CS276567B6 - Myší hybridóm IFNA2-N7 produkujúci monoklonálnu protilátku - Google Patents

Myší hybridóm IFNA2-N7 produkujúci monoklonálnu protilátku Download PDF

Info

Publication number
CS276567B6
CS276567B6 CS905547A CS554790A CS276567B6 CS 276567 B6 CS276567 B6 CS 276567B6 CS 905547 A CS905547 A CS 905547A CS 554790 A CS554790 A CS 554790A CS 276567 B6 CS276567 B6 CS 276567B6
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
interferon alpha
human interferon
ifna2
mouse hybridoma
monoclonal antibody
Prior art date
Application number
CS905547A
Other languages
Czech (cs)
English (en)
Other versions
CS554790A3 (en
Inventor
Peter Rndr Csc Kontsek
Michal Mvdr Csc Novak
Eva Rndr Kontsekova
Ladislav Akademik Borecky
Original Assignee
Virologicky Ustav Sav
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Virologicky Ustav Sav filed Critical Virologicky Ustav Sav
Priority to CS905547A priority Critical patent/CS554790A3/cs
Publication of CS276567B6 publication Critical patent/CS276567B6/sk
Publication of CS554790A3 publication Critical patent/CS554790A3/cs

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Účelom riešenia je příprava novej homogenněj protilátky, ktorá neutralizuje a viaže ludský interferon alfa 2 a nerozlišuje iné subtypy ludského interferonu alfaAJvedeného účelu sa dosiahne použitím nového myšieho hybridómu IPNA2-N7, produkujúceho monoklonálnu protilátku imunoglobulínovej podtriedy Gl; voči rekombinantnému ludskému interferonu alfa 2. Myší hybridóm IFNA2-N7 se využívá v imunodiagnostike a pri čistění ludského interferonu alfa 2.

Description

Vynález se týká nového myšieho hybridomu IFNA2-N7 produkujúceho monoklonálnu protilátku, ktorá neutralizuje a viaže ludský interferon alfa 2.
Protilátky voči ludskému interferonu alfa 2 se pripravujú vo formě antisér alebo monoklonálnych protilátok. Antiséra sa získávájú imunizáciou pokusných zvierat purifikovaným antigénom (ludským interferonom alfa 2). Takto připravené protilátky, sú nestandardně a jednotlivé šarže antisér majú rozdielne vázobné a neutralizačně schopnosti voči ludskému interferonu alfa 2. Antiséra výkazujú aj krížovú reaktivitu s příbuznými subtypmi 1'udského interferonu alfa. Přípravu homogénnych protilátok s neutrálizačnou a súčasne s vazebnou aktivitou voči ludskému interferonu alfa 2 umožňuje iba hybridómová technika přípravy monoklonálnych protilátok. Takéto monoklonálne protilátky umožňujú dokaž přítomnosti ludského interferonu alfa2 v roznych biologických materiálech pomocou citlivých neutralizačných a imunochemických stanovení. Hybridómy sa získávájú známým sposobom opísaným v literature /G.Kohler, C. Milstein: Nature, 256 (1975)/. Hybridom IFNA2-N7 nebol doteraz připravený.
Nevýhody konvenčně připravených antisér voči ludskému interferonu alfa 2 v podstatné j miere odstraňuje vynález, ktorého podstatou je myší hybridom IFNA2-N7,produkujúci monoklonálnu protilátku imunoglobulínovej podtriedy Gi voči rekombinantnému ludskému interferonu alfa 2. Hybridom IFNA2-N7 je uložený vo Virologickom ústave SAV, Dúbravská cesta, 842 46 Bratislava.
Výhodou hybridomu IFNA2-N7 je, že produkuje homogénnu protilátku, ktorá je schopná specificky neutralizovat a viazať ludský interferon alfa 2 a nerozoznáva iné subtypy ludského interferonu alfa. Po rozmražení buňky hybridomu IFNA2-N7 pokračujú v produkcii protilátky i bez áalšej imunizácie ludským interferonom alfa 2.
Přikladl .
Hybridómy sa získájú fúziou myších myelómových buniek NSO a buniek získaných zo sleziny myší kmeňa BALB/o imunizovaných rekombinantným ludským interferonom alfa 2c (Ernst Boehrínger-Institute fur Arzneimittelforschung, Viedeň). Po fúzii bol vybratý hybridom IFNA2-N7, ktorý produkuje monoklonálnu protilátku imunoglobulínovej podtriedy Gl, selektívne neutralizujúcu a viažúcu ludský interferon alfa 2. Hybridom IFNA2-N7 sa pestuje in vitro v kultivačných médiách alebo in vivo v peritoneálnej dutině myší kmeňa BALB/c. Buňky sa zmrazujú a uchovávájú v tekutom dusíku a po rozmražení pokračujú v produkcii protilátky bez dalšej imunizácie ludským interferonom alfa 2. Buňky hybridomu IFNA2-N7 rastů in vitro ako suspenzná kultura a produkujú do kultivačného média přibližné 1 pg/ml špecifickej protilátky. Kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eaglovho minimálneho esenciálneho média /R. Dulbecco, G. Freeman: Virology 8, 396 (1959)/. Toto médium je pre kultiváciu hybridómov doplněné inaktivovaným koňským sérom (ELAN CLONE). Za účelom získania vačšieho množstva monoklonálnej protilátky voči ludskému interferonu alfa 2 sa buňky IFNA2-N7 aplikovali v množstve 5.10^ do peritoneálnej du- , tiny myší BALB/c. Mys sa desať dní před touto aplikáciou premedikuje parafínovým ole- . jom (0,5 ml intraperitoneálne na myš). Po 10' až 15 dňoch od injekcie buniek IFNA2-N7..... bola myši odobratá ascitická tekutina, ktorá obdahovala požadovaná monoklonálnu protilátku v koncentrácii 1,1 mg/ml. .
CS 276567 Bg
Myší hybridem IFNA2-N7 sa používá ako zdroj homogénnej protilátky imunoglobulínovej podtriedy Gl. ktorá specificky viaže a neutralizuje ludský interferon alfa 2, pričom nereaguje s inými subtypmi ludského interferonu alfa. Připravená protilátka sa používá na detekciu ludského interferonu alfa 2 v biologických (neutralizačných) a ímunochemíckých (RIA, ELISA, imunoblot) testoch. Protilátka je vhodná aj na imunoafinitnú purifikáciu 1'udského interferonu alfa 2.

Claims (2)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    Myší hybridóm IFNA2-N7 produkujúci monoklonálnu protilátku imunoglobulínovej podtriedy G1 voči rekombinantnému ludskému interferonu alfa 2.
CS905547A 1990-11-12 1990-11-12 Murine hybridoma ifna2-n7 producing a monoclonal antibody CS554790A3 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS905547A CS554790A3 (en) 1990-11-12 1990-11-12 Murine hybridoma ifna2-n7 producing a monoclonal antibody

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS905547A CS554790A3 (en) 1990-11-12 1990-11-12 Murine hybridoma ifna2-n7 producing a monoclonal antibody

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS276567B6 true CS276567B6 (sk) 1992-06-17
CS554790A3 CS554790A3 (en) 1992-06-17

Family

ID=5400583

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS905547A CS554790A3 (en) 1990-11-12 1990-11-12 Murine hybridoma ifna2-n7 producing a monoclonal antibody

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS554790A3 (sk)

Also Published As

Publication number Publication date
CS554790A3 (en) 1992-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4699880A (en) Method of producing monoclonal anti-idiotype antibody
Tanaka et al. Preparation and preliminary characterization of monoclonal antibodies against human DNA polymerase alpha.
US5047507A (en) Monoclonal antibodies with specificity affinity for human carcinoembryonic antigen
FI87933B (fi) Foerfarande foer framstaellning av monoklonal humanreninantikropp r 3-36-16 och hybridomacell som producerar densamma
US5831032A (en) Interleukin-8 anti-peptide antibodies
CN113321731A (zh) 结合人程序性死亡配体1(pd-l1)的抗体
SK282649B6 (sk) Protilátka proti CD44v6, hybridómová bunková línia, molekula protilátky a jej použitie
US5631349A (en) Chimeric monoclonal antibodies recognizing human interleukin-2-receptor
Lewis et al. Conformation-specific monoclonal antibodies directed against the calcium-stabilized structure of human prothrombin
AU2003219954A1 (en) ANTAGONISTIC ANTI-hFAS LIGAND HUMAN ANTIBODIES AND FRAGMENTS THEREOF
CN109734803A (zh) 抗人myo抗体及其在检测试剂盒中的应用
Takahashi et al. Production of murine hybrid-hybridomas secreting bispecific monoclonal antibodies for use in urease-based immunoassays.
Ichikawa et al. Monoclonal antibodies to choline acetyltransferase of rat brain
CS276567B6 (sk) Myší hybridóm IFNA2-N7 produkujúci monoklonálnu protilátku
CS276203B6 (sk) Myší hybridóm IFNA2-N10 produkujúci monoklonálnu protilátku viažúcu ludský interferon alfa 2
CS276204B6 (sk) Myší hybridóm IFNA1-118 produkujúci minoklonálnu protilátku viažúcu íudský interferon alfa 1
Hamaoki et al. Monoclonal antibodies to endothelin: application for sandwich immunoassays
JPH0216997A (ja) γ−ANPを認識するモノクローナル抗体
CS277142B6 (sk) Myší hybridóm IFNA1-48 produkujúci monoklonálnu protilátku
JPS59172496A (ja) モノクロ−ナル抗体
CN119241696B (zh) 一种特异性结合肠毒素sec的抗原结合蛋白对及其应用
CN109725151A (zh) 人肌红蛋白检测试纸卡及其临床应用
US5141865A (en) Monoclonal antibodies which bind thromboxane A2 receptor antagonists and diagnostic methods based thereon
CN109721655A (zh) 抗人肌红蛋白抗体及其在检测试剂盒中的应用
CS276080B6 (cs) Myší hybridám HRP 16-1 produkujdci monoklonálnu protilátku imunoglobulínovej podtriedy G2a voči ehrenovej peroxidáze