu 1:

- 18 9 9 9·9 9 9 9 • 9 • 9·· ·

• 9 »9 999 ·♦ 99 • 9 9 9 • · 9 « • · 9 » • · 9 · ··

Schéma 1

(a)

(b)

(c)

(Xli) (e) (g)

(X) (<#

(IX) ^P1_X I Jl^NHCOCFj (XIII) (h)

Oaikyi _n A^NHCQCFj (XIV)

(k)

(XVIII) reH3S.3aS.6aR) (XVII) (I) ♦ ·· «

c« β

Schéma 1- pokračování

Krok (a) .

Popisovaná reakce je běžná reakce navázání ochranné skupiny, která může být, v případě že skupina P₂ znamená BOC, prováděna reakcí s (BOC)₂O v přítomnosti báze (například NaOH) v systému polárních rozpouštědel jako je dioxan/voda.

Krok (b)

Tuto konverzi je možno provádět působením hydrogenuhličitanem amonným v přítomnosti vhodného rozpouštědla jako je pyridin/DMF a v přítomnosti (BOC)₂O nebo vhodného ekvivalentu.

Krok (c)

Jde o běžnou ochrannou reakci, která může být, v případě že Pí znamená CBZ, prováděna reakcí s nBuLi a následnou reakcí s CBZ-CI v přítomnosti inertního rozpouštědla jako je THF při teplotě nižší než

-50 °C.

- 20 Krok (d)

Tato reakce může být prováděna působením RX, kde RX je sloučenina (například Mel, benzyljodid nebo Me₂SO₄) schopná převést síru ve skupině SMe na sulfoniovou skupinu ve vhodném rozpouštědle, například propanonu nebo acetonitrilu. Skupina R bude obecně znamenat alkyl nebo aralkyl a skupina X bude znamenat halogenid, zvláště jodid nebo sulfát. Ochrana amidové skupiny je u této reakce vhodná, ale ne nezbytná.

Krok (e)

Tato reakce uzavření kruhu může být prováděna působením pryskyřicí Dowex 2X8 400 mesh OH' ve vhodném rozpouštědle, například MeCN. Alternativně je možno uzavření kruhu provést působením uhličitanu draselného ve vhodném rozpouštědle, například MeCN.

Krok (f)

Odstranění ochranných skupin může být provedeno běžným způsobem, například ochranná skupina BOC může být odstraněna působením HCI, například v dioxanu.

Krok (g)

Tato reakce může být prováděna působením alkylesteru kyseliny trifluoroctové (například methylesteru) nebo anhydridu kyseliny trifluoroctové v přítomnosti vhodné báze, například N-methylmorfolinu.

··*·

Krok (h)

Tato přeměna bude probíhat působením redukčního činidla, například borohydridu lithného, na sloučeninu vzorce (XIII) s následným působením koncentrované kyseliny sírové v přítomnosti alkylalkoholového rozpouštědla, například ethanolu.

Krok (i)

Reakce sloučenin vzorce (XIV) a (XV) probíhá v přítomnosti Lewisovy kyseliny, například dietherátu trifluoridu boritého, a v inertním rozpouštědle, například dichlorethanu. Skupina „alkyl“ ve skupinách Oalkyl a OSi(alkyl)₃ obecně znamená Ci-6alkyl. Ve sloučenině vzorce (XV) patří mezi vhodné alkylové skupiny v silylalkylové skupině methyl, isopropyl a t-butyl. Výhodnou skupinou Oalkyl je OEt a výhodnou skupinou OSi(alkyl)₃ je OSi(i-Pr)₃ nebo OSi(Me)₂(t-Bu). Je také možné použití variant sloučenin vzorce (XV), ve kterých je skupina Oalkyl nahrazena skupinou OSi(alkyl)₃.

Sloučeniny vzorce (XV) mohou být vyrobeny působením silné báze (například LHMDS) na odpovídající ester karboxylové kyseliny (R²CH₂COOEt nebo jiný alkylester, kde tyto sloučeniny jsou buď známy nebo mohou být vyrobeny známými způsoby), s následným působením trialkylsilylchloridu (jako je trimethylsilylchlorid) nebo trialkylsilyltriflátu.

Typicky se reakce bude provádět při nízké teplotě (méně než 0 °C) v inertním rozpouštědle (jako je THF) v přítomnosti DMPU.

Krok (i)

Tato reakce odstranění ochranných skupin bude probíhat působením báze, jako je uhličitan draselný.

·· ·· ► · · 4 ···< * · · * · ···

- 22 Krok (k)

Tato reakce uzavření kruhu může být prováděna působením alkyl-Grignardova činidla (například t-butylmagnesiumchloridu) v inertním rozpouštědle jako je THF v přítomnosti tetramethylethylendiaminu při teplotě -20 °C až 25 °C.

Krok (I)

Tato reakce je sulfonylace laktamu. Vhodně se provádí reakcí se sloučeninou R¹SC>2-Y, kde Y je reaktivní skupina, s výhodou chlor, v přítomnosti LHMDS, NaH nebo KH, v rozpouštědle jako je THF a při teplotě vhodně od -78 do 0 °C.

Krok (m)

Uvedená reakce je odstranění ochranné skupiny z atomu dusíku, které může být vhodně prováděno běžným způsobem. Jestliže je tedy skupina Pí CBZ, reakce se vhodně provádí hydrogenací na katalyzátoru Pd(OH)₂ v rozpouštědlech jako je ethylacetát nebo THF.

Sloučeniny vzorce (XIII) mohou být také vyrobeny způsobem popsaným ve schématu 2:

(XXI)

Krok (a)

Tato reakce bude probíhat za standardních podmínek pro tvorbu alkylesterů, například působením alkoholu, například methanolu v přítomnosti SOCI₂. R13 je vhodně Cvealkylová skupina, s výhodou methyl.

Krok (b)

Cyklizační reakce bude probíhat za míchání ve vodě s materiálem Dowex 2X8 (s výhodou 400 mesh, 37 pm).

- 24 ·· ·· • · · « • « ·· ··«· • 9 • ··* • ® 9 to to to to $

Krok (c)

Amin chráněný TFA se vytvoří působením methyltrifluoracetátu v polárním protickém rozpouštědle, například MeOH, na sloučeninu vzorce (XXII).

Krok (d)

Mezi vhodné ochranné skupiny Pí patří CBZ. V tomto případě je možno na sloučeninu vzorce (XIII) působit silnou bází jako je LHMDS nebo nBuLi v inertním rozpouštědle jako je THF s následujícím působením CBZ-CI.

Alternativní způsob výroby sloučenin vzorce (XVIII) podle schématu 1 je uveden ve schématu 3:

·· ·φ • · · ♦ • · 9 9 • 9 β 999 9 999 • ' t

··>

···· • » • *·♦ • · • · ·» • · · > · · • · · • - 9 e

9

Schéma 3

OEt (XXIV)

(XXV)

Pí

CO₂R₁₃ (XXVII)

(XXXI)

P,

CO₂R₁₃ o

(XXX) rel-(2S,3R)

- 26 ···· • ·· ·· ·· • · · · • · · · • ·«, · • · · · ·· ··

Schéma 3 - pokračování

:...1

£θ2^13

Ν-Ρ

Η

0) (XXXII)

(XXXIII) ι · (XVIII)

Krok (a)

Sloučeniny vzorce (XXIV) jsou buď známé látky nebo mohou být vyrobeny analogicky jako známé sloučeniny. Pí je N-ochranná skupina, s výhodou CBZ. Krok (a) je další ochranná reakce dusíkového atomu. P₂ ve vzorci (XXV) je jiná N-ochranná skupina, s výhodou BOC. Jestliže P₂ je BOC, reakce se vhodně provádí s použitím BOC₂O. ' .

Reakce se s výhodou provádí v přítomnosti báze jako je triethylamin nebo 4-dimethylaminopyridin v rozpouštědle jako je ethylacetát při teplotě vhodně 0 až 25 °C.

Krok (b)

Tato konverze se vhodně provádí s pyridinium-ptoluensulfonátem, v rozpouštědle jako je aceton/voda při teplotě vhodně mezi 25 až 75 °C.

• ·

- 27 Krok (c)

Toto je reakce kondenzačního přeuspořádání, která se vhodně provádí s použitím esteru kyseliny 2-fenylsulfinyloctové (PhSOCH₂CC>2Ri3) a piperidinu v rozpouštědle jako je acetonitril, vhodně při pokojové teplotě. R13 je vhodně Ci-6alkylová skupina, s výhodou methyl.

Krok (d)

Toto je reakce Mitsunobuovy substituce s použitím ftalimidu, PPh3 a dialkylazodikarboxylátu jako je DEAD v přítomnosti rozpouštědla jako je THF při teplotě vhodně 0 až 40 °C.

Krok (e)

Reakce odstranění ochranné skupiny, s výhodou s použitím silné kyseliny jako je TFA v rozpouštědle jako je DCM při teplotě vhodně 0 až 40 °C. R₁₃ je vhodně C-i-6alkyl, s výhodou ethyl.

Krok (f)

Cyklizační reakce, která se vhodně provádí jako intramolekulární Michaelova reakce. Vhodně se používá NaH v rozpouštědle jako je THF při teplotě 0 až 25 °C.

Krok (g)

Při této reakci probíhají dva kroky: odstranění N-ochranné skupiny a navázání nové ochranné skupiny. Ftalimidová skupina se vhodně odstraňuje hydrátem hydrazinu v rozpouštědle jako je ethanol při teplotě mezi 0 °C a teplotou varu pod zpětným chladičem.

- 28 Ochranná skupina P₃ se zavádí běžným způsobem. Jestliže skupina P₃ je BOC, reakce se vhodně provádí BOC2O.

Krok (h)

Postranní řetězec R² může být zaváděn alkylací s použitím činidla R²-Y, kde Y je reaktivní skupina jako je brom nebo jod. Reakce se tedy provádí použitím báze, s výhodou silné báze jako je LHMDS. V případě LHMDS se vhodně používá pomocné rozpouštědlo DMPU v THF. Vhodné reakční teploty jsou -78 až +50 °C. Za těchto podmínek probíhá reakce obecně s dobrým řízením stereochemického výtěžku.

Krok (i)

Toto je reakce hydrolýzy esteru s následným odstraněním Nochranné skupiny. Hydrolytická reakce se provádí běžným způsobem, například použitím KOH ve vodném ethanolu při teplotě vhodně 25 až 80 °C. Druhá reakce se provádí běžným způsobem, například použitím HCI v dioxanu, při teplotě vhodně 0 až 50 °C, nebo jestliže je ochranná skupina trifluoracetát, působením báze.

Krok (i)

Cyklokondenzační reakce, která se vhodně provádí v přítomnosti 2-chlor-1-methylpyridiniumjodidu a vhodné báze jako je N,Ndiizopropylethylamin v rozpouštědle jako je dichlormethan při teplotě vhodně 0 °C až teplota varu pod zpětným chladičem. Autoři vynálezu také zjistili, že je možné používat sloučeninu vzorce (XXXIII) jako ester karboxylové kyseliny; v tomto případě není hydrolýza esteru popisovaná v kroku (i) nutná. V tomto případě jsou výhodné podmínky pro cyklokondenzaci s použitím alkyl-Grignardova činidla například tBuMgCI v THF při teplotě mezi -20 °C a 25 °C.

- 29 Alternativní způsob výroby sloučenin vzorce (XXXI) je ukázán ve schématu 4:

Schéma 4 kyselina diaminomáselná

(a)

CO₂H (b)

HjN (XXXV)

NHP, >

(c)

(XXXI) rel-(2S,3R)

CH₂OH

CHO

P,HN

(XXXVIII)

NHP, (d)

P,HN

NHP, (XXXVII)

Krok (a)

Sloučeniny vzorce (XXXIV) jsou buď známé látky nebo mohou být vyrobeny analogickým způsobem jako známé sloučeniny. P₃ je ochranná skupina jak je uvedeno výše a je s výhodou BOC. Reakce se • · ·

- 30 vhodně provádí použitím PIFA (fenyljodosylbis(trifluoracetátu) a báze jako je pyridin ve vodném rozpouštědle, jako je vodný THF, dioxan nebo acetonitril. Tato metoda je metoda podle Stansfield, C. F., Organic Preparations and Procedures Int., 1990, 22(5), 593 - 603.

Krok (b)

P-ι je ochranná skupina, například CBZ. Tato ochranná reakce může být prováděna běžným způsobem. Provádí se například vhodně v rozpouštědle mísitelném s vodou jako je THF, DMF nebo dioxan s použitím N-(benzyloxykarbonyioxy)sukcinamidu, benzyloxykarbonylchloridu, nebo jakéhokoli vhodného zdroje benzyloxykarbonylové -Skupiny, přičemž se provádí nastavení pH do alkalické oblasti uhličitanem sodným.

Jako alternativní krok (b¹) může být sloučenina vzorce (XXXVI) připravena běžným způsobem z kyseliny diaminomáselné.

Krok (c)

Reakce se vhodně provádí dvoustupňové. První krok zahrnuje reakci sloučeniny vzorce (XXXVI) při snížené teplotě s Nmethylmorfolinem a potom alkylchloroformátem, jako je ethylchloroformát, v organickém rozpouštědle jako je DCM, dioxan nebo THF. Ve druhém stupni se produkt redukuje, vhodně borohydridem sodným při snížené teplotě, jako například při -20 až 10 °C, v rozpouštědle jako THF.

Krok (d)

Tato oxidační reakce může být prováděna jakýmkoliv vhodným způsobem, například použitím oxalylchloridu v DMSO a DCM v dusíku

při snížené teplotě, jako je -30 až -70 °C a následným působením triethylaminu. Meziprodukt (XXXVIII) ses výhodou neizoluje.

Krok (e)

Tato reakce se vhodně provádí s použitím Wittigova činidla jako je trifenylfosforan Ri₃O2CCH=PPh₃, nebo může být také prováděna použitím fosfonátu při Wadsworth-Emmonsově reakci.

Krok (f)

Reakce Michaelovy adice se vhodně provádí použitím LHMDS nebo jiné vhodné silné báze ve vhodném organickém rozpouštědle jako je THF, ether nebo toluen, a s výhodou v přítomnosti komplexačního činidla jako TMEDA.

Meziprodukt sloučeniny vzorce (III) může být vyroben reakcí sloučeniny vzorce (Vlil) s odstraněnou ochrannou skupinou podle schématu 1 se sloučeninou vzorce (XXXX)

R³—N _z(CH₂)_a ^<CH₂)_a

COOH (XXXX) nebo jejím kyselinovým derivátem, jako je halogenid kyseliny (například chlorid kyseliny) způsobem popsaným výše v souvislosti s hlavním způsobem (i).

(Počáteční odstranění N-ochranné skupiny může být provedeno jak je popsáno výše ve schématu 1 krok (m).

Meziprodukt sloučeniny vzorce (IV) může být vyroben ze sloučeniny vzorce (VII) (s vhodně chráněnou skupinou primárního

aminu) analogickým způsobem jak bylo popsáno výše pro výrobu sloučeniny (III) ze sloučeniny vzorce (Vlil) spolu s hlavním způsobem (ii) výše.

Sloučeniny vzorce (V), kde X_a znamená S, mohou být vyrobeny reakcí odpovídající sloučeniny vzorce (III) se sloučeninou vzorce R^{1 *}SSR¹ za standardních podmínek pro nukleofilní reakci. Sloučeniny vzorce (V), kde X_a znamená SO, mohou být vyrobeny oxidací odpovídající sloučeniny, ve které X_a znamená S, pomocí perkyseliny.

Sloučeniny vzorce (VI) mohou být vyrobeny způsobem zahrnujícím reakci sloučeniny vzorce (II) se sloučeninou vzorce (XXXXA)

HN (CH₂)_a

COOH (XXXXA)

2>a

I nebo jejím kyselinovým derivátem jako je halogenid kyseliny

I (například chlorid kyseliny) nebo jejím chráněným derivátem podle

I v oboru známých běžných metod.

I Sloučeniny vzorce (XXXXA) se budou obecně používat

I ’ v chráněné formě, například v N-chráněné formě skupinou CBZ.

I . Sloučeniny vzorce (XXXX) a (XXXXA) jsou buď známé nebo

I mohou být vyrobeny známými způsoby.

I Konkrétněji mohou být sloučeniny vzorce (XXXXA), ve kterých

I R³ znamená C₂-salkyl nebo -(CH₂)_nAr, redukční aminací sloučeniny

I vzorce (XXXXA) za běžných podmínek.

Sloučeniny vzorce (XXXX) nebo (XXXXA) mohou být také například připraveny hydrolýzou odpovídající nitrilové sloučenině, která může být vyrobena z odpovídající hydroxylové sloučeniny. Tento

Ií, &

- 33 postup je ilustrován pro sloučeniny, ve kterých a znamená 1, v článku Anderson a Lok (1972), J. Org. Chem. 37 (24) 3953 - 3955 a tam uvedených odkazech.

Bude zřejmé, že schémata 1, 2, 3 a 4 mohou být modifikována pro vytvoření homochirálních produktů použitím homochirálních výchozích látek (například S-methioninu ve schématu 1 nebo kyseliny

S-diaminomáselné ve schématu 4) nebo provedením dalšího kroku * chirálního dělení.

Jestliže se sloučeniny vzorce (XII) připravují v racemické formě podle schématu 1 z racemického methioninu, autoři vynálezu zjistili, že izomery sloučenin vzorce (XII) mohou být rozděleny postupem dynamického dělení. Na racemickou sloučeninu vzorce (XII) je tedy možno působit homochirální kyselinou di-p-toluoylvinnou v přítomnosti

3,5-dichlor-3-hydroxybenzaldehydu jako katalyzátoru v inertním rozpouštědle, například THF. Vznikne homochirální sůl sloučeniny vzorce (XII). Následným působením methylesteru kyseliny trifluoroctové v přítomnosti N-methylmorfolinu může být vyrobena sloučenina vzorce (XIII).

- Oba enantiomery sloučeniny vzorce (XII) mohou být také vyrobeny syntézou založenou na S-methioninu podobným způsobem.

Odborníkům v oboru bude zřejmé, že výše popsané způsoby syntézy sloučenin vzorce (I) mohou být modifikovány s přidáním nebo vynecháním ochranných skupin nebo s použitím alternativních orchranných skupin (například skupin popsaných v T. W. Green, „Protective Groups in Organic Synthesis“, 2. vydání (1991), J. Wiley & Sons) při rutinní optimalizaci experimentálních podmínek.

Nové chirální meziprodukty ve výše popsaných částech týkajících se chirálních sloučenin a jejich dělení tvoří také důležité provedení vynálezu.

Další provedení vynálezu tvoří způsob výroby meziproduktů.

·· ·»

- 34 Sloučeniny podle vynálezu jsou výhodné v tom, že mohou být účinnější, mají vyšší selektivitu, méně vedlejších účinků, mají delší dobu působení, jsou při podávání výhodným způsobem snáze biologicky dostupné, mají přijatelnější farmakodynamické nebo farmakokinetické vlastnosti nebo mají lepší vlastnosti než podobné známé sloučeniny.

Vynález bude ilustrován následujícími neomezujícími příklady.

Příkladv provedení vynálezu
Zkratkv
BOC	t-butyloxykarbonyl
CBZ	benzyloxykarbonyl
(Boc)2O	di-terc-butyldikarbonát
THF	tetrahydrofuran
LHMDS	lithium bis(trimethylsilyl)amid

DMPU	1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2-(1 H)-pyrimidinon
DMAP	4-dimethylaminopyridin
DMF	dimethylformamid
EDC	1-(3-N,N-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid
DEAD	diethylazodikarboxylát
DCM	dichlormethan
TMEDA	tetramethylethylendiamin
HOBT	1-hydroxybenztriazol
HATU	O-(7-azabenztriazol-1-yl)-1,1, 3, 3-tetramethyluronium hexafluorfosfát

- 35 » ···· • · • 444 ·· ·· • 4 4 ₄

TBTU 2-(1 H-benztriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetra fluorborát

DMSO dimethylsulfoxid

Meziprodukty

Meziprodukt 1: Dihydrochlorid methylesteru kyseliny 2,4-diaminomáselné

K dihydrochloridu kyseliny D.L-diaminomáselné (350 g) v methanoiu (1,61) byl při 0 °C přidán thionylchlorid (200 ml) v průběhu 0,5 hod. Po varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hod bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek rozetřen s toluenem (650 ml) za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (385 g).

Hmot. spektroskopie: volné báze MH⁺ (nalezeno) 133 MH⁺ (vypočteno) 133

Meziprodukt 2: 3-aminopyrrolidin-2-on

Meziprodukt 1 (1 g), voda (70 ml) a Dowex 2X8-400 mesh (16,4 ml) byly míchány 1 hod. Pryskyřice byla potom odfiltrována a filtrát koncentrován ve vakuu za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (0,40 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu: (18 : 3 ethylacetát: methanol) Rf 0,07.

Meziprodukt 3: 2,2,2-trifluor-N-(2-oxopyrrolidin-3-vl)-acetamid

Suspense meziproduktu 2 (181 g), methyltrifluoracetátu (218 ml) a methanolu (2,6 I) byla míchána 2 hod. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno ve vakuu za získání v názvu uvedené sloučeniny jako krémové pevné látky (355 g). Hmot. spektroskopie: MNH₄ ⁺ (nalezeno) 214 MNH₄ ⁺ (vypočteno) 214 « ·

- 36 Meziprodukt 4: Benzylester kyseliny 2-oxo-3-(2,2,2-trifluoracetylamino)-pyrrolidin-1-karboxylové

K meziproduktu 3 (3,5 g) v tetrahydrofuranu (100 ml) byl při -70 °C přidán hexamethyldisilazid lithný (20 ml). Po 1/4 hod byl přidán benzylchloroformát (2,8 ml). Směs byla zahřívána na pokojovou teplotu 1 hod a byla přidána 1M kyselina chlorovodíková (25 ml). Po extrakci ethylacetátem (3 x 25 ml) byly spojené extrakty promyty 2% roztokem amoniaku, 2M kyselinou chlorovodíkovou a roztokem soli, \ potom sušeny (MgSO₄). Po odstranění rozpouštědla byla bílá pevná \átka rekrystalizována ze směsi ethylacetát : hexan 5 : 1 za poskytnutí

K v názvu uvedené sloučeniny (4,2 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu (18 :2 ethylacetát : methanol) Rf 0,7.

Meziprodukt 5: Benzylester kyseliny 2-ethoxy-3-(2,2,2-trifluoracetylamino)-pyrrolidin-1-karboxylové

K meziproduktu 4 (34 g) v ethanolu (1070 ml) byl při -5 °C přidán borohydrid sodný (9,86 g). Po kapkách byl potom přidán roztok 4M chlorovodíku v 1,4-dioxanu (20 ml). Periodicky byly potom přidávány další počíly 4M chlorovodíku v 1,4-dioxanu (2 x 5 ml, 1 x 10 ml) a borohydridu sodného (2 g). Po 3 hod byla přidána koncentrovaná kyselina sírová (11 ml) a směs byla zahřívána na pokojovou teplotu 2 hod. Potom byl přidán nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (300 ml) a ethanol a dioxan byly odstraněny ve vakuu. Zbytek byl zředěn vodou (500 ml) a extrahován ethylacetátem (3 x 500 ml). Spojené extrakty byly promyty roztokem soli a sušeny (MgSO₄). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl čištěn bleskovou chromatografii na silikagelu 9385 s eluci etherem, za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny (21 g). Hmot. spektroskopie: MNH₄ ⁺ (nalezeno) 378 MNH4+ (vypočteno) 378.

9

- 37 Meziprodukt 6: Benzylester kyseliny trans-2-(1-ethoxvkarbonyl-2methvlpropvl)-3-(2,2,2-trifluoracetylamino)-pvrrolidin-1-karboxové

Meziprodukt 5 (10 g), ethyltrimethylsilylisopropylketenacetal (11 ml) a dichlormethan (250 ml) byly ochlazeny na 5 °C a v průběhu 1/4 hod byl přidán dietherát trifluoridu boritého (17 ml). Po 1 hod byly přidány další dietherát trifluoridu boritého (3,4 ml) a ketenacetal (11 ml). Po další 1 hod byla přidána 1M kyselina chlorovodíková (200 ml) a organické vrstvy byly odděleny a promyty roztokem soli a sušeny (MgSO₄). Rozpouštědlo byio odstraněno ve vakuu za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny (16,7 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu (2 : 1 ether: cyklohexan) Rf 0,18 a 0,27.

Meziprodukt 7: Benzylester kyseliny trans-3-amino-2-(1-ethoxykarbonvl-2-methvlpropvl)-pyrrolidin-1-karboxylové

Meziprodukt 6 (31 g), uhličitan draselný (71 g), voda (930 ml) a ethanol (930 ml) byly zahřívány při 60 °C 3 hod. Ethanol byl odstraněn ve vakuu a vodný zbytek byl extrahován ethylacetátem (3 x 300 ml). Spojené extrakty byly promyty roztokem soli a sušeny (MgSO₄), koncentrovány ve vakuu za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako hnědého oleje (17,5 g).

Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 349 MH⁺ (vypočteno) 349

Meziprodukt 8: Benzylester kyseliny rel-(3R₁3aR,6aS)-6-isopropyl-5oxohexahahvdropvrrolo[3,2b]pyrrol-1-karboxvlové

Meziprodukt 7 (17,5 g) v tetrahydrofuranu (1,800 ml) byl ochlazen na -5 °C a byl přidán 1M t-butylmagnesiumchlorid v tetrahydrofuranu (204 ml) v průběhu 1/2 hod. Po 2 hod byla přidána 1M kyselina chlorovodíková (250 ml) a roztok soli (300 ml). Směs byla potom extrahována ethylacetátem (250 ml). Po zakoncentrování • 9

- 38 »♦·· ··<· •· · • · • « • · I *· ·♦· ··>

• · * • · · • ♦ * • * · extraktů na poloviční objem ve vakuu byly extrakty promyty roztokem soli a sušeny (MgSO₄). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu, zbytek byl rozetřen s diethyletherem (60 ml) za poskytnutí bílé pevné látky. Ta byla rekrystalizována z ethylacetátu za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny (3,4 g). Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 303 MH⁺ (vypočteno) 303

Meziprodukt 9: Benzylester kyseliny rel-(3R,3aR,6aS)-6-isopropyl-4methansulfonvl-5-oxohexahvdropyrrolo[3,2-b1pvrrol-1-karboxylové

K míchanému roztoku meziproduktu 8 (15,01 g) v bezvodém tetrahydrofuranu (950 ml) při -74 °C v atmosféře dusíku byl po kapkách přidán 1,0M hexamethyldisilylazid lithný v tetrahydrofuranu (69,5 ml). Po míchání při -74 °C 10 min byla směs ponechána ohřát na 0 °C v průběhu 45 min a potom ponechána při této teplotě 20 min. Potom byla ochlazena na -76 °C a po kapkách byl přidáván methansulfonylchíorid (9,61 ml) a směs byla ponechána míchat při této teplotě 1,5 hod. Potom byla ohřátá na -50°C, reakce byla ukončena nasyceným roztokem chloridu amonného (480 ml) a ponechán ohřát na pokojovou teplotu. Směs byla rozdělena mezi vodu (300 ml) a ethylacetát (750 ml), vodná vrstva byla extrahována dalším ethylacetátem (750 ml) a potom byly spojené organické extrakty promyty roztokem soli (450 ml), sušeny (Na₂SO₄) a koncentrovány ve vakuu na krémovou pevnou látku. Čištění bleskovou chromatografii na koloně silikagelu (Merck 9385) s eluci směsí,ethylacetát : cyklohexan (1 : 3, 1 : 2, 1 : 1, potom 3 : 1) poskytlo v názvu uvedenou sloučeninu jako bílou krystalickou pevnou látku (13,65 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu (dichlormethan) Rf 0,22. Hmot. spektroskopie: MNH₄ ⁺ (nalezeno) 398 MNH₄ ⁺ (vypočteno) 398

- 39 .··.:··· * · · ·· ··· •\ 5 » v ··

Meziprodukt 10: rel-(3R,3aR,6aS)-3-isopropyl-1-methansulfonvlhexa- \ hvdropvrrolo[3,2-b1pyrrol-2-on

Κ suspenzi meziproduktu 9 (13,63 g) v ethylacetátu (900 ml) byl přidán 20% hydroxid paladnatý (vlhký) na uhlí (3,16 g) a získaná černá suspenze byla důkladně míchána v atmosféře vodíku při pokojové teplotě 90 min. Směs byla potom zfiltrována přes Harborlite J2 a koncentrována ve vakuu za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako jemného bílého prášku (8,63 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu (methanol dichlormethan 1 : 9) Rf 0,50. Hmot.

spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 247 MH⁺ (vypočteno) 247

Meziprodukt 11: Benzylester kyseliny rel-(3R,3aR,6aS)-3-(6-isopropyl4-methansulfonyl-5-oxohexahydropvrrolof3,2-b]pyrrol-1-karbonvlazetidin-1 -karboxylové

Kyselina 1-benzyloxykarbonylazetidin-3-ová (0,235 g), meziprodukt 10 (0,246 g), hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropy!)-3ethylkarbodiimidu (0,230 g) a acetonitril (5 ml) byly míchány při pokojové teplotě 6 hod. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a nahrazeno ethylacetátem (25 ml). Roztok byl promyt 1M kyselinou chlorovodíkovou (2 x 25 ml), roztokem 8% hydrogenuhličitanu sodného (25 ml) a roztokem soli (10 ml) a sušen (MgSO₄). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako bezbarvého oleje (0,392 g). Hmot. spektroskopie: MNH₄ ⁺ (nalezeno) 481, MNH₄ ⁺ (vypočteno) 481

Meziprodukt 12: Acetát rel-(3R,3aR,6aS)-4-(azetidin-3-karbonyl)-3isopropvl-1-methansulfonvlhexahvdropvrrolor3,2-b1pyrrol-2-onu

Roztok meziproduktu 11 (0,090 g) v kyselině octové (15 ml) byl hydrogennován na katalyzátoru oxidu platiny (0,227 g) 3 hod. Katalyzátor byl potom odfiltrován a filtrát koncentrován ve vakuu.

• · • · · · ··· ···· • · · · · · · 9 · 9 « • 9 · · · ······ • « 9 9 9 9 9 9 9

9999 9999 9 9 9 99 9 9 9 9

- 40 Zbytek byl azeótropně destilován s toluenem (10 ml) za získání v názvu uvedené sloučeniny jako oleje (0,077 g). Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 330, MH⁺ (vypočteno) 330

Meziprodukt 13: Kyselina 1-benzyloxykarbonylazetidin-3-ová

Ke kyselině azetidin-3-karboxylové (0,50 g), uhličitanu draselnému (0,82 g), dioxanu (5 ml), vodě (10 ml) byl přidáván benzylchloroformát (0,74 ml) při pokojové teplotě 6 hod v atmosféře dusíku. Potom byl přidán piperazin (5 kapek). Po 1/2 hod byl dioxan odstraněn ve vakuu a zbytek byl zředěn 2M kyselinou chlorovodíkovou (25 ml). Po extrakci ethylacetátem (35 ml) byla organická vrstva promyta roztokem soli (10 ml) a sušena (MgSO₄). Odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo meziprodukt 13 jako bezbarvý olej (1,07 g).

Hmot. spektroskopie: MNH₄* (nalezeno)(253, MNH₄ ⁺ (vypočteno)

253

Meziprodukt 14: Benzylester kyseliny (3S,3aS,6aR)-3-(6-isopropyl-4methansulfonvl-5-oxohexahvdropvrrolo[3,2-blpyrrol-1-karbonvlazetidin-1 -karboxylové

Směs (3S,3aS,6aR)-3-isopropyl-1-methansulfonylhexahydropýrrolo[3,2-b]pyrrol-2-onu (meziprodukt 122 z mezinárodní patentové přihlášky WO 97/36903) (0,90 g), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3ethylkarbodiimidu (0,91 g) a acetonitrilu (12 ml) byla míchána 5 min v atmosféře dusíku, a potom byl přidán meziprodukt 13 (0,90 g) v acetonitrilu (30 ml). Po 18 hod bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek byl smíchán s 2M kyselinou chlorovodíkovou (30 ml) a extrahován ethylacetátem (90 ml). Organická vrstva byla promyta 2M kyselinou chlorovodíkovou (30 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 30 ml), roztokem soli (30 ml) a • · • · · · • · · · ····· ···· ···· ·· «·· «· ··

- 41 sušena (MgSO₄) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu (Merck 9385) s eluci 10%, potom 20% acetonitrilem v dichlormethanu za poskytnutí meziproduktu 14 jako bezbarvé pěny (0,80 g).

Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 464, MH⁺ (vypočteno) 464

Meziprodukt 15: Acetát (3S,3aS,6aR)-4-(azetidin-3-karbonyl)-3isopropvl-1-methansulfonvlhexahvdropyrrolof3₁2-b1pvrrol-2-onu

Oxid platičitý (1,0 g) a kyselina octová (50 ml) byly předhydrogenovány 1/2 hod a potom byl přidán meziprodukt 14 (0,30 g) v kyselině octové (50 ml). Po důkladném míchání v atmosféře vodíku 19 hod byla reakční směs zfiltrována přes extrakční diskovou patronu 3M Empore C18 a koncentrována ve vakuu. Získaná guma byla azeotropně destilována s toluenem (3 x 50 ml) a rozetřena s etherem (2 x 20 ml) za poskytnutí meziproduktu 15 jako bílého prášku (0,63 g).

Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 330, MH⁺ (vypočteno) 330

Příklady

Příklad 1: Hydrochlorid rel-(3R,3aR,6aS)-4-1-cyklopropvlmethylazetidin-3-karbonvl)-3-isopropyl-1-methansulfonvlhexahvdropyrrolof3,2-blpyrrol-2-onu

Meziprodukt 12 (0,019 g), kyselina octová (1 kapka), triacetoxyborohydrid sodný (0,021 g), cyklopropankarboxaldehyd (0,075 ml) a dichlormethan (1 ml) byly míchány při pokojové teplotě 3 dny. Směs byla zředěna dichlormethanem (5 ml), míchána s 8% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) a oddělena. Zakoncentrováni organické vrstvy s následným čištěním preparativní chromatografií na tenké vrstvě s eluci směsí dichlormethan : ethanol : amoniak 100 : 8 : 1 poskytlo bezbarvý olej (0,007 g). Ten byl

········ ·· ··· ·· ··

- 42 rozpuštěn v chloroformu (1 ml). Byl přidán 1M chlorovodík v etheru (1 ml) a rozpouštědla byla odstraněna ve vakuu za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (0,009 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu dichlormethan : ethanol : amoniak [100 : 8 : 1], Rf 0,39. Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 384, MH⁺ (vypočteno) 384

Příklad 2: Hydrochlorid rel-(3R,3aR,6aS)-4-(1-benzylazetidin-3karbonvl)-3-isopropyl-1-methansulfonvlhexahvdropvrroloí3,2-blpyrrol2-onu

Příklad 2 byl připraven podobně jako příklad 1 z meziproduktu 12 a benzaldehydu (0,011 ml) za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (0,009 g). Chromatografie na tenké vrstvě silikagelu dichlormethan : ethanol : amoniak [100 : 8 : 1], Rf 0,46. Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 420, MH⁺ (vypočteno) 420

Příklad 3: Hydrochlorid rel-(3R,3aR,6aS)-4-[1-(2,2-dimethylpropyl)azetidin-3-karbonvn-3-isopropvl-1-methansulfonylhexahydropyrrolo[3,2-blpyrrol-2-onu

Příklad 3 byl připraven podobně jako příklad 1 z meziproduktu 12 a pivaldehydu (0,011 ml) za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (0,010 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu dichlormethan : ethanol : amoniak [100 : 8 : 1] Rf 0,44. Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 400, MH⁺ (vypočteno) 400

Příklad 4: Hydrochlorid rel-(3R,3aR,6aS)-4-[1-(2,6-dichlorbenzyl)azetidin-3-karbonvl1-3-isopropvl-1-methansulfonvlhexahvdropvrrolo [3,2-blpyrrol-2-onu

Příklad 4 byl připraven podobně jako příklad 1 z meziproduktu 12 a 2,6-dichlorbenzaldehydu (0,017g) za získání, po rozetření • 9

-43 s etherem (3x1 ml), v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (0,003 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu dichlormethan : ethanol : amoniak [100:8:1], Rf 0,51. Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 488, 490, MH⁺ (vypočteno) 488, 490

Příklad 5: Hydrochlorid rel-(3R,3aR,6aS)-4-(1-butylazetidin-3karbonvl)-3-isopropvl-1-methansulfonvlhexahvdropyrroloí3,2-b]pvrrol2- onu

Příklad 5 byl připraven podobně jako příklad 1 z meziproduktu 12 a butyraldehydu (0,009 ml) za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílé pevné látky (0,006 g), chromatografie na tenké vrstvě silikagelu dichlormethan : ethanol : amoniak [100 : 8 : 1 ], .Rf 0,46. Hmot. spektroskopie: MH⁺ (nalezeno) 386, MH⁺ (vypočteno) 386

Příklad 6: (3S,3aS,6aR)-4-[1-(2,2-dimethvlpropyl)-azetidin-3-karbonvn3- isopropvl-1-methansufonylhexahvdropvrrolo[3,2-b]pvrrol-2-on

K meziproduktu 15 (0,625 g) v dichlormethanu (90 ml) byly přidány kyselina octová (9 kapek - přibližně 100 pl), triacetoxyborohydrid sodný (0,680 g) a pivaldehyd (0,24 ml). Po 18 hod byla směs koncentrována ve vakuu a zbytek byl smísen s ethylacetátem (90 ml). Ten byl extrahován 1M kyselinou chlorovodíkovou (3 x 30 ml) a spojené extrakty upraveny na pH 8 pevným hydrogenuhličitanem sodným. Směs byla extrahována dichlormethanem (3 x 30 ml) a spojené extrakty byly sušeny (MgSCU) a koncentrovány ve vakuu. Zbytek byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu (Merck 9385) s eluci směsí 200 : 8 : 1 dichlormethan : ethanol : amoniak za získání gumy (0,466 g). Ta byla rozpuštěna v dichlormethanu (20 ml), smísena s 1M chlorovodíkem v etheru (5 ml) a koncentrována ve vakuu. Rekrystalizace ze 7% vody v isopropanolu

• · • ·

- 44 (75 ml) poskytla sloučeninu z příkladu 6 jako bílý prášek (0,298 g). Teplota tání 194 - 195 °C.

¹H-NMR (CD3OD, 57 °C, 400 MHz) δ 4,40 (t, 2H), 4,28 (bs, 2H), 3,88 (m, 1H), 3,83-3,71 (m, 3H), 3,59 (sextet, 1H), 3,36 (t, 1H), 3,23 (s, 3H), 3,10 (s, 2H), 3,03-2,96 (m, 1H), 2,95-2,90 (m, 1H), 2,52 (kvintet, 1H), 2,12 (kvintet, 1H), 1,27 (d, 3H), 1,04 (s, 9H), 1,02 (d, 3H).

IR (KBr difuzní reflektance) 3479, 3415, 2966, 2608, 1738, 1661 cm'¹

Hmot. spektroskopie; MH⁺ (nalezeno) 400,226259, MH⁺ (očekáváno) 400,227004 (1,9 ppm).

Chromatografie na tenké vrstvě silikagelu (100 : 8 : 1 dichlormethan : ethanol : amoniak): Rf 0,56

Spalovací analýza: Nalezeno: C, 50:80; H, 7,76; N, 9,37; S, 6,97 %

C19H33N3O4SO.8H2O HCI poskytne složení C, 50,67; H, 7,97; N, 9,33; S, 7,12%

HPLC (Inertsil ODS2-IK5, 40 °C, 215 nm, 1 ml/min, rozpouštědlo A H₂O + 0,1 % H₃PO₄, rozpouštědlo B 95% MeCN/H₂O + 0,1% H3PO4, gradient 0% B 2 min až 100% B ve 40 min, 100% B 10 min) retenční čas 14,247 min, (Chiralcel OD-H, 25 °C, 215 nm, 1 ml/min, izokraticky 60% EtOH v heptanu) retenční čas 7,796 min.

Biologické údaje

1. Sloučeniny z příkladů 1 až 6 byly testovány v testu na elastázu in vitro popsaném výše v popisu. Zjištěné hodnoty IC50 jsou uvedeny v následující tabulce.

• ·

- 45 ····»··· · · • i · • · • · • ·

Příklad

IC50 (nM)

194

229

210

2. Sloučenina z příkladu 3 byla testována výše popsaným testem IL-8 na křečkovi in vivo, přičemž se ukázalo, že mají dobu trvání účinku alespoň 6 hod v dávce 10 mg/kg.

3. Sloučeniny z příkladů 1 až 6 byly testovány v testu inhibice eiastázy v úplné lidské krvi, popsaném výše v popisu. Hodnoty IC50 jsou uvedeny v následující tabulce.

Příklad

IC50 (pM)

5,4 0,81 0,46

1,2

1,7 0,19

Zastupuje:

» ·· ·♦···· ·· « • · « 0 0' 0 · *» ♦

0 0 0

Claims (22)

1. PATENTOVÉ NÁROKY kde ve vzorci je naznačena relativní stereochemická konfigurace, kde:

   R¹ znamená Ci.₆alkyl;

   R² znamená C₂-4alkyl nebo C₂.₄alkenyl; a znamená 1 nebo 2;

   R³ znamená Ci.₈alkyl nebo (CH₂)_nAr;. n znamená 1 nebo 2;

   Ar znamená popřípadě substituovaný fenyl; a její soli a solváty.
2. 2. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 1, ve které R² znamená isopropyl nebo propyf.

   • · • · · · ·' · • ·

   -47
3. 3. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 2, ve které R² znamená isopropyl.
4. 4. Sloučenina vzorce (I) podle některého z předcházejících nároků, kde a znamená 1.
5. 5. Sloučenina vzorce (I) podle některého z předcházejících nároků, kde R¹ znamená methyl nebo ethyl.
6. 6. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 5,' kde R¹ znamená ethyl,
7. 7. Sloučenina vzorce (I) podle některého z předcházejících nároků, kde R³ znamená Ci-galkyl nebo -CH₂Ar.
8. 8. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 7, kde R³ znamená Ci-salkylovou skupinu zvolenou ze skupiny n-butyl, cyklopropyl a t-butyl nebo skupinu -CH₂Ar, kde Ar je zvoleno ze skupiny fenyl a fenyl substituovaný jednou nebo dvěma halogenovými skupinami.
9. 9. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 1, kterou je rel-(3R,3aR,6aS)-4-(1-cyklopropylmethyl-azetidin-3-karbonyl)-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-on;

   rel-(3R,3aR,6aS)-4-(1-benzyl-azetidin-3-karbonyl)-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-on;

   • ·

   -48 rel-(3R,3aR,6aS)-4-[1-(2,6-dichlorbenzyl)-azetidin-3-karbonyl]-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-on;

   rel-(3R,3aR,6aS)-4-(1-butyl-azetidin-3-karbonyl)-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-on;

   nebo sůl nebo solvát některé z těchto sloučenin.
10. 10. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 1, kterou je reÍ-(3R,3aR,6aS)-4-[1-(2₁2-dimethy!-prQpy!)-azetidin-3-karbonyl]-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-on nebo její sůl nebo solvát.
11. 11. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 1, kterou je hydrochlorid rel-(3R,3aR,6aS)-4-[1-(2,2-dimethyl-propyl)-azetidin-3-karbonyl]-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-onu.
12. 12. Vyčištěný jediný enantiomer sloučeniny vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 11 s absolutní stereochemickou konfigurací uvedenou ve vzorci (I).
13. 13. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 1, kterou je (3S,3aS,6aR)-4-[1-(2,2-dimethyl-propyl)-azetidin-3-karbonyl]-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-bjpyrrol-2~on;

    nebo její sůl nebo solvát.

    - 49
14. 14. Sloučenina vzorce (I) podle nároku 1, kterou je hydrochlorid (3S,3aS,6aR)-4-[1-(2,2-dimethyl-propyl)-azetidin-3-karbonyl]-3-izopropyl-1-methansulfonyl-hexahydro-pyrrolo[3,2-b]pyrrol-2-onu.
15. 15. Sloučenina vzorce (I) podle některého z předcházejících nároků pro použití jako léčivo.
16. 16. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje sloučeninu vzorce (I) podle některého z nároků 1 ař 14-ve směsi s jedním nebo více fyziologicky přijatelnými ředivy nebo nosiči.
17. 17. Použití sloučeniny vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 14 při výrobě farmaceutického prostředku pro léčení chronické bronchitidy nebo chronického obstruktivního plicního onemocnění.
18. 18. Způsob léčení chronické bronchitidy nebo chronického obstruktivního plicního onemocnění u člověka nebo zvířete, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 14 člověku nebo zvířeti.
19. 19. Použití sloučeniny vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 14 při výrobě farmaceutického prostředku pro léčení astmatu.

    ··

    9 9 9 • '· ·

    - 50 - ............
20. 20. Způsob léčení astmatu u člověka nebo zvířete, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny vzorce (I) podle některého z nároků 1 až 14 člověku nebo zvířeti.
21. 21. Sloučenina vzorce (!!!) (lil) s relativní stereochemickou konfigurací uvedenou ve vzorci, kde R², R³ a a jsou jak definováno v nároku 1, nebo její chráněný derivát.

    (IV) s relativní stereochemickou konfigurací uvedenou ve vzorci, ♦ ’ ·’ ’ · · · · · · ♦ ········ · · ·»· · * · ·

    - 51 kde R¹, R², R³ a a jsou jak definováno v nároku 1, nebo její ester s karboxylovou kyselinou.

    s relativní stereochemickou konfigurací uvedenou ve vzorci, kde R¹, R², R³ a a jsou jak definováno v nároku 1 a X_a znamená atom síry nebo skupinu SO.

    s relativní stereochemickou konfigurací uvedenou ve vzorci, kde R¹, R², R³ a a jsou jak definováno v nároku 1.

    - 52 25. Způsob výroby sloučeniny vzorce (I) podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje následující kroky:

    (i) sloučenina vzorce (II) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací:

    se kondenzuje se sloučeninou vzorce (XXXX)

    R³N \(CH₂), (XXXX)

    COOH nebo kyselinovým derivátem této sloučeniny, například halogenidem kyseliny jako je chlorid kyseliny nebo jejím chráněným derivátem, nebo (ii) se sloučenina vzorce (III) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací:

    • · · · · ··· · · · • · · · * · · · · .:........... ·· ·· nebo její chráněný derivát sulfonyluje sloučeninou YO₂SR¹, kde Y je reaktivní skupina jako je halogen, například atom chloru; nebo se (iii) sloučenina vzorce (IV) s .naznačenou relativní stereochemickou konfigurací o^{3 R}\ (IV) nebo její ester s karboxylovou kyselinou cyklizuje; nebo se (iv) odpovídající sloučenina vzorce (V) s naznačenou relativní kde X_a je atom síry nebo skupina SO oxiduje; nebo se (v) provede reakce odpovídající sloučeniny vzorce (VI) s naznačenou relativní stereochemickou konfigurací (VI) se sloučeninou vzorce R³-L, kde L je odštěpitelná skupina; nebo se (vi) odstraní ochranná skupina z chráněného derivátu sloučeniny vzorce (I); nebo se (vii) provede čištění jednoho enantiomeru sloučeniny vzorce (I) ze směsi enantiomeru; kde R¹, R², R³ a a jsou jak definováno v nároku 1;

    a kde se v případě potřeby nebo nutnosti převede získaná volná báze sloučeniny vzorce (I) na formu fyziologicky přijatelné soli nebo naopak nebo se převede jedna forma soli na jinou formu fyziologicky přijatelné soli.
22. 26. Způsob výroby sloučeniny vzorce (I) podle nároku 1, kde R znamená C₂-8alkyl nebo -(CH2)_nAr, vyznačující se tím, že se provede redukční aminace sloučeniny vzorce (VI).