CS273361B1 - Method of biosensors preparation on base of immobilized enzymes,cells and their fragments - Google Patents
Method of biosensors preparation on base of immobilized enzymes,cells and their fragments Download PDFInfo
- Publication number
- CS273361B1 CS273361B1 CS435588A CS435588A CS273361B1 CS 273361 B1 CS273361 B1 CS 273361B1 CS 435588 A CS435588 A CS 435588A CS 435588 A CS435588 A CS 435588A CS 273361 B1 CS273361 B1 CS 273361B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- weight
- enzyme
- mixture
- polyethylene
- polyethylene foil
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 title claims description 5
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 title claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 26
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims abstract description 20
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 239000011888 foil Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000003822 epoxy resin Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920000647 polyepoxide Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 229920002959 polymer blend Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000011149 active material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 241000352333 Amegilla alpha Species 0.000 claims 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 4
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 4
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- HMJBXEZHJUYJQY-UHFFFAOYSA-N 4-(aminomethyl)octane-1,8-diamine Chemical compound NCCCCC(CN)CCCN HMJBXEZHJUYJQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 102000020006 aldose 1-epimerase Human genes 0.000 description 1
- 108091022872 aldose 1-epimerase Proteins 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- 238000006193 diazotization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- XJDNKRIXUMDJCW-UHFFFAOYSA-J titanium tetrachloride Chemical compound Cl[Ti](Cl)(Cl)Cl XJDNKRIXUMDJCW-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu přípravy biosenzorů na bázi imobilizováných enzymů, buněk a jejich fragmentů.
Využití enzymů a celých biochemických systémů v aqalytícké chemii přináší výrazný pokrok daný neobyčejně vhodnými vlastnostmi enzymů pro tuto aplikační sféru. Jedná se především o vysokou substrátovou a účinkovou specifiku, stereospecifitu, mírné reakční podmínky a značnou rychlost enzymových reakcí. Na základě těchto vlastností je při enzymové katalýze snížena na mininum možnost ovlivnění výsledku analýz tvorbou vedlejších produktů reakce, popřípadě reakcemi jiných složek analyzované směsi látek. Proto je možno pomocí enzymové katalýzy stanovit určitou substanci v bohaté směsi ostatních látek bez její předchozí izolace nebo zdlouhavé úpravy vzorku před vlastní analýzou.
Průběh enzymové reakce je možno sledovat bu3 následnými chemickými reakcemi, například vzniklých reakčnich produktů, nebo s výhodou fyzikálními nebo fyzikálně chemickými metodami. Vedle velmi často používané spektrofotometrie má velký význam spojení enzymové reakce s elektrochemickými čidly detegujícími substráty, produkty nebo jiné látky ovlivňující průběh enzymové reakce. Z enzymových reakcí je možno elektrochemicky sledovat takové, pří kterých dochází ke změnám koncentrací kyslíku, peroxidu vodíku, oxidu uhličitého, NAD/P/H, H+, NH4 +, popřípadě dalších iontů, například CN~ a podobně. Největší možnosti jsou tedy při elektrochemickém sledování průběhu reakcí katalyzovaných oxidoreduktasami, hydrolasami, lyasami a ligasami.
Použití volných enzymů naráží v některých případech na technické nebo ekonomické problémy jejich získávání, obtížnou regeneraci z reakční směsi, poměrně malou stabilitu volných enzymů atd. Z těchto důvodů je velmi atraktivní imobilízace enzymů a následná fixace v blízkosti elektrochemického čidla, čímž se získá biosenzor opakovaně použitelný při stovkách analýz bez jakékoliv spotřeby chemikálií (v některých případech pouze pufru). Velkou výhodou těchto biosenzorů je rychlost, přesnost a reprodukovatelnost stanovení ve spojení s vysokou specifičností analýz a dále možnost stanovení látek v barevných, kalných nebo fluoreskujících vzorcích, kde jsou jiné způsoby detekce obtížné. Tyto skutečnosti umožňují využití biosenzorů v nejrůznějších oblastech chemie, chemické technologie, farmaceutického a potravinářského průmyslu, v moderních biotechnologiích, v klinické biochemii a v oblasti ochrany životního prostředí.
Analytická využitelnost biosenzorů je podstatně ovlivněna jejich stabilitou. Mezi hlavní faktory, které ovlivňují stabilitu biosenzorů, patří způsob imobilízace, množství navázaného enzymu, čistota enzymu, podmínky enzymové reakce a stabilita elektrochemického čidla. Z uvedených faktorů je způsob imobilízace nejsnáze ovlivnitelným faktorem, kterému je věnována náležitá pozornost.
Pro přípravu biosenzorů byla využita celá řada postupů imobilízace enzymů vypracovaná v souvislosti s přípravou heterogenních biokatalyzátorů. Jako klasické může být považováno Guilbaultovo rozdělení metod přípravy enzymových elektrod:
1. Použitím rozpustného enzymu, který se oddělí v blízkosti elektrochemického čidla od okolního prostředí semipermeabilní membránou (tzv. pseudoímobilizace).
2. Enzym se zachytí ve struktuře gelu na povrchu senzoru.
3. Enzym je některou z imobilizačníčh technik vázán na přirozené nebo synthetické membrá ny.
CS 273361 Bl
4. Enzym je sorbován na povrchu membrány a potom zesítěn bifunkěními činidly (například glutaraldehydem).
Nejčastěji se imobilizace provádí zachycením ve struktuře gelu at již přírodního (želatiny, alginátů, carrageenanů a podobně) nebo synthetického (polyakrylamidového gelu). Imobilizace enzymu na membrány se nejčastěji provádí pomocí síťujících činidel, především glutaraldehydu, za přídavku hovězího sérového albuminu nebo jiné bílkoviny nebo 1,8-diamino-4-aminomethyloktanu a podobně. Při imobilizaci enzymu na kolagenovou membránu bylo využito také její aktivace v sekvenci přípravy esterů, hydrazidů a azidů karboxylových kyselin. Enzymová elektroda byla také připravena imobilizaci enzymu na polyakrylátovou kyselinu modifikovanou p-nitroanilinem s následnou redukcí nitroskupiny chloridem titanitým a diazotací vytvořeného aromatického aminu.
Současné biosenzory připravované zabudováním enzymu do syntetických nebo přírodních gelů jsou mechanicky málo pevné. Stabilita takovéhoto čidla je potom poměrně nízká.
Způsob přípravy biosenzorů na bázi zmobilizovaných enzymů, buněk a jejich fragmentů podle vynálezu spočívá v zabudování enzymově aktivního materiálu do polymerní matrice, vytvořené z makromerů na bázi epoxidové pryskyřice dlaňového typu o molekulové hmotnosti 301 až 2 500 a makromerů na bázi <=< , Gr -diaminopolyethylenoxidu o molekulové hmotnosti 208 až 4 000, obsahující 28 až 65 hmot. % epoxidové složky a 70 až 30 hmot. % diaminopolyethylenoxidové složky. Imobilizovaný systém, respektive polymerní matrice obsahuje 0,1 až 15 hmot. % biologického materiálu. Imobilizace podle vynálezu se provádí mícháním směsi epoxidové a diaminůpolyethylenoxidové složky v molárním poměru 1 : 0,2 až 2 po dobu 0,5 až 6 h při teplotě 35 až 120 °C. Do reakčního produktu se po ochlazení na teplotu 25 až 35 °C homogenně zamíchá enyzymově aktivní biologický materiál a vytvořená směs se nanese na podložní desku potaženou polyethylenovou fólií, po jejíž stranách jsou připevněny proužky z polyethylenové fólie o síle 10 až 40 um vymezující tlouštku připravované membrány. Vrstva směsi polymeru se přikryje deskou potaženou polyethylenovou fólií a potom se zatíží závažím o hmotnosti 2 až 5 kg. Takto upravený preparát se ponechá při teplotě 30 až 35 °C po dobu 24 až 4 h. Při tomto stání proběhne sítovací reakce za vzniku nerozpustného polymerního systému, ve kterém je zabudován enzymově aktivní biomateriál. Z takto vytvořené membrány se sejmou desky včetně polyethylenových fólií. Fixací membrány se zabudovaným enzymově aktivním materiálem na povrch elektrochemického čidla se připraví vlastní biosenzor.
Výhodou způsobu přípravy biosenzorů na bázi imobilizovaných enzymů, buněk a jejich fragmentů podle vynálezu je jednoduchost provedení, vysoká stabilita připraveného biosenzoru, dostatečně rychlá odezva a šíře lineární odezvy biosenzorů na koncentraci přidaného substrátu.
Vynález je dokumentován příklady použití, aniž by se jimi omezoval.
Příklad 1
Směs epoxidové pryskyřice dianového typu o molekulové hmotnosti 301 a makromerů na bázi d , tu* -diaminopolyethylenoxidu o molekulové hmotnosti 4 000 v molárním poměru 1 ku 0,2 se míchá 0,5 h .při 120 °C. Po ochlazení na 35 °C se do reakčního produktu homogenně zamíchá 15 % hmot. glukosaoxidasy v 0,1 M fosfátovém pufru pH 6,8 a vytvořená směs se nanese na podložní desku potaženou polyethylenovou fólií, po jejíž stranách jsou připevněny proužky z polyethylenové fólie o síle 10 um. Vrstva směsi polymeru se přikryje
CS 273361 Bl deskou potaženou polyethylenovou fólií a potom se zatíží závažím o hmotnosti 5 kg. Po 4 h stání při 35 °C se z vytvořené membrány sejmou desky včetně polyethylenových fólií. Fixací membrány se zabudovanou glukosaoxidasou na povrch kyslíkového článku se připraví biosenzor na stanovení glukosy s lineární odezvou v rozsahu koncentrací 10~^ až 105 mol .dm-\
Příklad 2
Směs epoxidové pryskyřice dianového typu o molekulové hmotnosti 2 500 a makromeru na bázi eójW - diaminopolyethylenxoxidu o molekulové hmotnos.ti 208 v molárním poměru 1 ku 2 se míchá 6 h při 35 °C. Po ochlazení na 25 °C se do reakčního produktu homogenně zamíchá 0,1 % hmot. buněčných stěn kvasinek Saccharomyces cerevisiae vykazujících invertasovou aktivitu a 10 Jí hmot. směsi glukosaoxidasy, katalasy a mutarotasy v 0,1 M fosfátovém pufru pH 6,8. Vytvořená směs se nanese na podložní desku potaženou polyethylenovou fólií, po jejíž stranách jsou připevněny proužky z polyethylenové fólie o síle 40 um. Vrstva směsi polymerů se přikryje deskou potaženou polyethylenovou fólií a potom se zatíží závažím o hmotnosti 2 kg. Po 24 h stání při 30 °C se z vytvořené membrány sejmou desky včetně polyethylenových fólií. Fixací vytvořené membrány se zabudovaným enzymovým systémem na povrch kyslíkového čidla se připraví biosenzor na stanovení sacharosy s lineární odezvou v
-5 -2 -3 rozsahu koncentrací 5.10 až 10 mol.dm .
Příklad 3
Směs epoxidové pryskyřice dianového typu o molekulové hmotnosti 1 500 a makromeru na bázi oL, VA -diaminopolyethylenoxidu o molekulové hmotnosti 2 000 v molárním poměru 1 ku 1 se míchá 3 h při 65 °C. PO ochlazení na 25 °C se do reakčního produktu homogenně zamíchá 5 Jí hmot. biomasy kvasinek Kluyveromyces lactis vykazujících 4-galaktosidasovou aktivitu a 10 Jí hmot. směsi glukosaoxidasy a katalasy v 0,1 M fosfátovém pufru pH 6,8.
Dalším postupem uvedeným v příkladu 1 a 2 se připraví biosenzor na stanovení laktosy s -4 -2 -3 lineární odezvou v rozsahu koncentrací 10 až 10 mol.dm .
Claims (1)
- Způsob přípravy biosenzorů na bázi imobilizovaných enzymů, buněk a jejich fragmentů, vyznačující se tím, že se do polymerní matrice vytvořené po 0,5 až 6 h míchání při teplotě 35 až 120 -°C směsi makromerů na bázi epoxidové pryskyřice dianového typu o molekulové hmotnosti 301 až 2 500 a oí , Ur -diaminopolyethylenoxidu o molekulové hmotnosti 208 až 4 000 v molárním poměru 1 ku 0,2 až 2, obsahující 28 až 65 Jí hmot. epoxidové složky a 70 až 30 Jí hmot. diaminopolyethylenové složky, po ochlazení na 25 až 35 °C homogenně zamíchá 0,1 až 15 Jí hmot. enzymově aktivního biologického materiálu a vytvořená směs se nanese na podložní desku potaženou polyethylenovou fólií, po jejíž stranách jsou připevněny proužky z polyethylenové fólie o síle 10 až 40 um a vrstva směsi polymerů obsahující enzymově aktivní materiál se přikryje deskou potaženou polyethylenovou fólií, zatíží se závažím o hmotnosti 2 až 5 kg a nechá se při 30 až 35 °C po dobu 24 až 4 h, potom se po sejmutí desek včetně polyethylenových fólií, připraví vlastní biosenzor fixací vytvořené membrány na povrch elektrochemického čidla.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS435588A CS273361B1 (en) | 1988-06-21 | 1988-06-21 | Method of biosensors preparation on base of immobilized enzymes,cells and their fragments |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS435588A CS273361B1 (en) | 1988-06-21 | 1988-06-21 | Method of biosensors preparation on base of immobilized enzymes,cells and their fragments |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS435588A1 CS435588A1 (en) | 1990-07-12 |
| CS273361B1 true CS273361B1 (en) | 1991-03-12 |
Family
ID=5386109
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS435588A CS273361B1 (en) | 1988-06-21 | 1988-06-21 | Method of biosensors preparation on base of immobilized enzymes,cells and their fragments |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS273361B1 (cs) |
-
1988
- 1988-06-21 CS CS435588A patent/CS273361B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS435588A1 (en) | 1990-07-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4240889A (en) | Enzyme electrode provided with immobilized enzyme membrane | |
| Zhang et al. | Development and analytical application of an uric acid biosensor using an uricase-immobilized eggshell membrane | |
| EP0944731B1 (en) | Enzyme sensor | |
| EP0856064B1 (en) | Soybean peroxidase electrochemical sensor | |
| Schneider et al. | Hydrogel matrix for three enzyme entrapment in creatine/creatinine amperometric biosensing | |
| US20100028923A1 (en) | Cross-reactive sensors | |
| Mascini et al. | Clinical uses of enzyme electrode probes | |
| Tsuchida et al. | Immobilization of D-glucose oxidase onto a hydrogen peroxide permselective membrane and application for an enzyme electrode | |
| JP2002543396A (ja) | 化学毒素用バイオセンサとしての固定化酵素 | |
| Kovach et al. | Development and application of a histidine-selective biomembrane electrode | |
| Guilbault | [2] Enzyme electrode probes | |
| Kauffmann et al. | Enzyme electrode biosensors: theory and applications | |
| EP0351950A2 (en) | Use of plasma to immobilize protein on polymeric surfaces | |
| Guilbault et al. | Preparation and analytical uses of immobilized enzymes | |
| Guilbault | Analytical uses of immobilized enzymes | |
| Chauhan et al. | Covalent immobilization of uricase inside a plastic vial for uric acid determination in serum and urine | |
| CS273361B1 (en) | Method of biosensors preparation on base of immobilized enzymes,cells and their fragments | |
| US5190872A (en) | Immobilized alcohol utidase for use in an alcohol measuring apparatus | |
| Guilbault et al. | Enzymic methods of analysis | |
| JP2648361B2 (ja) | 選択透過膜およびそれを用いる電極 | |
| Male et al. | Novel FIA amperometric biosensor system for the determination of glutamine in cell culture systems | |
| Matsumoto et al. | A novel method for the assay of α-glucosidase inhibitory activity using a multi-channel oxygen sensor | |
| JP2651019B2 (ja) | 選択透過膜，それを用いる電極及び酵素電極 | |
| CS254645B1 (cs) | Způsob přípravy enzymové, resp. hybridní elektrody | |
| Yoda | [5] Multienzyme membrane electrodes |