CS269874B1 - Způsob a zařízení k provádění sérelegickéhe důkazu chlamydiových protilátek - Google Patents

Abstract

Způsobem provádění sérelegickéhe důkazu chlamydiových protilátek podle nového řešení je umožněno použití t.zv. sklíčkového antigénu. Podstata způsobu spočívá v tom, že na Petriho misce (3) so připraví infikovaná buněčná kultura, přičemž do Petriho misky (3) se vloží děrovaná matrice (4), do jejíž otvorů (5) so nakape testované sérum a prostřednictvím fluorescenčního mikroskopu se provádí test nepřímé imunofluorescenční reakce, při odečítání na dnš Petriho misky (3). Podstata zařízení spočívá v konstrukci základní desky (l), na kterou je položena Petriho miska (3), přičemž děrovaná matrice (4) je přitlačována šrouby (6), které spočívají vo třmenu (2), připevněném k základní desce (l).

Description

Vynález se týká způsobu provádění sérologického důkazu chlamydievých protilátek při použití testu nepřímé imunofluorescenční reakce a zařízení k provádění tohoto způsobu.

Sérologický důkaz chlamydievých protilátek se ve světě opírá o test nepřímé imunofluorescenční reakce, který je možno vykonávat na dvou antigenech, z nichž každý je připraven jinou metodou. První metoda využívá purifikovaný materiál, který ge získal pomnožením na vhodné tkáňové kultuře nebe žloutkovém vaku a následnou purifikací diferenciální centrifugací. Druhá metoda, pomocí které vznikne tzv. sklíčkový antigen, využívá infikovaných buněčných kultur na mikroskopických krycích sklíčkách, kde tyto Infikované buněčné kultury se pe ofixování přímo používají pro test nepřímé imunofluorescenční reakce, přičemž pro každé ředění séra se používá jedno mikroskopické krycí sklíčko. Při použití první metody, která využívá purifikovaný materiál, vzniká značná závislost na laboratorním vybavení. V mnoha případech se touto metodou dá'připravit pouze malé množství antigénu, přičemž příprava je značně časově i materiálově náročná a výsledky v testu nepřímé imunofluorescenční reakce nedosahují kvality, které je jinak možno dosáhnou při použití sklíčkového antigénu. Nevýhodou při použití sklíčkového antigénu. byla však pracnost a spotřeba mate* riálu. Nedostatky se částečně odstraňovaly použitím mikrotitračních destiček, avšak docházelo k dalšímu nedostatku, který spočíval v poškozování mikrotitračních destiček fixačními roztoky. Výsledky nebyle možno odečítat bez inverzního fluorescenčního mikroskopu. .

Tyto nedostatky při používání sklíčkového antigénu jsou odstraněny použitím způsobu provádění sérologického důkazu chlamydievých protilátek podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že na Petriho misce se připraví infikovaná buněčná kultura, která se ofixuje a do Petriho misky se vloží děrovaná matrice, která se přitlačí ke dnu Petriho misky, přičemž do otvorů v matrici se nakape testované sérum a provede se prostřednictvím fluorescenčního mikroskopu test nepřímé imunofluorescenční reakce, přičemž odečítání se se provádí na dně Petriho misky. Podstata zařízení k provádění způsobu podle vynálezu spočívá v tom, že zařízení je tvořeno základní deskou, na jejíž vrchní ploše je umístěna Petriho miska, uvnitř které je vložena děrovaná matrice, opatřená vespod těsnicí podložkou, přičemž nad děrovanou matricí spočívají přitlačovací prostředky, uložené ve třmenu, připevněném k základní desce. Přitlačovacími prostředky ae provádí přitlačení děrované matrice ke dnu Petriho misky.

Způsob a zařízení podle vynálezu umožňují vyšetřování sér pacientů, u kterých není možno vykonat kultivační vyšetření (epididymitidy u mužů, emdometritídy u žen), nebo je zaléčeno antibiotiky( akutní a chronické uretritídy u mužů). Kromě toho se ušetří kultivační médium a dojde k úsporám pracovního času laborantů při přípravě antigénu a testu nepřímé imunofluorescenční reakce, přičemž dojde k úsporám přípravných prací a spotřeby ostatního režijního materiálu.

Jedno z možných provedení zařízení podle vynálezu je znázorněno na výkresu, kde obr. 1 znázorňuje pohled na zařízení a obr. 2 znázorňuje půdorys z obr. 1.

Zařízení je zhotoveno z antikorozní oceli a těsnicí podložka je v provedení ze silikonové pryže. Používá se dvou druhů děrovaných matric £, z nichž menší děrovaná matrice má 10 otvorů o průměru 3 mm. Větší děrevaná matrice £ (znázorněná na výkresu) má 70 otvorů, každý rovněž o průměru 3 mm. Děrovaná matrice £ ee vkládá de Petriho misky j, položené na horní plochu základní desky 1. Pod děrovanou matricí £ spočívá těsnicí podložka 8. Prostřednictvím šroubů 7 je k základní desce 1 z beku připevněn třmen 2 se závity, kterými procházejí přitlačovací prostředky 6, v tomto případě upevňovací šrouby, kterými se děrovaná matrice 4 přitlačuje přes těsnicí podložku 8 ke dnu Petriho misky 3.

Infikovaná buněčná kultura se připraví na Petriho misce 3 a efixuje se zpravidla acetonem. Potom se na takto připravenou buněčnou kulturu přiloží těsnicí podložka 8 s děrovanou matricí £, která ee prostřednictvím přitlačovacích prostředků 6 přitlačí ke dnu Petriho misky 3. Po provedení těchto úkonů je možno do otvorů £'v matrici 4 nakapat testované sérum a prostřenictvím fluorescenčního mikroskopu provést test nepřímé fluorescenční (imunofluorescenční) reakce. Krajní přitlačovací prostředky (šrouby) £ slouží k

CS‘ 269 874 Bl přitlačení velké matrice 4 a přitlačevací preetředky 6, umístěné dovnitř, slouží k přitlačení malé děrované matrice £.

Claims (2)

PŘEDMĚT V Y N Á 1 E ZU

1. Způsob provádění eérologického důkazu chlamydiových.protilátek, vyznačující se tím, že na Petriho misce se připraví infikovaná buněčná kultura, která se ofixuje, a do Petriho misky se vloží děrovaná matrice, která se přitlačí ke dnu Petriho misky, následně do otvorů v matrici se nakape testované sérum a prostřednictvím fluorescenčního mikroskopu se provede test nepřímé imunofluorescenČní reakce, přičemž odečítání se provádí na dně Petriho misky. '

2. Zařízení k provedení způsobu podle bodu 1, vyznačující se tím, že je tvořeno základní deskou (1), na jejíž vrchní ploěe je umístěna Petriho miska (3), do které je vložena dSrová matrice.(4), opatřená na spodní ploěe těsnicí podložkou (8), přičemž nad děrovanou matricí (4) jsou uspořádány přitlačevací prostředky (6), uložené ve třmenu (2) připevněném k základní desce (1).