CS259288B1

CS259288B1 - Method of baker's yeast complex fractionation

Info

Publication number: CS259288B1
Application number: CS8610160A
Authority: CS
Inventors: Ernest Sturdik; Roman Kollar; Julius Forsthoffer; Jan Sajbidor; Danka Kollatiova; Miroslava Galkova; Stanislav Krcmar; Sona Huncikova
Original assignee: Ernest Sturdik; Roman Kollar; Julius Forsthoffer; Jan Sajbidor; Danka Kollatiova; Miroslava Galkova; Stanislav Krcmar; Sona Huncikova
Priority date: 1986-12-29
Filing date: 1986-12-29
Publication date: 1988-10-14
Also published as: CS1016086A1

Abstract

Riešenie sa týká spósobu selektívneho využitia pekárskeho droždia. Podstata riešenia spočívá v tona, že supernatant kvasničného autolyzátu sa vyzráža etanolom pri teplote 2 až 5 °C v objemovom pomere 0,9 až 2 : 1, zostatok sa po odstránení etanolu vysuší, zo sedimentu autolyzátu sa vyextrahuje lipidická frakcia 20-násobným nadbytkům extrakčnej zmesi etanol-hexán v objemovom pomere 1 : 2, ktorá sa ďalej frankcionuje 5-násobným nadbytkom acetonu, pričom acetonový extrakt so po· zmydelneni 15 °/o-ným roztokom hydroxidu draselného· počas 1 h pri 80 °C ďalej extrahuje hexánom, zahustí a po přidaní acetonu na výslednú koncentráciu 33 % hmot. v hexáne krystalizuje pri teplote —5 °C, pričom delipidizovaný zvyšok, ktorý zostal po· extrakcii lipidov zo sedimentu autolyzátu sa po zriedení vodou na 8 až 10 %-nú suspenziu vysuší.The solution relates to a method of selective use baker's yeast. The essence of the solution lies in the tone that the yeast supernatant the autolysate is precipitated with ethanol at temperature 2 to 5 ° C in a volume ratio of 0.9 to 2: 1, the residue is dried after the ethanol is removed, lipid is extracted from the autolysate sediment fraction of extraction excess ethanol / hexane (v / v) 1: 2 ratio, which is further franchised 5-fold excess of acetone with acetone extract with 15% saponification potassium hydroxide solution for 1 h further extracted with hexane at 80 ° C, concentrated and after adding acetone to the final concentration 33 wt. in hexane crystallized on temperature of -5 ° C, with the delipidized residue, which remained after extraction of lipids from sediment autolysate after dilution with water to 8-10% suspension.

Description

Vynález sa týká sposobu komplexně] frakcionácie pekařského droždia.The invention relates to a process for the complexation of baker's yeast.

Biómasa kvasiniek, teda aj pekařského droždia, je zdrojom mnoha cenných látok, ktoré boli doteraz izolované vačšinou jednotlivo, pričom po ich izolácii bola zostávajúca časť obsahu kvasničných buniek nevyužitá.Yeast biomass, including baker's yeast, is the source of many valuable substances that have so far been isolated individually, with the remaining portion of the yeast cell content being unused after isolation.

Bielkoviny sa získavajú z kvasiniek najčastejšie alkalickou extrakciou, resp. různými modifikáciami tejto metody po dezintegrácii buniek (Cooney, C. L., Rba, C., Tannenbaum, S. R., Adv. Food, Res. 26, 1—52, 1980 j. Hlavnou překážkou použitia takýchto mikrobiálnych bielkovín v 1'udskej výživě je vysoký obsah nukleových kyselin. Existuje niekoíko sposobov, ktoré umožňujú znížiť obsah nukleových kyselin v biomase kvasiniek a tým aj v izolovanom bielkovinovom produkte. Medzi najznámejšie patří zníženie obsahu nukleových kyselin v kvasinkách iniciované vhodným zložením kultivačného média (Rut, M., Štros, F., Hladeček, P., Kvasný průmysl '24, 58—66; Čs. vynález č. 188 575), pósobenie chemických činidel na intaktné buňky (Damodaran, S., Kinsella, J. E., Biotechnol. Bioeng. 25, 761—770, 1983; Patenty USA č. 3 615 654 a č. 3 775 393), použitie tepelného šoku (Deimann, W.,. Fabrini H. D., J. Exptl. Med., 23, 883—897, 1979; Patent USA č. 2 081 172), enzymatické štiepenie nukleových kyselin nukleázami endogénneho i exogénneho původu (Rottová, D., Fencl, Z., Průmysl potravin, 30, 531—3. 1979; Patent USA č. 3 867 255).Proteins are obtained from yeast most often by alkaline extraction, respectively. various modifications of this method after cell disintegration (Cooney, CL, Rba, C., Tannenbaum, SR, Adv. Food, Res. 26, 1-52, 1980). A major obstacle to the use of such microbial proteins in human nutrition is the high content of There are several ways of reducing the nucleic acid content of yeast biomass and thus of the isolated protein product, among which the reduction of the nucleic acid content of yeast initiated by the appropriate composition of the culture medium (Rut, M., Štros, F., Hladeček) , P., Kvasny prum [24, 58-66; U.S. Patent No. 188,575], the interaction of chemical agents on intact cells (Damodaran, S., Kinsella, JE, Biotechnol. Bioeng. 25, 761-70, 1983; U.S. Patent Nos. 3,615,654 and 3,775,393), the use of heat shock (Deimann, W., Fabrini HD, J. Exptl. Med., 23, 883-897, 1979; U.S. Patent No. 2,081,172). ), enzymatic cleavage of nucleic acids by nucleases en dogogenic and exogenous origin (Rottová, D., Fencl, Z., Food Industry, 30, 531—3. 1979 U.S. Pat. 3,867,255).

Ergosterol i celkové steroly sa najčastejšie izolujú metódou, ktorá před extrakciou do organického rozpúšťadla zahrňuje krok zmýdelnenia. Nezmydelnitelný podiel sterolov sa získá extrakciou nepolárným rozpúšťadlom, najčastejšie sa používá hexán, aceton, připadne extrakčný benzén (Čs. vynález č. 189 440).Ergosterol and total sterols are most commonly isolated by a method that comprises a saponification step prior to extraction into an organic solvent. The unsaponifiable fraction of sterols is obtained by extraction with a non-polar solvent, most often hexane, acetone or benzene (cf. No. 189 440) is used.

Invertáza je jedným z priemyselne najpoužívanejších enzýmov. Tradičnou metódou na uvoínenie kvasničnej invertázy z buňky je auíolýza indukovaná zvýšenou teplotou, alebo chemickým spósobom. Na izoláciu sa využívá predovšetkým precipitácia organickými rozpúšťadlami, najčastejšie etanolom, polyetylénglykolom, dietyléterom (Neumann, P., Lampen, J. O., Biochemistry 6, 468—75, 1967; Bacon, S., Metbods Enzymol. 1, 251 až 262, 1955; čs. vynález č. 101971).Invertase is one of the most industrially used enzymes. A traditional method for releasing yeast invertase from a cell is the auololysis induced by elevated temperature or by chemical means. In particular, precipitation with organic solvents, most commonly ethanol, polyethylene glycol, diethyl ether (Neumann, P., Lampen, JO, Biochemistry 6, 468-75, 1967; Bacon, S., Metbods Enzymol. 1, 251-262, 1955; No. 101971).

Polysacharidy kvasničných buňkových stien sa najčastejšie izolujú parciálnou alkalickou hydrolýzou, napr. glukany a manany (Manners, D. J., Masson, A. J., Patterson, J. C., J. Gen. Microbiol. 80, 411—417, 1974), alebo sa buňková stená kvasiniek enzymaticky naruší trypsínom, nerozpustné polysacharidy sa zbavia rozpuštěných glycidov a produktov odbúrania bielkovín vypieraním (Pillemer, L., Blum, L., Lepow, I. H., Wurz, L., Told, E. W., J. Exptl. Med. 103, 1 až 13, 1956). Týmto postupom je možné pískávat z kvasiniek zymozán (zmes glukanov a mananov), čo je preparát s imunochemickými vlastnostami. Postup přípravy chráni čs AO 185 063 j.Yeast cell wall polysaccharides are most commonly isolated by partial alkaline hydrolysis, e.g. glucans and mannans (Manners, DJ, Masson, AJ, Patterson, JC, J. Gen. Microbiol. 80, 411-417, 1974), or the yeast cell wall is enzymatically disrupted by trypsin, insoluble polysaccharides get rid of dissolved carbohydrates and protein breakdown products by scrubbing (Pillemer, L., Blum, L., Lepow, IH, Wurz, L., Told, EW, J. Exptl. Med. 103, 1-13, 1956). With this procedure it is possible to whistle zymosan (a mixture of glucans and mannan) from yeast, a preparation with immunochemical properties. Preparation procedure protects MS AO 185 063 j.

Nevýhodu týchto postupov je neefektívne využitie východiskové] suroviny. Túto nevýhodu odstraňuje spósob podta vynálezu, ktorého- podstata spočívá v tom, že supernatant kvasničného autolyzátu sa vyzráža etanolom pri teplote 2 až 5 ^JC v objemovorn pomere 0,9 až 2 : 1, zostatok sa po odstraněni etanolu vysuší, zo sedimentu autolyzátu sa vyextrahuje lipidická frakcia 20-násobným nadbytkoro extrakčnej zmesi etanol-hexán v objemovorn pomere 1 : 2, ktorá sa ďalej frakcionuje 5-násobným nadbytkem acetonu, pričom acetonový extrakt sa po zmydelnení 15 %-ným roztokom hydroxidu draselného počas 1 h pri 80 ^CC ďalej extrahuje hexánom, zahustí a po přidaní acetonu na výslednú koncentráciu 33 % hmot. v hexáne krystalizuje pri teplete —5 C, pričom delipidizovaný zvyšok, ktorý zostal po extra kcii lipidov zo sedimentu autolyzátu sa po zriedení vodou na 8 až 10 %-nú suspenziu vysuší. Kvasničný autolyzát sa rozdělí na supernatant hlavně bielkoviny a sediment zahrňujúci neropustné polysacharidy, frakciu lipidov, zvyšky bielkovín a nukleových kyselin, ktoré v priebehu autolýzy zostali viazané na buňkové steny. Supernatant sa finalizuje sušením v rozprašovacej sušiarni ako bielkovinový koncentrát s vysokým obsahom surověj bielkoviny alebo táto frakcia slúži na precipitaáciu preparátu invertázy organickým rozpúšfadlom, popřípadě k získanému supernatantu najskór za zníženej teploty přidáme vhodný objemový poměr organického rozpúšťadla, vzniknutý precipitát invertázy oddělíme centrifugáciou a fungát vysušíme ako proteinový koncentrát. Kompletná sedimentná frakcia sa po vhodnom riedení vodou vysuší v rozprašovacej sušiarni ako biosorbent pre vinárstvo alebo sa zo sedimentu kvantitativné extrahuje lipidická frakcia zmesou. organických rozpúšťadiel. Odseparovaním nerozpustného pedielu po extrakcii sa získajú delipidizované buňkové steny, vhodné pre izoláciu irounoaktívnych glukanov. Z lipidického extraktu sa odpaří rozpúšťadlo, odparek sa premýva nadbytkom acetonu, pričom do roztoku prejdú najma nepoláme lipidy. Po extrakcii zostane v acetone nerozpustná frakcia polárných lipidov, ktorá je vhodná ako emulgátor, například pre přípravu instantného droždia. Koncentrát sterolov možno získať n-hexánovou extrakciou nezmydelnitetného podielu z celkového lipidického extraktu sedimentnej frakcie. Je vhodný pre výrobu vitamínu Dž.The disadvantage of these processes is the inefficient use of the starting material. This disadvantage is removed by a process according to the invention, ktorého- is characterized in that the supernatant of yeast extract was precipitated with ethanol at a temperature of 2-5 C in a ^J objemovorn ratio of 0.9 to 2: 1, the residue was dried by removal of the ethanol, the sediments are autolysate The lipid fraction extracts a 20-fold excess of ethanol-hexane in a 1: 2 ratio by volume, which is further fractionated with a 5-fold excess of acetone, the acetone extract being saponified for 15 hours at 80 ^° C after saponification. It is extracted with hexane, concentrated and after addition of acetone to a final concentration of 33% by weight. in hexane crystallizes at a temperature of -5 DEG C., the delipidized residue remaining after the lipid extraction from the autolysate sediment is dried after dilution with water to an 8-10% suspension. The yeast autolysate is divided into a supernatant mainly of protein and sediment including non-permeable polysaccharides, a lipid fraction, protein and nucleic acid residues that remain bound to the cell walls during autolysis. The supernatant is finalized by spray drying as a protein concentrate with a high crude protein content or this fraction serves to precipitate the invertase preparation with an organic solvent, optionally add a suitable volume ratio of organic solvent to the obtained supernatant at reduced temperature. protein concentrate. After suitable dilution with water, the complete sediment fraction is spray-dried as a biosorbent for viticulture or the lipid fraction is extracted quantitatively from the sediment with the mixture. organic solvents. Separation of the insoluble pedicle after extraction yields delipidized cell walls suitable for the isolation of irounoactive glucans. The solvent is evaporated from the lipid extract, the residue is washed with an excess of acetone, the non-polar lipids being passed into the solution. After extraction, an insoluble fraction of polar lipids remains in acetone, which is suitable as an emulsifier, for example for the preparation of instant yeast. The sterol concentrate can be obtained by n-hexane extraction of the unsaponifiable fraction from the total lipidic extract of the sediment fraction. It is suitable for the production of vitamin D.

Výhodou komplexnej frakcionácie podta vynáleu je teda selektívne využitie pekárskeho droždia. Ďalšou výhodou uvedeného spósobu je, že celý proces je bezodpadovou technológiou, ktorá je nenáročná na materiálové a technické zabezpečenie. Princip komplexnosti vedie k určitým feompromisom v postupoch v porovnaní so sólo izoláciou jednotlivých zložiek, no napriek tomu výtažky a kvalita jednotlivých produktov sú dostatečné uspokojivé. Sposob komplexnej frakcionácie podlá vynálezu možno cíelene modififeova,: podta toho, ktoré produkty stoja v centre zaujmu, najma změnou iniciačných faktorov autolýzy, ovplyvňovaním jej priebehu, respektive změnami procesu izolácie a Unaližácie produktov.Thus, the advantage of the complex fractionation of the invention is the selective use of baker's yeast. Another advantage of this method is that the entire process is a waste-free technology that is not demanding in terms of material and technical security. The principle of complexity leads to some feompromises in procedures compared to solo isolation of individual components, but the yields and quality of the individual products are satisfactory. The process of complex fractionation according to the invention can be specifically modified, depending on which products are at the center of interest, in particular by changing the initiation factors of autolysis, influencing its course, or altering the process of isolation and product depletion.

Z jednej vsádzky pekárskeho droždia možno získat bielkovinový koncentrát pre tudskú výživu obsahujúci 40—80 % proteínov, hrubý preparát invertázy s aktivitou 6—23 ukat/g .sušiny vhodný pre cukrovinárske aplikácie, ergosterol s 80 %-nou čistotu pre farmaceutickú výrobu vitaminu Da, frakcia obsahuje 30 % fosfolipidov, vvužitstná ako emulgátor na přípravu instantného drozda, a produkt obsahujúci 70 % 'polysacharidov, z ktorého možno· získat imunoaktívne glukany, manany pre chemické aplikácie, resp. hydrolyzát pri biotechnologické živné média.From one batch of baker's yeast, protein concentrate for human nutrition containing 40-80% protein can be obtained, coarse invertase preparation with activity of 6-23 ukat / g. Dry matter suitable for confectionery applications, ergosterol with 80% purity for pharmaceutical production of vitamin Da, the fraction contains 30% phospholipids, useful as an instant emulsifier emulsifier, and a product containing 70% polysaccharides from which immunoactive glucans, manganese for chemical applications, and resp. hydrolyzate in biotechnological nutrient media.

Příklad 1Example 1

Dezintegrácia 2 550 ml 10 %-nej suspenzie kvasničných buniek pekárskeho droždia sa iniciuje prídavkom 425 ml čerstvého kvasničného autolyzátu, 26 g NaCl a 128 g etanolu. Autolýza prebieha za stálého miešania pri 50 °C a ukončí sa po 5 hodinách. Autolyzát, ktorý obsahuje 153 g surověj bielkoviny, sa okamžité vysuší, alebo scentrifuguje, čím sa získá 2 400 ml supernatantu, pričom do supernatantu sa uvolní 38 % proteínov z celkového obsahu proteínov v kvasničných buňkách. V sedimente sa oproti íntaktným buňkách zachová nezmenená hladina lipidov a polysacharidov.Disintegration of 2550 ml of a 10% yeast cell suspension of baker's yeast is initiated by the addition of 425 ml of fresh yeast autolysate, 26 g of NaCl and 128 g of ethanol. Autolysis proceeds with stirring at 50 ° C and terminates after 5 hours. The autolysate, which contains 153 g of crude protein, is immediately dried or centrifuged to obtain 2400 ml of supernatant, releasing 38% of the total protein content of the yeast cells into the supernatant. In the sediment, unchanged lipid and polysaccharide levels remain unchanged compared to the inactivated cells.

la) Supernatant sa vysuší v rozprašovače] sušiarni, čím sa získá produkt konzistencie, bieložltej farby, s koncentráciou proteínov 67 % hmot., alebo lb) K supernatantu sa přidá 0,9 naž 2-násobný objem 96 % etanolu, pričom etanol i supernatant sú ochladené na teploau 4 ^CC. Získá sa tak 4,5 g precipitátu s aktivitou invertázy 9 ukat na gram sušiny. Preparát invertázy je vhodný na použitie v potravinárstve, alebo lc) postup rovnaký ako v příklade lb, avšak po oddělení precipitátu invertázy centrifugáciou sa fugát vysuší v rozprašovacej sušiarni na proteinový koncentrát.1a) The supernatant is spray-dried in an oven to obtain a product of consistency, white in color, with a protein concentration of 67% by weight, or 1b) To the supernatant is added 0.9 to 2 times the volume of 96% ethanol, both ethanol and supernatant They are cooled to a temperature of 4 ^° C. This gives 4.5 g of precipitate with invertase 9 activity per gram of dry matter. The invertase preparation is suitable for use in the food industry, or lc) the same procedure as in Example 1b, but after separating the invertase precipitate by centrifugation, the fugate is spray dried to a protein concentrate.

ld) Sediment sa riedi vodou a vysuší sa v rozprašovacej sušiarni. Získaný produkt má výhodné adsorpčné vlastnosti, porovnatelné s komerčnými preparátmi zahraničných firiem používaných ako biosorbenty vo vinárstve na stimuláciu kvasenia hroznových mušktov, alebo lej sediment sa zmydelňuje 3-násoobným hmotnostným množstvom etanolického roztoku KOH (1 mol/1) 3 hodiny pod spatným chladičem. Po ukončení alkalickej hydrolýzy a ochladení obsahu sa přidá destilovaná voda v množstve zodpovedajúcom 1/3 celkového objemu hydrolýzovaného sedimentu. Zmes sa premieša a extrahuj 3-krát n-hexánom v objemovom pomere 1 : 1. Hexanové extrakty sa spoja, rozpústadlo sa odpaří a sterolový koncentrát prefúka prúdom inertného' plynu. Uvedeným postupom možno získat až 80 % celkových kvasničných sterolov 50 %-nej čistoty. Preparát je možné využit priamo v polnohospodárstve na deratizačně účely, alebo po ďalšej purifikácii a konverzii na vitamín D2 vo farmácii.ld) Dilute the sediment with water and dry in a spray drier. The product obtained has advantageous adsorption properties, comparable to commercial preparations of foreign companies used as biosorbents in the winery to stimulate the fermentation of grape musts, or the slaked sediment is saponified with a 3-fold amount of ethanolic KOH solution (1 mol / l) for 3 hours under a bad condenser. After the alkaline hydrolysis is complete and the contents are cooled, distilled water is added in an amount corresponding to 1/3 of the total volume of the hydrolyzed sediment. The mixture is stirred and extracted 3 times with n-hexane (1: 1 by volume). The hexane extracts are combined, the solvent is evaporated and the sterol concentrate is purged with a stream of inert gas. Up to 80% of the total yeast sterols of 50% purity can be obtained by this process. The preparation can be used directly in agriculture for rodent control purposes or after further purification and conversion to vitamin D2 in pharmacy.

If) Zo sedimentu sa extrahujú lipidy 20-násobným nadbytkom extrakčnej zmesi etanol-hexán v, objemovom pomere 1 : 2. Extrakt sa zahustí a k němu sa přidá, 500 ml acetónu. Koncentrovaný acetonový extrakt sa zmydelní 200 ml 15 %-ného metanolickébo KOH počas 1 hodiny pri CO ^CC a nezmydelnitelný podiel sa extrahuje bexánom. Hexánový extrakt sa odpaří na konečný objem 100 ml. K tomuto objemu sa přidá aceton a roztok sa ochladí na, —5 ^CG. Týmto postuipom sa získá 3,26 g preparátu vo formě bieložltých ihličiek, ktorý obsahuje 1,99 g sterolov, čo představuje 69,8 % z obsahu sterolov v intaktnom droždí. Získaná sterolová frakcia sa dá použiť na přípravu vitamínu Dr pre farmaceutické aplikácie, aleboIf) The lipids are extracted from the sediment with a 20-fold excess of ethanol-hexane extraction mixture (1: 2 by volume). The extract is concentrated and 500 ml of acetone is added. The concentrated acetone extract was hydrolyzed in 200 ml of 15% KOH metanolickébo for 1 hour at ^C CO C and the unsaponifiable portion was extracted bexánom. The hexane extract is evaporated to a final volume of 100 ml. Acetone is added to this volume and the solution is cooled to -5 ^° C. This procedure yields 3.26 g of white-needle needles containing 1.99 g of sterols, which represents 69.8% of the sterol content of the intact yeast. The sterol fraction obtained can be used to prepare vitamin D for pharmaceutical applications, or

Igj lipidická frakcia sa extrahuje zo sedimentu 20-násobným nadbytkom extrakčnej zmesi etanol-hexán v objemoovom pomere 1 : 2. Rozpúšťadlo sa odpaří. Odparok sa extrahuje 4—5-krát 5-násobrtým nadbytkom acetonu. Po extrakcii zosíáva v acetone nerozpustná frakcia polárných lipidov (ccaThe Igj lipid fraction was extracted from the sediment by a 20-fold excess of ethanol-hexane extraction mixture (1: 2 by volume). The solvent was evaporated. The residue is extracted 4-5 times with a 5-fold excess of acetone. After extraction, the insoluble fraction of polar lipids crosses in acetone (ca.

3,5 g), ktorá obsahuje 30 % fosfolipidov. Táto frakcia može byť využitá pri príprave instantného droždia. Acetonové extrakty sa spoja, pričom postup ďalšieho spracovania je analogický ako v příklade le.3.5 g) containing 30% phospholipids. This fraction can be used in the preparation of instant yeast. The acetone extracts were combined, the further processing being analogous to Example 1e.

lhj Delipidizované buňkové steny, ktoré sa získajú extrákciou lipidickej frakcie podlá postupov If a lg sa odfiltrujú, zhomogenizujú a po nariadení vodou sa vysušia v rozprašovacej sušiarni. Získá sa tak velmi jemný práškovitý produkt, ktorý obsahuje 68—73 % polysacharidov, vhodný pre izoláciu čistých glukanov pre imunolarmakologické účely.1hj Delipidized cell walls, which are obtained by extraction of the lipid fraction according to the procedures of If and 1g, are filtered, homogenized and, after dilution with water, dried in a spray drier. A very fine powder product is obtained which contains 68-73% of polysaccharides, suitable for isolation of pure glucans for immuno-alaracological purposes.

Příklad 2Example 2

Postup rovnaký ako v příklade 1, autolýza sa ukončí po 24 hodinách. V priebehu autolýzy sa do supernatantu uvolní viac ako 87 % z celkového obsahu proteínov v kvasničných buňkách.Following the procedure of Example 1, the autolysis was terminated after 24 hours. During autolysis, more than 87% of the total protein content of the yeast cells is released into the supernatant.

2a j Postup rovnaký ako v příklade la, bielkovinový produkt obsahuje 76 % bielkovín.2a j Following the procedure of Example 1a, the protein product contains 76% protein.

2b) Postup rovnaký ako v příklade lb, precipitátu sa však získá. 15 g, čo je vlastně preparát invertázy s aktivitou 6,8 ukat na gram sušiny.2b) The procedure is the same as in Example 1b, except that a precipitate is obtained. 15 g, which is actually an invertase preparation with an activity of 6.8 knots per gram of dry matter.

Příklad 3Example 3

Postup rovnaký ako v příklade 1, použije sa však objem 10 °/o suspenzie pekárskeho droždia — 1700 ml. Autolýza sa iniciuje prídavkom 170 ml čerstvého kvasničného autolyzátu, 2 g chloridu sodného a 17 g etanolu. Autolýza priebieha pri 50 °C za stálého miešania a ukončí sa po 10 hodinách. Autolyzát obsahuje 90 g surověj bielkoviny. Po centrifugácii sa získá 1300 ml supernatantu a 596 g sedimentu, pričom do supernatantu sa uvolní 30 °/o z celkového obsahu proteínov v kvasničných buňkách.The procedure is the same as in Example 1, except that a 10% volume of baker's yeast suspension - 1700 ml is used. Autolysis was initiated by the addition of 170 ml of fresh yeast autolysate, 2 g of sodium chloride and 17 g of ethanol. Autolysis is carried out at 50 ° C with stirring and terminated after 10 hours. The autolysate contains 90 g of crude protein. After centrifugation, 1300 ml of supernatant and 596 g of sediment are recovered, releasing 30% of the total protein content of the yeast cells into the supernatant.

3a] Postup rovnaký ako v přiklade la, bielkovlnový produkt však obsahuje 80 % surověj bielkoviny.3a] Procedure similar to Example 1a, but the proteinaceous product contains 80% crude protein.

b) Postup rovnaký ako v příklade lb, precipitáciou sa získá 1,7 g preparátu s aktivitou invertázy 23,5 ukat na gram sušiny.(b) Procedure as in Example 1b, precipitating 1.7 g of a preparation with an invertase activity of 23.5 kilograms per gram of dry matter.

Claims

SUBJECT

Process for the complex fractionation of baker's yeast, characterized in that the yeast autolysate supernatant is precipitated with ethanol at a temperature of 2 to 5 ^° C in a volume ratio of 0.9 to 2: 1, the residue is dried after removal of ethanol and the lipid fraction is extracted from the autolysate sediment. Excess of ethanol: hexane (1: 2 by volume) is further fractionated with a 5-fold excess of acetone and the acetone extract is then extracted with hexane for 1 hour at 80 ° C after saponification with a 15% solution of potassium hydroxide. and after addition of acetone to a final concentration of 33% w / w. in hexane crystallizes at -5 ° C, the delipidized residue remaining after the lipid extraction from the autolysate sediment is dried after dilution with water to an 8-10% suspension.

Severography, n. p. Race 7, Most

Price 2,40 Kčs