CS271570B1 - Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 - Google Patents
Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 Download PDFInfo
- Publication number
- CS271570B1 CS271570B1 CS878303A CS830387A CS271570B1 CS 271570 B1 CS271570 B1 CS 271570B1 CS 878303 A CS878303 A CS 878303A CS 830387 A CS830387 A CS 830387A CS 271570 B1 CS271570 B1 CS 271570B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- amylase
- alpha
- liviidans
- amylace
- Prior art date
Links
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 title description 5
- 241000187398 Streptomyces lividans Species 0.000 claims abstract description 9
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 10
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 abstract description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 abstract description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 abstract description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 2
- 235000019890 Amylum Nutrition 0.000 abstract 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 10
- 108010019077 beta-Amylase Proteins 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 6
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 5
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 5
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 2
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 101000596279 Bacillus subtilis Type II restriction enzyme BglII Proteins 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 101000892431 Proteus hauseri Type II restriction enzyme PvuII Proteins 0.000 description 1
- 241000828254 Streptomyces lividans TK24 Species 0.000 description 1
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 description 1
- 108010045649 agarase Proteins 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012365 batch cultivation Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000030414 genetic transfer Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000000856 sucrose gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká kmene Streptomycez Lividans AS 28 produkujícího alfa amylázu.
Tento nový produkční průmyslový bakteriální kmen se vyznačuje vysokou produkcí exocelulárniho enzymu^/-amylázy.
Streptomycety produkují řadu extracelulárních enzymů (Williame et al., □. Gen Microbiol. 129 : 1743, 1983). Znamená to, že podobně Jako rod Bacillus mají vysoce účinný systém exportu proteinů z buňky. Vznikla proto snaha spojit dlouholetou zkušenost e fermentaci streptomycet, získanou při výrobě antibiotik, 8 produkcí některých průmyelově důležitých enzymů. Genovou manipulaci byly připraveny kmeny etreptomycet sekretujicí enzymy tyrozinázu /Katz et al·, □. Gen. Microbiol. 129 í 2703, 1983/, endoglykosidézu H /Robbine et al·, □ . Biol. Chem· 256: 10640, 1981/ a agarázu, která hydrolyzuje agarový či agaro8ový polymer /Kendall a Cullum Gene 29: 315, 1984/. V roce 1986 McKillop et al· /FEMS Microbiol· Lett. 36: 3, 1986/ uepěšně klonovali -amylázu ze Streptomyces,hydroscopiue v Streptomaces lividane· Příprava -amylázu superprodukujících streptomycet má velký význam pro přípravu cukerného sirupu o vysokém obsahu maltosy, který je žádanou surovinou pro potravinářský a kvasný průmysl.
Nový kmen Streptomyces lividans AS28 byl získán vnesením nově konstruovaného mnohokopiového plasmidu pAS28, kódujícího syntézu^/,-amylázy, do kmene Streptomyces lividans TK24· Genetické informace pro syntézu^/-amylázy byla nejprve vyčleněna z chromozomu Streptomyces limosus, kde Je přítomna v Jedné kopii a zmnožena klonováním v mnohokopiovém plasmidovóm vektoru pI0622. Rekombinovaný plaemid pSA28 je předmětem čs. АО č· 269 939. Charakteristickým znakem kmene Streptomyces lividane AS28 Je schopnost růstu na škrobnatých substrátech doplněných organickým a anorganickým dusíkem za současné produkce X-amylázy. Konečným produktem degradace škrobu Jsou oligoeacharidy· Produkční schopnosti kmene zůstávají plně zachovány Jak při submerzni vsádkovó, tak i kontinuální kultivaci· Při submerzni vsádkovó kultivaci 8 2 % škrobu Jako substrátu, kmen Streptomyces lividans AS28 produkuje 4 500 až 5 000 jednotekoó-amylázy (měřeno Spofa•amylázovým testem) na ml média·
Způsob přípravy monohokopiového plasmidu pAS28, který kóduje syntézu^-amylázy ve etreptomycetách;
Z kmene Streoptomycee limosus, producenta pZ-amylázy, byla izolována chromosomová ONA. Chromosomová ONA byla parciálně štěpena reetrikční endonukleázou Sau3AI nebo Mbol a získané reetrikční fragmenty byly rozděleny podle molekulové hmotnosti centrifugací v sacharozovém gradientu· Fragmenty o velikosti 2 až 4 kb byly použity pro ligaci in vitro do mnohokopiovóho plasmidového vektoru pI0622. Klonováním v jediném zásahovém místě plasmidového vektoru pro reetrikční endonukleázu BglII, došlo ke zrušení syntézy tyrozinázy kódované tímto plaemidem a plasmidový vektor obsahující insertované restrikční fragmenty chOfreorové DNA mohl.být po transformaci do recipientniho kmene Streptomycee lividans TK24 indentifikován v thioetrepton resistentnich, melanin neprodukujicích buňkách· Rekombinovaný plasmid pAS28 Je složen z plasmidového vektoru pI0622 (Kieser et al., MolGen. Genet. 185: 223, 1982) s ineertovaným Sau3Al nestříkáním fragmentem o velikosti 3 kb, na kterém Je lokalizován gen pro produkcieZ-amylázy. Reetrikční fragment obsahuje i zásahové místo pro reetrikční endonukleázu -PvuII, Sstl a EcoRI· Reetrikční endonukleázy KpnI a EcoRI jsou situovány mimo oblast kódující produkci-amylázy. Zásahové místo pro raetrikčni endonukleázu Sstl Je lokalizováno v oblasti kódující syntézu ©ó -amylázy a inserce do Sstl zásahového místa vede ke ztrátě produkceoC-aniylázy.
a) Morfologická pozorováni
1· Vegetativní buňky kmene Streptomyces lividans AS28 jeou Grampozitivní spojené v mnohabuňkovó mycelium.
2. Na tekutých půdách kmen S. lividans AS28 vykazuje myceliární růst. Cen zřídka roste ve dvojicích.
CS 271 570 Bl
3. Na pevných půdách je mycelium zakončeno sporami. Spory jsou termosenzitivní·
4. Růst na pevných půdách: kolonie na agaru jsou okrouhlé, světle žluté či bělové. Profil kolonii js pravidelný a plochý. Kolonie pevně vrůstají do živého agaru. Povrch kolonií je většinou hladký, ale může být na sušších agarech až drsný s četnými jiz- p? vámi.
b) Fyziologické podmínky r
1. Kmen roste striktně aerobně.
2. Teplotní optimum kmene je mezi 25 až 34 °C. Teplotní maximum je 37 až 45 °C.
3. Aktivní růst probíhá při pH 5,5 až 8,0.
4. Na Škrobnatých substrátech tvoři kmen značné množství sxocelulárniho enzymu^-amylázy. Konečným produktem štěpeni škrobu produkovanou^ó-amylázou jsou oligosacharidy. Produkované $6 -amyláza má pH optimum 8,0 a teplotní optimum 37 °C.
5. Glukóza reprimuje tvorbu^č-amylázy. ·
c) Genetická charakteristika
1. Kmen nemá detekovanou restrikční aktivitu v podmínkách používaných ke genetickým přenosům.
2. Kmen Streptomyces lividans AS28 se od kmene Streptomyces lividans Tl<24 odlišuje tím, že obsahuje plasmidovou DNA pAS28 o molekulové hmotnosti 921<b, která kóduje resistenci к thioetreptonu a produkci^Z-amylázy.
Claims (1)
- Kmen Streptomyces lividans AS28 CCM 4010 produkující alfa amylázu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS878303A CS271570B1 (en) | 1987-11-19 | 1987-11-19 | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS878303A CS271570B1 (en) | 1987-11-19 | 1987-11-19 | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS830387A1 CS830387A1 (en) | 1990-02-12 |
| CS271570B1 true CS271570B1 (en) | 1990-10-12 |
Family
ID=5433392
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS878303A CS271570B1 (en) | 1987-11-19 | 1987-11-19 | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS271570B1 (cs) |
-
1987
- 1987-11-19 CS CS878303A patent/CS271570B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS830387A1 (en) | 1990-02-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5731174A (en) | Process for the saccharification of starch | |
| Wong et al. | Genetic organization of the cellulose synthase operon in Acetobacter xylinum. | |
| Singh et al. | Production of inulinases: recent advances | |
| Stasinopoulos et al. | Detection of two loci involved in (1→ 3)-β-glucan (curdlan) biosynthesis by Agrobacterium sp. ATCC31749, and comparative sequence analysis of the putative curdlan synthase gene | |
| Lamothe et al. | Genetic and biochemical characterization of exopolysaccharide biosynthesis by Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus | |
| Zhang et al. | Enhancing fructooligosaccharides production by genetic improvement of the industrial fungus Aspergillus niger ATCC 20611 | |
| EP0120693A1 (en) | Maltogenic amylase enzyme product, preparation and use thereof | |
| IE810297L (en) | Cloned amylase | |
| JP3557289B2 (ja) | 非還元性糖質からトレハロースを遊離する組換え型耐熱性酵素 | |
| Mielenz | Bacillus stearothermophilus contains a plasmid-borne gene for alpha-amylase. | |
| US20160369254A1 (en) | Truncated pullulanases, methods of production, and methods of use thereof | |
| JP3557288B2 (ja) | 還元性澱粉糖から末端にトレハロース構造を有する非還元性糖質を生成する組換え型耐熱性酵素 | |
| EP1257638B1 (en) | Bacterial isolates of the genus klebsiella, and an isomaltulose synthase gene isolated therefrom | |
| EP0694063B1 (en) | An alpha-amylase from pyrococcus | |
| Cimini et al. | Improved fructosylated chondroitin production by kfoC overexpression in E. coli K4 | |
| JP3559609B2 (ja) | 組換え型酵素とその製造方法並びに用途 | |
| Kimura et al. | Molecular cloning of the β-cyclodextrin synthetase gene from an alkalophilic Bacillus and its expression in Escherichia coli and Bacillus subtilis | |
| Wang et al. | Expression and characterization of an α-glucosidase from Thermoanaerobacter ethanolicus JW200 with potential for industrial application | |
| CS271570B1 (en) | Alpha amylace producing strain streptomyces liviidans as 28 | |
| JP3557272B2 (ja) | 組換え型酵素とその製造方法並びに用途 | |
| JP2004313074A (ja) | 新規α−１，２−マンノシダーゼおよびその遺伝子、ならびに該酵素を用いたα−マンノシル糖化合物の製造方法 | |
| US5395927A (en) | DNA-fragment having the cyclodextrin glycosyltranferase gene | |
| JPH099958A (ja) | スクロース代謝突然変異体 | |
| US5747310A (en) | Gene integration into chromosomes of lactobacillus delbrueckii species and integrants thereof | |
| Wanker et al. | Expression of Bacillus subtilis levanase gene in Lactobacilus plantarum and Lactobacillus casei |