CS271570B1 - Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 - Google Patents
Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 Download PDFInfo
- Publication number
- CS271570B1 CS271570B1 CS878303A CS830387A CS271570B1 CS 271570 B1 CS271570 B1 CS 271570B1 CS 878303 A CS878303 A CS 878303A CS 830387 A CS830387 A CS 830387A CS 271570 B1 CS271570 B1 CS 271570B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- amylase
- alpha
- liviidans
- amylace
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká kmene Streptomycez Lividans AS 28 produkujícího alfa amylázu.
Tento nový produkční průmyslový bakteriální kmen se vyznačuje vysokou produkcí exocelulárniho enzymu^/-amylázy.
Streptomycety produkují řadu extracelulárních enzymů (Williame et al., □. Gen Microbiol. 129 : 1743, 1983). Znamená to, že podobně Jako rod Bacillus mají vysoce účinný systém exportu proteinů z buňky. Vznikla proto snaha spojit dlouholetou zkušenost e fermentaci streptomycet, získanou při výrobě antibiotik, 8 produkcí některých průmyelově důležitých enzymů. Genovou manipulaci byly připraveny kmeny etreptomycet sekretujicí enzymy tyrozinázu /Katz et al·, □. Gen. Microbiol. 129 í 2703, 1983/, endoglykosidézu H /Robbine et al·, □ . Biol. Chem· 256: 10640, 1981/ a agarázu, která hydrolyzuje agarový či agaro8ový polymer /Kendall a Cullum Gene 29: 315, 1984/. V roce 1986 McKillop et al· /FEMS Microbiol· Lett. 36: 3, 1986/ uepěšně klonovali -amylázu ze Streptomyces,hydroscopiue v Streptomaces lividane· Příprava -amylázu superprodukujících streptomycet má velký význam pro přípravu cukerného sirupu o vysokém obsahu maltosy, který je žádanou surovinou pro potravinářský a kvasný průmysl.
Nový kmen Streptomyces lividans AS28 byl získán vnesením nově konstruovaného mnohokopiového plasmidu pAS28, kódujícího syntézu^/,-amylázy, do kmene Streptomyces lividans TK24· Genetické informace pro syntézu^/-amylázy byla nejprve vyčleněna z chromozomu Streptomyces limosus, kde Je přítomna v Jedné kopii a zmnožena klonováním v mnohokopiovém plasmidovóm vektoru pI0622. Rekombinovaný plaemid pSA28 je předmětem čs. АО č· 269 939. Charakteristickým znakem kmene Streptomyces lividane AS28 Je schopnost růstu na škrobnatých substrátech doplněných organickým a anorganickým dusíkem za současné produkce X-amylázy. Konečným produktem degradace škrobu Jsou oligoeacharidy· Produkční schopnosti kmene zůstávají plně zachovány Jak při submerzni vsádkovó, tak i kontinuální kultivaci· Při submerzni vsádkovó kultivaci 8 2 % škrobu Jako substrátu, kmen Streptomyces lividans AS28 produkuje 4 500 až 5 000 jednotekoó-amylázy (měřeno Spofa•amylázovým testem) na ml média·
Způsob přípravy monohokopiového plasmidu pAS28, který kóduje syntézu^-amylázy ve etreptomycetách;
Z kmene Streoptomycee limosus, producenta pZ-amylázy, byla izolována chromosomová ONA. Chromosomová ONA byla parciálně štěpena reetrikční endonukleázou Sau3AI nebo Mbol a získané reetrikční fragmenty byly rozděleny podle molekulové hmotnosti centrifugací v sacharozovém gradientu· Fragmenty o velikosti 2 až 4 kb byly použity pro ligaci in vitro do mnohokopiovóho plasmidového vektoru pI0622. Klonováním v jediném zásahovém místě plasmidového vektoru pro reetrikční endonukleázu BglII, došlo ke zrušení syntézy tyrozinázy kódované tímto plaemidem a plasmidový vektor obsahující insertované restrikční fragmenty chOfreorové DNA mohl.být po transformaci do recipientniho kmene Streptomycee lividans TK24 indentifikován v thioetrepton resistentnich, melanin neprodukujicích buňkách· Rekombinovaný plasmid pAS28 Je složen z plasmidového vektoru pI0622 (Kieser et al., MolGen. Genet. 185: 223, 1982) s ineertovaným Sau3Al nestříkáním fragmentem o velikosti 3 kb, na kterém Je lokalizován gen pro produkcieZ-amylázy. Reetrikční fragment obsahuje i zásahové místo pro reetrikční endonukleázu -PvuII, Sstl a EcoRI· Reetrikční endonukleázy KpnI a EcoRI jsou situovány mimo oblast kódující produkci-amylázy. Zásahové místo pro raetrikčni endonukleázu Sstl Je lokalizováno v oblasti kódující syntézu ©ó -amylázy a inserce do Sstl zásahového místa vede ke ztrátě produkceoC-aniylázy.
a) Morfologická pozorováni
1· Vegetativní buňky kmene Streptomyces lividans AS28 jeou Grampozitivní spojené v mnohabuňkovó mycelium.
2. Na tekutých půdách kmen S. lividans AS28 vykazuje myceliární růst. Cen zřídka roste ve dvojicích.
CS 271 570 Bl
3. Na pevných půdách je mycelium zakončeno sporami. Spory jsou termosenzitivní·
4. Růst na pevných půdách: kolonie na agaru jsou okrouhlé, světle žluté či bělové. Profil kolonii js pravidelný a plochý. Kolonie pevně vrůstají do živého agaru. Povrch kolonií je většinou hladký, ale může být na sušších agarech až drsný s četnými jiz- p? vámi.
b) Fyziologické podmínky r
1. Kmen roste striktně aerobně.
2. Teplotní optimum kmene je mezi 25 až 34 °C. Teplotní maximum je 37 až 45 °C.
3. Aktivní růst probíhá při pH 5,5 až 8,0.
4. Na Škrobnatých substrátech tvoři kmen značné množství sxocelulárniho enzymu^-amylázy. Konečným produktem štěpeni škrobu produkovanou^ó-amylázou jsou oligosacharidy. Produkované $6 -amyláza má pH optimum 8,0 a teplotní optimum 37 °C.
5. Glukóza reprimuje tvorbu^č-amylázy. ·
c) Genetická charakteristika
1. Kmen nemá detekovanou restrikční aktivitu v podmínkách používaných ke genetickým přenosům.
2. Kmen Streptomyces lividans AS28 se od kmene Streptomyces lividans Tl<24 odlišuje tím, že obsahuje plasmidovou DNA pAS28 o molekulové hmotnosti 921<b, která kóduje resistenci к thioetreptonu a produkci^Z-amylázy.
Claims (1)
- Kmen Streptomyces lividans AS28 CCM 4010 produkující alfa amylázu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS878303A CS271570B1 (en) | 1987-11-19 | 1987-11-19 | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS878303A CS271570B1 (en) | 1987-11-19 | 1987-11-19 | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS830387A1 CS830387A1 (en) | 1990-02-12 |
| CS271570B1 true CS271570B1 (en) | 1990-10-12 |
Family
ID=5433392
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS878303A CS271570B1 (en) | 1987-11-19 | 1987-11-19 | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS271570B1 (cs) |
-
1987
- 1987-11-19 CS CS878303A patent/CS271570B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS830387A1 (en) | 1990-02-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5731174A (en) | Process for the saccharification of starch | |
| Wong et al. | Genetic organization of the cellulose synthase operon in Acetobacter xylinum. | |
| Singh et al. | Production of inulinases: recent advances | |
| Maiorano et al. | Microbial production of fructosyltransferases for synthesis of pre-biotics | |
| Stasinopoulos et al. | Detection of two loci involved in (1→ 3)-β-glucan (curdlan) biosynthesis by Agrobacterium sp. ATCC31749, and comparative sequence analysis of the putative curdlan synthase gene | |
| Lamothe et al. | Genetic and biochemical characterization of exopolysaccharide biosynthesis by Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | |
| EP0120693A1 (en) | Maltogenic amylase enzyme product, preparation and use thereof | |
| IE810297L (en) | Cloned amylase | |
| JP3557289B2 (ja) | 非還元性糖質からトレハロースを遊離する組換え型耐熱性酵素 | |
| Mielenz | Bacillus stearothermophilus contains a plasmid-borne gene for alpha-amylase. | |
| Cimini et al. | Improved fructosylated chondroitin production by kfoC overexpression in E. coli K4 | |
| US20160369254A1 (en) | Truncated pullulanases, methods of production, and methods of use thereof | |
| JP3557288B2 (ja) | 還元性澱粉糖から末端にトレハロース構造を有する非還元性糖質を生成する組換え型耐熱性酵素 | |
| EP0694063B1 (en) | An alpha-amylase from pyrococcus | |
| Ananthalakshmy et al. | Optimization of levan production by Zymomonas mobilis | |
| JP2003523203A (ja) | Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ属の細菌単離体およびそれから単離されたイソマルツロース・シンターゼ遺伝子 | |
| JP3559609B2 (ja) | 組換え型酵素とその製造方法並びに用途 | |
| JP4259169B2 (ja) | 新規α−１，２−マンノシダーゼおよびその遺伝子、ならびに該酵素を用いたα−マンノシル糖化合物の製造方法 | |
| Kimura et al. | Molecular cloning of the β-cyclodextrin synthetase gene from an alkalophilic Bacillus and its expression in Escherichia coli and Bacillus subtilis | |
| CS271570B1 (en) | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 | |
| JP3557272B2 (ja) | 組換え型酵素とその製造方法並びに用途 | |
| US5395927A (en) | DNA-fragment having the cyclodextrin glycosyltranferase gene | |
| JPH099958A (ja) | スクロース代謝突然変異体 | |
| Wang et al. | Expression and characterization of an α-glucosidase from Thermoanaerobacter ethanolicus JW200 with potential for industrial application | |
| Wasko et al. | A New Protein of ${\alpha} $-Amylase Activity from Lactococcus lactis |