CS273467B1 - Method of precallicreine's and hageman's factor's from blood plasma standard concentrates preparation - Google Patents
Method of precallicreine's and hageman's factor's from blood plasma standard concentrates preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS273467B1 CS273467B1 CS623388A CS623388A CS273467B1 CS 273467 B1 CS273467 B1 CS 273467B1 CS 623388 A CS623388 A CS 623388A CS 623388 A CS623388 A CS 623388A CS 273467 B1 CS273467 B1 CS 273467B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- concentrate
- hageman factor
- precallikrein
- blood plasma
- factor fragment
- Prior art date
Links
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 title claims abstract description 28
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 102000000429 Factor XII Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims abstract description 7
- -1 hydroxyalkyl methacrylate Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920002818 (Hydroxyethyl)methacrylate Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical class CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical class [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 4
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 claims abstract 2
- 238000011033 desalting Methods 0.000 claims abstract 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 claims description 6
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 claims description 6
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 5
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 claims description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 5
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 claims description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 239000003914 blood derivative Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 abstract 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 8
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 6
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HBOMLICNUCNMMY-KJFJCRTCSA-N 1-[(4s,5s)-4-azido-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-KJFJCRTCSA-N 0.000 description 1
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical class NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011399 Anion exchange proteins Human genes 0.000 description 1
- 108050001632 Anion exchange proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010009192 Circulatory collapse Diseases 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000010631 Kininogens Human genes 0.000 description 1
- 108010077861 Kininogens Proteins 0.000 description 1
- 102000002397 Kinins Human genes 0.000 description 1
- 108010093008 Kinins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 239000002607 heparin antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 206010040560 shock Diseases 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Description
Vynález se týká způsobů přípravy standardních koncentrátů prekallikreinu a fragmentu Hagemanova faktoru z krevní plasmy, zejména z intaktní citrátové krevní plasmy, a to k diagnostickým účelům.
Plasmatický prekallíkrein slouží jako jediné specifické agnes k laboratornímu průkazu přítomnosti fragmentu Hagemanova faktoru (aktivátoru prekallikreinu, také HFf) v preparátech připravovaných z krevní plasmy. HFf je iniciátorem pochodů, které v krevním oběhu vedou k uvolnění kininů z plasmatických kininogenů známým mechanismem. Kontaminace fragmentem Hagemanova faktoru u intravenosně podávaných krevních derivátů znamená tedy pro příjemce ohrožení, spočívající v prudkém poklesu krevního tlaku, vedoucím až k cirkulačnímu kolapsu. Dosavadní výrobní postupy pro přípravu stabilního plasmatíckého roztoku, albuminu nebo intravenosního gama-globulinu nezabranují tomu, aby HFf, přítomný ve výchozím materiálu buď jako takový, nebo v podobě prekurzoru, nepřecházel jako kontaminující složka do konečného preparátu. Stanovení hladiny HFf, jehož hypotenzívní účinky jsou známy, může být ukazatelem případné reaktivity derivátů krevní plasmy při klinických aplikacích.
Průkaz fragmentu Hagemanova faktoru v klinicky používaných preparátech je založen na tom, že preparát, který tento faktor obsahuje, je schopen aktivovat prekallíkrein na enzym kallikrein, jehož uvolněné množství je úměrné přítomnému aktivátoru prekallikreinu a sta>noví se pomocí specifického substrátu. Někteří autoři používají substrátů na bázi esterů bázických aminokyselin (cit. lit. 1, 2), v pozdější době jsou však vesměs užívány specifičtější chromogenní oligopeptidické deriváty p-nitroanilinu (cit. lit. 3). Aby hylo možno standardizovat metodu stanovení HFf v preparátech připravených z krevní plasmy, je nutno mít k dispozici standardní prekallíkrein a k jeho přípravě standardní aktivátor prekallikreinu.
Jsou známy způsoby oddělování prekallikreinu z krevní plasmy sloupcovou chromatografií na sorbentech typu dietylaminoetylderivátů dextranu, které jsou všeobecné známé a komerčně dostupné (cit. lit. 4). Protože povrchový elektrický náboj prekallikreinu je blízký povrchovému elektrickému náboji imunoglobulinu G, lze pro tyto účely použít i postupy popsané pro izolaci této frakce z krevní plasmy (cit. lit. 5). Nevýhodou těchto postupů, založených na sloupcové chromatografii, je především několikahodinové trvání separačního procesu, při kterém ve zpracovávané plazmě může docházet k aktivaci prekallikreinu v enzym kallikrein vlivem kofaktorů aktivace přítomných v krevní plasmě a vlivem negativního elektrického náboje povrchu skleněného separačního zařízení. Je znám způsob, jak zabránit nežádoucí aktivaci prekallikreinu: Pro jeho separaci z plasmy je nutno.používat chromatografických trubic s intaktním povrchem, tj. prostých elektrického náboje, nebo skleněných trubic potažených uvnitř vrstvou silikonu.
Způsobem podle vynálezu se podařilo odstranit popsané nevýhody dosavadních postupů, především tedy dlouhotrvající separaci a značné nároky na speciální úpravu aparatury a současně využít zbytků krevní plasmy po isolaci prekallikreinu k přípravě koncentrátu fragmentu Hagemanova faktoru. Jeho podstata spočívá v tom, že se výchozí surovina s přísadou látky neutralizující negativní elektrické náboje, například hexadimethrinbromidu, předem ekvilibrovaná pufrem s hodnotou pH 6,3 až 8,0 a molarity 0,0175 až 0,1, uvádí v zařízení prostém povrchového elektrického náboje, za stálého pohybu ve styk s anexem, zejména na bázi dietylaminoetylderivátů polysacharidů, například dextranu nebo celulosy, nebo na bází hydroxyalkylmetakrylátového nebo glykolmetakrylátového gelu, předem promytým ekvilibračním pufrem, po ukončené sorpci se roztok nesorbovaných bílkovin, obsahujici koncentrát prekallikreinu, oddělí, například filtrací, a to opět v zařízení prostém povrchového elektrického náboje, potom se podíl bílkovin, sorbovaný na anexu a obsahující prekursor fragmentu Hagemanova faktoru, uvolní elucí pufrem s hodnotou pH ekvílibračního pufru a s obsahem chloridu sodného nejméně 1,0 mol/1, získaný eluát se odsolí, například dialýzou, a podrobí proteolýze, například kallikreinem, a uvolněný HFf se izoluje na katexu, například na bázi karboxymetylderivátu dextranu nebo celulosy, po ekvilibraci eluátu i katexu pufrem s hodnotou pH 5,5 až 6,0 elucí solným gradientem, například v koncentraCS 273 467 Bl ·<£( !
&
'i ci od 0 do 1,0 mol/1 chloridu sodného.
Při provedení způsobu podle vynálezu spočívá základní opatření v uvedení krevní plasmy do styku s anexem v nádobě s intaktním povrchem, tzn. prostým elektrického náboje, za přesně definovaných podmínek pH a iontové síly, za kterých se prekallikrein spolu s imunoglobulinovou frakcí nesorbuje na anex. Nesorbovaný podíl slouží jako koncentrát prekallikreinu. Podíl bílkovin, vázaný na anex, obsahující prekurzor fragmentu Hagemanova faktoru, se uvolní elucí roztokem se zvýšenou iontovou silou a slouží k přípravě koncentrátu HFf, Získaná frakce se po odstranění solí podrobí proteolytickému štěpení, čímž se obohatí o fragment Hagemanova faktoru, který se potom dále za definovaných podmínek separuje sloup covou chromatografií na katexu. Koncentrát HFf se zpracuje známým způsobem, uvedeným pro ilustraci v příkladu 2, na standard aktivátoru prekallikreinu.
Způsob podle vynálezu aplikací vsádkového postupu v nádobě (respektive v zařízení) prosté povrchového elektrického náboje umožnil zkrácení přípravy koncentrátu prekallikreinu na dobu nejvýše 30 min. a tím i podstatně snížil nebezpečí vzniku autoaktivačních nebo proteolytických pochodů v plasmě. Nevyžaduje žádné speciální chromatografické aparatury a současně využívá sorbované frakce bílkovin k přípravě koncentrátu HFf. Při dodržení doporučených podmínek podle vynálezu jsou oba koncentráty stálé kvality.
Výhodou způsobu podle vynálezu je, že umožňuje velmi jednoduchou, rychlou a hospodárnou přípravu složek plasmy nutných pro kontrolu přítomnosti fragmentu Hagemanova faktoru v preparátech získávaných z lidské krevní plasmy.
Bližší podrobnosti způsobu podle vynálezu vyplývají z následujících příkladů provedení, které předmět vynálezu pouze ilustrují, ale nijak neomezují.
Příklad 1
a) Příprava koncentrátu prekallikreinu
Ke 100 ml intaktní lidské citrátové plasmy se přidá 5 mg hexadimethrinbromidu (syntetický antagonista heparinu, Polybren) a potom se plasma ekvilibruje dialýzou při 4 °C proti pufru Tris-HCl (0,1 mol/1, pH 8,0) s přísadou hexadimethrinbromidu v koncentraci 50 mg/1. K ekvilibrované plasmě se přidá 8 g dietylaminoetylderivátu dextranu s velikostí částic 40 až 120 /im nebe 10 g dietylaminoetylderivátu celulosy nebo 8 g dietylaminoetylderívátu hydroxyetylmetakrylátu, předem promytých ekvilibračním pufrem a směs se míchá za mírného otáčení 20 minut v polyetylenové nádobě. Po skončené sorpci se sorbent odsaje na odsávačce opatřené rychle tekoucím filtračním papírem a filtrát se jímá do polyetylenového sáčku nebo nádoby. Získaný filtrát je koncentrát prekallikreinu. Popsaným postupem se získá veškerý prekallikrein přítomný ve výchozí plasmě, spolu s IgG tvoří 95 až 98 % bílkoviny koncentrátu. Počet mezinárodních jednotek prekallikreinu se stanoví aktivací standardním aktivátorem prekallikreinu.
b) Příprava koncentrátu fragmentu Hagemanova faktoru
Anex, oddělený v předchozí operaci od kapalného podílu, na kterém je zachycena bílkovinná frakce obsahující prekursúr fragmentu Hagemanova faktoru, se eluuje dvakrát po 150 ml pufru o vysoké iontové síle, například pufrem Tris-HCl (0,1 mol/1, pH 8,0) s přísadou 2,0 mol/1 chloridu sodného. Eluát o objemu zhruba 300 ml se zbaví solí dialýzou proti destilované vodě (nebo diafiltrací) a diafiltrací se zahustí na objem 50 ml. Přídavkem 10 ml roztoku aktivního enzymu kallikreinu (aktivita 80 až 100 U/ml) a minimálně 8 hodinovou inkubací při 25 °C se tento podíl obohatí o HFf. Směs se frakcionuje na sloupci katexu (CM Sephadex, velikost částic 40 až 120 /un, velikost sloupce 1,6 x 40 cm) solným gradientem od 0 do 1,0 mol/1 chloridu sodného v acetátovém pufru (0,1 mol/1, pH 5,9). Podíly obsahující HFf se spojí a po odstranění solí dialýzou proti destilované vodě (nebo diafiltrací) se zahustí na takový objem, aby získaný koncentrát fragmentu Hagemanova faktoru vykazoval aktivitu nejméně 90 U/ml. Spolu s albuminem tvoří HFf více než 98 % bílkoviny.
CS 273 467 Bl
Příklad 2
Příprava standardu aktivátoru prekallikreinu v albuminu
Pro přípravu standardu aktivátoru prekallikreinu se použije komerční albumin, ze kterého se odstraní popřípadě přítomné inhibitory kallikrelnového systému vazbou na sorbent s afinitou ke glykoproteinům (například na sítované agarese s navázaným lektinem Concanavalinem A) a volný kallikrein postupem popsaným v přikladu 1, odst. a) pro separaci prekallikreinu. Sorbovaný albumin se eluuje pufrem o vysoké iontové síle postupem popsaným v příkladu 1, odst. b), stejným postupem se odstraní soli a roztok se zahustí ultrafiltrací. Koncentrát fragmentu Hagemanova faktoru se smísí s koncentrátem albuminu tak, aby výsledná koncentrace bílkoviny byla přibližně 5 % a aktivita fragmentu Hagemanova faktoru srovnatelná s mezinárodním standardem aktivátoru prekallikreinu (National Institute for Biological Standards and Control, London). Osmolalita roztoku se upraví na 300 mOs/kg přídavkem chloridu sodného.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob přípravy standardních koncentrátů prekallikreinu a fragmentu Hagemanova faktoru z krevní plasmy, zejména z intaktní citrátové lidské krevní plasmy za použití obecně známých postupů a materiálů jako je sloupcová chromatografie na sorbentech typu dietylaminoetylderivátů polysacharidů nebo na bázi hydroxyalkylmetakrylátového nebo glykolmetakrylátového gelu v zařízeních prostých elektrického náboje pro koncentrát prekallikreinu a na sorbentech typu karboxymetylderivátů s využitím eluce, odsolení a proteolýzy pro koncentrát fragmentu Hagemanova faktoru, vyznačující se tím, že se výchozí surovina s přísadou látky neutralizující negativní elektrické náboje, například hexadimethrínbromidu, předem ekvílibrovaná pufrem s hodnotou pH 6,3 až 8,0 o molaritě 0,0175 až 0,1, uvádí v prostoru prostém povrchového elektrického náboje, za stálého pohybu ve Styk s anexem, zejména na bázi dietylaminoetylderivátů polysacharidů, například dextranu nebo celulózy,, nebo na bázi hydroxyalkylmetakrylátového nebo glykolmetakrylátového gelu, předem promytým ekvilibračním pufrem, po ukončené sorpci se roztok nesorbovaných bílkovin, obsahující koncentrát prekallikreinu oddělí, například filtrací, a to opět v prostoru prostém povrchového elektrického náboje, potom se podíl bílkovin, sorbovaný na anexu a obsahující prekursor fragmentu Hagemanova faktoru, uvolní eluci pufrem s hodnotou pH ekvilibračního pufru a s obsahem chloridu sodného 1,0 až 2,0 mol/1, získaný eluát se odsolí, například dialýzou a podrobí proteolýze, například kallikreinem a uvolněný fragment Hagemanova faktoru se izoluje na katexu, například na bázi karboxymetylderivátů dextranu nebo celulosy, po ekvilibraci eluátu i katexu pufrem s hodnotou pH 5,5 až 6,0, eluci solným gradientem, například v koncentraci od 0 do 1,0 mol/1 chloridu sodného.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS623388A CS273467B1 (en) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Method of precallicreine's and hageman's factor's from blood plasma standard concentrates preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS623388A CS273467B1 (en) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Method of precallicreine's and hageman's factor's from blood plasma standard concentrates preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS623388A1 CS623388A1 (en) | 1990-07-12 |
| CS273467B1 true CS273467B1 (en) | 1991-03-12 |
Family
ID=5408893
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS623388A CS273467B1 (en) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Method of precallicreine's and hageman's factor's from blood plasma standard concentrates preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS273467B1 (cs) |
-
1988
- 1988-09-20 CS CS623388A patent/CS273467B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS623388A1 (en) | 1990-07-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2220501C (en) | Novel factor ix purification methods | |
| JP3094167B2 (ja) | 免疫血清グロブリンの精製方法 | |
| CA2024667C (en) | Process for preparing a concentrate of blood coagulation factor viii-von willebrand factor complex from total plasma | |
| US6670455B1 (en) | Process for the preparation in pure form of the protease activating blood clotting VII, its proenzyme or a mixture of both proteins by means of affinity chromatography | |
| US5112949A (en) | Method of and apparatus for separating proteins | |
| US4138287A (en) | Purifying and isolating method for hepatitis virus to use in preparing vaccine | |
| SU1523046A3 (ru) | Способ очистки человеческого @ -интерферона | |
| US5614500A (en) | Compositions containing highly purified factor IX proteins prepared by immunoaffinity chromatography | |
| US6746607B1 (en) | Use of an adsorbent gel for eliminating and purifying biomolecules | |
| US5055557A (en) | Ultrapurification of factor IX and other vitamin K-dependent proteins | |
| JP2573467B2 (ja) | 第ｉｘ因子タンパク質を含有する治療用途に適した薬剤的組成物 | |
| US4065445A (en) | Pregnancy-specific β1 -glycoprotein and process for isolating it | |
| CS273467B1 (en) | Method of precallicreine's and hageman's factor's from blood plasma standard concentrates preparation | |
| SU513595A3 (ru) | Способ выделени орготеина | |
| FI78303C (fi) | Foerfarande foer avskiljande av lipoproteiner med hjaelp av derivatiserad polyhydroximetylen. | |
| JP2001323000A (ja) | Ｆｓｈ（卵胞刺激ホルモン）とｌｈ（黄体化ホルモン）の分離と精製工程 | |
| CA1151542A (en) | Process for preparing the third component of the complement from human blood plasma | |
| RU2042358C1 (ru) | Способ получения концентрата фактора ix | |
| JPS59167519A (ja) | 不活化トロンビンゲルにより血漿タンパク質混合液からフイブリノ−ゲンを除去する方法 | |
| JPH01196295A (ja) | プロウロキナーゼからの発熱性物質除去方法 | |
| AU781741B2 (en) | Process for the preparation in pure form of the protease activating blood clotting factor VII, its proenzyme or mixture of both proteins by means of ion-exchange chromatography | |
| JPS59109172A (ja) | カリクレインの精製法 | |
| AU759379B2 (en) | Novel factor IX purification methods | |
| JPS5810522A (ja) | 不活化トロンビンゲルによるアンチトロンビン３の精製法 | |
| Wickerhauser | A Simple Method For Preparation Of Nonthrombogenic Prothrombin Complex |