CS266809B1

CS266809B1 - Method of crystalline silybine production

Info

Publication number: CS266809B1
Application number: CS877053A
Authority: CS
Inventors: Jaroslav Ing Moural; Rudolf Mazac; Vladimir Rndr Prochazka
Original assignee: Jaroslav Ing Moural; Rudolf Mazac; Vladimir Rndr Prochazka
Priority date: 1987-09-30
Filing date: 1987-09-30
Publication date: 1990-01-12
Also published as: CS705387A1

Abstract

Řešení se týká výroby krystalického silybinu z přírodní drogy, která se předem neodtučňuje a obsahuje ve svém silymarinovém komplexu alespoň 60 % hmot. silybinu spolu s isosilybinem. Výroba je založena na extrakci drogy 95% vodným acetonem, po zředění vodou se oddělí olejová fáze. Vodně acetonová fáze se zahustí, vzniklá suspenze surového silybinu se po úpravě chloridem sodným odtuční petroletherem a oddělený silybin se promyje chlorovaným uhlovodíkem. Tento surový silybin se překrystaluje z methanolu a dále ze směsi kyseliny octové, acetonu a vody. Získá se čistý krystalický silybin, který slouží jako léčivo při chorobách jater.The solution relates to the production of crystalline Silybin from Natural Drugs That Take Advance it does not defat and contains in its silymarin % of the complex at least 60 wt. silybin together with isosilybin. Production is based for drug extraction with 95% aqueous acetone, po the oil phase is separated by dilution with water. Vodně the acetone phase is concentrated, the resulting suspension the crude silybin was treated with chloride with sodium defatted petroleum ether and separated the silybin is washed with a chlorinated hydrocarbon. This crude silybin is recrystallized from methanol and then from acetic acid, acetone and water. The pure crystalline was obtained silybin, which serves as a medicament at diseases of the liver.

Description

Vynález se týká způsobu výroby krystalického silybinu a získávání oleje extrakcí neodtučněných drcených plodů ostropestřece mariánského (Silybum marianum (L.) Gaertn.), obsahujících komplex flavanolignanů (silymarin) s převahou více než 60 % silybinu spolu s isosilybinem.The invention relates to a process for the production of crystalline silybin and to the recovery of oil by extraction of non-defatted crushed fruits of milk thistle (Silybum marianum (L.) Gaertn.) Containing a complex of flavanolignans (silymarin) with a predominance of more than 60% silybin together with isosilybin.

Plody ostropestřece mariánského obsahují komplex flavonoidních látek odvozených od flavánonolu taxifolinu, nazvaný silymarin. Silymarin se používá řadu let jako cenné jaterní léčivo se stimulujícím účinkem na metabolismus jaterních buněk ar ..branným působením na jejich membrány (např. G: Vogel a sp.: Arzneimittel-Forsch. 25, 82, 1975). Hlavními složkami silymarinu jsou izomerní sloučeniny sumárního vzorce ^C25^H22°10 siskin (dříve silymarin I), silydianin (dříve silymarin II) a silychristin (dříve silymarin III), které jsou považovány za nositele účinku a působí synergicky (např. NSR pat. spis 1 923 081). Do dnešní doby byla dostatečně objasněna chemická struktura i stereochemie silybinu (A. Pelter a sp.: Tetrahedron Letters č. 25, 2 911, 1968; R. Hansel a sp.: Chem. Ber. 108, 1 482, 1975; A. Arnone a sp.; J. Chem. Soc., Chem. Commun. č. 16, 696, 1979), silydianinu (D. J. Abrahem a sp.: Tetrahedron Letters č. 31, 2 675, 1970) i silychristinu (A. Pelter a sp.: Tetrahedron Letters č. 51, 4 547, 1977; H. Wagner a sp.: Tetrahedron Letters č. 4 381 1978). Rovněž byl odlišen silybin od svého polohového izomeru isosilybinu (A. Arnone a sp.: J. Chem. Soc., Chem. Commun. č. 16, 696, 1979), který jej pravidelně provází v menším množství.Milk thistle fruits contain a complex of flavonoid substances derived from the flavanonol taxifolin, called silymarin. Silymarin has been used for many years as a valuable liver drug with a stimulating effect on the metabolism of liver cells and by acting on their membranes (e.g. G: Vogel et al .: Arzneimittel-Forsch. 25, 82, 1975). The main constituents of silymarin are isomeric compounds of general formula ^C 25 ^H 22 ° 10 siskin (formerly silymarin I), silydianin (formerly silymarin II) and silychristin (formerly silymarin III), which are considered to act synergistically (e.g. NSR Pat. file 1 923 081). To date, the chemical structure and stereochemistry of silybin have been sufficiently elucidated (A. Pelter et al .: Tetrahedron Letters No. 25, 2911, 1968; R. Hansel et al .: Chem. Ber. 108, 1482, 1975; A. Arnone et al .; J. Chem. Soc., Chem. Commun. No. 16, 696, 1979), silydianin (DJ Abrahem et al., Tetrahedron Letters No. 31, 2 675, 1970) and silychristin (A. Pelter et al .: Tetrahedron Letters No. 51, 4,547, 1977; H. Wagner et al .: Tetrahedron Letters No. 4,381 (1978). Silybin has also been distinguished from its positional isomer of isosilybin (A. Arnone et al .: J. Chem. Soc., Chem. Commun. No. 16, 696, 1979), which regularly accompanies it in smaller amounts.

Při současném stavu techniky je ve světovém měřítku široce rozpracována průmyslová příprava silymarinu z odtučněné i neodtučněné drogy ostropestřece. Izolace silymarinu i jeho jednotlivých složek je přitom mimořádně ztížena vysokým obsahem oleje v droze, obtížnou difúzí flavanolignanů do extrakčního média a směsným charakterem silymarinu. Z řady patentově chráněných postupů izolace silymarinu jako celku byl nejvíce využíván původní postup podle NSR pat. spisu č. 1 923 082 (čs. AO č. 162 722). Podle tohoto postupu byl získáván amorfní silymarin o obsahu 70 až 80 % flavanolignanů s poměrem silybin:silydianin:silychristin v průměru 3:1:1 podle kvality výchozí.drogy. Jako další lze uvést modifikovaný postup (NSR pat. spis č. 2 914 330, Čs. AO č. 223 986), podle nějž se dosahuje v silymarinu obsahu 90 až 96 % flavanolignanů. V ČSSR je silymarin vyráběn původním postupem, jímž se dosahuje obsahu flavanolignanů 75 až 80 % (čs. AO č. 216 997).In the current state of the art, the industrial preparation of silymarin from defatted and non-defatted milk thistle drugs is widely developed worldwide. The isolation of silymarin and its individual components is extremely hampered by the high oil content of the drug, the difficult diffusion of flavanolignans into the extraction medium and the mixed nature of silymarin. Of a number of patent-protected methods for isolating silymarin as a whole, the original method according to NSR Pat. File No. 1,923,082 (Czechoslovak AO No. 162,722). According to this procedure, amorphous silymarin containing 70 to 80% of flavanolignans with a silybin: silydianin: silychristin ratio of on average 3: 1: 1 according to the quality of the starting drug was obtained. Another is a modified process (NSR Pat. No. 2,914,330, Czech AO No. 223,986), according to which a silymarin content of 90 to 96% of flavanolignans is achieved. In the Czechoslovak Socialist Republic, silymarin is produced by the original process, which achieves a content of flavanolignans of 75 to 80% (Czechoslovak AO No. 216,997).

Přestože je znám synergismus při hepatoprotektivním působení‘jednotlivých složek silymarinu, představuje silybin hlavní účinnou látku (G. Vogel a sp.: Arzneimittel-Forsch. 25, 82, 1975; Η. P. Koch a sp.: Arch. Pharm. 314, 515, 1981). Vzhledem ke své malé rozpustnosti ve vodě a poměrně nízké biologické dostupnosti je silybin s výhodou chemicky Obměňován na vodorozpustné deriváty, z nichž se ukazují jako optimální poloestery s dikarboxylovými kyselinami (Η. P. Koch a sp.: Arch. Phram. 316, 385, 1983; NSR pat. spis č. 1 963 318; NSR pat. spis č. 3 442 639). V poslední době začal být vedle silymarinu využíván též silybin v lékařské praxi a tím vzrostla potřeba hledat nové izolační postupy, umožňující získávat Čistý silybin ekonomickým způsobem, využitelným v průmyslovém měřítku.Although synergism in the hepatoprotective action of the individual components of silymarin is known, silybin is the main active ingredient (G. Vogel et al .: Arzneimittel-Forsch. 25, 82, 1975; P. Koch et al., Arch. Pharm. 314, 515, 1981). Due to its low solubility in water and relatively low bioavailability, silybin is preferably chemically converted to water-soluble derivatives, which have been shown to be optimal half-esters with dicarboxylic acids (P.. P. Koch et al .: Arch. Phram. 316, 385, 1983; NSR Pat. No. 1,963,318; NSR Pat. No. 3,442,639). Recently, in addition to silymarin, silybin has also been used in medical practice, and there is a growing need to find new isolation methods that make it possible to obtain pure silybin in an economical way that can be used on an industrial scale.

V tomto spise je pojmem silybin definován nadále hlavní izomer z dvojice silybin - isosilybin. Vyizolovaným silybinem z drogy se tedy rozumí produkt, obsahující pouze příměs isósilybinu.In this document, the term silybin further defines the major isomer of the silybin-isosilybin pair. Thus, isolated silybin from a drug is a product containing only an admixture of isosilybin.

Dosavadní způsoby izolace silybinu jsou obtížné a jsou spojeny se značnými ztrátami. Závažným problémem je přitom vysoký obsah oleje v droze, který může činit až 30 % hmot., nepříznivý poměr jednotlivých složek silymarinu a někdy též vysoký obsah isosilybinu. Postupy podle pat. spisů NSR č. 1 923 082 a 2 914 330 jsou zaměřeny na přípravu silymarinového komplexu a jejich charakteristickým rysem je předběžné částečné odtučnění drogy lisováním, různě modifikovaná extrakce octanem ethylnatým a následné usilovné odtučňování koncentrovaného meziproduktu. Výsledný silymarin má u obou postupů průměrný poměr (silybin + isosilybin): :silydianin-silychristin 3:1:1, přičemž poměr silybin:isosilybin je asi 2:1. Izolace silybinu z tohoto komplexu o dosti nepříznivém složení je popsána v pat. spise NSR č. 3 537 656 (v CSSR přihlášeno jako čs. AO č. 271 321). Silymarin se bud extrahuje octanem ethylnatýmConventional methods for isolating silybin are difficult and involve considerable losses. A serious problem is the high oil content of the drug, which can be up to 30% by weight, the unfavorable ratio of the individual components of silymarin and sometimes also the high content of isosilybin. Procedures according to Pat. NSR No. 1 923 082 and 2 914 330 are focused on the preparation of a silymarin complex and their characteristic feature is the preliminary partial degreasing of the drug by compression, variously modified extraction with ethyl acetate and subsequent strenuous degreasing of the concentrated intermediate. The resulting silymarin in both processes has an average ratio (silybin + isosilybin): silydianin-silychristin of 3: 1: 1, with the silybin: isosilybin ratio being about 2: 1. Isolation of silybin from this complex with a rather unfavorable composition is described in U.S. Pat. NSR file No. 3,537,656 (registered in the CSSR as Czechoslovak AO No. 271,321). Silymarin is either extracted with ethyl acetate

CS 266 809 Bl , 3 nasyceným vodou a tím se obohacuje o silybin, nebo se rozpustí v methanolu a po zahuštění krystaluje řadu dnů surový silybin. Ten se pak rekrystaluje bud ze směsi octan ethylnatý - methanol nebo z octanu ethylnatého s definovaným obsahem vody. Nevýhodou postupu je časová náročnost, práce s velkými objemy rozpouštědla a potřeba bezvodého octanu ethylnatého.CS 266 809 B1, 3 saturated with water and thus enriched in silybin, or dissolved in methanol and, after concentration, the crude silybin crystallizes for many days. This is then recrystallized either from a mixture of ethyl acetate - methanol or from ethyl acetate with a defined water content. The disadvantages of the process are time consuming, working with large volumes of solvent and the need for anhydrous ethyl acetate.

Vlastními pokusy bylo prokázáno, že u silymarinu obsahujícího do 60 % silybinu včetně příměsi isosilybinu je izolace silybinu v průmyslovém měřítku značně obtížná a nevýhody u popsaných postupů lze ztěží odstranit. Vzhledem k variabilitě produkční rostliny lze však docílit drogy s vyšším obsahem silybinu a v tomto případě bylo zjištěno, že lze překvapivě částečně využít způsobu extrakce drogy podle čs. AO č. 216 997. Podle tohoto postupu se drcená neodtučněná droga extrahuje za studená vodným acetonem o koncentraci acetonu 90 až 98 % obj extrakt se zahustí na olejovitý odparek, který se převede do 60% vodného ethanolu a olej se odstraní opakovanou extrakcí petroletherem. Odtučněná vodně - ethanolická fáze se vyextrahuje chloroformem, chloroformová fáze Obsahující silymarin se zahustí na sirup a z něj se sráží silymarin uváděním do nadbytku vody. Při aplikaci tohoto postupu u drogy bohaté silybinem bylo zjištěno, že již při částečném zahuštění extraktu a dosažení koncentrace acetonu asi 60 % začíná spontánně krystalovat silybin, který spolu s vyloučeným olejem vytváří složitou směs. Při odtučňování petroletherem vznikají stabilní emulze a oddělování fází je značně ztíženo. Z technologického hlediska nelze stávajícíl postup používat ke zpracování drogy bohaté silybinem.Experiments have shown that silymarin containing up to 60% silybin, including isosilybin, is very difficult to isolate silybin on an industrial scale and the disadvantages of the described processes are difficult to overcome. However, due to the variability of the production plant, drugs with a higher silybin content can be obtained, and in this case it was found that the method of drug extraction according to MS. AO No. 216,997. Following this procedure, the crushed non-defatted drug is extracted cold with aqueous acetone at an acetone concentration of 90-98% v / v. The defatted aqueous-ethanolic phase is extracted with chloroform, the chloroform phase containing silymarin is concentrated to a syrup and silymarin is precipitated from it by bringing into excess water. When applying this procedure to a silybin-rich drug, it was found that even when the extract was partially concentrated and an acetone concentration of about 60% was reached, silybin began to spontaneously crystallize, which together with the precipitated oil formed a complex mixture. Stable emulsions are formed during degreasing with petroleum ether and phase separation is considerably more difficult. From a technological point of view, the current procedure cannot be used to process a silybin-rich drug.

Uvedené nevýhody odstraňuje způsob výroby krystalického silybinu z přírodní neodtučněné drogy obsahující komplex flavanolignanů s obsahem alespoň 60 % hmot, silybinu včetně isosilybinu po extrakci drcené drogy 95% vodným acetonem podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se acetonový extrakt flavanolignanů zředí vodou, poté se oddělí spodní olejová vrstva a vodně acetonová fáze se zahustí. Vzniklá suspenze surového silybinu se vyextrahuje alifatickým uhlovodíkem nebo směsí alifatických uhlovodíků s 5 až 8 atomy uhlíku, potom se vodná suspenze upraví přídavkem chloridu sodného. Po oddělení filtrátu se surový silybin předsuší odvětráváním na obsah vody 15 až 20 % hmot, za případného promytí chlorovaným uhlovodíkem typu dichlormethan nebo chloroform. Po rozpuštění surového silybinu v acetonu a přefiltrování se acetonová fáze odpaří k suchu, odparek se za varu rozpustí v methanolu a po přidání 3 až 7 % obj. vody se ponechá krystalovat. Získaný silybin se rozpustí za varu v soustavě kyselina octová - aceton ve vzájemném objemovém poměru 3,5 až 4,0:6,5 až 6,0, poté se roztok přefiltruje s aktivním uhlím a čirý filtrát se po zahuštění na třetinu svého objemu zředí vodou v množství 5 % obj. vody na objem získaného koncentrátu, načež se získaný čistý krystalický silybin oddělí.The process for producing crystalline silybin from a natural non-fat drug containing a complex of flavanolignans containing at least 60% by weight of silybin, including isosilybin after extraction of the crushed drug with 95% aqueous acetone according to the invention eliminates these disadvantages by diluting acetone extract of flavanolignans with water. the lower oil layer is separated and the aqueous acetone phase is concentrated. The resulting suspension of crude silybin is extracted with an aliphatic hydrocarbon or a mixture of aliphatic hydrocarbons having 5 to 8 carbon atoms, then the aqueous suspension is treated by adding sodium chloride. After separation of the filtrate, the crude silybin is predried by ventilation to a water content of 15 to 20% by weight, optionally washed with a chlorinated hydrocarbon of the dichloromethane or chloroform type. After dissolving the crude silybin in acetone and filtering, the acetone phase is evaporated to dryness, the residue is dissolved in methanol at reflux and, after adding 3 to 7% by volume of water, allowed to crystallize. The silybin obtained is dissolved in boiling acetic acid-acetone in a volume ratio of 3.5 to 4.0: 6.5 to 6.0, then the solution is filtered with activated charcoal and the clear filtrate is diluted to one third of its volume after concentration. water in an amount of 5% by volume of water per volume of the concentrate obtained, after which the pure crystalline silybin obtained is separated.

Způsob podle vynálezu se provádí tak, že se drcená neodtučněná droga o obsahu 2,0 až 2,5 % silybinu extrahuje celkem 10 díly 95 až 98% obj. vodného acetonu při teplotě 20 až 25 °C, načež se v odděleném extraktu upraví přídavkem vypočteného množství vody koncentrace acetonu na hodnotu 92 % obj . . Stáním po dobu 15 až 24 hodin při teplotě 20 až 25 °C se při této koncentraci acetonu oddělí olejová vrstva jako spodní fáze, která se dá snadno oddělit. Tímto způsobem lze získat až 50 % oleje obsaženého ve výchozí droze. Po oddestilování acetonu za sníženého tlaku se získá kvalitní olej, neobsahující zbytkové rozpouštědlo. Vrchní vodně acetonová fáze se odpaří za sníženého tlaku asi na 1/15 původního objemu (aceton se regeneruje) a vznikne suspenze, obsahující ještě olej. Po přídavku chloridu sodného, který příznivě ovlivňuje strukturu suspenze, se systém odtuční extrakcí petroletherem a odsátím se získá surový produkt, který se po částečném vysušení zbaví některých příměsí rozpuštěním v acetonu a filtrací. Odparek z acetonového čirého filtrátu se krystaluje z 95% vodného methanolu a získaný krystalický silybin se dále čistí rekrystalováním ze směsi kyselina octová - aceton - voda. Tímto způsobem se získá krystalický silybin obsahující méně než 1 % hmot, isosilybinu, ve výtěžku kolem 1,2 až 1,4 % hmotnosti výchozí drogy, tj. kolem 60 % analyticky zjištěného obsahu silybinu v droze.The process according to the invention is carried out by extracting a crushed non-defatted drug containing 2.0 to 2.5% of silybin with a total of 10 parts of 95 to 98% by volume of aqueous acetone at a temperature of 20 to 25 ° C, after which it is treated in a separate extract by adding of the calculated amount of water, the concentration of acetone to 92% vol. . By standing for 15 to 24 hours at 20 to 25 ° C, at this concentration of acetone, the oil layer separates as a lower phase which can be easily separated. In this way, up to 50% of the oil contained in the starting drug can be obtained. After distilling off the acetone under reduced pressure, a quality oil is obtained, free of residual solvent. The upper aqueous acetone phase was evaporated under reduced pressure to about 1/15 of the original volume (acetone was recovered) to give a suspension containing oil. After the addition of sodium chloride, which has a favorable effect on the structure of the suspension, the system is defatted by extraction with petroleum ether and suction filtration to give a crude product which, after partial drying, is freed of some impurities by dissolving in acetone and filtering. The clear acetone filtrate residue was crystallized from 95% aqueous methanol, and the obtained crystalline silybin was further purified by recrystallization from acetic acid-acetone-water. In this way, crystalline silybin containing less than 1% by weight of isosilybin is obtained in a yield of about 1.2 to 1.4% by weight of the starting drug, i.e. about 60% of the analytically determined silybin content of the drug.

Hlavní výhody postupu podle vynálezu spočívají v časové nenáročnosti, v nízké spotřebě surovin a v jednoduché technologii, která nevyžaduje nákladných zařízení. Odpadá nutnostThe main advantages of the process according to the invention lie in the time-saving nature, in the low consumption of raw materials and in the simple technology which does not require expensive equipment. There is no need

CS 266 809 Bl předběžného odtučňování drogy a jednotlivé čisticí stupně jsou účinné při minimální spotřebě organických rozpouštědel. Na rozdíl od octanu ethylnatého Lze použitá rozpouštědla aceton a petrolether snadno a bez ztráty kvality regenerovat. Z nízké spotřeby rozpouštědel vyplývá i úspora energií v celém izolačním postupu i při jejich regeneraci. Postup umožňuje přípravu jak čistého krystalického silybinu, tak i kvalitního oleje bez zbytkového rozpouštědla. Realizace postupu podle vynálezu nezatěžuje životní prostředí nežádoucími dopady. Získaný olej obsahuje esenciální nenasycené mastné kyseliny a je r ·íno jej využít v kosmetice nebo v potravinářství.CS 266 809 B1 pre-fat defatting of the drug and the individual purification steps are effective with minimal consumption of organic solvents. Unlike ethyl acetate, the solvents used, acetone and petroleum ether, can be easily and without loss of quality. The low consumption of solvents also results in energy savings in the entire insulation process and in their regeneration. The process allows the preparation of both pure crystalline silybin and quality oil without residual solvent. The implementation of the process according to the invention does not burden the environment with undesired effects. The oil obtained contains essential unsaturated fatty acids and can be used in cosmetics or the food industry.

V dalším je vynález blíže objasněn příklady provedení, aniž by se jimi omezoval.In the following, the invention is further elucidated by, but not limited to, exemplary embodiments.

Příklad 1Example 1

Navážka 5,0 kg hrubě drcených plodů ostropestřece mariánského o velikosti částic 0,5 až 2,0 mm se extrahuje protiproudně perkolací 95% vodným acetonem (obj.) tak, aby během 8 h proteklo náplní 5 1. Extrakt o objemu 50 1 (10 dílů vztaženo na výchozí drogu) se upraví přídavkem vody na koncentraci acetonu 92 % obj. a po rozmíchání se ponechá stát 20 h při teplotě 20 až 25 °C. Po této době se vyloučí jako spodní fáze 550 ml olejové vrstvy. Jejím oddělením a odpařením acetonu za sníženého tlaku se získá 640 ml velmi čistého oleje. Extrakt oddělený od olejové vrstvy se zahustí za sníženého tlaku na objem 3 000 ml při teplotě lázně do 60 °C. Vzniklá suspenze se míchá s 3 000 ml petroletheru po dobu 30 minut a pak se ponechají fáze oddělit. Z petroletherové fáze se regeneruje rozpouštědlo. Olejový zbytek obsahuje ještě petrolether a nepřipojuje se k prvnímu podílu oleje.A portion of 5.0 kg of coarsely crushed milk thistle fruit with a particle size of 0.5 to 2.0 mm is extracted countercurrently by percolation with 95% aqueous acetone (v / v) so that a 5 L extract flows over 8 hours. 10 parts based on the starting drug) are adjusted to a concentration of 92% by volume of acetone by adding water and, after stirring, left to stand for 20 hours at a temperature of 20 to 25 ° C. After this time, 550 ml of an oil layer precipitated out as the lower phase. Separation and evaporation of the acetone under reduced pressure gave 640 ml of a very pure oil. The extract separated from the oil layer was concentrated under reduced pressure to a volume of 3,000 ml at a bath temperature of up to 60 ° C. The resulting suspension is stirred with 3,000 ml of petroleum ether for 30 minutes and then the phases are allowed to separate. The solvent is recovered from the petroleum ether phase. The oily residue still contains petroleum ether and does not attach to the first portion of the oil.

Odtučněná vodná suspenze se rozmíchá s přídavkem 150 g chloridu sodného. Po 30 minutách míchání vznikne dobře filtrovatelná suspenze, která se odsaje na nuči a promyje 3x100 ml vody. Produkt se suší volně odvětráváním 24 hodin při teplotě 25 °C. .The defatted aqueous suspension is stirred with the addition of 150 g of sodium chloride. After stirring for 30 minutes, a well-filterable suspension is formed, which is filtered off with suction and washed with 3 * 100 ml of water. The product is dried freely by ventilation for 24 hours at 25 ° C. .

Částečně vysušený produkt, obsahující 15 % vody, se promyje 2x250 ml dichlormethanu, pak se rozpustí v 1 000 ml acetonu a roztok se zfiltruje. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku při vnitřní teplotě do 50 °C k suchu.The partially dried product, containing 15% water, is washed with 2x250 ml of dichloromethane, then dissolved in 1000 ml of acetone and the solution is filtered. The filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure at an internal temperature of up to 50 ° C.

Podíly acetonu získané z destilací se spojí a po stanovení obsahu vody se upraví koncentrace acetonu na 95 % obj.. Regenerovaný aceton takto upravený se použije znovu k extrakci drogy.The acetone fractions obtained from the distillations are combined and, after determining the water content, the acetone concentration is adjusted to 95% by volume. The regenerated acetone thus treated is used again for drug extraction.

Suchý odparek z acetonu se rozpustí za varu v 1 000 ml methanolu, přičemž část zůstane již při této operaci nerozpuštěna a je krystalická, vyhovující čistoty. K horké suspenzi se přidá 50 ml vody a směs se ponechá 20 h krystalovat při teplotě 20 až 25 °C. Poté se odsaje a promyje 50 ml 95% (obj.) vodného methanolu. Získá se 60 g prvního podílu silybinu. Zahuštěním matečných louhů na poloviční objem se získá 16 g druhého podílu. Odpařením matečných louhů k suchu, rozpuštěním odparku v 300 ml 95% (obj.) vodného methanolu za varu a ochlazením se získá ještě 5,0 g třetího podílu.The dry residue from acetone is dissolved in boiling 1 000 ml of methanol at boiling point, part of which remains undissolved in this operation and is crystalline, of satisfactory purity. 50 ml of water are added to the hot suspension and the mixture is allowed to crystallize at 20-25 ° C for 20 h. It is then filtered off with suction and washed with 50 ml of 95% (v / v) aqueous methanol. 60 g of a first portion of silybin are obtained. Concentration of the mother liquors to half volume gave 16 g of the second crop. Evaporation of the mother liquors to dryness, dissolving the residue in 300 ml of 95% (v / v) aqueous methanol at reflux and cooling gave a further 5.0 g of a third crop.

Všechny tři podíly silybinu (celkem 81,0 g) jsou chromatograficky shodné a použijí se k další rafinaci, popsané v příkladu 3.All three portions of silybin (81.0 g in total) are chromatographically identical and are used for further refining as described in Example 3.

Příklad 2Example 2

Násada 50 kg hrubě drcených plodů ostropestřece mariánského o velikosti částic 0,5 až 2,0 mm se extrahuje 250 1 (5 dílů) 95% (obj.) vodného acetonu za míchání při teplotě 20 až 25 °C po dobu 5 h- Extrakt se oddělí a postup se opakuje ještě jednou stejným množstvím vodného acetonu. Při použití zařízení na protiproudnou extrakci se droga při uvedené teplotě extrahuje takovou rychlostí, aby celkové množství 10 dílů rozpouštědla proteklo za dobu 10 h. Ve spojeném a zhomogenizovaném extraktu se stanoví obsah vody, který závisí na vlhkosti výchozí drogy, a koncentrace acetonu se upraví přídavkem vody na hodnotu 92 % (obj.). PoA batch of 50 kg of coarsely crushed milk thistle fruit with a particle size of 0.5 to 2.0 mm is extracted with 250 l (5 parts) of 95% (v / v) aqueous acetone with stirring at 20 to 25 ° C for 5 hours. is separated and the procedure is repeated once more with the same amount of aqueous acetone. Using a counter-current extraction device, the drug is extracted at this temperature at such a rate that a total of 10 parts of solvent flows over 10 hours. water to a value of 92% (vol.). After

CS 266 809 Bl rozmíchání se extrakt ponechá stát při teplotě 20 až 25 °C po dobu 20 h. Oddělí se 6 000 ml spodní olejové fáze, která poskytne po odpaření acetonu za sníženého tlaku 4 900 ml čistého oleje.After stirring, the extract is allowed to stand at 20-25 DEG C. for 20 hours. 6,000 ml of the lower oil phase are separated, which yields 4,900 ml of pure oil after evaporation of the acetone under reduced pressure.

Po oddělení olejové vrstvy se extrakt zahustí za sníženého tlaku na objem 30 1, vzniklá suspenze se rozmíchá s 1 500 g chloridu sodného a po 30 minutách extrahuje 30 1 petroletheru při teplotě 20 až 25 °C. Po odtažení uhlovodíkové vrstvy se odtučněná vodná suspenze odsaje a promyje 3x1 000 ml vody. Produkt se suší ve vakuové sušárně tak, aby obsahoval 15 % hmot, vody. Jeho hmotnost je 3 000 g. Pak se rozpustí v 10 1 acetonu, zfiltruje a odpaří za sníženého tlaku k suchu.After separating the oil layer, the extract was concentrated under reduced pressure to a volume of 30 L, the resulting suspension was stirred with 1500 g of sodium chloride, and after 30 minutes extracted with 30 L of petroleum ether at 20-25 ° C. After removal of the hydrocarbon layer, the defatted aqueous suspension is filtered off with suction and washed with 3 * 1000 ml of water. The product is dried in a vacuum oven to contain 15% by weight of water. It weighs 3,000 g. It is then dissolved in 10 l of acetone, filtered and evaporated to dryness under reduced pressure.

Aceton a petrolether se regeneruje jako v příkladu 1.Acetone and petroleum ether were recovered as in Example 1.

Odparek z acetonu se rozpustí za varu v 10 1 methanolu a ve třech podílech se získá krystalický silybin jako v příkladu 1. Hmotnosti jednotlivých podílů jsou 600 g, 150 g a 45 g. Celkový výtěžek 795 g představuje 1,59 % hmot, vztaženo na výchozí drogu. Další rafinace je uvedena v příkladu 3.The acetone residue is dissolved in boiling 10 l of methanol to give crystalline silybin in three portions as in Example 1. The weights of the individual portions are 600 g, 150 g and 45 g. The total yield of 795 g represents 1.59% by weight, based on the starting material. drug. Further refining is given in Example 3.

Příklad 3Example 3

Navážka 1 000 g krystalického silybinu, získaného z 95% methanolu podle příkladu 1 a 2, se rozpustí v 11 000 ml směsi aceton - kyselina octová o objemovém poměru 6,0.4,0 za varu pod zpětným chladičem. Přidá se 20,0 g aktivního uhlí a po 5minutovém varu se roztok za horka zfiltruje přes papírový filtr. Žlutý filtrát se zahustí za sníženého tlaku při vnější teplotě 60 °C na objem 4 000 ml. K tomuto roztoku se přilije při teplotě 60 °C 200 ml vody (5 % na koncentrátu) a po promíchání počne spontánně krystalovat silybin. Směs se ponechá dále krystalovat při teplotě 20 až 25 °C po dobu 5 h, poté se krystaly odsají a promyjí postupně 500 ml 95% (obj.) vodné kyseliny octové, 500 ml methanolu a nakonec 1 000 ml 90% (obj.) vodného methanolu. Odsátý produkt se suší ve vakuové sušárně do konstantní hmotnosti.A portion of 1000 g of crystalline silybin, obtained from 95% of methanol according to Examples 1 and 2, is dissolved in 11,000 ml of a mixture of acetone-acetic acid in a volume ratio of 6.0, 4.0 at reflux. 20.0 g of activated carbon are added and, after boiling for 5 minutes, the hot solution is filtered through a paper filter. The yellow filtrate was concentrated under reduced pressure at an external temperature of 60 ° C to a volume of 4,000 ml. To this solution, 200 ml of water (5% on concentrate) was added at 60 ° C, and after stirring, silybin began to crystallize spontaneously. The mixture is allowed to crystallize further at 20-25 DEG C. for 5 hours, then the crystals are filtered off with suction and washed successively with 500 ml of 95% (v / v) aqueous acetic acid, 500 ml of methanol and finally 1000 ml of 90% (v / v). aqueous methanol. The aspirated product is dried in a vacuum oven to constant weight.

iand

Získá se 750 g krystalického silybinu, obsahujícího 0 ,,5 % hmot. isosilybinu.750 g of crystalline silybin containing 0.5% by weight are obtained. isosilybin.

Claims

OBJECT OF THE INVENTION

A process for the production of crystalline silybin from a natural non-defatted drug comprising a complex of flavanolignans containing at least 60% by weight, silybin including isosilybin after extraction of the crushed drug with 95% by volume aqueous acetone, characterized in that the acetone extract of flavanolignans is diluted with water to 90 to 92%. % by volume of acetone, then the lower oil layer is separated and the aqueous acetone phase is concentrated, the resulting suspension of crude silybin is extracted with aliphatic hydrocarbon or a mixture of aliphatic hydrocarbons having 5 to 8 carbon atoms, then the aqueous suspension is of the crude silybin obtained, dried by venting to a water content of 10 to 20% by weight, and dissolved in acetone, then the acetone phase is filtered and evaporated to dryness, the residue is dissolved in methanol and boiled after adding 3 to 7% by volume of water. crystallize, after which the silybin obtained is dissolved at reflux in an acetic acid: acetone system in a mutual volume ratio of 3.5 to 4.0: 6.5 to 6.0 parts, after the addition of act. The charcoal solution is filtered and the clear filtrate, after concentration to one third of its volume, is diluted with water in an amount of 5% by volume of water per volume of the concentrate obtained, after which the precipitated pure crystalline silybin is separated.

2. The process according to item 1, characterized in that the obtained crude silybin is optionally washed with a chlorinated hydrocarbon of the dichloromethane or chloroform type.