CS254731B1

CS254731B1 - 1-(2-Chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]-močoviny a způsob jejich výroby

Info

Publication number: CS254731B1
Application number: CS865609A
Authority: CS
Inventors: Antonin Cerny; Jiri Krepelka; Milan Melka
Original assignee: Antonin Cerny; Jiri Krepelka; Milan Melka
Priority date: 1986-07-24
Filing date: 1986-07-24
Publication date: 1988-01-15
Also published as: CS560986A1

Abstract

Řešení se týká 1-(2-chlorethyl)- “3“ E4“(6-purinylthio)butyljmočovin obecného vzorce I s(ch2)4nhconch2ch2ci (I) ve kterém X značí atom vodíku nebo nitrososkupinu a způsobu jejich výroby spočívajícím v reakcí 6-(4-aminobutylthio)purinu s 2-chlorethylisokyanátem a v následující nitrosaci vzniklé močoviny na 1-(2-chlorethyl)-1-nitroso- -3-[4-(6-purinylthio)butyl]močovinu. Nitrosomočovina vykázala významnou antineoplastickou účinnost u zvířat s experimentálními nádory

Description

Vynález se týká 1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močovin obecného vzorce I s(ch₂)₄nhconch₂ch₂ci

Ν. X ve kterém X značí atom vodíku nebo nitroskupinu a způsobu jejich výroby.

Nitrosomočoviny, hlavně 3-substituované 1-(2-chlorethyl)-1-nitrosomočoviny, jsou cytostatika alkylačního typu, z nichž některých, hlavně 1-(2-chlorethyl)-3-cyklohexyl-1-nitrosomočoviny (CCNU; NSC 79 037) se široce používá v klinické praxi. Stále však jsou hledány výhodnější nosiče pro alkylačné působící 3-(2-chlorethyl)-3-nitrosoureidový zbytek uvedených cytostatik. Sloučeniny podle vynálezu obsahuji jako takový nosič 4-(6-purinylthio)butylovou skupinu odvozenou od antineoplasticky účinné kyseliny 5-(6-purinylthio)valerové (viz čsl. pat. 82 287) a mají tak jednak charakter látek s alkylačním účinkem a jednak charakter antimetabolitů purinových basí nukleových kyselin.

Podle vynálezu se 1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močoviny obecného vzorce I vyrábějí tím způsobem, že se 6-(4-aminobutylthio)purin vzorce II

H uvede do reakce s 2-chlorethylisokyanátem vzorce III cich₂ch₂nco (III) a vzniklá 1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močovina vzorce la s(ch₂)₄nhconhch₂ch₂ci

(la) se nitrosuje působením kyseliny dusité za vzniku 1-(2-chlorethyl)-l-nitroso-3-[4-(6-purinylthio) butyl]močoviny vzorce lb s(ch₂)₄nhconch₂ch₂ci

NO (lb)

Nový 6-(4-aminobutylthio)purin vzorce II se používá jako výchozí sloučenina při přípravě močoviny vzorce la. Výchoz! aminolátka vzorce II se vyrábí Curtiovým odbouráním azidu kyseliny

5-(6-purinylthio)valerové vzorce IV S(CH₂)₄CON₃ (IV)

působením kyseliny chlorovodíkové za varu.

Reakce 2-chlorethylisokyanátu vzorce III s 6-(4-aminobutylthio)purinem vzorce II se provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, jako v dioxanu, tetrahydrofuranu, dimethylformamidu nebo dimethylsulfoxidu, při teplotě v rozmezí od teploty místnosti do 70 °C. Žádaný produkt vzorce la se isoluje z reakční směsi běžnými způsoby, výhodně nalitím reakční směsi do vody a krystalisací odfiltrované, relativně velmi čisté surové látky.

. Nitrosace močoviny vzorce la na nitrosoderivát vzorce Ib se provádí účelně v bezvodém prostředí, výhodně v roztoku látky vzorce la v nižší alifatické organické kyselině, například v kyselině mravenčí nebo v kyselině octové, působením kyseliny dusité, uvolňované v uvedeném prostředí z dusitanu alkalického kovu, jako z dusitanu sodného, nebo z nižšího alkylesteru kyseliny dusité, například z butylnitritu. Reakce se provádí při teplotě +5 až +20 °C, za použití 1,2 až 2 molekvivalentů dusitanu alkalického kovu nebo alkylnitritu. Žádaný nitrosoderivát vzorce Ib se isoluje z reakční směsi známými způsoby, výhodně tak, že se reakční směs zředí vodou, surový produkt se odfiltruje a čistí sloupcovou chromatografií'a/nebo krystalisací. Nitrosoraočovina vzorce Ib je světležlutá krystalická látka citlivá na teplo a alkálie.

Převedení azidu vzorce IV na amin vzorce II se provádí postupným vnášením pevného azidu nebo pomalým přikapáváním jeho roztoku ve vhodném inertním rozpouštědle, jako v dioxanu nebo tetrahydrofuranu, do vroucí zředěné, výhodně 0,1 až 0,5 M kyseliny chlorovodíkové. Rychlost přidávání azidu se řídí intensitou při reakci se vyvíjejícího dusíku, která při rychlém přidání může nabýt až bouřlivého charakteru. Jako vedlejší reakce se při uvedeném postupu uplatňuje štěpení sulfidické vazby v látce vzorce II, probíhající při působení kyseliny chlorovodíkové za vyšší teploty za vzniku hypoxanthinu; je proto účelné provádět uvedené odbourávání azidu co nejrychleji. Potřebný azid vzorce IV se dá připravit popsaným způsobem působením dusitanu sodného na roztok hydrazidu kyseliny 5-(6-purinylthio)valerové ve zředěné kyselině chlorovodíkové (viz čsl. pat. 128 123).

Potřebný 2-chlorethylisokyanát je komerčně dostupný preparát, popřípadě ho lze vyrábět popsanými způsoby (viz například Siefken W., Ann. Chem. 562, 103 (1949)).

Nitrosomočovina vzorce Ib měla při testování na experimentálních myších a krysích nádorech protinádorový účinek projevující se ve srovnání s kontrolními neléčenými zvířaty bud snížením průměrné hodnoty hmotnosti nádoru nebo prodlouženou průměrnou hodnotou doby přežití nebo příznivým ovlivněním obou těchto ukazatelů. Využitelný terapeutický účinek t,éto látky byl prokázán např. u myší H s Crockerovým sarkomem 180, kde ve srovnání s kontrolní skupinou látka v dávce 200 mg/kg p.o. snížila hmotnost nádoru na 39 % a souběžně prodloužila dobu přežití na 132 %. U myší DBA/2 s leukémií L1210 v téže dávce látka prodloužila dobu života léčených zvířat na 151 %.

Protinádorový účinek, projevující se snížením průměrné hodnoty totálního ascitokritu, byl prokázán i u zvířat s dalšími experimentálními nádory; tak například po dávce 200 mg/kg p.o. bylo prokázáno snížení hodnot totálního ascitokritu u myší s nádory ATE (73 %),

Sa37 (71 %), Kr2 (47 %) a NK (83 %). Po poloviční dávce (1 x 100 mg/kg p.o.) bylo průkazné snížení těchto hodnot u myší s nádorem Sa37 (70 %) a Kr2 (66 %). U Yoshidova nádoru,

Zajdelova ascitického hepatomu a solidní formy Ehrlichova nádoru protinádorový účinek prokázán nebyl. V pokusech in vitro na buňkách Yoshidova nádoru výrazně převažovala inhibice

-5 -1 biosyntézy DNA (IC_cr. pro 5-jod-2'-deoxy/6- H/uridin 1,8 .* 10 mol.l ) nad inhibicí pro^bU 14 -4 -i teosyntézy nádorových buněk (IC,-_n pro /U- C/aminokyselinovou směs 6 . 10 mol.l , s pre~·^υ -7 -4 -1 vahou degradace bílkovin nad proteosyntézou v koncentračním intervalu 10 az 10 mol.l ).

U látky vzorce la byl protinádorový účinek naznačen v dávce 8 x 100 mg/kg p.o. u myší s Crockerovým nádorem 180 (přežití 111 %) a Sa37 (přežití 107 %).

Způsob podle vynálezu je blíže objasněn v následujících příkladech provedení, které však rozsah vynálezu nijak neomezují. Teploty tání uvedených sloučenin jsou stanoveny na Koflerovu bloku a jsou uvedeny, stejně jako ostatní údaje teplot, ve °C. Procentické údaje jsou uvedeny v hmotnostních %.

Příklad 1

1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močovina (Ia)

K suspenzi 2,23 g (0,01 mol) 6-(4-aminobutylthio)purinu v 16 ml bezvodého dimethylformamidu se za míchání přidá 1,06 g (0,01 mol) 2-chlorethylisokyanátu a směs se zahřívá 2 h na lázni 50 až 55 °C teplé. Roztok se nechá stát přes noc při teplotě místnosti, pak se nalije do 50 ml ledové vody, směs se okyselí zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (1:5) na pH 3 a vyloučený produkt se odfiltruje. Získá se 1,45 g (výtěžek 68 %) sloučeniny Ia, t.t. 142 až 145 °C (zředěná kyselina octová).

Příklad 2

1-(2-chlorethyl)-l-nitroso-3- [4-(6-purinylthio)butyl]močovina (Ib)

Do roztoku 1,64 g (5 mmol) 1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močoviny (Ia) ve 4 ml 99,5% kyseliny mravenčí se za míchání, při teplotě +5 až +7 °C, po částech vnese 0,47 g (6,8 mmol) rozetřeného dusitanu sodného. Reakčni směs se míchá 1 h při uvedené teplotě, pak se nalije do 40 ml ledové vody a vyloučený olejovitý produkt, který stáním ztuhne, se odfiltruje. Surový produkt (1,49 g) se chromatografuje na sloupci silikagelu, za použití směsi chloroformu s ethanolem 9:1 k eluci látek. Ze spojených jednotlivých frakcí, obsahujících méně polární látku, se oddestilují rozpouštědla za sníženého tlaku, odparek se rozpustí v kyselině mravenčí, roztok se zředí vodou a vyloučená látka odfiltruje. Získá se 0,99 g (výtěžek 55,3 %) nitrosomočoviny Ib o t.t. 142 až 143 °C.

Příklad 3

6-(4-aminobutylthio)purin (II)

K roztoku 4,0 g (15 mmol) hydrazidu kyseliny 5-(6-purinylthio)valerové ve 150 ml (30 mmol) 0,2 M kyseliny chlorovodíkové se za míchání a chlazení, při teplotě 0 až +3 °C, přikape během asi 15 min roztok 150 ml (15 mmol) 1 M dusitanu sodného. Reakčni směs se míchá 1,5 h při uvedené teplotě, pak se zneutralisuje 15 ml (15 mmol) 1 M vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a vyloučený azid se po 1 h odfiltruje a promyje vodou. Ještě vlhký azid (4,1 g) se rozpustí při teplotě místnosti ve 40 ml dioxanu a roztok se během asi 10 min přikape do 75 ml (15 mmol) vroucí 0,2 M vodné kyseliny chlorovodíkové. Směs se zahřívá dalších 5 min k varu, pak se zahustí za sníženého tlaku asi na objem 5 ml a roztok se zředí 60 ml horkého acetonu. Po ochlazení se vyloučí 2,9 g (výtěžek 74,4 %) hydrochloridu 6-(4-amino butylthio)purinu, který po překrystalisování z vodného acetonu má t.t. 237 až 238 °C.

Base se uvolní z roztoku 2,6 g (10 mmol) shora uvedeného hydrochloridu ve 13 ml vody přidáním 1,05 ml (10,5 mmol) 10 M hydroxidu sodného. Vyloučí se dihydrát base II.(1,84 g, výtěžek 70,8 %) o t.t. 94 až 96 °C, který vysušením při 100 °C/27 Pa ztrácí krystalicky vázanou vodu a má pak t.t. 167 až 168 °C.

Claims

PŘEDMĚT VYNÁLEZU

1. 1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močoviny obecného vzorce I

S(CH₂|₄NHCOI\)CH₂CH₂CI N. X ve kterém X značí atom vodíku nebo nitrososkupinu.

(I),
2. Způsob výroby 1-(2-chlorethyl)-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močovin podle bodu 1 obecného vzorce I vyznačující se tím, že se 6-(4-aminobutylthio)purin vzorce II (II) , uvede do reakce s 2-chlorethylisokyanátem vzorce III cich₂ch₂nco (III), a vzniklá 1-(2-chlorethyl)-3-£4-(6-purinylthio)butyl]močovina vzorce la

S(CH₂)₄NHCONHCH₂CH₂CI (la) , se popřípadě nitrosuje kyselinou dusitou za vzniku 1-(2-chlorethyl)-l-nitroso-3-[4-(6-purinylthio)butyl]močoviny vzorce Ib s(ch₂)₄nhco^ich₂ch₂ci

NO (Ib) ,
3. Způsob podle bodu 2 vyznačující se tím, že se nitrosace provádí v prostředí nižší alifatické karboxylové kyseliny, výhodně v prostředí kyseliny mravenčí nebo octové, působením dusitanu alkalického kovu nebo nižšího alkylesteru kyseliny dusité při teplotě +5 až +20 °C.