CS276359B6 - NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057 - Google Patents

NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057 Download PDF

Info

Publication number
CS276359B6
CS276359B6 CS676289A CS676289A CS276359B6 CS 276359 B6 CS276359 B6 CS 276359B6 CS 676289 A CS676289 A CS 676289A CS 676289 A CS676289 A CS 676289A CS 276359 B6 CS276359 B6 CS 276359B6
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
alkaloids
production
sclerotia
ccm
ergocryptine
Prior art date
Application number
CS676289A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Hana Pharm Dr Povazska
Josef Rndr Valik
Zdenek Rndr Malinka
Jiri Phmr Spacil
Josef Ing Stuchlik
Original Assignee
Galena S P
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Galena S P filed Critical Galena S P
Priority to CS676289A priority Critical patent/CS276359B6/en
Publication of CS276359B6 publication Critical patent/CS276359B6/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Účelem řešení je zabezpečení vhodné suro- · vínové základny pro výrobu námelových alkaloidů ergotoxinové skupiny, zejména er- gokorninu, popřípadě pro výrobu polosyn- tetických derivátů kyseliny lysergové. Surovinou pro tyto výroby jsou sklerocia námele, získaná parazitní kultivací. Uvedeného účelu se dosáhne vypěstováním sklerocií nového průmyslového kmene Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057 na šitě v množství nejméně 960 kg/ha a použitím těchto sklerocií k výrobě substancí nativních nebo polosyntetic- kých námelových alkaloidů. Sklerocia obsahují námelové alkaloidy v množství 0,52 % až 1,25 % sušiny biomasy, minimálně 93,5 % sumy alkaloidů je tvořeno směsí ergokorninu, alfa-ergokryptinU a beta- ergokryptinu v poměru 4,2 : 1,6 : 1.The purpose of the solution is to provide a suitable raw wine base for the production of ergot alkaloids of the ergotoxin group, in particular the gerocornine, or for the production of semi-synthetic lysergic acid derivatives. The sclerocia of ergot obtained by parasitic cultivation is the raw material for these production. This purpose is achieved by growing sclerotia of the new industrial strain Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057 on a suture of at least 960 kg / ha and using such sclerotia to produce substances of native or semi-synthetic ergot alkaloids. Sclerotia contains ergot alkaloids in the amount of 0.52% to 1.25% biomass dry matter, at least 93.5% of the alkaloid sum consists of a mixture of ergocornine, alpha-ergocryptineU and beta-ergocryptine in a ratio of 4.2: 1.6: 1.

Description

Vynález se týká nového průmyslového kmene mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057, vyznačujícího se při polní kultivaci na žitě velmi vysokými hektarovými výnosy námelových sklerocií s vysokým obsahem ergokorninu, alfa-ergokryptinu a beta-ergokryptinu a minimálním zastoupením nežádoucích doprovodných alkaloidů. ’The invention relates to a new industrial strain of the microorganism Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057, characterized by very high hectare yields of ergot sclerotia with a high content of ergocornine, alpha-ergocryptine and beta-ergocryptine and a minimal proportion of undesired concomitant alkaloids during field cultivation on rye. ’

Ergokornin, alfa-ergokryptin a beta-ergokryptin jsou ergotoxinové alkaloidy s významnými léčivými účinky. Tyto alkaloidy lze v terapeutické praxi využít samostatně nebo ve směsích. Ergokornin je v současné terapeutické praxi používán ve směsi s alfa-ergokryptinem, beta-ergokryptinem a ergokristinem v přesně definovaném poměru pod obchodním názvem Secatoxin. S výhodou je možno využít terapeutických vlastností ergokorninu samotného nebo ve směsi s ergokristinem. Směs alkaloidů může být použita jako výchozí surovina pro výrobu polosyntetických derivátů s širokým spektrem účinků.Ergokornin, alpha-ergocryptine and beta-ergocryptine are ergotoxin alkaloids with significant therapeutic effects. These alkaloids can be used in therapeutic practice alone or in mixtures. Ergokornin is used in current therapeutic practice in a mixture with alpha-ergocryptine, beta-ergocryptine and ergocristine in a precisely defined ratio under the trade name Secatoxin. Advantageously, the therapeutic properties of ergocornine alone or in a mixture with ergocristine can be exploited. A mixture of alkaloids can be used as a starting material for the production of semi-synthetic derivatives with a wide range of effects.

Pro výrobu ergokorninu ve směsi s alfa-ergokryptinem a beta-ergokryptinem je v současné době využívána řada kmenů Claviceps purpurea (Fr.) Tul., popsaných v odborné a patentové literatuře. Hlavním nedostatkem těchto kmenů je nízký obsah žádoucích námelových alkaloidů, nepříznivý vzájemný poměr ergokorninu k alfa a beta-ergokryptinu a vysoký obsah nežádoucích doprovodných alkaloidů.A number of strains of Claviceps purpurea (Fr.) Tul., Described in the technical and patent literature, are currently used for the production of ergocornine in a mixture with alpha-ergocryptine and beta-ergocryptine. The main disadvantages of these strains are the low content of desirable ergot alkaloids, the unfavorable ratio of ergocornine to alpha and beta-ergocryptine and the high content of undesired concomitant alkaloids.

Tyto nedostatky do určité míry odstranil vynález (čs. autorské osvědčení č. 239 884), kterým je nový průmyslový kmen CCM F-734, produkující námelovou drogu s příznivějším poměrem jednotlivých složek ve směsi alkaloidů a vysokým hektarovým výnosem nejméně 840 kg/ha. Vysoké výnosy jsou dány vysokou schopností tohoto kmene infikovat hostitelskou rostlinu. Nedostatkem tohoto kmene je však poměrně nízký obsah námelových alkaloidů (nejméně 0,32 %), způsobující vyšší náklady na.získávání alkaloidů z námelové drogy.These shortcomings were to some extent eliminated by the invention (Czechoslovak author's certificate No. 239 884), which is a new industrial strain CCM F-734, producing a ergot drug with a more favorable ratio of individual components in a mixture of alkaloids and a high yield per hectare of at least 840 kg / ha. The high yields are due to the high ability of this strain to infect the host plant. However, the disadvantage of this strain is the relatively low content of ergot alkaloids (at least 0.32%), causing higher costs for obtaining alkaloids from the ergot drug.

Uvedené nedostatky kmenů námele pro polní produkci ergotoxinových alkaloidů odstraňuje do značné míry vynález, jímž je nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul., uložený v Cs. sbírce mikroorganismů University J. E. Purkyně, Brno, tř. Obránců míru 10, pod označením CCM 8057.These shortcomings of ergot strains for the field production of ergotoxin alkaloids are largely eliminated by the invention, which is a new industrial strain of the microorganism Claviceps purpurea (Fr.) Tul., Deposited in Cs. collection of microorganisms J. E. Purkyně University, Brno, cl. Defenders of Peace 10, under the designation CCM 8057.

Hlavní výhodou tohoto kmene je při kultivaci na žitě vysoká produkce sumy alkaloidů ve sklerociích, která dosahuje průměru 0,91 % (minimum 0,52 %) sušiny biomasy. Další výhodou je velmi nízká tvorba nežádoucích doprovodných alkaloidů, které tvoří nejvýše 6,5 % sumy alkaloidů. Ergotoxinové alkaloidy tvoří nejméně 93,5 % celkové sumy alkaloidů v poměrném průměrném zastoupení ergokorninu : alfa-ergokryptinu : beta ergokryptinu = 4,2 : : 1,6 : 1. Kmen lze s výhodou použít k získání námelové drogy pro izolaci této směsi ergotoxinových alkaloidů i pro izolaci ergokorninu a ergokryptinu zvlášť.. Nový kmen se také vyznačuje vysokou schopností infikovat hostitelskou rostlinu, která umožňuje při recentně užívané agrotechnice pěstování námele dosahovat hektarového výnosu námelové drogy minimálně 960 kg/ha. Vlastnosti nového kmene umožňují zefektivnit postupy extrakce a izolace při výrobě námelových alkaloidů, zejména snížením spotřeby surovin, energie a pracnosti. Sklerocia tohoto kmene mohou být také použita jako výchozí surovina pro výrobu polosyntetických derivátů.The main advantage of this strain is the high production of the sum of alkaloids in sclerotia when cultivated on rye, which reaches an average of 0.91% (minimum 0.52%) of biomass dry matter. Another advantage is the very low formation of undesired concomitant alkaloids, which make up at most 6.5% of the total alkaloids. Ergotoxin alkaloids make up at least 93.5% of the total sum of alkaloids in the relative average proportion of ergocornine: alpha-ergocryptine: beta ergocryptine = 4.2:: 1.6: 1. also for the isolation of ergocornine and ergocryptine separately. The properties of the new strain make it possible to streamline the extraction and isolation processes in the production of ergot alkaloids, in particular by reducing the consumption of raw materials, energy and labor. Sclerotia of this strain can also be used as a starting material for the production of semi-synthetic derivatives.

Popis vlastností nového kmene Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057:Description of the properties of the new strain Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057:

Při saprofytním růstu na sladinové půdě ztužené agarem tvoří houba kolonie z typického sfacelioyého vzdušného mycelia. Mycelium je bohatě větvené, bílé a postranní hyfy jsou ukončeny konidiogenními buňkami. Konidie mají průměrné rozměry 7,4 x 3,8 mikrometrů. Mladé kultury jsou bílé, starší jsou slabě růžovofialově pigmentované.During saprophytic growth on agar-hardened wort soil, the fungus forms colonies of typical spherical air mycelium. The mycelium is richly branched, white and lateral hyphae are terminated by conidiogenic cells. Conidia have average dimensions of 7.4 x 3.8 micrometers. Young cultures are white, older ones are slightly pinkish-purple pigmented.

Při parazitní kultivaci na žitě tvoří houba tmavá, fialově pigmentovaná sklerocia o váze v rozmezí 0,016 až 0,105 g (průměr 0,046 g). Sklerocia tohoto kmene obsahují námelové alkaloidy v množství od 0,52 % do 1,25 % sušiny biomasy, při průměru 0,91 %. Minimálně 93,5 % sumy alkaloidů je tvořeno ergokorninem, alfa-ergokryptinem a beta-ergokryptinem. Poměr ergokorninu ku ergokryptinům je 1,62 : 1, poměr alfa-ergokryptinu ku beta-ergokryp- . tinu je 1,6 : 1. Doprovodnými alkaloidy jsou zejména ergometrin, dále ergokornam a klavinové-alkaloidy.In parasitic cultivation on rye, the fungus forms dark, violet-pigmented sclerotia weighing between 0.016 and 0.105 g (average 0.046 g). Sclerotia of this strain contain ergot alkaloids in an amount of from 0.52% to 1.25% of the biomass dry matter, on average 0.91%. At least 93.5% of the sum of alkaloids consists of ergocornine, alpha-ergocryptine and beta-ergocryptine. The ratio of ergocornine to ergocryptines is 1.62: 1, the ratio of alpha-ergocryptine to beta-ergocryptin. tinu is 1.6: 1. The accompanying alkaloids are mainly ergometrine, ergocornam and clavine alkaloids.

CS 276359 B6 . 2CS 276359 B6. 2

Nový produkční kmen byl vyšlechtěn z původního produkčního kmene CCM F - 734. Sklerocium tohoto kmene obsahující 0,72 % sumy alkaloidů s poměrným zastoupením ergokorninu ku alfa-ergokryptinu a beta-ergokryptinu 2,6 : 1,3 : 1 bylo převedeno db saprofytní -2-1 kultury a vytvořené konidie byly ozařovány UV zářením o výkonu 15 J m s po dobu 185 s, kdy přežívalo 0,50 % konidií. Po ozáření byla suspenze spor monosporicky rozizolována. Postup UV- mutageneze a monokonidiové izolace byl opakován za stejných podmínek třikrát. Kultury z jednotlivých monokonidiových izolátů byly naočkovány na žito. Vzniklá sklerocia byla jednotlivě izolována, Z analyzovaných sklerocií bylo pro další šlechtění vybráno sklerocium s obsahem sumy alkaloidů 1,05 %, ergokorninem, alfa-ergokryptinem a beta-ergokryptinem v poměru 3,5 : 1,1 : 1. Sklerocium bylo převedeno do saprofytní kultury. Připravená suspenze konidií byla podrobena UV- mutagenezi a následné monokonidiové izolaci opakovaně třikrát. Takto získané kultury monokonidiových izolátů byly naočkovány na žito. Na základě hodnocení jednotlivých mutovaných monokonidiových izolátů, tj. stanovení jejich infekceschopnosti a analýzy námelových alkaloidů v souboru sklerocií byl vybrán kmen označený CCM 8057, který se vyznačuje uvedeným výhodným spektrem alkaloidů, minimem doprovodných nežádoucích alkaloidů a velmi vysokou infekceschopnosti. Stabilita těchto vlastností byla potvrzena opakovanou kultivací na žitě ve dvou vegetačních obdobích na šesti rozdílných lokalitách.The new production strain was bred from the original production strain CCM F - 734. 2-1 cultures and formed conidia were irradiated with UV radiation at 15 J ms for 185 s, when 0.50% of the conidia survived. After irradiation, the spore suspension was isolated monosporically. The procedure of UV-mutagenesis and monoconidium isolation was repeated three times under the same conditions. Cultures from individual monoconidium isolates were inoculated on rye. The resulting sclerotia was isolated individually. From the analyzed sclerotia, sclerotia with a total alkaloid content of 1.05%, ergocornine, alpha-ergocryptine and beta-ergocryptine in a ratio of 3.5: 1.1: 1 was selected for further breeding. culture. The prepared conidia suspension was subjected to UV mutagenesis and subsequent monoconidium isolation three times. Cultures of monoconidium isolates thus obtained were inoculated on rye. Based on the evaluation of individual mutated monoconidium isolates, ie determination of their infectivity and analysis of ergot alkaloids in a set of sclerotia, a strain designated CCM 8057 was selected, which is characterized by the preferred spectrum of alkaloids, minimum concomitant undesirable alkaloids and very high infectivity. The stability of these properties was confirmed by repeated cultivation on rye in two growing seasons in six different localities.

Způsob kultivace nového kmene pro získání výchozí suroviny k izolaci ergokorninu, alfa-ergokryptinu a beta-ergokřyptinu a následné výrobě finálních produktů z těchto alkaloidů je doložen v příkladu použití, aniž by se tímto příkladem jakkoli omezovaly vlastnosti nového kmene, způsob jeho kultivace a použití vé výrobě.The method of culturing a new strain to obtain a starting material for the isolation of ergocornine, alpha-ergocryptine and beta-ergocriptine and the subsequent production of final products from these alkaloids is documented in the example of use, without limiting the properties of the new strain, its method of cultivation and use. production.

Příklad použití:Example of use:

Z potřebného objemu saprofytní kultury kmene CCM se připraví vodná suspenze konidií. Suspenzí konidií se pomocí očkovacího stroje naočkují klasy žita ve fázi metání tak, že 11 - „ na plochu 1 ha se použije 5.10 živých konidií. Po 35 az 60 denním rustu na zite se provede sběr narostlých sklerocií námele. Z jednoho hektaru žita bylo získáno 1 020 kg suchých sklerocií námele, obsahujících 0,91 % sumy alkaloidů, ze které bylo 97,5 % tvořeno ergokorninem, alfa a beta-ergokryptinem ve vzájemném poměru 4,2 : 1,6 : 1, zbytek byl tvořen ergometrinem, ergokornamem a klavinovými alkaloidy.An aqueous suspension of conidia is prepared from the required volume of saprophytic culture of the CCM strain. Rice ears are inoculated with the conidia suspension using a seeding machine in the throwing phase, so that 5.10 live conidia are used on an area of 1 ha. After 35 to 60 days of growth on the zite, the grown sclerotia of the ergot is collected. 1 020 kg of dry sclerotia of ergot was obtained from one hectare of rye, containing 0.91% of the sum of alkaloids, of which 97.5% was ergocornine, alpha and beta-ergocryptine in a ratio of 4.2: 1.6: 1, the remainder it consisted of ergometrine, ergocornam and clavin alkaloids.

Získaná droga byla vyextrahována, extrakty byly zčásti izolovány na jednotlivé alkaloidy a použity pro výrobu preparátu ergotoxinu, zčásti použity k výrobě směsi alkaloidů s vysokým podílem ergokorninu a zčásti použity pro výrobu polosyntetických derivátů.The drug obtained was extracted, the extracts were partly isolated into individual alkaloids and used for the production of an ergotoxin preparation, partly used for the production of a mixture of alkaloids with a high content of ergocornine and partly used for the production of semisynthetic derivatives.

Claims (1)

PA TENTOVÉ NÁROKY ’PA TENTAL CLAIMS ’ Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057 produkující ergokornin, alfa-ergokryptin a beta-ergokryptin.A new industrial strain of the microorganism Claviceps purpurea (Fr.) Tul. CCM 8057 producing ergocornine, alpha-ergocryptine and beta-ergocryptine.
CS676289A 1989-11-30 1989-11-30 NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057 CS276359B6 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS676289A CS276359B6 (en) 1989-11-30 1989-11-30 NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS676289A CS276359B6 (en) 1989-11-30 1989-11-30 NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS276359B6 true CS276359B6 (en) 1992-05-13

Family

ID=5415378

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS676289A CS276359B6 (en) 1989-11-30 1989-11-30 NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS276359B6 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106416744B (en) Gastrodia elata symbiotic armillaria mellea strain and preparation method thereof
JP2022516888A (en) Strains producing ergothioneine and methods for screening thereof
CN100516195C (en) A new bacterial strain and the method for producing paclitaxel using the bacterial strain
US5349121A (en) Biologically pure mushroom culture and method for mushroom cultivation
US3224945A (en) Process for the production of ergot alkaloids
CS276359B6 (en) NOVEL INDUSTRIAL STRAIN OF MICRO-ORGANISM CLAVICEPS PURPUREA (Fr.)TUL . CCM 8057
CZ2019790A3 (en) Industrial production strain of the microorganism Claviceps purpurea (Fr.) Tul., CCM8865
CS276627B6 (en) Novel industrial strain of microorganism of species claviceps purpurea(fr) tul. ccm 8059
CS225272B1 (en) The new industrial strain of microorganism claviceps purpurea /fr./tul.,ccm f- 721
CN1212387C (en) Fine rod bundle spore SX-1 separated and cultured from cordyceps and its saparation, culture process and use
CZ283773B6 (en) INDUSTRIAL PRODUCTION STRAIN OF CLAVICEPS PURPUREA (Fr)Tul. MICRO-ORGANISM
CA1154699A (en) FERMENTATION PROCESS FOR THE PREPARATION OF ERGOT ALKALOIDS, PRIMARILY ERGOCORNINE AND .beta.- ERGOCRYPTINE
US3314961A (en) Heterocyclic carboxylic acids and their production
CZ239691A3 (en) novel industrial strain of micro-organisms claviceps purpurea (fr.) tul., ccm 8058
CZ287130B6 (en) Industrial production strain of Claviceps purpurea (Fr.) Tul. microorganism
CS239883B1 (en) New industrial microorganism strain claviceps purpurea (fr.) tul ccm f-745
RU2118661C1 (en) Strain of fungus claviceps purpurea (fr) tul - a producer of ergocriptines
CZ279533B6 (en) INDUSTRIAL PRODUCTION STRAIN OF CLAVICEPS PURPUREA /Fr./Tul. MICRO-ORGANISM
CS239884B1 (en) New industrial microorganism strain claviceps purpurea (fr.) tul ccm f-745
Malinka Saprophytic cultivation of Claviceps
US3219545A (en) Microbiological production of lysergic acid derivatives
RU2188231C1 (en) Strain of fungus claviceps purpurea (fr) tul vkm-f-3662 d as producer of ergocornam
US3282796A (en) Microbiological process for producing ergobasine
WO2024127299A1 (en) Production of a psychoactive alkaloid and compositions, and production of a fruiting body organism
CN117016285A (en) Method for culturing Phellinus linteus strain and cultivating fungus sticks

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20081130