CS259211B1 - Spůsob výroby amfolytických pufrov - Google Patents
Spůsob výroby amfolytických pufrov Download PDFInfo
- Publication number
- CS259211B1 CS259211B1 CS855672A CS567285A CS259211B1 CS 259211 B1 CS259211 B1 CS 259211B1 CS 855672 A CS855672 A CS 855672A CS 567285 A CS567285 A CS 567285A CS 259211 B1 CS259211 B1 CS 259211B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- ampholytic
- buffers
- solution
- hydrochloric acid
- hydrolysis
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Očelom spósobu výroby amfolytických pufrov na báze bielkovín je ich rozloženie na základné stavebné kamene - aminokyseliny a ich torza minerálnou hydrolýzou. Uvedeného účelu sa dosiahne použitím štandardného odstředěného mlieka s 6 molárnou kyselinou chlorovodíkovou pri teplote 105 °C po dobu 40 hodin. Po hydrolýze sa kyselina chlorovodíková z roztoku odpaří a zostavajúci roztok sa podrobí autofokusácii. Zo získaných frakcií sa pre konečný produkt vyberajú tie, ktoré sa najviac bližia svojimi hodnotami požadovanému rozsahu. Spósob výroby amfolytických pufrov móže nájst široké praktické použitie vo výskumných pracoviskách, v priemysle farmaceutickom, chemickom, potravinárskom a pri všetkých využitiach elektromigračných technik.
Description
Vynález sa týká spůsobu přípravy amfolytických pufrov, vhodných pre elektromigračné metody, ako izoelektrické fokusovánie.
Doteraz sa pre izoelektrické fokusovánie a iné elektromigračné metodiky ako amfolytické pufre používali syntetické látky. Příprava týchto látok je velmi zložitá a nákladná. Préto sú uvedené výrobky ťažko dostupné a vylučujú ich použitie v preparatívnom meradle pri priemyselnom použití. Výroba amfolytických pufrov podía ČSSR AO č. 187 104 má tú nevýhodu, že východzia surovina obsahuje až 40 % solí, čo komplikuje spůsob výroby, pretože vyžaduje odsolovanie gélovou filtráciou.
Uvedené nevýhody odstraňuje vypAlez, ktorého podstata spočívá v tom, že bielkoviny získané z odstrodeného mlieka Standardného zloženia sa podrobia minerálnej hydrolýze kyselinou chlorovodíkovou. Táto sa zo vzniknutého roztoku odstráni odpařením a zostávajúcim roztokom sa po přefiltrovaní naplní autofokusačná aparatúra, kde působením jednosměrného prúdu sa získá gradient pH. Zmiešaním vybraných frakcií sa ziskavajú amfolytické pufre požadovaného rozsahu.
Vynález umožňuje jednoduchú výrobu velkého množstva amfolytických pufrov so štandardnými vlastnosťami, bez obsahu sacharózy pre analytické i priemyselné použitie izoelektrickej separácie, expedovatelné aj v lyofilizovanom stave, čo predlží expiračnú dobu pufrov. Příklad K príprave amfolytických pufrov z odstředěného mlieka s maximálnym obsahom tuku 0,05 objem, percent, ktoré obsahuje 26 až 30 g kazeínu v litri. Prvým krokom je izoláoia mliečnej bielkoviny vyzrážaním v izoelektrickom bode pri pH 4,7 jednomolárnym roztokom 4 -2 kyseliny chlorovodíkovéj. Po naslednom odstředění pri 10 m.s 20 minút sa na izolovaný kazeín působí šesťmolárnym roztokom kyseliny chlorovodíkovéj v pomere 1:50 k množstvu bielkoviny, ktorá sa Sálej hydrolyzuje pod spatným chladičom pri teplote 105 °C 40 hodin.
Do roztoku sa přidává 10 ml/1 kyseliny mravenčej, aby sa zabránilo vzniku huminových látok, ktoré sú produktami rozkládájúceho sa tryptofánu v přítomnosti cukorných zložiek.
Préd započetím hydrolýzy sa do roztoku přidává 1 % hmot. aktivného uhlí, ktorý už behom hydrolýzy vlaže na seba vMčšinu látok obsahujúcich ultrafialové světlo a roztok vyčiruje. Po skončení hydrolýzy sa roztok ochladí na teplotu 20 °C a po filtrácii-sa z filtrátu odpaří kyselina chlorovodíková za zníženého tlaku najvhodnéjšie v rotačnom odparováku pri teplote 40 °C tak, aby výsledný roztok vykazoval měrnou elektrickou vodivost 2 až 3 mS.cm Potom sa roztok naleje do autofokusera, kde prebieha autofokusácia pri 4 °C po dobu 48 až 72 hodin tak, aby příkon elektrického prúdu nepřesahoval 3 W. Napatie sa postupné zvyšuje z počiatočných 100 W až na 100 W. Po ukončeni autofokusovánia, kéS klesne prúd pod 0,5 mA sa z fokusačnej aparatúry zhromaždia tie frakcie, ktoré sú najbližšie v gradiente pH k hodnotám, žiadúcim po projekci! potřebného rozsahu pH pre výsledný produkt.
Zvolená zmes sa podía potřeby může ešte raz refokusovať. Výsledná vodivost pufrov sa upraví na 1 mS.cm a obsah sušiny na 40 % hmot. Získaný produkt sá pre izoelektrickú fokusáciu použije v 2 až 3 objemových % koncentrácii v pomere k médiu.
Vynález může nájsť široké praktické použitie vo výskumných pracoviskách, v priemysle farmaceutickorn, chemickom, potravinárskom a pri všetkých využitiach elektromigračných technik.
Claims (1)
- PREDMET VYNÁLEZU Spůsob výroby amfolytických pufrov na báze bielkovín vyznačujúci sa tým, že odstředěné mlieko sa hydrolyzuje kyselinou chlorovodíkovou, výhodné 6 mol kyselinou chlorovodíkovou, následné odpařuje do hodnoty vodivosti roztoku 2 až 3 mS.cm a roztok sa autofokusuje aspoň 48 hod.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS855672A CS259211B1 (cs) | 1985-08-02 | 1985-08-02 | Spůsob výroby amfolytických pufrov |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS855672A CS259211B1 (cs) | 1985-08-02 | 1985-08-02 | Spůsob výroby amfolytických pufrov |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS567285A1 CS567285A1 (en) | 1988-02-15 |
| CS259211B1 true CS259211B1 (cs) | 1988-10-14 |
Family
ID=5402015
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS855672A CS259211B1 (cs) | 1985-08-02 | 1985-08-02 | Spůsob výroby amfolytických pufrov |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS259211B1 (cs) |
-
1985
- 1985-08-02 CS CS855672A patent/CS259211B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS567285A1 (en) | 1988-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5455331A (en) | Enriched whey protein fractions and method for the production thereof | |
| US4042576A (en) | Extraction of glycoproteins and sialic acid from whey | |
| Maubois | Ultrafiltration of whey | |
| EP0604684B1 (en) | Process for the recovery of alpha-lactalbumin and beta-lactoglobulin from a whey protein product | |
| US3969337A (en) | Chromatographic fractionation of whey | |
| US4582580A (en) | Process for the separation of immunoglobulins from colostrum | |
| EA023615B1 (ru) | Способ выделения остеопонтина с применением концентрированных продуктов питания | |
| AU677230B2 (en) | A process for producing beta-casein enriched products | |
| US3728327A (en) | Protein and method of extracting same from soybeans employing reverse osmosis | |
| De Wit et al. | Evaluation of functional properties of whey protein | |
| EP0291264B1 (en) | Process for the production of k-casein glycomacropeptide | |
| JPH01165343A (ja) | ホエーからα−ラクトアルブミン含量の高い濃縮物を製造する方法 | |
| EP0320152B1 (en) | Isolation of an immunoglobulin rich fraction from whey | |
| AU622428B2 (en) | Continuous process for the preparation of gelatin from powdered bone, and gelatin obtained | |
| US4844923A (en) | Method for removing serum proteins from milk products | |
| Al Kader et al. | Demineralisation and recovery of whey proteins from commercial full-fat salty Cheddar whey using size-exclusion chromatography | |
| Zhuravskaya et al. | Concentration of proteins as a result of the phase separation of water‐protein‐polysaccharide systems Part 2. Concentration of milk proteins | |
| JPS61268138A (ja) | 改質ホエ−蛋白濃縮物の製造法 | |
| JP3225080B2 (ja) | κ−カゼイングリコマクロペプチド含有量の高い組成物の製造方法 | |
| Ivanovna et al. | Whey permeate mineral profile at various stages of membrane filtration | |
| US5436014A (en) | Removing lipids from cheese whey using chitosan | |
| JPH04228036A (ja) | 塩を含有する透明な乳清タンパク質加工品の製造法 | |
| CHEN | Clarification of Cheese Whey by Aqueous Two‐Phase Systems | |
| SU1242098A1 (ru) | Способ получени концентрата из подсырной сыворотки дл использовани в пивоварении | |
| IE920012A1 (en) | Process for the separation of whey proteins and products¹obtained |