CZ164197A3 - Method of detecting spongy-like encephalopathy - Google Patents
Method of detecting spongy-like encephalopathy Download PDFInfo
- Publication number
- CZ164197A3 CZ164197A3 CZ971641A CZ164197A CZ164197A3 CZ 164197 A3 CZ164197 A3 CZ 164197A3 CZ 971641 A CZ971641 A CZ 971641A CZ 164197 A CZ164197 A CZ 164197A CZ 164197 A3 CZ164197 A3 CZ 164197A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- animal
- agent
- body fluid
- amount
- encephalopathy
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
- G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
- G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
- G01N2800/2828—Prion diseases
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Oblast techniky . .Technical field. .
Předkládaný vynález se týká metod pro detekci spongiformních encephalopatií u zvířat, a zejmena detekce hovězí spongíformní encefalopatie (BSE) u dobytka.The present invention relates to methods for detecting spongiform encephalopathies in animals, and in particular for the detection of bovine spongiform encephalopathy (BSE) in cattle.
i Dosavadní stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION
Spongíformní encefalopatie jsou třídou chorob, která zahrnuje scrapie u ovcí a Čretzfeld-Jakobovu chořóbu^u lidí.Spongiform encephalopathies are a class of diseases that include scrapie in sheep and Cretzfeld-Jakob's disease in humans.
* í ' F,’ '· .* í 'F,' '·.
BSE jé.hlášení podléhajícífatální neurodegenérat i vhí.. /./ choroba' nacházená u.dobytka. BSE je. velmi důležitá-prol · · · britský farmářský průmysl. ' . ...BSE is a report subject to a fatal neurodegenerate as well as a disease found in an animal. BSE is. a very important-prol · · · British farming industry. '. ...
’ . < i . ·* 1 ' , * ' ΐ -Λ”' , . * ’’ V současnosti' jsou případy BSE identifikovány klinickou .manifestací u zvířat. Případy jsou potvrzeny posmrtnou •/V · F analýzou mozkové tkáně, například histopátologiί, pomocí detekce se scrapie asociovanými vlákny nebo protéiriasa K rezistentního proteinu. . , • v . . · i' 1 · . v ’ . · . . . ‘ . ’· ;'. <i. · * 1 ', *' ΐ - Λ '',. Currently, BSE cases are identified by clinical manifestation in animals. The cases are confirmed by post-mortem / V · F analysis of brain tissue, such as histopathology, by detection of scrapie-associated fibers or protéiriasis of the K resistant protein. . , • v. . · I ' 1 ·. v '. ·. . . '. '·;
Tyto metody mají tu nevýhodu, že vyžadují porážku.. , potenciálně infikovaných zvířat, o kterých se může ukázat, ,že jsou bez onemocnění. Alternativně mohou být klinické .. *These methods have the disadvantage that they require slaughter of potentially infected animals which may prove to be disease-free. Alternatively, they may be clinical .. *
-žnámky nepřítomné, nebo nedětegované, a tak se ponechají infikovaná zvířata ve stádě.- the marks absent or undigested, leaving the infected animals in the herd.
Tak existuje potřeba předsmrtného testu na BSE, který může být použit v diagnóze potenciálně infikovaných zvířat.Thus, there is a need for a premature BSE test that can be used in the diagnosis of potentially infected animals.
-Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION
Předkládaný vynález nyní poskytuje metodu pro detekci .....spongiformní encefalopatie u zvířat.,, která řeší. některé, a v preferovaném provedení všechny, tyto problémy.The present invention now provides a method for detecting spongiform encephalopathy in animals that it solves. some, and in a preferred embodiment all, these problems.
Podle jednoho aspektu předkládaného vynálezu je poskytnuta metoda pro detekci přítomnosti spongiformní * encefalopatie u zvířat, .která zahrnuje určení přítomnosti a/nebo množství agens v tělesných tekutinách zvířete, kdeAccording to one aspect of the present invention, there is provided a method for detecting the presence of spongiform encephalopathy in an animal, comprising determining the presence and / or amount of the agent in the body fluids of the animal, wherein
-1 agens má molekulární hmotnost mezi 35 - 39 kDa, pl přibližněThe 1 agent has a molecular weight between 35-39 kDa, p1 approximately
5,3 a nereaguje zkříženě s protilátkami namířenými prot i apol i.poproteinu E a určeni vztahu tohoto. určení k infekčnímu stavu zvířete.5.3 and does not cross-react with antibodies directed against apol ioprotein E and determine the relationship of this. intended to infect the animal.
Preferovaně je výsledek určení srovnán s kontrolní hodnotou a jejich vztah je korelován s infekčním.stavem ' zvířete.Preferably, the result of the determination is compared to a control value and their relationship is correlated with the animal's infection status.
Preferovaně je metoda využita pro detekci, BSE.Preferably, the method is used for detection, BSE.
Tak objev, Že infekce zvířete spongiformní encefalopat ií fc * | může být korelována s přítomností nebo se- zvýšením < ' koncentrace agens v tělesných tekutinách'tohoto zvířete vytváří základ pro metodu.podle předkládaného vynálezu.Thus the discovery that an animal infection with a spongiform encephalopathy is fc * | it may be correlated with the presence or increase in the concentration of the agent in the body fluids of this animal to form the basis of the method of the present invention.
Apolipoprotein E je cholesteroltransportní protein produkovaný v periferním a centrálním nervovém systému. Jeho přítomnost bud v mnohotných nebo v jednoduchých formách může být kategorizována v mozkomíšním moku (CSF) a séru. Jeho molekulová hmotnost (37 kDa) a pl (asi 5,4 až 5,7) je podobná jako u agens popsaného výše. Nicméně, agens, které je určováno v metodách podle předkládaného.vynálezu ' ’ nereaguje zkříženě s protilátkou proti apolipoproteinu E.Apolipoprotein E is a cholesterol transport protein produced in the peripheral and central nervous systems. Its presence in either multiple or simple forms can be categorized in cerebrospinal fluid (CSF) and serum. Its molecular weight (37 kDa) and pI (about 5.4-5.7) are similar to those described above. However, the agent that is determined in the methods of the present invention does not cross-react with the anti-apolipoprotein E antibody.
Mělo by být zdůrazněno, Že neexistuje požadavek pro přesné určení koncentrace agens, protože stav infekce zvířete spongiformní encefalopatií muže být detegován srovnáním s' kontrolou.It should be emphasized that there is no requirement to accurately determine the concentration of the agent, since the infection status of the animal by spongiform encephalopathy can be detected by comparison with the 'control'.
Kontrolní hodnota může být odvozena od koncentrace agens v různých zvířatech (pro které je infekční stav známý) a která jsou analyzována paralelně s testovaným zvířetem.The control value may be derived from the concentration of the agent in the various animals (for which the infectious condition is known) and which are analyzed in parallel with the test animal.
'Alternativně může být kontrolní hodnota od stejného zvířete , , ·, nebo' j í může'být známý standard. ; ·:.. · · *· . t . .;·· · * . š . ’ . V každém.pří pádě musí být kontrolní hodnota určena za použití stejné· metody, která byla použita pro testování k zvířete nebo za použití odlišné analytické metody.Alternatively, the control value may be from the same animal, or may be a known standard. ; ·: ... t. . ·· · *. š. '. In každém.pří fall control value must be determined using the same method ·, which was used for the test animal or using a different analytical method.
• * · · .• * · ·.
•ř * ’ .• *.
'·;* Výsledky'od kontrolního. zvířete mohou být použity pro, , odvození -standardní kontrolní hodnoty.^nebo pro kalibrování . '' výsledků testovaného zvířete. ’ < , · . ' · \ · ’ - -1fcJ ' * i + p f . ·. . . ' i .Preferovanou tělesnou tekutinou analyzovanou v metodě jie'·; * Results'from checklist. The animal can be used to derive a standard control value or to calibrate. '' test animal results. '<, ·. '· \ ·' - -1fcJ '* i + p f. ·. . . Preferred body fluid analyzed in method j i e
CSF, vzhledem k tomu, že těsný kontakt CSF-s mozkem,znamená, že .neurologické choroby, které produkují změny ve složení . proteinů mozku, mohou být manifestovány v CSF,. Metody pro / extrakci vzorků CSF jsou odborníkům dobře známé. . ' * ' . * '*»CSF, since close contact of CSF-with the brain, means that neurological diseases that produce changes in composition. brain proteins can be manifested in CSF. Methods for / extracting CSF samples are well known to those skilled in the art. . '*'. * '* »
Vynález využívá jakoukoliv metodu pro určení přítomnostiThe present invention utilizes any method for determining presence
Λ * * 5 a/nebo množství agens v tělesné tekutině zvířete, která je ** And / or the amount of agent in the body fluid of the animal that is *
nyní v oboru-známa a jakoukoliv metodu, která se pozdě.j i stane dostupnou.now known in the art and any method that becomes available later.
Preferovaně je přítomnost a/nebo množství-agens v tělesné tekutině zví.fet.e určena„za použit í polyakry-lamidov-é- gelové - elektroforesy (PAGE) pro separaci agens, majících jak molekulovou hmotnost mezi 35 - 39 kDa tak pí přibližně 5,3, od jiných materiálů v tělesné tekutině, a potom barvením gelu a provedením densitometrického měření v oblasti’gelu, která obsahuje agens tak, aby se určila přítomnost a/nebo množství přítomného agens.Preferably the presence and / or amount - the agent in a body fluid zví.fet.e designated "s using polyacrylic lamidov-E- gel - electrophoresis (PAGE) separation agents having both a molecular weight between 35-39 kDa and a pI of about 5.3, from other materials in the body fluid, and then dyeing the gel and performing densitometric measurements in the region of the gel containing the agent to determine the presence and / or amount of the agent present.
Preferovaně je PAGE dvourozměrná polyakryl.amidová gelová elektroforeza (2DPAGE) a barveni je barvení stříbrem.·, j .;Preferably, the PAGE is a two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2DPAGE) and the staining is silver staining.
• 1·. F '• 1 ·. F '
Preferovaně je chybění zkřížené reaktivity meziTagens a. agens anti-apolipoprotein E protilátky potvrzeno použitím ' I * - ’ protilátky namířené proti apolipoproteinu E. Na imunogenu založené techniky pro měření zkřížené reaktivity jsou v oboru dobře známé, např.' ELISA nebo Western blotting.Preferably, the lack of cross-reactivity between the T agent and the anti-apolipoprotein E antibody agent is confirmed using an 'I * -' antibody directed against apolipoprotein E. Immunogen-based techniques for measuring cross-reactivity are well known in the art, e.g. ELISA or Western blotting.
. 1 · . , t - - a · * ·’ '.· ’ ·/ ·· • ,. , . · - *·• 1 i» . - · · , ‘ · ·-7 ’ ’V alternativním provedení ..vynálezu mohou být tyto.. 1 ·. , t - - and · * · ''. · '· / ·· •,. ,. · - * · • 1 i ». In an alternative embodiment of the invention, these may be.
r·...:.· -i. , · · · - í · - ! ; · u- 1 . ... , , · · 4 · · imunogenní techniky použity jak pro iděntifikaci agens, takr · ...:. · -i. , · · · - í · - ! ; · U- 1 . Immunogenic techniques used to identify agents as well
L . ·> » X ·. ί· ... . I í pro hodnocení jeho koncentrace. Toho může být dosaženo / ..,'’. 4 ‘ ‘ ''* ’- namířením, prot i látek proti agens, nebo Syntetickému peptidu odvozenému z jeho sekvence. ,L · X ». ί · .... It is also used to evaluate its concentration. This can be accomplished by / .. ''. 4 m ‘'' * ´ - by targeting, against agents against an agent, or a synthetic peptide derived from its sequence. ,
.....i - - Λ·-...... ' * ....... ' r‘'..... i - - Λ · -...... '* .......' r ''
Tak vynález poskytuje metody-pro detekci- přítomnosti . spongiformní encefalopatie u testovaných zvířat, které mohou ' vyřešit mnoho, a v preferované formě všechny, problémů předchozích metod.. Rovnováha mezi spolehlivostí testu a jeho snadným použitím bude závislá na přesné metodě analýzy . 1 .Thus, the invention provides methods for detecting the presence. spongiform encephalopathies in test animals that can solve many, and in a preferred form, all of the problems of the prior art. The balance between the reliability of the test and its ease of use will depend on the exact method of analysis. 1 .
agens, která bude vybrána v metodě podle předkládaného vynálezu. Nicméně, předsmrtná diagnosa BSEu dobytka otevírá možnost pro masové testování stád, a tak redukci pravděpodobnosti porážky ne i nf ikovaných zvířat,, nebo . promeškání porážky infikovaných.an agent to be selected in the method of the present invention. However, the pre-mortem diagnosis of BSEu cattle opens the possibility for mass testing of herds, thus reducing the likelihood of slaughter of uninfected animals, or. missing the slaughter of the infected.
Metoda podle předkládaného vynálezu bude nyní popsána, pouze pro názornost, prostřednictvím následujících příkladůThe method of the present invention will now be described, by way of illustration only, by way of the following examples
I a obrázků. Jiná provedení spadající do rozsahu vynálezu budou odborníkům zřejmá ve světle těchto příkladů.I and pictures. Other embodiments within the scope of the invention will be apparent to those skilled in the art in light of these examples.
Příklady provedení vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Příklad: Identifikace BSE u dobytkaExample: Identification of BSE in cattle
Příprava vzorku: Byly shromážděny CSF vzorky od.BSE pozitivního dobytka a od BSE negativního dobytka. V-každém, případě byla diagnosa potvrzena posmrtnou histopatologii a elektronovou mikroskopií. CSF vzorky byly odebrány punkcí cisterna magna po,smrti. a byly koncentrovány 10 - 15 krát.. Objemy CSF obsahuj ící- 40 pg celkového proteinu byly smíseny' v,poměru 4:1 s denaturačním roztokem (1 g dodecylsulfátu· sodného (SDS) a 0,2.32 g dithiotreitolu v 10 ml vody) a byly zahřátý na 95 °C po 5 minut. Pak byly vzorky pulzně centrifugovány.Sample preparation: CSF samples were collected from BSE positive cattle and BSE negative cattle. In each case, the diagnosis was confirmed by post-mortem histopathology and electron microscopy. CSF samples were collected by puncture of the cistern magna after death. CSF volumes containing 40 µg of total protein were mixed 4: 1 with denaturing solution (1 g sodium dodecyl sulfate (SDS) and 0.2.32 g dithiotreitol in 10 ml water). and were heated to 95 ° C for 5 minutes. The samples were then pulsed by centrifugation.
Elektroforeza: Připravené vzorky byly 2D elektroforezováný za použití Millipore Investigator 2D elektroforetického systému podle metody v manuálu; Izoelektrické zaměření prvního rozměru bylo provedeno 26 cm závitových skleněných tubách s vnitřním průměrem 1 mm v pH gradientu 3 - 10 pro 18000 volthodin po předchozím zaměření gelu po t hodinu, při 1500 V. Druhý rozměr SDS7PAGE byl proveden za použití 1 mm tenkých' gelů velkého formátu ,· (23 cm x _23_._cm) s. 1.2,5%. akrylamidem a,nestohovaným-ge-lem.Electrophoresis: The prepared samples were 2D electrophoresed using a Millipore Investigator 2D electrophoresis system according to the method in the manual; The isoelectric measurement of the first dimension was performed with 26 cm threaded glass tubes with an internal diameter of 1 mm in a pH gradient of 3-10 for 18000 volt hours after previous gel targeting for t hour, at 1500 V. The second dimension SDS7PAGE was performed using 1 mm thin gels format, · (23 cm x _23 _._ cm) p. 1.2.5%. acrylamide and, non-stacked geel.
Barvení á analýza obrazu: 2D gely byly barveny stříbrem podle Millipore manuálu. Gely byly snímány pomocí Omnimedia scanner XRS a analyzovány za použití Bioimage, software a ’ ' i . . Λ ·. kStaining and image analysis: 2D gels were stained with silver according to the Millipore manual. The gels were scanned with the Omnimedia XRS scanner and analyzed using Bioimage, software and 'i'. . Λ ·. to
Invěsťigáťor Database programu (Millipore) zapoužití sunSPARC station počítače.Database Designer (Millipore) using sunSPARC station computer.
Potvrzení identity agens: 2D gely byly elektroblótovány do:Immobilon-P membrán přes noc při 30 V za použití Bio, RAd T Trans Blot buňky. Bloty byly blokovány za použití Tween/80* ’ρο 1 hodinu a potom inkubovány po 90 minut s ;ovčím.;<.· ' antisérem, obsahuj ícím polyklonální proti látku namířenou proti apel ipopróteinu E.‘ Vazba ovčích proti látek byla detegována za použití králičího anti-ovčího.IgG a detekčního systému křenové*peroxidasy. ' ' ... Srovnání BSEýnegat ivního^ a BSE pozitivního dobytka:, Srovnání barvených gelů od. typicky BSE pozi t ivní Ch ;a typ-ícky . J ’ r -' ' - - 'T L · ' - “ , ' * .. · .Agent identity confirmation: 2D gels were electroblotted into : Immobilon-P membranes overnight at 30 V using a Bio, RAd T Trans Blot cell. The blots were blocked using Tween / 80 for 1 hour and then incubated for 90 minutes with sheep antiserum containing a polyclonal anti-apoprotein E. Binding of sheep anti-substances was detected using rabbit anti-sheep IgG and a horseradish peroxidase detection system. Comparison of BSE-negative and BSE-positive cattle: Comparison of stained gels from < tb > typically BSE positive Ch 2 and typ. J 'r -''--' T L · '-', '* .. ·.
BSE negativních vzorků je ukázáno na Obr.la á Óbř. lb.· Jak’ • ’ < · · r · je vidět, počet stříbrně zbarvených skvrn v oblasti' '· ý korespondující agens, ma.j ícímu přibl ižnou molekulovou, hmotnost 34 - 38 kĎa, a pl okolo 5,4 -'5,7 >(značený .ApoBSE negative samples are shown in FIG. As can be seen, the number of silver-stained spots in the region corresponding to an agent having an approximate molecular weight of 34-38 kPa and a pl of about 5.4- 5.7> (labeled .Apo
E)·, je vyšší- u-BSE pozitivních vzorků. Tyto skvrny ív oblasi značeného ApoE byly shledány jako zkříženě reaktivní s anti-apolipoprotein A.protilátkou. Nicméně, ’2 -'3 skvrny, molekulové hmotnosti 3.5 - 39 kDa a pI 5,3 (šipka v. každém gelu), korespondující jednomu nebo více agens, které nereagovaly zkříženě s touto protilátkou, nebyly detegovatelné v BSE negativních vzorcích, ale byly přítomny v jasně detegovatelném množství- v BSE pozitivních vzorcích.E) · is higher- u-BSE positive samples. These spots in the ApoE-labeled region were found to be cross-reactive with the anti-apolipoprotein A. antibody. However, '2-3-spots, molecular weight 3.5-39 kDa and pI 5.3 (arrow in each gel), corresponding to one or more agents that did not cross-react with this antibody, were not detectable in BSE negative samples but were present in a clearly detectable amount in BSE positive samples.
Za použití velkého počtu vzorků tělesých tekutin od různých vzorků dobytka bylo shledáno, že agens bylo důsledně přítomno v detegovatelném množství u BSE pozitivních zvířat, ale nebylo detegovatelné u BSE negativních zvířat, což ukazuje’, že přítomnost a/nebo množství tohoto agens může být použita pro detekci pravděpodobné přítomnosti BSE,v potenciálně infikovaných zvířatech..Using a large number of body fluid samples from different cattle samples, it was found that the agent was consistently present in a detectable amount in BSE positive animals, but was not detectable in BSE negative animals, indicating that the presence and / or amount of this agent can be used. to detect the likely presence of BSE in potentially infected animals.
V.IN.
Ví“· 'rVSHe knows '' rVS
O <77 σO <77 σ
o tx tO'o tx tO '
OC změněný listOC changed sheet
PATENTOVÉ NA KOKYCOCTENT PATENT
1. Způsob určení infekčního stavu spongiformní encefalopatie u zvířat, vyznačující, se tím, Že zahrnuje určení přítomnosti a/nebó množství agens v tělesných tekutinách zvířete, které:What is claimed is: 1. A method of determining an infectious condition of spongiform encephalopathy in an animal comprising: determining the presence and / or amount of an agent in an animal's body fluid which:
(a) je možné získat z mozkomíšního moku zvířete s pozitivním infekčním stavem (b) má, molekulovou hmotnost mezi 35 a 39 kDa, . (c). má plpřibližně 5,3, _ ' -.(a) it is possible to obtain from a cerebrospinal fluid of an animal having a positive infectious condition; (b) has a molecular weight between 35 and 39 kDa; (C). it has about 5.3%.
(d) nereaguj,e zkříženě s protilátkou námi fenou prot i- = apolipoproteinů E, a který zahrnuje.-stanovení vztahu výsledku k infekčnímu stavu zvířete.(d) do not cross-react with the antibody by an anti-apolipoprotein E female, and which comprises determining a result of the animal's infection status.
2. Způsob podle nároku 1, v y z n a č u j í c i s é t í m, že je výsledek určení, srovnán s kontrolní, hodnotou á vztah mezi těmito dvěma je „korelován, s .infekčním stavem zvířete... ’2. A method according to claim 1, wherein the result of the determination is compared to a control value and the relationship between the two is " correlated "
3. Způsob podle nároku 1 nebo nároku 2, vyznačující se tím, že *· spongiformní encefalopatíí je hovězí spongiformní encefalopatie. ’ ,The method of claim 1 or claim 2, wherein the spongiform encephalopathy is bovine spongiform encephalopathy. ’,
4. Způsob podle jakéhokoliv z předcházejících nároků., vyznačující·' s e t í m, že je tělesnou tekutinou analyzovanou v metodě mozkomíšní mok.A method according to any of the preceding claims, characterized in that it is a body fluid analyzed in the cerebrospinal fluid method.
Claims (11)
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB9424068A GB9424068D0 (en) | 1994-11-29 | 1994-11-29 | Spongiform encephalopathy detection methods |
GBGB9424768.1A GB9424768D0 (en) | 1994-11-29 | 1994-12-07 | Spongiform encephalopathy detection methods |
PCT/GB1995/002767 WO1996017250A1 (en) | 1994-11-29 | 1995-11-28 | Spongiform encephalopathy detection methods |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ164197A3 true CZ164197A3 (en) | 1997-11-12 |
Family
ID=26306060
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ971641A CZ164197A3 (en) | 1994-11-29 | 1995-11-28 | Method of detecting spongy-like encephalopathy |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0795133A1 (en) |
AU (1) | AU3932995A (en) |
CA (1) | CA2205228A1 (en) |
CZ (1) | CZ164197A3 (en) |
FI (1) | FI972254A (en) |
GB (1) | GB2308658B (en) |
HU (1) | HUT77339A (en) |
NO (1) | NO972340D0 (en) |
NZ (1) | NZ295722A (en) |
SK (1) | SK67797A3 (en) |
WO (1) | WO1996017250A1 (en) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2319607A (en) * | 1996-11-23 | 1998-05-27 | Electrophoretics International | Detection of prion proteins in mononuclear cells |
GB9701045D0 (en) * | 1997-01-18 | 1997-03-05 | Narang Harash K | Diagnosis of neuro-degenerative disorders |
WO1999040439A1 (en) * | 1998-02-06 | 1999-08-12 | Harash Kumar Narang | Diagnosis of neuro-degenerative disorders |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4892814A (en) * | 1987-06-22 | 1990-01-09 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Method for distinguishing Creutzfeldt-Jakob disease from other dementias |
-
1995
- 1995-11-28 SK SK677-97A patent/SK67797A3/en unknown
- 1995-11-28 EP EP95937125A patent/EP0795133A1/en not_active Withdrawn
- 1995-11-28 WO PCT/GB1995/002767 patent/WO1996017250A1/en not_active Application Discontinuation
- 1995-11-28 AU AU39329/95A patent/AU3932995A/en not_active Abandoned
- 1995-11-28 CZ CZ971641A patent/CZ164197A3/en unknown
- 1995-11-28 GB GB9708654A patent/GB2308658B/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-11-28 HU HU9702330A patent/HUT77339A/en unknown
- 1995-11-28 NZ NZ295722A patent/NZ295722A/en unknown
- 1995-11-28 CA CA002205228A patent/CA2205228A1/en not_active Abandoned
-
1997
- 1997-05-22 NO NO972340A patent/NO972340D0/en unknown
- 1997-05-28 FI FI972254A patent/FI972254A/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2205228A1 (en) | 1996-06-06 |
FI972254A0 (en) | 1997-05-28 |
SK67797A3 (en) | 2000-02-14 |
HUT77339A (en) | 1998-03-30 |
WO1996017250A1 (en) | 1996-06-06 |
NZ295722A (en) | 1999-03-29 |
NO972340L (en) | 1997-05-22 |
GB2308658A (en) | 1997-07-02 |
NO972340D0 (en) | 1997-05-22 |
GB9708654D0 (en) | 1997-06-18 |
FI972254A (en) | 1997-07-28 |
EP0795133A1 (en) | 1997-09-17 |
GB2308658B (en) | 1998-11-18 |
AU3932995A (en) | 1996-06-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
MURRAY et al. | Cross-linking analysis of the ryanodine receptor and α 1-dihydropyridine receptor in rabbit skeletal muscle triads | |
Grauballe et al. | Optimized enzyme‐linked immunosorbent assay for detection of human and bovine rotavirus in stools: Comparison with electron‐microscopy, immunoelectro‐osmophoresis, and fluorescent antibody techniques | |
US11933792B2 (en) | Markers for renal disease | |
US20230221337A1 (en) | Method for testing aggravation risk of person infected with novel coronavirus, test kit therefor, companion diagnostic drug and aggravation risk marker thereof | |
Ogasawara et al. | Formation of albumin dimers induced by exposure to peroxides in human plasma: a possible biomarker for oxidative stress | |
JP2022033286A (en) | Hemoglobin measurement reagent, measurement kit, and measurement method | |
Bhagwat et al. | N‐formyl‐l‐aspartate: A novel sperm chemoattractant identified in ovulatory phase oviductal fluid using a microfluidic chip | |
CZ164197A3 (en) | Method of detecting spongy-like encephalopathy | |
CZ164297A3 (en) | Method of detecting spongy-like encephalopathy | |
Murata et al. | Validation of a newly generated oxytocin antibody for enzyme-linked immunosorbent assays | |
CN115184620B (en) | Quantum dot fluorescence detection test strip and kit for PLA2R antibody and application of quantum dot fluorescence detection test strip and kit | |
Zhang et al. | Proteome analysis of a plasma membrane‐enriched fraction at the placental feto‐maternal barrier | |
KR101396300B1 (en) | Biomarkers for diagnosing the addiction of ethylbenzene | |
EP3835788A1 (en) | Method for immunologically detecting mycoplasma pneumoniae | |
Newton et al. | Presence of the major progesterone-induced proteins of the sheep endometrium in fetal fluids | |
WO2024181457A1 (en) | Method for immunologically measuring hemoglobin using deglycosylated haptoglobin | |
EP4033247A1 (en) | Multi-species immunoassays for detecting antibodies anti-sars-cov-2 using protein a for detection of captured antibodies | |
AU2017204520B2 (en) | Markers for renal disease | |
Gravel | Protein blotting | |
KR20100026084A (en) | Sensitive methods to diagnose malaria |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |