CS274504B2

CS274504B2 - Preparation of enzymatic compounds for cholesterol optical indication

Info

Publication number: CS274504B2
Application number: CS503989A
Authority: CS
Inventors: Jurij M Dr Lopuchin; Irina P Andrianova; Viktor V Zujevskij; Alexandr B Rabovskij
Original assignee: Ni Instit
Priority date: 1988-01-19
Filing date: 1989-08-30
Publication date: 1991-04-11
Also published as: CS503989A2

Claims

PŘEDMĚT VYNÁLEZU

1. Způsob přípravy afinně enzymatických sloučenin pro vizuální indikaci cholesterolu na povrchu kůže pacienta na bázi detekčniho činidla a vizualizačniho činidla, vyznačující se tím, že se afinní detekční činidlo A zvolené ze skupiny, která zahrnuje steroidni glykoeidy majici ve svém složeni jako aglykon cyklopentanporhydrofenantrenový zbytek furostanolové nebo spirostanolové řady a oligoeacharidový fragment obsahující 3 až 10

CS 274 504 B2 monosacharidů přímé nebo rozvětveně řady, ze skupiny zahrnující agavosid A, agavosid 13, agavosid C, agavosid O, agavosid F, agavosid H, agavosid G, trillin, funcosid C, funcosid 0, funcosid F, funcosid G, funcosid I, dioscin, gracillin, protodioscin, cícubasaponin, juncosid E, juncosid H, lanatigonin, desglukodigitonin, digitonin, gitonin, rocosid C, rocosid 0, rocosid E, funcosid E, alliumosid C, polygonatonin, tigogenintetraosid, tigogeninhexaosid, capsicosld, ammunosid B, ammunosid C, ammunosid D, ammunosid E, desglukodesramnoparillin, desglukoparillin, parillin, sarsaparillosid, asparagosid C, asparagosid 0, asparagosid G, asparagosid H, protoyuccosid H, yuokkosid B, lanatigosid, monosid, biosid, triosid, purpuraagitosid, gekogenin, rocogenin, diogenin, tigogenin, protopolygametosid, tomatonin, laxogeninlycotetraosid, alliogeninlycoteraosid, karoteosid A, cyclosieversiosid H, acantofilosid C, alliofusosid A, alliospirosid A, cyklosieversiosid F, theasaponin, ačantofilosid B, tigonin (celkový), glykosid rostliny Calha polypetala nebo cyclosieversiosid G, nebo ze skupiny triterpenglykosidů, obsahující agylkon o(- nebo β-amyrylové, lupanové, hopanové, damaranové, lanostanové nebo holostanové řády a oligosacharid sa 2 až B rozvětvenými nebo nerozvětvenými zbytky, zahrnující následujici soubor látek - aescin, avenacin, theasaponin, Ct-hederin, caulosid C, stichinosid A, cyclamin, chinovin, saponiny cukrové řepy, hypsosid i tritsrpenglykosidy ziskané z rostliny Fatsia japonica, detekční činidlo A je dále voleno ze skupiny hydrofobnich bílkovin, kterými jsou meilinové bílkoviny podls Folcha, bílkoviny lysozomů a mitochondrii, fibrinogen, immunoglobuliny, cerebron, myoglobin, cytochrom C, cytochrom P-450 nebo apoproteiny lipoproteinů, ze skupiny bilkovinových toxinů schopných tvořit komplexní sloučeninu s cholesterolem, které lze získat z bakterii, mořských mikroorganismů, hmyzu a hadů, která zahrnuje streptolysin o, pneumolysin, listeriolysin, #-toxin C.X. získaný z Psrfringens typu A a C, cf—t oxin C.I. nový typ A a C, haemolysin C.I. histolyticum, haemolysin C.I. botulinum typ C a D, tetanolysin, cerebroíysin, alveolysin, tíiringeolysin nsbo cytotoxin z aktinie Metridium senile, ze skupiny polyenantibiotik zahrnujici amphotericin B, philipin nabo nistatin, ze skupiny enzymů, majících vysokou afinitu k cholesterolu, zahrnujici cholesteroloxidazy, cholssterolhydrogsnázy nebo cholesterolesterázy, a vizualizační činidlo B, vybrané ze souboru, který tvoři enzymy acetylcholinesteráza, tyrosinázy, glukoso-6-fosfátdehydrogenázy, glukooxidáza, glukoeoamyláza, galaktosidáza, peroxidáza, alkalické nebo kyselé fosfatázy,té-chymotrypsin nebo pyrofosfatáza, necháji reagovat se zesitovacim činidlem C, vybraným zs skupiny, kterou tvoři nízkomolekulární bifunkční sloučeniny, zahrnující bromkyan, trichlortriazin nebo 2-amino-4,S-dichlor-3-triazin, nebo vysokomolekulární sloučeniny, obsahujíc! jakoukoliv z funkčních skupin zvolených ze souboru, který zahrnuje primární aminoskupinu, karboxyl, hydroxyl, aldehydovou skupinu, hydrohalogenidovou skupinu, skupinu smíšeného anhydridu, lminoetherovou skupinu, azidovou skupinu, hydrazidovou skupinu, maleiimidovou, isokyanátovou nebo epoxidovou skupinu, nechají reagovat ve vodném solném tlumivém roztoku o hodnotě pH 5 až 9 při toplotě O až 20 °C, přičemž se roakco provádi v libovolném pořadí.

'2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tim, že afinní detekční činidlo uvedené v bodě 1 rozpustí ve vodném solném tlumivém roztoku o hodnotě pH 5 až 9 v koncentraci od 1 do 20 mg/ml a roztok se nechá reagovat s nizkomolekulárnim asymetrickým bifunkčnim zesitovacim činidlem C zvoleným ze souboru, který zahrnuje bromkyan, trichlortriazin nebo
2-amino-4,G-dichlor-S-triazin v molárnim poměru AsC o 1:0,5 až 1:10 a roztok se udržuje 1 až 20 hodin při teplotě od O do 20 °C, pak se přidá vizualizační činidlo B zvolené ze souboru enzymů, který zahrnuje acetylcholinesterázu, tyrosinázu, glukoso-6-fosfátdehydrogenázu, glukosooxidázu, glukosoamylázu, galaktosidázu, peroxidázu, alkalickou nebo kyselou fosfatázii, (X- alkalickou nebo kyselou fosfatázu,0(- chymotrypsin nebo

CS 274 504 B2 pyrofosfatázu, v molárnim poměru A:B a 20:1 až 1:1 a roztok se 1 až 48 hodin udržuje při teplotě O až 20 °C.
3. Způsob podle bodu 1, vyznačujici se tim, že se vizualizačni činidlo B, zvolené ze skupiny enzymů, zahrnující acetylcholinesterázu, tyrosinázu, glukoso-6-fosfátdehydrogenázu, glukosooxidázu, glukosoamylázu, gelaktosidázu, peroxidázu, alkalickou nebo kyselou fosfatázu, OC-chymotrypsin nebo pyrofosfatázu, rozpustí ve vodném solném tlumivém roztoku o pH 5 až 9 při koncentraci vizualizačniho činidla B 1 až 20 mg/ml, přidá se nizkomolekulární asymetrické zesitovaci činidlo C, vybrané ze skupiny zahrnující bromkyan, trichlortriazin nebo 2-amino-4,6-dichlor-S-triazin v molekulárním poměru B:C a 1,0:0,5 až 1:10 a roztok ee udržuje 1 až 20 hodin ha teplotě O až 20 °C a pak se nechá reagovat s detekčnim činidlem A, majícim význam uvedený v bodě 1, v molárnim poměru A:B e 20:1 až 1:1 a roztok se udržujo 1 až 48 hodin při teplotě O až 20 °C.
4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tim, že se detekční činidlo A, majici význam uvedený v bodě 1, nebo směs těchto látek, spolu s vizualizačnim činidlem B, zvoleným ze skupiny enzymů, zahrnující acetylcholinesterázu, tyrosinázu, glukoso-5-fosfátdehydrogenázu, glukosooxidázu, glukosoamylázu, galaktosidázu, peroxidázu, alkalickou nebo kyselou fosfatázu nebo 'X-chymotryp3in, rozpustí v molárnim poměru A:B = 20:1 až 1:1 ve vodném solném tlumivém roztoku o hodnotě pH 5 až 9 při koncentraci A a B vždy 0,1 až 20 mg/ml, získaný roztok se nechá reagovat s vysokoroolekulárnim polyfunkčním zesitovacim činidlem C, kterým jsou polysacharidy, proteiny nebo syntetické polymery, obsahující jakoukoliv z funkčních skupin, zahrnující primární aminovou karboxylovou, hydroxylovou, aldehydovou, hydrohalogenidovou skupinu, skupinu smíšeného anhydridu, azidovou, hydrazidovou, maleimidovou, isokyanátovou nebo epoxidovou skupinu, nechá reagovat v molárnim poměru (A+B) :C = 1:0,5 až 1:10 a získaný roztok se udržuje 1 až 20 hodin při teplotě O. až 20 °C.
5. Způsob podle lo C použije

Způsob podle lo C použije bodu 4, vyznačujici se tim, že se jako vysokomolekulárni zesitovaci činidkopolymer akrylové kyseliny nebo anhydridu kyseliny maleinové.

bodu 5, vyznačujici se tim, že se jako vysokomolekulárni zesitovaci činidkopolymer N-vinylpyrrolidonu a anhydridu kyseliny maleinové.