CZ200084A3 - Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků - Google Patents

Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků Download PDF

Info

Publication number
CZ200084A3
CZ200084A3 CZ200084A CZ200084A CZ200084A3 CZ 200084 A3 CZ200084 A3 CZ 200084A3 CZ 200084 A CZ200084 A CZ 200084A CZ 200084 A CZ200084 A CZ 200084A CZ 200084 A3 CZ200084 A3 CZ 200084A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
alkyl
cycloalkyl
prostaglandin
group
aryl
Prior art date
Application number
CZ200084A
Other languages
English (en)
Inventor
Johan Stjernschantz
Bahram Resul
Staffan Lake
Original Assignee
Pharmacia & Upjohn Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharmacia & Upjohn Ab filed Critical Pharmacia & Upjohn Ab
Priority to CZ200084A priority Critical patent/CZ200084A3/cs
Publication of CZ200084A3 publication Critical patent/CZ200084A3/cs

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Je popsán nový způsob a kompozice pro léčení glaukomu a okulámí hypertenze. Způsobje založen na použití antagonistů EP) prostanoidních receptorů, které účinně snižují intraokulámí tlak, ale při tommají nulový nebo snížený vedlejší účinek pigmentace duhovky. Prostagladinové deriváty, kteréjsou EP) selektivními agonisty, se aplikují povrchově do oka.

Description

Prostaglandinové deriváty pro vedlejších účinků léčení glaukomu, bez
Vynález se týká způsobu léčení glaukomu a okulární hypertenze s použitím prostaglandinových analogů nebo derivátů, které nemají nebo mají sníženou melanogenní účinnost na oko. Vynález se také týká oftalmických kompozic, které obsahují prostaglandinové sloučeniny, které mají menší nebo nulový vedlejší melanogenní účinek na oko.
Glaukom je oční porucha, charakterizovaná zvýšeným intraokulárním tlakem, narušením hlavy optického nervu a postupnou ztrátou vizuálního pole. Abnormálně vysoký intraokulární tlak je obecně známým, pro oko škodlivým příznakem a existují jasné známky toho, že při glaukomu je vysoký intraokulární tlak nejdůležitějším faktorem, který způsobuje degenerativní změny sítnice a hlavy optického nervu. Exaktní patofysiologický mechanismus zeleného očního zákalu je, nicméně, dosud neobjasněn. Pokud se glaukom neléčí, může vést ke oslepnutí, přičemž průběh nemoci obvykle začíná pomalou a postupuje progresivní ztrátou.
Intraokulární tlak (IOP) se dá definovat vzorcem (1):
(1) IOP = Pe + (Ft - Fu)x R kde Pe je tlak v episklerální žíle, Ft je množství vytvořeného moku přední oční komory, Fu je podíl moku který odchází očním uveosklerálním odtokovým kanálkem a R je odpor trabekulárního odtokového kanálku. Mok v anteriorní a posteriorní oční komoře se tvoří v řasinkách za duhovkou. Pak teče pupilou do anteriorní komory a je normálně v oku v trabekulární síťovině a · · ····· * · · · „ 9 _ · · · · · ·««··· · · · « · · · · · ··· ···· ο· ·»· ·· e·
Schlemmovým kanálkem se dostává do episklerální žíly mimo oční bulvu. Nicméně, část vodné tekutiny může oko opouštět uveosklerální odtokovou cestou. Odtok touto cestou je pouze minimálně ovlivňován intraokulárním tlakem (Bili, 1975).
Intraokulární tlak je u lidí normálně v rozmezí 12-22 mmHg. Při vyšších tlacích, např. nad 22 mmHg, roste riziko, že se oko poškodí. Při jedné z forem glaukomu je tlak normální, nicméně k poškození může dojít při hodnotách intraokulárního tlaku, které se pohybují v rámci normálního psychologického rozmezí. Opačný případ je také známý, t.j. u některých jedinců se může projevit abnormálně vysoký intraokulární tlak mez toho, aby se manifestoval defekty ve vizuálním poli nebo v hlavě optického nervu. Takovéto stavy se obvykle popisují jako okulární hypertenze.
Léčení glaukomu se může provádět pomocí farmaceutických látek, laseru nebo chirurgického zákroku. Při léčení pomocí farmaceuticky účinných látek je cílem snížení tvorby moku přední oční komory (Ft), nebo snížení odporu, který je kladen odtoku moku z přední oční komory (R), což má mít podle vzorce (1), uvedeného shora, za následek snížení intraokulárního tlaku; alternativně také snižuje intraokulární tlak růst průtoku moku přední oční komory uveosklerální cestou, což odpovídá vzorci (1).
Prostaglandiny a nejčastěji PGF2a, jejich estery a analogy, snižují intraokulární tlak zejména zvyšováním uveosklerálního odtoku moku přední oční komory (Crawford a Kaufman, 1987; Nilsson et al., 1989; Toris et al., 1993; Stjernschantz et al., 1995). Použití prostaglandinů a jejich derivátů je popsáno v několika patentech a patentových
9
přihláškách, například v US 4,599,353 (Bito), US 4,952,581 (Bito), WO89/03384 (Resul a Stjemschantz), EP 170258 (Cooper), EP 253094 (Goh) a v EP 308135 (Ueno).
Prostaglandiny jsou mastné kyseliny, obvykle odvozené od prekursorů eikosatrienových, eikosatetraenových a eikosapentanových kyselin pomocí metabolických stupňů, zahrnujících oxidaci. Prostaglandiny, které se vyskytují v přírodě, mají obvykle obecnou strukturu, která je znázorněna na obr. 1.
Obr.1
Prostaglandiny nesou současně cyklopentanový kruh, ke kterému jsou navázány dva uhlíkaté řetězce, přičemž horní řetězec se obvykle nazývá „alfa řetězec“ a dolní řetězec se obvykle nazývá “omega řetězec“. Prostaglandiny se klasifikují do podskupin A, B, C, D, E, F, G, Η, I a J podle jejich struktury substituentů na cyklopentanovém kruhu, jak je znázorněno na Obr. 2.
Obr. 2
Uvedený alfa řetězec znamená alifatický řetězec, který má 7 uhlíkových atomů, je zakončen karboxyskupinou, zatímco uvedený omega řetězec znamená alifatický řetězec s 8 uhlíkovými atomy, zakončený methylem. V závislosti na počtu dvojných vazeb v těchto řetězcích se dávají prostaglandinům dolní indexy 1 až 3. U prostaglandinů s indexem 1, například u PGFia, j® dvojná vazba umístěna mezi uhlíky 13 a 14 u omega řetězce a u přírodně se vyskytujících prostaglandinů má konfiguraci trans. U prostaglandinů s indexem 2, například. PGF2a, je další dvojná • 9* 9 9 9··· ·· · 9 · 9 9 9 9 · · * • « 9 9 9 9 9 9 · 9 »
C 9 9 9*9 ·9 9 9 9 · “ vJ “ 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9999 99 «·9 ·· 9· vazba v konfiguraci cis situována mezi uhlíky 5 a 6 v alfa řetězci a nakonec u prostaglandinů s indexem 3 je třetí dvojná vazba situována mezi uhlíky 17 a 18 v omega řetězci. Tato dvojná vazba má také u přírodních prostaglandinů cis konfiguraci. Všechny přírodně se vyskytující prostaglandiny nesou hydroxylovou skupinu na uhlíku 15, což je důležité pro biologickou účinnost.
Receptorový systém pro prostaglandiny, vyskytující se v přírodě, byl objasněn teprve nedávno. Většina prostaglandinových receptorů již byla farmakologicky charakterizována a jejich molekulová struktura identifikována technikami molekulární biologie (Coieman et aí., 1994). Pro přírodně se vyskytující prostaglandiny existují specifické receptory. Receptory pro PGD, PGE, PGF, PGI2 (prostacyklin) a TxA2 (thromboxan) se zkracují jako DP, EP, FP, IP, a TP. Dá!e bylo ukázáno, že EP receptory se může dále dělit do čtyř skupin receptorů, jmenovitě EPi, EP2, EP3, a EP4 receptory. Specifické tkáně nebo buňky mohou exprimovat pouze několik málo nebo také mnoho receptorů, v závislosti na evolučním vývoji tohoto autakoidního systému u jednotlivých druhů. Tak například bylo prokázáno, že sval svěrače duhovky u kočky exprimuje především FP receptory, které jsou funkčně spojeny a zprostředkují kontrakci zřítelnice, zatímco odpovídající hladký sval oka skotu exprimuje EP1 a TP receptory, přičemž aktivace jednoho z nich způsobí kontrakci svalu. Sloučenina, která se váže na specifický receptor a aktivuje je, se nazývá agonista, zatímco sloučenina, která se pouze váže na receptor, aniž by jej aktivovala, se nazývá antagonista.
S ohledem na praktickou použitelnost mnoha prostaglandinů a jejich derivátů jako vhodných účinných látek pro léčení glaukomu nebo okulární hypertenze, může být limitujícím
- 6 9 · 99 9999 99 9«
9*9 · ···
9 9999 9 99 * · 9 9 «99 99 9
9 9 9 *99*
999 9999 *9 9*9 ·· 99 faktorem jejich schopnost způsobovat vzrůst pigmentace oční duhovky (Stjernschantz a Alm, 1996). Z těchto důvodů má barva duhovky v průběhu trvalého ošetřování u opic a u lidí tendenci tmavnout a měnit se na hnědou. To sice nemá zjevný negativní efekt při aplikaci léčiva, ale je jasná, že z kosmetického hlediska je to nevhodné, zejména u pacientů, kteří se léčí pouze na jedno oko. Bylo by žádoucí identifikovat prostaglandiny, které účinně redukují intraokulární tlak bez zvýšení pigmentace duhovky coby vedlejšího příznaku.
Nyní jsme překvapivě zjistili, že prostaglandinové deriváty a jejich analogy, které jsou are selektivními agonisty pro EPi podskupinu prostanoidních receptorů, splňují požadavky na prostaglandinový analogy, které jsou účinné pro snižování intraokulárního tlaku aniž by způsobovaly růst produkce pigmentu (melanogenézi) v duhovce. Na pozadí tohoto zjištění byla studie, která se snažila najít a identifikovat subtypy prostanoidních receptorů u melanocytů lidské rohovky, při které jsme zjistili, že tyto buňky exprimují ve svých buněčných membránách FP, EP2, a EP3 receptory, ale neexprimují EP a TP receptory. Dále jsme zkoumali snížení intraokulárního tlaku, způsobené několika relativně selektivními EP1 agonisty a tak jsme nalezli tyto prostaglandinový analogy, které účinně a schopně redukují intraokulární jak u koček, tak i u opic.
Z těchto důvodů je zjevné, že použitím selektivních agonistů EP1 receptorů se dá snížit intraokulární tlak u primátů a tudíž také u lidí, bez zvýšení nebo pozorovatelného snížení melanogenéze jako vedlejšího účinku, jelikož pro produkci melaninu v buňkách (melanocytech) chybí specifické receptory nutné pro transmembránovou signalizaci do buněk. V současné době sice nemáme klinický důkaz, že takovéto selektivní EP1
- 7 • · * · · · · · · • fefefe · · · ♦ · * · fe fe «···· fefefe » fe fefe·· fefe»··· • fe fefe fe fefefefe •••••fefe fefe ··· ·· ·· agonisté růst pigmentace duhovky nezpůsobují, neboť doba, nutná v vyvolání tohoto jevu je přes 6-12 měsíců a jedná se tudíž o extrémně dlouhodobé a drahé pokusy, které se navíc musejí provádět na primátech, avšak můžeme dedukovat z relevantních výsledků experimentů prováděných v vitro, že takovéto zvýšení pigmentace by se neprojevilo při absenci specifického signálního receptoru v buněčné membráně melanocvtů.
Podle toho, co bylo shora uvedeno, vysoká selektivita nebo specifičnost na EPi receptor ve srovnání s jinými prostaglandinovými receptory v oku charakterizuje sloučeniny, které se mají použít při způsobu nebo pro kompozice podle vynálezu. Není třeba říkat, že větší stupeň selektivity určité sloučeniny na EPi receptor znamená , že se s touto sloučeninou získají lepší výsledky, a určité výhody se pochopitelně dosáhnou v případech interakce s jinými receptory. Vysoká selektivita tohoto spojení znamená , že vliv na EPi receptor je minimálně 5 krát, v určitých případech 10 krát a někdy dokonce více než 100 krát nebo 1000 krát účinnější, než vliv na jiné prostaglandinové receptory.
Specifické prostaglandinový analogy, které jsme použili jako příklady provedení vynálezu, jsou PGF2p(1), PGF2p isopropyl ester (2), 17-fenyl-18,1 9,20-trinor-PGE2 (3), 1 7-fenyl-18,19,20trinor-PGEZ isopropyl ester (4), 15(R, S)-16,16-trimethylenPGE2 (5), 1 5(R,S)-16,16-trimethylen-PGE2 methyl ester (6) a
3,14-dihydro-17-(3-fiuorfenyl)-18,1 9,20-trinor-PGE2-isopropyl ester (7). Veškeré tyto analogy jsou relativně selektivními agonisty EPi receptoru. Profily testovaných sloučenin pro receptory jsou uvedeny v tabulce I.
- 8 • 4 4 * · · · · · 4 ·
4 4 4 4 · * «··« • 4 4 4 4·· β · 4 · • 4 4 4 · 4 4 4
444 4 < ·*4 44 4«
Tabulka I. Receptorové profily testovaných prostaglandinových analogů (hodnoty EC-50 jsou vyjádřeny v molech/l při testech na funkci receptoru).
Prostaglandin FP EPi ep2 ep3 DP/IP TP
1 5x1 0'e 1Ο'δ 10-5 >10'4 >10’8
>10‘3
3 10‘7 2x1 O'8 >10’4 >10'4 >10’4
>10’4
5 2x1 0'ΰ 6x1 0‘a 2x10'7 3x1 O'8# >10‘4 >1 O'4
7 6x10'z 4χ10'δ 5x1 O’5 10‘6# >10’4 >10‘4
# odhady založené na rozdílu v receptorových testech mezi hodnotami získanými testováním na chámovodu morčat a na kuřecím ileu.
Vynález se podle jednoho aspektu týká použití selektivních agonistů receptoru prostaglandinů EPi bez melanogenního efektu pro léčení glaukomu nebo okulární hypertenze. Tento způsob léčení glaukomu nebo okulární hypertenze zahrnuje krok, při kterém se na povrch oka působí kompozicí, obsahující EPi selektivní prostaglandin, jak je shora uvedeno, v množství schopném snížit intraokulární tlak, s cílem snížit tento tlak a udržet jej na snížené úrovni. Kompozice obvykle obsahu znamená si 0,1-100 pg, zejména 1-30 pg na jednu aplikaci účinné látky. Kompozice se aplikuje povrchově na oko 1 -3 krát denně.
Derivát prostaglandinů se mísí s oftalmologicky snášítelným, o sobě známým vehikulem. Vehikulum, které se může použít pro přípravu kompozic podle vynálezu zahrnuje
- 9 • ·« »· ···· 4 4
4 · · 9 4 4 ♦ · · « · · · · · · «·· ·· ·· · · · · 4994444 49 4 44 ·· vodné roztoky, např. fyziologický roztok, olejové roztoky nebo masti. Vehikulum může dále obsahovat oftalmologicky kompatibilní ochranné prostředky jako je například benzalkonium chlorid, surfaktanty jako je polysorbat 80, liposomy nebo polymery, například methylcelulózu, polyvinylalkohol, polyvinyl-pyrrolidon a hyaluronovou kyselinu; tyto přísady se dají použít pro zvýšení viskosity. Dále je také možné použít rozpustné nebo nerozpustné inertní přísady do léčiv.
Podle dalšího aspektu se vynález týká oftalmoiogických kompozic pro léčení glaukomu nebo okulární hypertenze, které obsahují analog prostaglandinu, který je selektivním agonistou EPi receptorů, jak je definováno shora, v množství snižujícím intraokulární tlak, a oftalmologicky přijatelný nosič. Účinné množství obvykle obsahuje dávku asi 0,1-100 pg derivátu prostaglandinu v asi 10-50 pl kompozice. Kompozice podle vynálezu jsou čistá vylepšení oproti prostaglandinovým kompozicím podle známého stavu techniky, neboť mají oproti jiným prostaglandinovým sloučeninám aktivním pro ΕΡτ receptory vyšší selektivitu a současně je u nich riziko pigmentace odstraněno nebo alespoň podstatně sníženo.
Podle dalšího aspektu se vynález týká použití prostaglandinových analogů pro farmaceutických prostředků pro léčení glaukomu a okulární hypertenze.
Výhodně jsou prostaglandinový analogy odvozeny od PGF nebo PGE typu prostaglandinů. Zejména jsou prostaglandinový analogy vyjádřitelné obecným vzorcem:
• · · *
- 10 • 4 « · · · · * · '· · · « · φ « « * · · · • ♦ · ♦ · · ♦ · · 9 • · · · «4*«·· • · · 9 · · · *
9494 · * · · · · · · *
COOR kde:
vlnité vazby znamenají a nebo β konfiguraci a přerušované vazby představují jednoduchou vazbu, trojnou vazbu nebo dvojnou vazbu v cis nebo trans konfiguraci;
R je vodík, nasycený nebo nenasycený alkyl, zejména C1-10 alkyl, cykloalkyl, výhodně C3-5 cykloalkyl, arylová, arylalkyl, výhodně arylová-C2-5 alkyl, nebo heteroaryl;
R1 znamená nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, která má 2-5 uhlíkových atomů, popřípadě přerušenou by heteroatomy vybranými ze skupiny, do které patří kyslík, síra a dusík, cykloalkyl, výhodně C3-7 cykloalkyl, cykloalkenyl, výhodně C3-7 cykloalkenyl, arylová nebo heteroaryl;
X je C-OH nebo C = O;
R2 je vodík, hydroxy, methyl, ethyl, methoxy nebo OCOR4, kde R4 znamená lineární nebo rozvětvenou nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, výhodně C1-10 alkyl, zejména C1-5 alkyl, nebo a cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl, nebo arylová skupina;
R3 znamená lineární nebo rozvětvenou nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, výhodně mající 3-8 uhlíkové atomy, zejména 3-5 uhlíkové atomy, popřípadě přerušenou jedním nebo více heteroatomy vybranými ze souboru, do kterého patří kyslík, síra a dusík, přičemž každý uhlíkový atom popřípadě může být substituován substituentem vybraným ze souboru, do kterého * · · φ · ···· ·· ·· ·«·· · » · ♦ · · · · · · · · · · · · ·
-11- * ·**·· · »··· patří C1.5 alkyl, hydroxy a karbonylové skupiny, přičemž hydroxyl a karbonyl je výhodně připojený k uhlíku 15 prostaglandinové struktury a uvedená alkylová skupina popřípadě obsahuje cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl, arylovou nebo heteroarylovou skupinu, která může být mono- nebo nezávisle vícenásobně substituovaná C1.3 alkyl, C1.3 alkoxy, hydroxy, nitro, trifluormethyl nebo halogen;nebo a farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester některé z těchto sloučenin.
Aryl je výhodně substituovaný nebo nesubstituovaný fenyl.
Příkladem heteroarylových skupin jsou thiofen, furan, thiazol, isothiazol, oxazol, isoxazol, pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin.
Aryl, heteroaryl a cykloalkyl může být mono- nebo nezávisle di- nebo multisubstituovaný C1-3 alkylem, C1-3 alkoxyskupinou, hydroxyskupinou, nitroskupinou, trifluormethylem nebo halogenem.
Nenasycený alkyl může obsahovat jednu nebo více dvojných a/nebo trojných vazeb.
Halogen je fluor, chlor, brom nebo jod, zejména fluor, chlor nebo brom.
Prostaglandiny mohou být ve formě epimerních směsí nebo ve formě jednotlivých epimerů.
Vynález je neomezujících příkladů:
ilustrován formou následujících
- 12 • ♦ * · φ * · · * · · « φ ΦΦ··· · φ φ · • φ · φ φ ♦·»··· φφ φφ ··«·· φφφ φφφφ φφ Φ·Φ ·· φ·
Příklady provedení
Identifikace prostaglandinových receptorů.
Prostaglandinové receptory byly identifikovány s použitím metody reakčního řetězce reversní transkriptázy polymerázy (RT-PCR). Specifické priméry byly vytvořeny pro receptory FP, EPi, EP2i EP3 a TP. Priméry použité v testech jsou uvedeny v tabulce II. RT-PCR byl vytvořen na mRNA izolované z kultury lidských h m slanocytů duhovky. Pro přípravu mRNA byly použity namnožené buňky. RT-PCR mix byl analyzován na agarozovém gelu a podíly s očekávanou velikostí byly klonovány a sekvencovány. Dedukované sekvence byly analyzovány na podobnost pro každou sekvenci každého prostaglandinového receptoru.
Metody, Melanocyty lidské duhovky byly izolovány a kultivovány podle Hu et al. (1993) a použity ve výchozích stupních. Buňky byly namnoženy na dostatečné množství a zpracovány pro obohacení mRNA.
mRNA byla izolována s použitím Dynalova mRNA přímého systému (Dynal A/S, Norway) podle instrukcí výrobce. Při otohacení bylo použito 100,000-200,000 lidských melanocytových buněk. mRNA se kovalentně naváže na oligo-dT značené perličky Dyna. S použitím reverzní transkriptázy se syntetizuje první linie cDNA přímo na perličkách „Dynabead s oligo-dT jako reverzní transkriptázovým primérem. Druhá linie cDNA se syntetizují s použitím známé 3' sekvenčního priméru z příslušného prostaglandinového receptoru, což má za následek dvojitě vinutou cDNA. Pro každý receptor RT-PCR byl použit stejný soubor perliček „Dynabead“. Receptorově specifické priméry byly použity pro PCR zesílení DNA z cDNA vázané na Dynabead podle instrukcí výrobce. Pro reakce FP a EP3 receptorů byla PCR
- 13 * 99 ' *· 9999 99 ♦ ·
9*9 9 · * · 9 · 9
9 9 9 99* 9 · « *
9999 »99*«· ·· 9* 9 9999
999 999* 99 9*9 99 9* upravena do výsledného objemu 50 pl přidáním 5% DMSO, 200 μΜ dNTP a 20 pmolů každého priméru. Pro jiné receptory byl použit nový start s peletami AmpliWax (Perkin Elmer, USA) ve finálním objemu 75 μΙ s 5% DMSO, 200 μΜ dNTP a 20 pmoly každého priméru.
Tabulka II. Specifické priméry prostaglandinového receptorů.
FP priméry:
Primární priméry; CAC AAC CTG CCA GAC GGA AAA C a CCA GTC TTT GAT GTC TTC TGT G
Sekundární priméry; CAG TAA TCT TCA TGA CAG TGG G a TTG TAG AAA CAC CAG GTC CTG G
EPi priméry:
primární priméry; TGT GGC ATG GCC GTG GAG a ACC AAC ACC AGC ATT GGG C sekundární priméry; CTG CAG GGA GGT AGA GCT C a GGC ACG TGG TGC TTC ATC G
EP2 priméry:
primární priméry; CAA CCA TGC CTA TTT CTA CAG C a TCT CGC TCC AAA CTT GGC TG sekundární priméry; CTA CGT GGA CAA GCG ATT GGC a TGG TTG ACG AAC ACT CGC AC
EP3 priméry:
primární priméry; GGG ATC CAA GAT CTG GTT CAG a GCC TTC CCG ATC ACC ATG CTG sekundární priméry; CGC AAG AAG TCG TTC CTG CTG a CAC CAA GTC CCG GGC CAC TG
TP priméry:
primární priméry; CTG GTG ACC GGT ACC ATC GTG GTG T a GTA GAT CTA CTG CAG CCC GGA GCG C sekundární priméry; TCG CTA CAC CGT GCA ATA CC a GGC TGG AGG GAC AGC GAC
- 14 9 9· 9· 9999 9· 9·
99*9 999 9·99
9 99999 «99 9
999 9 999 *9 9
9 99 9 999 9
999 9999 99 ««9 99 99
PCR mix z těchto reakcí byl analyzován na 1% LMP agarózovém gelu (BioRad Laboratories, USA). DNA fragmenty očekávané velikosti byly TA-klonovány s použitím TA-klonovací soupravy instrukcí výrobce (Invitrogen lne., USA), a sekvencovány s použitím systému „Applied Biosystem Model 373A DNA sequencing systém“ (Applied Biosystems lne., USA) podle protokolu Applied Biosystems pro jejich soupravu „Taq Dye Dioxy Terminátor cykle sequencing kit“. Generovaná primární data byla zpracována na počítači VAX s použitím programů pro analýzu sekvencí od Genetics Computer Group lne., Madison, USA (Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research 12 ( 1 ): 387-395 (1984).
Výsledky: V melanocytech lidské duhovky na základě našeho RTPCR jsme mohli prokázat expresi FP, EP2 a EP3 receptorů. Nicméně, nebyli jsme schopni prokázat přítomnost EP1 a TP receptorů (Tabulka III). Jako pozitivní kontroly jsme zesílili očekávané EP1 a TP fragmenty z knihovny cDNA, z lidských ledvin, se stejnými priméry. Obohatili jsme póly A mRNA z melanocytů lidské rohovky, izolované ve dvou různých časech a prováděn pomocí PCR reakcí několikrát se stejnými výsledky.
Tabulka III. RT-PCR (sekundární PCR priméry) mRNA melanocytů lidské duhovky s použitím specifických primérů prostaglandinových receptorů (viz Tabulka II).
Gen Přesná velikost fragmentu (bp) Pozorováno Očekáváno Analýza sekvence
FP + 489 shodná s FP
EP1 - 397 -
ep2 + 501 shodná s EP2
ep3 + 372 shodná s EP3
TP - 484 -
• · ♦ ···
-15- · ·**·* · ···· ······· ·· ··· ·· ♦»
SYNTÉZY PROSTAGLANDINOVÝCH DERIVÁTU
Struktury výsledných sloučenin, připravených v příkladech jsou znázorněny na schématu 1, umístěném na konci pc pisu.
Příklad 1: PGF2p (sloučenina 1)
Titulní sloučenina byla koupena od Cayman Chemicals Company, Ann Arbor Michigan, USA.
Příklad 2: PGF2p isopropyl ester (sloučenina 2)
DBU (163,5 mg, 1,01 mmol) byl přidán k míchanému roztoku PGF2p (Cayman Chemicals) (60 mg, 0,169 mmol) v acetonu (20 ml) při 0 °C. Směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu, při které byl po kapkách přidán isopropyljodid (222,6 mg, 1,34 mmol). Po 48 h (TLC monitoring) byla směs rozpuštěna v ethylacetátu (40 ml), promyta solankou (30 ml), kyselinou citrónovou 3% (2x40 ml) a hydrogenuhličitanem sodným 5% (2x30 ml) a sušena nad bezvodým síranem sodným. Poté bylo rozpouštědlo odstraněno ve vákuu a zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí ethylacetát:aceton 3:1 jako eluentu. To poskytlo a bezbarvý olej, výtěžek 46 mg (68%).1H NMR (CDCI3) d
1,3 (d, 6H), 1,6-1,7 (dm, 4H), 2,0-2,2 (dm, 6H), 2,3 (t, 2H), 4,04,1 (m, 3H), 5,0 (sept, 1H), 5,5 (m, 2H), 5,6 (m, 2H).13C NMR (CDCI3) d 135,9, 132,2, 130,5, 128,0, 75,3, 74,8, 72,85, 67,6, 56,23, 52,25, 51,59, 42,32, 37,35, 33,44, 31,74, 29,14, 26,66, 24,79, 22,6, 21,8, 14,03.
- 16 • 99 ·· 9999 ·· 99 • 9 * · 9 · 9 · · 9 9
9 99 999 9999
999 9 · 9 9 *9 9
99 9 9999
999 9999 99 999 99 99
Příklad 3: 17-Fenyl-1 8,1 9,20-trinor-PGE2 (sloučenina 3)
Titulní sloučenina byla koupena od Cayman Chemicals Company, Ann Arbor Michigan, USA.
Příklad 4: 17-Fenyl-18,19,20-trinor-PGE2 isopropyl ester (sloučenina 4)
DBU (43,5 mg, 0,29 mmol) v acetonitrilu (1 ml) byl přidán po kapkách k míchanému roztoku sloučeniny 3 (22,1 mg, 0,057 mmol) v acetonitrilu (3 ml) při 0 °C. Směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu, při které byl přidán po kapkách isopropyljodid (78,0 mg, 0,46 mmol) v acetonitrilu (2 ml). Po míchání po dobu 12 h (TLC monitoring), byla reakční směs zředěna vodou (8 ml), směs byla extrahována ethylacetátem (2x50ml), a extrakt byl promyt solankou (10 ml), kyselinou citrónovou 3% (10 ml), a na závěr hydrogenuhličitanem sodným 5% (10 ml). Po sušení bezvodým síranem sodným, bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý olej byl chromatografován na silikagelu s pomocí ethylacetát jako eluentu. To poskytlo 230 mg produktu (69%) titulní sloučeniny jako bezbarvý olej: Rf = 0,516 (ethylacetát.aceton: HOAc 1:1:0,02); 1H NMR (CDCIs) d 0,89 (m, 3H), 1,3 (d, 6H), 2,6-2,8 (m, 2H), 4,1 (m, 2H), 5,0 (m, 1H), 5,3-5,7 (dm, 4H), 7,2 (m, 5H). 13C NMR (CDCI3) d 10,9, 13,9, 21,8, 22,9, 23,8, 24,49, 24,8, 25,17, 25,6, 26,68, 28,93, 30,45, 31,77, 33,90, 34,01, 34,07, 38,8, 46,22,
53,3, 54,48, 66,83, 67,62, 68,18, 71,77, 72,21, 76,35, 77,00, 77,2, 77,64, 125,93, 126,46, 128,39, 128,44, 128,79, 130,63, 130,81, 131,04, 137,79, 213,88.
99
- 17 ···«··· 9 9 *· ·
Příklad 5: 15RS-16,16-trimethylen-PGE2 (sloučenina 5)
K míchanému roztoku methylesteru 15RS-16J6trimethylen-PGE2 (52 mg, 0,13 mmol) v acetonu (0,4 ml) a fosforečnanového pufru o pH 7 (4 ml) byla přidán lipáza VII (40 mg). Směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 24 h (TLC monitoring). Směs byla zředěna ethanolem (3 ml) a extrahována ethylacetátem (2x 10 ml). Organická vrstva byla promyta solankou, sušena (síranem sodným), a zahuštěna ve vákuu, což poskytlo 46 mg produktu v podobě oleje.
Příklad 6: 15RS-16,16-trimethylen-PGE2 methyl ester (sloučenina 6)
Syntéza 15RS-16,16-trimethylenprostaglandin E2 (Skotnicki, S. et al. 1977) je schematicky znázorněna na schématu 2.
Dále uváděná čísla sloučenin znamenají příslušné struktury, znázorněné ve schématu 2.
Ethyl 2,2-trimethylenhexanoát (9)
K míchanému roztoku N-isopropylcyklohexylaminu (56,2 g, 398 mmol) v THF (400 ml) při -78 °C byl rychle přidán nBuLi (159 ml, 398 mmol 2,5 M v hexanu). K výslednému roztoku byl přidán po kapkách ethyl cyklobutankarboxylát (8) (50 g, 390 mmol) a míchán po dobu 30 min, pak zahřát na 0 °C a přikapán k roztoku n-butyljodidu (159 ml, 398 mmol v 2,5 molu hexanu) v DMSO (200 ml). Reakční směs byla míchána po dobu 1 h při pokojové teplotě (TLC monitoring). Sůl byla odstraněna filtrací a filtrát byl zahuštěn pod vákuem. Zbytek byl rozpuštěn v hexanu a
- 18 fe · • fefe · · · · fe· * fefe * fefe fefe • fe · · · · • fefefe · fefe · fe fefefe fefe fe fe · · · · · • fe fefefe fefe fefe pro myt HCI 2%, solankou a vodou, pak sušena nad síranem scdným, a odpařen ve vakuu. Zbylý olej byl destilován (49-56 °C, mmHg) což poskytlo 26,5 g (37%) produktu.
1H NMR (CDCI3) d 0,9 (t, 3H), 1,2 (t, 3H), 1,8-2,0 (dm, 5H), 2,22.5 (m, 3H), 4,2 (m, 2H).
2.2- Trimethylenhexan-1-ol (10)
K míchanému roztoku ethyl 2,2-trimethylenhexanoát (9) (26,5 g, 144mmol) v suchém toluenu ( 100 ml) byl přidán po kapkách DIBAL-H (206 ml, 289 mmol 1,4 mot v toluen) při 0 °C. Výsledný roztok byl míchán při pokojové teplotě po dobu 3 h (TLC monitoring) a pak byl nalit do ledové HCI 5%. Organická vrstva byla oddělena a promyta HCI 5%, solankou, sušena, filtrována a zahuštěna, což poskytlo 30 g produktu v podobě oleje. 1H NMR (CDCI3) d 0,9 (t, 3H), 1,8-2,0 (dm, 5H), 2,5 (m, 1H), 3,0 (m, 1H),
3.6 (m, 2H).
2.2- Trimethylenhexaldehyd (II)
K roztoku 2,2-trimethylenhexan-1-olu (10) (30 g, 210 mmol), v DME (400 ml), byl přidán dicyklohexankarbodiimid (DCC) (130 g, 630 mmol), DMSO (120 ml) a ortofosforečná kyselina (10,3 g). Směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 3 h (TLC monitoring), a filtrována. Filtrát byl rozpuštěn v dichlormethanu (300 ml), a promyt vodou. Organická vrstva byla oddělena. Zbytek byl odstraněn filtrací. Filtrát byl promyt solankou (100 ml), sušen a zahuštěn ve vákuu. Zbytek byl zahuštěn sloupcovou chromatografií na silikagelu s pomocí hexanu jako eluentu, což poskytlo titulní produkt (17,3 g) jako olej. 1H NMR (CDCI3) d 0,9 (t, 3H), 1,2 (t, 3H),1,8-2,0 (dm, 5H), 8,8 (s, 1H).
- 19 ·· ·»·· ·· ·· • · ··· ····
4,4-Τrimethylen-1 -oktin-3-ol (12)
Κ roztoku lithium acetylid-ethylendiaminového komplexu (12,2 g, 132 mmol) v DMSO (10 ml) byl přidán roztok
2,2-trimethylen-hexaldehydu (h) (17 g, 120 mmol) v DMSO (20 ml) při 0 °C pod N2. Směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 24 h (TLC monitoring) a pak nalita do ledem chlazené směsi HCI 2% (50 ml) a éteru (50 ml). Organická vrstva byla oddělena a vodná vrstva byl extrahován éterem (50 ml), spojené organické fáze byly promyty solankou, sušeny, filtrovány a zahuštěny ve vákuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí směsi hexan:ethylacetát 5:1 jako eluentu, což poskytlo 12 (7,6 g, 38%) v podobě oleje.
E-Tributylcín-4,4-trimethylen-1 -okten-3-ol (13)
Směs 4,4-trimethylen-1 -oktin-3-olu (12) (5,0 g, 30 mmol), tributylčín hydridu (14,6 ml, 54,2 mmol) a AIBN (30 mg) byla míchána při 130 °C po dobu 24 h (TLC monitoring). Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí hexanu a směsi hexan:éter 9:1, jako eluentů, což poskytlo titulní sloučeninu (13) (12,54 g, 91,4°k) jako olej.
E-Tri butyl cín-4,4-trimethylen-3-tri methyl si lyl oxy-1 -okten (14)
Ke směsi E-tributylcín-4,4-trimethylen-1 -okten-3-ol (13) (7 g, 15,3 mmol) v DMF (100 ml) byl přidán imidazol (2,1 g, 30,6 mmol) a tri m ethyl si lyl chlorid (2,5 g, 23,0 mmol). Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 1 h (TLC monitoring). Směs byla rozdělena mezi vodu (200 ml) a éter (200 ml). Organická fáze byl sušen a odpařen ve vakuu. Zbytek byl
- 20 ·· 49 9999 4· ·· 4 · 4 4 4 4 4 • 9 · · ·· 9 9 · 9 ···· 4 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 4 4 ··« 4444 ·· 444 ·· *4 chromatografován na silikagelu pomocí hexanu jako eluentu, což poskytlo sloučeninu 14 (5,53 g).
11,1 5-bis trimethylsilyloxy-16,1 6-trimethylen-5,6-didehydro-PGE2 methyl ester (1 7)
Suchá 100-ml tříhrdlá baňka vybavená magnetickým míchadlem byla naplněna kyanidem měďným (928 mg, 10,4 mmol). Baňka byla uzavřena gumovou blánou a zahřívána pod vákuem za účelem odstranění veškerých stop vody, načež byla ochlazena na 0 °C pod N2 a byl přidán suchý THF a následně methyllithium (14 ml, 22,4 mmol 1,6 mol v diethyléteru), přičemž se použilo injekční stříkačky. Směs byla míchána při 0 °C po dobu 15 minut, v průběhu kterých se suspenze vyčeřila a stala se homogenní. Poté byl injekční stříkačkou při 0 °C přidán roztok Etributylcín-4,4-trimethylen-3-trimethylsilyloxy-1 -oktenu (14) (5,9 g, 11,2 mmol) v THF (10 ml) a směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 30 min. K výslednému roztoku a roztoku 4-(tbutyldimethylsilyloxy)cyklopentenonu (15) ( 1,7 g, 8 mmol) v THF (6 ml) byl přidán tri m et hy I s i I y l ch I o r i d (4,35 g, 40 mmol) a následně triethylamin (8,1 g, 80 mmol), při -70 °C a směs byla míchána při -70 °C dalších 15 minut a pak ještě dalších 15 min při 0 °C. Směs byla rozdělena mezi hexan (600 ml) a vodou (300 ml). Organická vrstva byla oddělena, sušena nad síranem sodným, filtrována a zahuštěna ve vakuu, což poskytlo surový silylenol éter jako čirý olej. K míchanému roztoku takto získaného silylenoí éteru v THF (50 ml), pod N2, bylo přidáno při -30 °C methyllithium (7,7 ml, 12,3 mmol 1,6 mol v diethyléteru) a směs byla míchána po dobu 30 min s následným přidáním čerstvě připraveného methyl-1 -triflat-2-hexinoátu (16) (Erhardt, P.W., et al. 1987; Caldwell A. G., et al. 1979) a směs byla míchána při -40 °C po dobu 5 min. Výsledný roztok byl zředěn nasyceným vodným « ·»·» ·* r· ·· Φ · · · 4 · ·♦· • · · * ··· 4 9 9 9 έ- I “ 4 9 9 · · · « * ·
999 ··*· ·* 944 **· 94 roztokem chloridu amonného (30 ml) a extrahován éterem (3x100 ml), sušen nad síranem sodným, filtrován a zahuštěn ve vákuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí směsi hexan:ethylacetát (1:1) jako eluentu, což poskytlo čirý olej a směs 15RS isomeru (2,71 g, 57,3%) Rf= 0,36 (SiO2, éter:hexan 1:1). 1H NMR CDCI3) d 0,2 (dm, 12H), 0,8-0,9 (ms, 18H), 1,8 (m, 2H), 2,3 (m, 4H), 3,7 (s, 3H), 3,9-4,1 (dm, 2H), 5,5S.6 (2H). 1H NMR byla také prováděna na desilylovaném analogu, 16,16trimethylen-S,6-didehydro-PGE2 methyl ester. 1H NMR (CDCI3) d 0,9 (t, 3H), 1,21,3 (m, 3H), 1,9-2,1 (m, 4H), 3,7 (s, 3H), 4,1 (m, 2H), 5,6-5,9 (dm, 2H).
11,15-bis Trimethylsílyloxy-16,16-trimethylen-PGE2 methyl ester
K míchanému roztoku methyl esteru 11,15-bis-trimethylsilyloxy-1 6,16-trimethylen-5,6-didehydro PGE2(17) (500 mg, 0,8 mmol), ve směsi benzen:cyklohexan 1:1 (50 ml), byl přidán Pd-BaSCU (250 mg) a chinolin (250 mg) a směs by!a míchána pří -40 °C pod H2 atmosférou po dobu 5 h (TLC monitoring). Reakční směs byla rozpuštěna v éter a filtrována přes celit, a zahuštěn ve vákuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí směsi hexan:ethylacetát 9:1, což poskytlo 442 mg odpovídajícího produktu.
6,16-Trimethylen-PGE2 methyl ester (6)
K roztoku methylesteru 11,15-bis trimethylsilyloxy-16,16-trimethylen-PGE2 (374 mg, 0,589 mmol) v THF (18 ml) byl přidán HF 40% (3,5 ml) v THF ( 1 ml) při 0 °C. Reakční směs byla míchána po dobu 5 h (TLC monitoring) a pak byla nalita do směsi hydrogenuhličitanu sodného 5% (30 ml) a ethylacetátu (50 ml). Organická vrstva byla oddělena a vodná vrstva byl promyta • *
- 22 • · · · · · • · · · 9 • · · · ····· · · · · · • · • · · · · · · ethylacetátem (2x30 ml). Organické vrstvy byly spojeny, sušeny nad síranem sodným a zahuštěny ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí směsi hexan/ethylacetát 1:1 a následně samotným ethylacetátem, což poskytlo 6 (75 mg, 31 %), v podobě oleje.
1H NMR (CDCIs) d 0,9 (t, 3H), 1,3 (t, 6H), 2,0-2,6 (mm, 9H), (dm, 5H), 3,6 (s, 3H), 4,1 (m, 2H), 5,4 (m, 2H), 5,6-5,8 (dm, 2H); 13C NMR (CDCb) d 14,222, 14,9, 23,7,
24.7, 25,2, 26,2, 26,5, 26,6, 26,8, 29,7, 33,4, 36,5, 44,9, 46,0, 51,6, 54,0, 54,6, 71,9, 76,7, 77,06, 77,1, 77,38, 126,5, 126,9,
127.7, 130,9, 132,5, 132,9, 133,36, 133,46, 174,15, 214,32.
Příklad 7: Syntéza 13,14-dihydro-17-(3-fIuorfenyI)-18,19,20-trinor PGE2 isopropyl esteru (sloučenina 7)
Syntéza titulní sloučeniny je schematicky znázorněna na schématu 3. Dále uvedená čísla sloučenin odpovídají strukturám, znázorněným ve schématu 3.
Dimethyl-(2-oxo-4-(3-fluorfenylbutyl) fosfonát
K míchané suspenzi hydridu sodného (4,17 g, 138 mmol) předběžně promyté n-pentanem, v suchém THF (250 ml) byl při pokojové teplotě přidán po kapkách roztok dimethyl-2-oxopropylfosfonát (23,12 g, 132,3 mmol) v THF ( 110 ml). Reakční směs byla míchána po dobu 2 h, pak ochlazena v ledové lázní a podrobena působení roztoku n-BuLi (10,2 g, 158,7 mmol) v hexanu, což způsobilo změnu zbarvení roztoku na tmavě hnědou. V míchání se pokračovalo po dobu 2 h při 0 °C, s následným přidáváním 3-fluorbenzylbromidu (25 g, 132,3 mmol) v THF (50 ml) po kapkách. Reakční směs byla postupně zahřáta na pokojovou teplotu a po 3 h (TLC monitoring), byla zředěna
- 23 10% HCI (20 ml). Pak byla směs nalita do vody s ledem (200 ml), extrahována CHCI3 (2x150 ml), organické vrstvy byly spojeny, promyty solankou (150 ml), chromatografovány na silikagelu s pomocí CH2CI2 a poté EtOAc jako eluentů, což poskytlo 19,5 g a lehce žlutého oleje. Rf= 0,37 (silikagel, EtOAc:aceton 1:1 (1 S, 5R,6R,7R)-6-Form yl-7-(4-feny lbenzoyloxy)-2-oxa bicykl o (3,3,0)-oktan-3-on (19)
K roztoku alkoholu 18 (19,0 g, 53,9 mmol) v DME (100 ml), ochlazenému na 18 °C, byl přidán dicyklohexylkarbodiimid (DCC) (33,3, 161,8 mmol), DMSO (38,2 ml) a fosforečná kyselina (1,43 ml, 21,28 mmol). Teplota reakční směs byla udržována pod 25 °C po dobu 30 min. Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě další 2 hodiny (TLC monitoring) a sraženina byla odstraněna filtrací a promyta éterem (2x50 ml). Spojená organická vrstva byla promyta vodou (50 ml) a solankou (2x50 ml), vodný roztok byl extrahován éterem (I00 ml), organické vrstvy byly spojeny a sušeny nad síranem sodným, filtrovány a použity přímo v následujícím stupni. TLC Rf = 0,37 (silikagel, EtOAc:toluen 2:1).
(1 S,5R,6R,7R)-6-{3-Oxo-5-(3-fluorfenyl)-1-E-pentenyl}-7-(4-fenyl benzoyloxy)-2-oxabicyklo[3,3,0]oktan-3-on (20)
K míchané suspenzi NaH (1,9 g, 65,1 mmol), předběžně promyté n-pentanem v DME ( 130 ml) pod dusíkovou atmosférou, byl přidán po kapkách dimethyl-2-oxo-4-(3-fluorfenyl) bitylfosfonát (Wadsworth, Jr., W. S., et al. 1961) (19,3 g, 70,5 mmol), v DME (100 ml) a směs byla živě míchána po dobu 1 h při pokojové teplotě. Směs byla pak ochlazena to -10 °C a po kapkách byl přidán roztok surového aldehydu 19. Po 30 minutách
- 24 - * ** * ί · »···· ······· ·· ··» ·· ·· při 0°C a 2 h při pokojové teplotě (TLC monitoring) byla reakční směs zneutralizována kyselinou octovou, rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v EtOAc (200 ml) a promyt vodou (50 ml) a solankou (50 ml). Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným, filtrována a odpařen ve vákuu. Zbytek byl rozmíchán v éteru (100 ml); výsledná bílá sraženina byla filtrována a promyta studeným éterem, což poskytlo bílou krystalickou látku ve výtěžku (17 g, 58,5%)
Rf = 0,56 (silikagel, ethylacetát : toluen 2:1) (1 S,5R,6R,7R)-6-(3S-3-Hydroxy-5-(3-fluorfenyl)-1 -pentenyl )-7-(4fenylbenzoyloxy)-2-oxabicyklo[3,3,0]oktan-3-on (21)
K míchanému roztoku enonu 20 (17,1 g, 34,3 mmol) v THF (20 ml) a hydrátu chloridu čeřitého (CeCI3-7H2O) (3,8 g, 10,3 mmol) ve směsi THF:éter 1:2 (60 ml) ochlazenému na -20 °C pod dusíkovou atmosférou byl po malých podílech přidán borohydrid sodný (0,8 g, 20,57 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 2 h (TLC monitoring). Teplota byla zvýšena na °C, pak byla směs zředěna vodou (20 ml) a přidáním vodného roztoku 10% HCI byla je:í reakce upravena na pH = 4, načež byla extrahována EtOAc (50 ml). Organická vrstva byla oddělena a promyta solankou, sušena nad bezvodým síranem sodným, zahuštěna ve vakuu a chromatografována dvakrát na silikagelu s pomocí směsi toluen:EtOAc 2:1 a následně 1:1 jako eluentu, což poskytlo sloučeninu 4 (5 g) jako bílý krystalický produkt Rf = 0,32 (silikagel, EtOAc/toluen 2:1.
- 25 • 4 ··· (1 S,5R,6R,7R)-6-{3R-3-Hydroxy-5-(3-fluorfenyl)-1 -pentyl}-7-(4fenyl benzoyloxyl-2-oxabicyklo[3,3,0]o|řtan-3-on (22)
K suspenzi 10% Pd/C (0,1 g) v dusitanu sodném (3,6 ml, 1,8 mmol) a ethanolu (15 ml) byl přidán roztok sloučeniny 21 (3 g, 6,0 mmol) v ethanolu (6,0 ml). Směs byla míchána pod vodíkovou atmosférou po dobu 6 h (TLC monitoring) a zředěna pomocí 1M roztoku HCI. Katalyzátor byl odstraněn filtrací přes celitové lože a promyt absolutní methanolem (15 ml). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vákuu. Výsledný olej byl rozpuštěn v EtOAc (100 ml) a promyt solankou o koncentraci 15% (30 ml). Vodná fáze byla promyta EtOAc (40 ml). Spojené organické extrakty byly sušeny nad síranem sodným a filtrovány. Rozpouštědlo bylo odstraněno pod vákuem. Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí EtOAc jako eluentu, což poskytlo sloučeninu 5 (2,94 g), Rf = 0,25 (silikagel, EtOAc).
(1 S,5R,6R,7R)-6-{3R-3-Hydroxy-5-(3-fluorfenyl)-1 -pentyl}-7-Rhydroxy-2-oxabicyklo[3,3,0]oktan-3-on (23)
K roztoku laktonu 22 (2,8 g, 5,65 rrimol) v methanolu (15 ml) byl přidán uhličitan draselný (0,47 g, 3,3 mmol) a směs byla míchána při okolní teplotě po dobu 6 h (TLC monitoring). Směs byla zneutralizována pomocí 10% vodného roztoku HCI a extrahována pomocí EtOAc (2x30 ml). Organická fáze byla sušena nad bezvodým síranem sodným a odpařena do sucha. Surový produkt byl chromatografován na silikagelu s pomocí EtOAc:aceton 1:1 jako eluentu. Titulní sloučenina 23 byla získána jako bílý krystalický produkt; výtěžek 1,6 g, Rf= 0,17 (silikagel, EtOAc); 1H NMR (CDCI3) d 1,2-1,4 (m, 1H), 1,54 (m, 3H), 1,8 (m, 3H), 2,1 (m, 1H), 2,2 (m, 1 H), 2,3 (m, 1H), 2,6 (m, 2H), 2,67 (m,
- 26 »· φ · > · φ φ «♦ * • 9 · » · · Φ · · · ♦ • < Φ Φ · ♦ *···♦ • φ Φ « · · · » · φφ« ···· ·· *·· *» · * ·
1Η), 2,8 (m, 2Η), 3,60 (m, CH2CHOHCH2), 4,0 (m, CHOH) 4,92 (m, CHOC = O), 6,8-7,0 (m, 3H), 7,28 (m, 1H).
(1 S,5R,6R,7R)-6-(3R-3-t-butyldimethylsilyloxy-5-[3-fluorfenyl)-1p entyl]-7-R-terc. butyl dimethyl s i lyloxy-2-oxa bicykl o [3,3,0] oktan-3ori (24) t-Butyldimethylsilyl chlorid (2,3 g, 14,9 mmol) byl přidán v jediném podílu přidán k roztoku diolu 23, triethylaminu (2,1 ml, 14,8 mmol) a 4-dimethylaminopyridinu (0,06 g, 0,1 mmol) v dichlormethanu (20 ml) a aplikovalo se živé míchání při pokojové teplotě po dobu 24 h. Reakční směs byla zahuštěna ve vákuu. Surový produkt byl rozpuštěn v ethylacetátu (50 ml), promyt vodou (20 ml) a 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanem sodným (20 ml). Organická fáze byla sušena nad síranem sodným, filtrována a zahuštěna ve vákuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí dichlormethanu jako eluentu, což poskytlo 3 g produktu jako olej. Rf=0,68 (silikagel, éter) (1 -S.5R,6R,7R)-6-{3R-3-t-butyl d i methyl silyloxy-5-(3-fluorf eny l)-1 pentyl}-7-R-terc. butyl di methylsilyl oxy-2-oxa bicykl o[3,3,0]oktan-3ol (25)
Roztok diisobutylaluminium hydridu (DIBAL) (1,1 g, 7,43 mmol) v suchém toluenu (5,3 m) byl přidán po kapkách k míchanému roztoku laktonu 24 (2,7 g, 4,95 mmol) v suchém THF (30 ml) při -72/-80 °C. Po 1 h (TLC monitoring) byla reakční směs zředěna methanolem (5 ml) a byl zahřát na pokojovou teplotu a byla přidána voda (50 ml) a 10% vodný roztok HCI (50 ml). Získaná směs byla extrahována pomocí EtOAc (2x50 ml). Organická vrstva byla sušena síranem sodným, filtrována, rozpouštědlo bylo odstraněno ve vákuu, a zbytek byl « 9 «9 99 9 9·9· • 99 9999 99 <·9 9* · · chromatografován na silikagelu s pomocí EtOAc a dále směsí EtOAc:aceton 1:1, jako eluentu, což poskytlo žlutý olejovitý produkt (2,7 g), Rf = 0,85 (silikagel, ethylacetát 1:1).
3,14-D i hydro-11,1 5-di-t-butyldi methylsilyloxy-17-(3-fluorfenyl)18,1 9,20-trinorPGF2a
K míchané suspenzi 4-karboxybutyltrifenyl fosfonium bromidu (8,78 g, 19,82 mmol) v THF (50 ml) pod dusíkovou atmosférou při 0-5 °C byl přidán t-butoxid draselný (3,89 g, 34,6 mmol) a směs míchán po dobu 30 min. při pokojové teplotě. K výslednému červenooranžovému roztoku byl při -15/-10 °C přidán laktol 25 (2,7 g, 4,95 mmol) v THF ( 10 ml), a směs byla míchán po dobu 3-4 h (TLC monitoring). Reakční směs byla rozpuštěna v vodou (30 ml) a promyta éter (4x40 ml). Vodná vrstva byla okyselena pomocí 5% vodného roztoku kyseliny citrónové na pH 4 a extrahována pomocí EtOAc (2x50 ml). Organická fáze byla promyta solankou(30 ml), sušena nad síranem sodným a zfiltrována. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vákuu a kaše sloučeniny 26 byla použita přímo bez izolace pro další krok.
13,14-Dihydro-11,15-di-t-butyldimethyl silyloxy 17-(3-fluorfenyl)1 8,1 9,20-trinor PGF2a isopropyl ester (27)
DBU (5,28 g, 34,7 mmol) byl přidán po kapkách k míchanému roztoku surového produktu 26 (3,16 g, 4,96 mmol) v acetonu (20 ml) při 0 °C. Směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu a byl přidán po kapkách isopropyl jodid (5,05 g, 29,7 mmol). Po 4 h (TLC monitoring) byla směs rozpuštěna v EtOAc (100 ml), promyta solankou(30 ml), kyselinou citrónovou 3% (2x25 ml) a hydrogenuhličitanem sodným 5% (2x25 ml) a sušena nad
- 28 « fe · • fefe · • · • · fe··· ·· • · · · · fe • ···· · · · · • fe fefefe··· • fe · · · · · fefe fefefe * * fefe bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vákuu a zbytek byl chromatografován na silikagelu s pomocí směsi éter:petroléter 1:2 jako eluentu. To poskytlo bezbarvý olej, výtěžek 1,7 g, Rf = 0,43 (silikagel, éter:petroléter 1:2) 1H NMR (CDCIs) d 0,1 (m, 9H), 0,9 (m, 16H), 1,2 (m, 9H), 1,6-1,8 (mm, 10H), 2,12 (m, 2H), 2,22-2,33 (m, 2H), 2,6-2,9 (dm, 2H), 3,65 (m, CH2CHOHCH2), 3,94 (m, CH2CHOH), 4,16 (m, CH2CHOH), 5,0 (sept. 1H), 5,38 (m, db), 5,47 (m, db), 6,8-7,0 (dm, Ar, 3H), 7,2 (m, Ar, 1 H).
13,14-Dihydro-11,15-di-t-butyldi methy Isilyloxy 1 7-(3-fluorfenyl)1 8,19,20-trinor PGE2 isopropyl ester (28)
Pyridin dichlorchromát (2,43 g, 11,25 mmol) na oxidu hlinitém (20 g) byl přidán v malých podílech k roztoku sloučeniny 27 (1,7 g, 2,5 mmol) v dichlormethanu (30 ml) a takto získaná snes byla míchána při pokojové teplotě (TLC monitoring), filtrována, promyta směsí éter:ethylacetát 2:1. Pak bylo rozpouštědlo odstraněno ve vákuu. Zbytek byl rozpuštěn v éteru (100 ml) a promyt vodou (30 ml), 5% vodného roztoku NaHCO3 (3x20 ml), organická fáze byl oddělena a sušena nad síranem sodným, a odpařena ve vakuu, což poskytlo 28 (1,3 g), v podobě oleje. Rf= 0,72 (silikagel, ethylacetát).
3,14-Dihydro-1 7-13-fluorfenyl )-18,1 9,20-trinor PGE2 isopropyl ester k roztoku sloučeniny 28 (314 mg) byi přidán fluorovodík v acetonitrilu 15% (12 ml). Směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu 4 h (TLC monitoring). Reakční směs byla rozpuštěna v ethylacetátu (100 ml) a promyta vodou (3x20 ml), pak sušena a odpařena ve vákuu. Zbytek byl chromatografován na
- 29 «9 999 silikagelu s pomocí ethylacetátu jako eluentu, což poskytlo sloučeninu 7 (64 mg) v podobě oleje, Rf=0,43 (silikagel, ethylacetát). 1H NMR (CDCI3) d 1,2 (d, 6H), 1,6-1,8 (m, 6H), 1,8 (m, 2H), 2,12 (m, 2H), 2,2-2,3 (m, 2H), 2,6-2,8 (dm, 2H), 3,6 (m, CH2CHOHCH2), 4,16 (m, CH2CHOH), 5,0 (sept. 1H), 5,38 (m, db),
5,47 (m, db), 6,8-7,0 (dm, Ar, 3H), 7,2 (m, Ar, 1H).
Farmakologie
Snížení intraokulárního tlaku u koček a u opic vlivem testovaných sloučenin.
Sloučeniny byly testovány na schopnost snižovat intraokulární tlak na zvířecích modelech. Intraokulární tlak byl měřen pomocí kalibrovaného pneumotonometru. Jako pokusná zvířata byly použity evropské domácí kočky a opice rodu cynomolgus. Rohovka byla před měřením znecitlivěna pomocí oxibuprokainu. Snížení intraokulárního tlaku po topickém ošetření isopropylesterem PGF2p (2), isopropyl esterem 17-fenyl-1 8,1 9,20trinor-PGE2 (4), methyl esterem 15RS-16,16-trimethylenu (6) a isopropyl esterem 13,1 4-dihydro-1 7-(3-fluorfenyl)-18,19,20-trinorPGE2 (7) jsou uvedena v tabulkách IV a V.
9 ·9
9 * · • 9 9
- 30 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9· «9 99 · 9999 »99 9999 99 <·9 ·· ··
Tabulka IV. Snížení intraokulárního tlaku při aplikaci 1-10 pg testovaných sloučenin s účinkem na EPi prostanoidní receptor, u koček. Kontrolní oko obdrželo pouze vehikulum.
(n= 5-6; průměr+/-směrodatná odchylka).
Prostaglandin/
Oko
Experimentální oko Kontrolní oko
Experimentální oko Kontrolní oko
Experimentální oko Kontrolní oko
Experimentální oko Kontrolní oko 20,6
Normální tlak (mmHg)
24,2 ± 2,3 24,5 ± 2,7
22,0 ± 1,7 21,5 ± 1,7
19.2 ± 1,7
19.3 ± 1,7
20,4 ± -2,0 ±-1,8 18,4
Tlak 3 h po ošetření (mmHg)
15,1 ± 2,8
22,5 ± 3,4
14,2 ± 0,9 ± 1,5
14,2 ± 1,7 18,7 ± 1,9
9,5 ± 0,5 17,0 ± 1,3 * p<0,01 (stanoveno párovým t-testem mezi testovanými oky)
• · * · ····· ·«· ···· «« ·** ♦ * ··
Tabulka V. Snížení intraokulárního tlaku aplikací testovaných sloučenin s účinkem na EP1 receptor, u opic. Dávka isopropyl esteru PGF2p- byla 30 pg, zatímco dávka isopropyl esteru 17fenyl-18,1 9,20-trinor-PGE2 a isopropyl esteru 15RS-16,16trimethylen-PGE2 byla 3 pg. Kontrolní oko obdrželo pouze vehikulum (n = 6; průměr+směrodatná odchylka).
Prostaglandin/ oko
Základní tlak (mmHg)
Tlak 4 h po ošetření (mmHg)
Experimentální oko Kontrolní oko
Experimentální oko Kontrolní oko
Experimentální oko Kontrolní oko
17.8 ± 1,4
16.9 ± 1,2
14,1 ± 1,8 17,5 ± 2,0
14,1 ± 1,1 13,9 ± 1,0
9,9 ± 0,9 1 1,5 ± 0,8
20,9 ± 1,6 21,3 ± 1,5
15,3 ± 2,4 19,0 ± 1,5 * p<0,05 (stanoveno párovým t-testem mezi testovanými oky)
Lze vidět, že jak u koček, tak u opic snižují všechny prostaglandinové analogy, které mají preferencí pro EPi receptor, signifikantně intraokulární tlak.
V souladu s tím vynález zveřejňuje, že sloučeniny selektivně stimulující EPi receptory snižují intraokulární tlak, a že takovéto
- 32 • 4 9999 t 9 9
9 9 9 9 sloučeniny nemohou mít žádný melanogenní efekt, nebo alespoň mají signifikantně snížený vliv na buňky, produkující pigmentu v oku, melanocyty, nemající EPi receptor, u člověka man. Tudíž obvyklý vedlejší účinek, který se projevuje zvýšením pigmentace duhovky, se může eliminovat v průběhu terapie pomocí prostaglandinů, selektivních pro EPi receptory.
Schéma 1
F
- 33 • fefe fefefe ·
Schéma 2
TBDMO 15
Reagenty:
a. N-isopropylcyklohexylamin/THF, n-BuLi, ethylcyklobutankarboxylát/DMSO
b. DIBAL-H/toluen
c. DCC/DME, DMSO, H3PO4,
d. Lithiumacetylidethylendiamin, DMSO
e. tributyIcínhydrid, AIBN
f. Tri m et hy I s i I y l chlorid (TMSCI), imidazol/DMF
g. LÍ2CuCN(CH3)2, TMSCI, triethylamin, 4-t-butyldimethylsilyloxy
2-cyklopentenon, 1 -tri butyl cín-4,4-tri methyl en-3-tr i methyl silyloxy-1 -okten, methyl-2-in-8-oktanoát
h. Pd-BaSO4, chinolin,
i. HF/THF
- 34 • φ φ φφ ·
Φ Φ · φ φ φ φ φ φ φ φ φ · φ · φ φ φφφφφ φφφφ φ φφφφ φφφφφ φ φφ φφ φ φφφφ φφφ φφφφ φφ φφφ ·· ··
Schéma 3
*COOCM{OM^
X •COOCMfOV, k
zz
Reagenty
a. DCC, DMSO, H2SO4, DME, H3PO4
b. NaH, dimethyl-2-oxo-4-(3-fluorfenyl)-butylfosfonát
c. NaBH4, CeCI3.7H2O/THF
d. Pd/C. NaNO2/THF
e. K2CO3/Methanol
f. TBDMS, TEA, 4-dimethylamino pyridin/dichlormethan
g. DIBAI-H/THF
h. 4-karboxybutyl trifenyl fosfonium bromid, t-butoxid draselný THF
i. DBU, isopropyljodid/aceton
j. pyridinium chlorchromát, oxid hlinitý/dichlormethan
k. HF/acetonitril • *
- 35 9 11 119 11
111 1911 11 111 11 11
Odkazy
Bili, A. ( 1975). Blood circulation and fluid dynamics in the eye. Physiol. Rev. 55; 383-417.
Coleman, R.A., Smith, W.L. a Narumiya, S. (1994). Vlil. International Union Pharmacology classification prostanoid receptors: Properties, distribution a structure of the receptors and their subtypes. Pharmacol. Rev. 46; 205-229.
Crawford, K., a Kaufman, P.( 1987). Pilocarpine antagonizes PGF2a-induced ocular hypotension in monkeys. Arch. Ophthalmol. 105; 1112-1116.
Ernhardt, P.W, Owens, A. H. (1987) Facile Formation Quaternary azetidinium compounds During Triflation of Dialkylaminopropanols. Synth. Commun. I7, 469475.
Caldwell, A., G,. Hams, C. J., Stepny, R., Whittaker, N. ( 1979). Hydantoin Prostaglandin analogues, Potent and Selective Inhibitors Platelet Aggregation. J. C. S. Chem. Commun. 561.
Skotnicki, S., Schaub, E., Weiss, J. ( 1977). Prostaglandins and congeners. 14. Synthesis and Bronchodialator Activity dl-16,16trimethyleneprostaglandins. J. Med. Chem. 20, 1042.
Hu, D-N. et al. (1993). Investigative Ophthalmology and Visual Science 34; 22102219.
Nilsson, S.F.E., Samuelsson, M., Bili, A., a Stjernschantz, J. (1989). Increased uveoscleral outflow as possible mechanism
- 36 • 9 9 99 9 ·· · 99 ·· • 9 · · 999 9 9 9 9
9 99999 9999
999 9 999 99 · • 9 99 9 9999
999 ·999 99 999 ·· ·· ocular hypotension caused by prostaglandin F2a-isopropyl ester in cynomolgus monkey. Exg. Eye Res. 48; 707716.
Stjernschantz, J., Selen, G., Sjoquist, B., a Resul, B. (1995). Preclinical pharmacology latanoprost. Advances in the Prostaglandin, Thromboxane a Leukotriene Research 23; 513518.
Stjernschantz, J. a Alm, A. (1996). Latanoprost as a new horizen in the médi ca I management of glaucoma Current Opi ni on in Ophthalmology 7; 2: 11-17.
Toris, C., Camras, C.B., a Yablonski, M.E. (1993). Effects PhXA41, a new prostaglandin F2a analogue, on aqueous humour dynamics in human eyes. Ophthalmology 10; 1297-1304.
Wodswarth, Jr., W. S., Emmon, W. D. (1961). The Utility Phosphonate Carbanions in Olefín Synthesis. J. Am. Chem. Soc. 83, 1733.

Claims (12)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Kompozice pro léčení glaukomu a okulární hypertenze, zahrnující terapeuticky aktivní fyziologicky přijatelné množství prostaglandinového analogu, který je selektivním agonistou pro EPi prostanoidní receptory, nebo farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester některé z těchto sloučenin.
  2. 2. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že prostaglandinový analog je odvozen od prostaglandinového typu PGF nebo PGE.
  3. 3. Kompozice podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že prostaglandinový analog je a sloučenina obecného vzorce:
    COOR ve kterém:
    vlnovité vazby znamenají a nebo β konfiguraci, čárkované vazby znamenají jednoduchou vazbu, trojnou vazbu nebo dvojnou vazbu v cis nebo trans konfiguraci;
    R je vodík, nasycený nebo nenasycený alkyl, výhodně C1-10 alkyl, cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl, arylová, arylalkyl, výhodně arylová-C2-salkyl, nebo heteroaryl;
    - 38 ·· ···· • · · · · · · • ···· · · · · • · «·· · · · • · · · · · · ·· «·· ·· »·
    R! znamená nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu mající 2-5 uhlíkovými atomy, popřípadě přerušenou by a heteroatomy vybrané ze souboru, do kterého patří kyslík, síra a dusík, cykloalkyl, výhodně C3-7 cykloalkyl, cykloalkenyl, výhodně C3.7 cykloalkenyl, aryl nebo heteroaryl;
    X je C-OH nebo C = O;
    R2 je vodík, hydroxy, methyl, ethyl, methoxy nebo OCOR4, kde R4 znamená lineární nebo rozvětvenou nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, výhodně C1-10 alkyl, zejména C1.6 alkyl, nebo cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl, nebo arylová skupina;
    R3 znamená lineární nebo rozvětvenou nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, výhodně mající 3-8 uhlíkovými atomy, zejména 3-5 uhlíkových atomů, popřípadě přerušenou jedním nebo více heteroatomy vybranými ze souboru, do kterého patří kyslík, síra a dusík, přičemž každý uhlíkovými atom popřípadě může být substituován substituentem, vybraným ze souboru, do kterého patří C1-5 alkylové, hydroxylové a karbonylové skupiny, přičemž hydroxyl a karbonyl může být výhodně připojený k uhlíku 15 prostaglandinové struktury a uvedená alkylová skupina popřípadě obsahuje cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkylovou, arylovou nebo heteroarylovou skupinu, která může být mono- nebo nezávisle vícenásobně substituovaná C1-3 alkylem, C1-3 alkoxylem, hydroxy, nitroskupinou, trifluormethylem nebo halogenem;
    nebo farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester některé z těchto sloučenin.
    - 39 • · · ·
  4. 4. Kompozice podle nároku 1, 2 nebo 3, ve kterém prostaglandinový analog je 15(R,S)-16,16-trimethylen-PGE2 nebo jeho alkyl ester.
  5. 5. Kompozice podle nároku 1, 2 nebo 3 vyznačující se tím, že prostaglandinový analog je 13,14-dihydro-17-(3fluorfenyl)-18,19,20-trinor-PGE2 nebo jeho alkyl ester.
  6. 6. Způsob léčení glaukomu nebo okulární hypertenze v oku subjektu, přičemž tento způsob zahrnuje uvedení povrchu oka do kontaktu s účinně intraokulární tlak snižujícím, terapeuticky aktivním a fyziologicky přijatelným prostaglandinovým analogem, který je selektivním agonistou pro EPi prostanoidní receptory, nebo a farmaceuticky přijatelnou solí nebo esterem některého takového analogu.
  7. 7. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že prostaglandinový analog je odvozen od PGF nebo PGE prostaglandinů.
  8. 8. Způsob podle nároku 6 nebo 7, vyznačující se tím, že prostaglandinový analog znamená sloučenina obecného vzorce:
    ve kterém
    - 40 99 »999 • · 9 · 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • 9··· 9 9 9 9 9 ·
    99 99 9 9999
    999 9999 99 999 99 99 vlnovité vazby znamenají a nebo β konfiguraci, čárkované vazby znamenají jednoduchou vazbu, trojnou vazbu nebo dvojnou vazbu v cis nebo trans konfiguraci;
    R je vodík, nasycený nebo nenasycený alkyl, výhodně Ci-io alkyl, cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl, aryl, arylalkyl, výhodně aryl-C2-s alkyl nebo heteroaryl;
    R1 znamená nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, mající 2-5 uhlíkovými atomy, popřípadě přerušenou heteroatomy vybranými ze souboru, do kterého patří kyslík, síra a dusík, cykloalkyl, výhodně C3-7 cykloalkyl, cykloalkenyl, výhodně C3.7 cykloalkenyl, arylová nebo heteroaryl;
    X je C-OH nebo C = O;
    R2 je vodík, hydroxy, methyl, ethyl, methoxy nebo OCOR4, kde R4 znamená lineární nebo rozvětvenou nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, výhodně C1-10 alkyl, zejména C1-6 alkyl, nebo a cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl, nebo arylovou skupinu;
    R3 znamená lineární nebo rozvětvenou nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu, výhodně mající 3-8 uhlíkových atomů, zejména 3-5 uhlíkových atomů, popřípadě přerušenou jedním nebo více heteroatomy, vybranými ze souboru, do kterého patří kyslík, síra a dusík, přičemž každý uhlíkovými atom může být popřípadě substituován substituentem, vybraným ze souboru, do kterého patří C1-5 alkylové, hydroxylové a karbonylové skupiny, přičemž hydroxy a karbonyl může být výhodně připojený k uhlíku 15 prostaglandinové struktury a uvedená alkylová skupina popřípadě obsahuje cykloalkyl, výhodně C3-8 cykloalkyl,
    - 41 • · • · · • · ·· ···* ·· • f ···· • · • · · * φ* ··
    arylová nebo heteroaryl skupina, která může být mono- nebo nezávisle vícenásobně substituovaná Cl-3 alkylem, C1-3 alkoxylem, hydroxylem, nitroskupinou, trifluormethylem nebo halogenem; nebo a farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester některé z těchto
    sloučenin.
  9. 9. Kompozice podle nároku 6, 7 nebo 8, vyznačující se 4 tím, že prostaglandinový analog je 15(R,$)-16,16-trimethylen» PGE2 nebo jeho alkyl ester.
    Λ
  10. 10. Kompozice podle nároku 6, 7 nebo 8 vyznačující se tím, že prostaglandinový analog je 1 3,1 4-dihydro-17-(3fIL'orfenyl)-1 8,1 9,20-trinor-PGE2 nebo jeho alkyl ester.
  11. 11. Způsob podle některého z nároků 6-10, vyznačující se tím, že terapeuticky aktive a fyziologicky přijatelná kompozice, obsahující uvedený prostaglandinový analog se podává povrchově na oko 1-3 krát denně.
  12. 12. Použití prostaglandinového analogu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, který je selektivním agonistou pro EPi prostanoidové receptory, pro přípravu léku k léčení glaukomu a okulární hypertenze.
CZ200084A 1998-07-10 1998-07-10 Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků CZ200084A3 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ200084A CZ200084A3 (cs) 1998-07-10 1998-07-10 Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ200084A CZ200084A3 (cs) 1998-07-10 1998-07-10 Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ200084A3 true CZ200084A3 (cs) 2000-08-16

Family

ID=5469221

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ200084A CZ200084A3 (cs) 1998-07-10 1998-07-10 Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ200084A3 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU739828B2 (en) Prostaglandin derivatives devoid of side-effects for the treatment of glaucoma
JP3187438B2 (ja) エンドセリン拮抗剤
FI92690C (fi) Menetelmä farmakologisesti aktiivisten 13,14-dihydro-17-fenyyli-18,19,20-trinor-PGF2 -alkyyliestereiden valmistamiseksi
NO308993B1 (no) Middel for behandling av lever- og gallesykdommer samt forbindelser som kan anvendes i midlet
US6172109B1 (en) 13-Thia prostaglandins for use in glaucoma therapy
US6235779B1 (en) Use of cis-Δ4 analogs of prostaglandins as ocular hypotensives
AU2139600A (en) Method and composition for treatment of female sexual dysfunction
HK1252353A1 (zh) 治疗精神分裂症的方法
CZ200084A3 (cs) Prostaglandinové deriváty pro léčení glaukomu, bez vedlejších účinků
RU2505530C2 (ru) Замещенные циклопентаны, обладающие простагландиновой активностью
AU2001241143B2 (en) Composition for use in treatment of ocular hypertension and glaucoma
HK1029942B (en) Prostaglandin derivatives devoid of side-effects for the treatment of glaucoma
Matsumura Fluorinated prostanoids: development of tafluprost, a new anti-glaucoma agent
HK1196278A (en) Method for treating schizophrenia
MXPA00000403A (en) Prostaglandin derivatives devoid of side-effects for the treatment of glaucoma

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic