CS273084B1 - Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation - Google Patents
Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS273084B1 CS273084B1 CS655988A CS655988A CS273084B1 CS 273084 B1 CS273084 B1 CS 273084B1 CS 655988 A CS655988 A CS 655988A CS 655988 A CS655988 A CS 655988A CS 273084 B1 CS273084 B1 CS 273084B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- beta
- glucan
- gluco
- fraction
- carboxymethyl
- Prior art date
Links
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 title abstract 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 8
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 1
- 241000222480 Schizophyllum Species 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 alkali metal salt Chemical class 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 108010001062 polysaccharide-K Proteins 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
1 ,CS 273 084 B1
Vynález sa týká sposobu přípravy definovaných frakoií sodnej soli karboxymetyl--(1*6)-heta-D-gluko-(1+3)-beta-D-gíukánu.
Stěnový (1-*6)-beta-D-gluko-(l*3)-beta-D-glukán izolovaný z kvasiniek, húh a lišaj-níkov zvyšuje rezistenoiu organizmov voči infekčným a malígnyra ochoreniam. Je doležitouadjuvantnou složkou vakcín a významným induktorom krvitvorby živočichov [n.R. Diluzio,Springer Semin. Iramunopathol., 8, 387, 1985]· Biologické efekty tohto polysacharidu(imunomodulačný, antihakteriálny, antivirový a antitumorový) úzko súvisia s jeho-mole-kulovými parametrami. Napr. u sohizofylanu, extracelulámeho polysacharidu produkované-ho hubami Schizophyllum commune, sa zistilo, že podmienkou antitumorovej aktivity nasarkom 180 je molekulová hmotnost nad 5x10^ Da, optimálně výše 2x10^ Da [t. Kojima, K. Tabata, W. Itoh, T. Yanaki, Agric. Biol. Chem., 50 (1), 231-232, 1986]. Tiež hol sle-dovaný protinádorový účinok a protistafylokoková aktivita rozpustného glukánu, připra-veného z partikulárneho glukánu z huniek kvasiniek Sacoharorayces oerevisiae jjr. R. DiLuzio, D. Ir. Williams, R. B. McNamee, B. F. Edwarda, A. Kitahama, Int. J. Cancer, 24,773-779, 1979]. Sodná soi karboxymetyl-(l*6)-beta-D-gluko-(l-*3)-beta-D-glukánu, ktorása dá připravit' chemickou modifikáciou (l->ó)-beta-D-gluko-(1->3)-beta-D-glukánu, izolo-vaného zo Saccharomyces cerevisiae (AO 261819, P7 1789-87; 270103 , EV 3944-86), je lát-kou s poměrně širokou di3trihúciou molekulovej hmotnosti.
Tieto nedostatky je možné odstrániť přípravou jej definovaných frakcií spSsobompódia vynálezu. Podstata vynálezu spočívá v tom, že 0,1 až 0,5 %-ný roztok sodnej solikarboxymetyl-(1-^6)-beta-D-gluko-(1-»3)-beta-D-glukánu v 0,3 až 1 %-nom roztoku alkalic-kej soli minerálnej kyseliny s výhodou v chloride sodnom aleho draselnom, sa prezrážaorganickým rozpúšťadlora rozpúšťajúcim sa vo vodě, krotým raože byť aceton, n-propylalko-hol, izopropylalkohol, etylalkohol, dioxán apod. Oddělí sa hrubá predfrakcia a získanýroztok sa postupné opakované zráža organickým rozpúšťadlom, aké sa použilo na prezrá-žanie. Získané frakcie sa oddelia (napr. odcentrifugovaním) a vysušia z éteru. Předvysušením sa mážu ešte přečistit prezrážaním rovnakým organickým rozpúšíadlora.
Riešenie pódia vynálezu umožňuje pripraviť definované frakcie sodnej soli karbo-xyraetyl-(1-i6)-beta-D-gluko-(1->3)-beta-D-glukánu s definovaným a opakovateiným zložením.
Uvedené příklady ilustrujú, ale neobmedzujú predmet vynálezu. Příklad 1 1 g sodnej soli karboxymetyl-(1*6)-beta-D-gluko-(1+3)-beta-D-glukánu sa rozpustív 250 ml 0,5 % hmot. vodného roztoku NaCl. Nerozpustný podiel sa oddělí odstředěním. K čirému roztoku sa přidá 220 ml acetonu, až vznikne jemná suspenzia. Táto sa ochladína teplotu 10 °C a potom sa odstředí. Sediment (10 %) sa oddělí ako hrubá predfrakcias nejednotnou molekulovou hraotnosíou (dokaž gélovou chromatografiou). K čirému roztokusa Sálej přidá 60 ml acetonu a vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °C a odstředí. Se-diment sa rozpustí v 10 ml 0,5 % hmot. vodného roztoku NaCl, prezráža acetonem (60 ml)a dekantuje s 2x60 ml acetonu a s 2x40 ml dietyléteru. Nakoniee sa vysuší pri labora-tórnej teplote. Výtažok takto pripravenej širokej frakcie sodnej soli karboxymetyl-(1-6)--beta-D-gluko-(1-3)-beta-D-glukán je 72,3 %· Jej limitné’viskozitné Číslo stanovenév 0,1 H vodnom roztoku NaCl při 25 °C je -0,966 dl.g”\ Molekulová hmotnost vrcholu chro-matografického záznamu vztiahnutá na kalibraoné Standardy dextránu je 1,02 x 10^ Da.Příklad 2
Prakcia z příkladu 1 v množstve 1,2 g sa rozpustí v 300 ml 0,5 % hmot. vodnéhoroztoku NaCl. Potom sa zráža 296 ml acetonu a vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °Ca odstředí. Sediment sa oddělí (9,3 %) ako írakcia s nejednotnou molekulovou hmotnos-ťou (gélovou chromatografiou sa získá trojvrcholový záznam frakcie). Supernatant sazráža Sálej s 20 ml acetónom a po ochladení na 10 °C sa suspenzia odstr.edí. Sediment
Claims (3)
- CS 273 084 B1 2 sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Výťažok frakcie je 45,9 %. Supernatant sa po-užije v příklade 3. 0,55 S vysušeného sedimentu sa rozpustí v 138 ml 0,5 % hmot. vodné-ho roztoku NaCl. Roztok sa zráža s 123 ml acetonu a vzniknutá suapenzia sa po ochlade-ní na 10 °C odstředí. Získaný sediment sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Takto sazíská frakcia I, ktorej výťažok je 11 %. Chromatogram tejto frakcie má 2 píky, a to1,5x10^ Da a 1,6x10^ Da. Získaný supernatant sa ďalej zráža s 20 ml acetonu. Vypadnezrazenina, ktorá sa oddělí po ochladení na 10 °C odstředěním. Po prezrášaní a vysušeníako v příklade 1 sa získá frakcia II (výťažok 20,5 %). Jej J^] stanovené ako v příklade1 je 1,193 dl.g"^ a molekulová hmotnost' z chromatografického záznamu je 2,3x10^ Da.Supernatant po oddělení frakcie II sa ďalej zráža s prehytkom acetonu (40 ml) a poochladení na 10 °C sa zrazenina odstředí. Po prezrášaní a vysušení ako v příklade 1sa získá frakcia III (výtažok 9,7 %)· Jej limitné viskozitné číslo a molekulováhmotnost stanovené ako v příklade 1 sú 1,074 dl.g a 6,75 x 10 Da. Příklad 3 Supernatant z příkladu 2 sa zráža s 20 ml acetonu. Vzniknutá suspenzia sa ochladí na10 °C, odstředí sa a sediment sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Získá sa frakciaIV, ktorá gélovou chromatografiou dává dvojpíkový záznam. Supernatant po oddělení frak-cie IV sa ďalej zráža 20 ml acetonu, suspenzia sa ochladí na 10 °C, odstředí a sedi-ment sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Získá sa frakcia V (výťažok 7,7 %) s dvoj-pikovým chromatografickýra záznamom. Supernatant po oddělení frakcie V sa zráža s 20 mlacetonu, vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °C, odstředí a spracuje ako v příklade 1.Získá sa frakcia VI (výťažok 10,5 %). Limitné viskozitné číslo a molekulová hmotnosťstanovené ako v příklade 1 sú 1,012 dl.g-1 a 2,9x103 Da. Supernatant získaný oddělenímfrakcie VI sa zráža s naďbytkom acetonu (60 ml), suspenzia sa ochladí na 10 °0, odstře-dí a sediment sa spracuje ako v příklade 1. Získá sa frakcia VII (výťažok 8,8 %). Jejlimitné viskozitné číslo a molekulová hmotnost' stanovená ako v příklade 1 sú 0,657dl.g-1 a 8,6x10^ Da. Vynález može nájsť uplatnenie v humánnej a veterinárnej medicíně ako imunostimu-látor, v ohemickom priemysle ako referenčné materiály pre kvapalinovú-chromatografiu. PRBDMBT VYUÁLEZV1. Spásoh přípravy definovaných frakcií sodnej soli karhoxyraetyl-(1-*6)-heta-D-gluko--(1->3)-heta-D-glukánu vyznačujúci sa tým, že 0,1 až 0,5 %-ný roztok sodnej solikarhoxymetyl-(l-»6)-heta-D-gluko-(1->3)-heta-D-glukánu v 0,3 až 1,0 %-nom vodnom roz-toku alkalickej soli minerálnej kyseliny, po predzrážaní organickým rozpúšťadiomrozpúšťajúoim sa vo vodě a oddělení hruběj predfrakcie, sa postupné opakované zrážarovnakým organickým rozpúšťadiom, získané frakcie sa oddelia a vysušia z éteru.
- 2. Spfisoh přípravy pódia hodu 1 vyznačujúci sa tým, že ako alkalická sol’ minerálnejkyseliny sa použije chlorid sodný.
- 3. SpSsoh přípravy pódia hodu 1 vyznačujúci sa tým, že ako organické rozpúšťadlo roz-púšťajúce sa vo vodě sa použije aceton.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS655988A CS273084B1 (en) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS655988A CS273084B1 (en) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS655988A1 CS655988A1 (en) | 1990-07-12 |
| CS273084B1 true CS273084B1 (en) | 1991-03-12 |
Family
ID=5412948
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS655988A CS273084B1 (en) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS273084B1 (cs) |
-
1988
- 1988-10-03 CS CS655988A patent/CS273084B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS655988A1 (en) | 1990-07-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2022962C (en) | Process for the preparation of extracts having high content in anthocyanosides | |
| EP0485614B1 (en) | Cyclodextrin derivative | |
| EP1414865B1 (en) | Isolation of glucan particles and uses thereof | |
| EP0046581B1 (en) | Process for separation of mucopolysaccharides | |
| Nishimura et al. | Bioactive chitin derivatives. Activation of mouse-peritoneal macrophages by O-(carboxymethyl) chitins | |
| US3426011A (en) | Cyclodextrins with anionic properties | |
| Tomoda et al. | Plant Mucilages. XXVI. Isolation and Structural Features of a Mucilage," Okra-mucilage F," from the Immature Fruits of Abelmoschus esculentus | |
| EP1270599B1 (en) | Salmon-origin chondroitin sulfate | |
| Flodin et al. | Separation of acidic oligosaccharides by gel filtration | |
| GB2189245A (en) | Producing modified cyclodextrins | |
| JP2702377B2 (ja) | ３位を求核基で置換されたα−Ｌ−ガラクツロン酸を含有する半合成グリコサミノグリカン類 | |
| HU188599B (en) | Process for preparing physiologically active substance designated as ch-1 | |
| EP0527236A1 (en) | Polysaccharide derivative, production thereof, and separating agent | |
| Adams et al. | The chemical constitution of lipid A from Serratia marcescens | |
| Gonda et al. | Structure and anticomplementary activity of an acidic polysaccharide from the leaves of Malva sylvestris var. mauritiana | |
| CS273084B1 (en) | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation | |
| CA2035948A1 (en) | Polysaccharides with immunomodulating properties from astragalus membranaceus and pharmaceutical compositions containing them | |
| KR920003692B1 (ko) | 다당류의 해중합 및 황산염화 방법 | |
| Ukai et al. | Polysaccharides in Fungi. I. Purification and characterization of acidic heteroglycans from aqueous extract of Tremella Fuciformis Berk | |
| GB818336A (en) | A new acid aminopolysaccharide and a process for the production thereof | |
| Stacey et al. | 313. Structure of the dextran synthesised from sucrose by a new strain of Betacoccus arabinosaceous | |
| CN101054420A (zh) | 阿拉伯半乳聚糖硫酸酯的制备方法 | |
| US5512672A (en) | Curdlan sulfate | |
| Van der Want et al. | Synthesis of linear oligomers of ε‐amino. Caproic acid: Synthesis of a tri‐, tetra‐and penta‐ω‐peptide | |
| US4973581A (en) | Glucan derivatives having tumoricidal activity |