CS253602B1 - Analytic agent for substrates determination by means of oxidative coupling - Google Patents
Analytic agent for substrates determination by means of oxidative coupling Download PDFInfo
- Publication number
- CS253602B1 CS253602B1 CS859696A CS969685A CS253602B1 CS 253602 B1 CS253602 B1 CS 253602B1 CS 859696 A CS859696 A CS 859696A CS 969685 A CS969685 A CS 969685A CS 253602 B1 CS253602 B1 CS 253602B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- oxidative coupling
- substances
- determination
- coupling
- reagent
- Prior art date
Links
- 238000005691 oxidative coupling reaction Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title abstract 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 18
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 8
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 4
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 18
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 6
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 4
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 3
- WXTMDXOMEHJXQO-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=CC=C1O WXTMDXOMEHJXQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010089254 Cholesterol oxidase Proteins 0.000 description 2
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 2
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- PHOLIFLKGONSGY-CSKARUKUSA-N (e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine Chemical compound C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 PHOLIFLKGONSGY-CSKARUKUSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 229960005219 gentisic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 125000000864 peroxy group Chemical group O(O*)* 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000000276 potassium ferrocyanide Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical compound [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- XOGGUFAVLNCTRS-UHFFFAOYSA-N tetrapotassium;iron(2+);hexacyanide Chemical compound [K+].[K+].[K+].[K+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] XOGGUFAVLNCTRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Řešení se týká analytického činidla pro stanovení substrátů oxidační kopulací obsahujících pufr, kopulační složky a enzymy, které podle vynálezu obsahuje redukující látky v určitém· množství v poměru k roztoku kompletního analytického činidla. Oproti současně používaným činidlům uvedené činidlo potlačuje vliv pozitivně interferujících látek.The present invention relates to an analytical reagent for determination of substrates by oxidative coupling containing buffer, coupling components a enzymes which contain reducing agents according to the invention substances in a certain amount in proportion to a solution of the complete analytical reagent. Compared to currently used agents listed the agent suppresses the effect of positively interfering substances.
Description
Vynález se týká analytického Činidla pre stanovení substrátů oxidační kopulací potlačující vliv pozitivně interferujících látek a způsob jeho přípravy.The invention relates to an analytical reagent for the determination of substrates by oxidative coupling suppressing the influence of positively interfering substances and to a process for its preparation.
Analytické systémy založené na oxidační kopulaci jsou v současné době široce využívány pro stanovení látek, které se vliverm specificky působících enzymů oxidují kyslíkem za vzniku oxidačních produktů a peroxidu vodíku. Peroxid vodíku se využívá v další reakční sekvenci k oxidační kopulaci katalyzované nejčastěji enzymem peroxidasou a vzniklé zbarvení se měří fotometricky. Jako kopulační složky se obvykle používají 4-aminoantipyrin, s různými fenoly nebo 3-methyl-2~benzothiazolinon hydrazon s aromatickými aminy. Tímto postupem jsou například stanovovány glukosa, cholesterol, kyselina močová, triacylglyceroly a další látky» Oxidace glukosy je katalysována enzymem glukosar· xoxidasou, oxidace kyseliny močové enzymem urikasou, oxidace cholesterolu enzymem cholesteroloxidasou.Analytical systems based on oxidative coupling are currently widely used for the determination of substances which are oxidized by oxygen to the effect of specific enzymes to form oxidation products and hydrogen peroxide. Hydrogen peroxide is used in the next reaction sequence for oxidative coupling catalysed mostly by the enzyme peroxidase and the resulting color is measured photometrically. 4-Aminoantipyrine, with various phenols or 3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone with aromatic amines, are usually used as coupling components. For example, glucose, cholesterol, uric acid, triacylglycerols and other substances are determined by this procedure. »Oxidation of glucose is catalysed by the enzyme glucose oxidase, oxidation of uric acid by the enzyme uricase, oxidation of cholesterol by the enzyme cholesteroloxidase.
Zatímco prvá reakční sekvence využívající enzymů specificky katalysující oxidaci analytu, který je současně pro daný enzym substrátem, je specifická, je druhá reakční sekvence, při níž probíhá kopulace, reakcí nespecifickou. Může být totiž vyvolána jak peroxidem vodíku vznikajícím v prvé reakční sekvenci, tak i jinými peroxosloučeninami nebo dalšími látkami, které mohou samy působit oxidačně, nebo jako katalysátory kopulace přímo na vzdušný kyslík.While the first reaction sequence utilizing enzymes specifically catalyzing the oxidation of the analyte, which is at the same time a substrate for the enzyme, is specific, the second reaction sequence in which the coupling takes place is a non-specific reaction. It can be induced either by the hydrogen peroxide produced in the first reaction sequence, or by other peroxy compounds or other substances which may themselves act as oxidizing agents or as catalysts for coupling directly to atmospheric oxygen.
Průběh oxidační kopulace je výrazně rušen prakticky většinou redukujících látek, které snižují obsah peroxide vodíku vzniklého prvou reakční sekvencí, a tím negativně ovlivňují analýzu. Je známo, že tyto analysy jsou rušeny kyselinami askorbovou, gentisovou, močovou a dalšími redukujícími látkami přít 2S3 602 tomnými například v biologickém materiálu. Některá z redukovadel jsou dokonce schopná odbarvovat vzniklé barvivo.The course of the oxidative coupling is significantly disturbed by virtually most reducing substances, which reduce the hydrogen peroxide content formed by the first reaction sequence and thus negatively affect the analysis. It is known that these analyzes are interfered with ascorbic acid, gentisic acid, and uric other reducing agents at T 602 2S3 tomnými example, in biological material. Some of the reducing agents are even capable of bleaching the resulting dye.
Bylo zjištěno, že zejména některé chemikálie, jako jsou pufry a detergenty, které jsou používány v činidlech pro stanovení oxidační kppulací, obsahují látky vyvolávající kopulační reakce i bez přítomnosti stanoveného analytu. Tím nespecifickým způsobem narůstá absorbance reakční směsi, mění se současně citlivost stanovení, jeho přesnost a správnost a u metod využívajících kinetické způsoby měření se mění počáteční rychlost nekontrolovatelným způsobem.In particular, it has been found that some chemicals, such as buffers and detergents, which are used in reagents for the determination of oxidative coupling, contain coupling agents in the absence of the analyte to be determined. In this way, the absorbance of the reaction mixture increases in an unspecific manner, the sensitivity of the assay changes, its accuracy and accuracy, and the initial velocity changes in an uncontrollable manner in methods using kinetic measurement methods.
Uvedené interference lze částečně potlačit například výběrem chemikálií bez interferujících látek, nebo chemikálie speciálně čistit. V obou případech narůstají prudce náklady na analysu. Někteří výrobci diagnostik volí ke korigování uvedených pozitivních interferencí projevujících se zvyšováním nespecifické absorbance samostného Činidla jiný postup. Například do reakčního systému pro stanovení glukosy přidávají předem stanovovaný analyt, v tomto případě glukosu, který zvyšuje počáteční absorbanci činidla na definovanou hodnotu, Čímž se zdánlivě potlačí nespecifický vliv rušivých látek. Toto řešení má ale několik nevýhod. Jednou z nich je vyšší počáteční hodnota absorbance kompletního činidla. Obecným požadavkem kladeným na analytické metody totiž je, aby hodnota slepého pokusu byla co nejnižší. Mimo to má vznik zbarveni v činidle nepříznivý vliv na jeho stabilitu. V prvém přiblížení lze říci, že čím intenzivnější je počáteční zbarvení činidla, tím méně je stálé. Z uvedeného rozboru dosavadních nedostatků analytických systémů založených na oxidační kopulaci plyne, že počáteční intenzivní zbarvení činidel nepříznivě ovliv» í nuje jejich vlastnosti i vlastnosti analytické metody.These interferences can be partially suppressed, for example, by the selection of chemicals without interfering substances, or the chemicals specifically purified. In both cases, the cost of analysis rises sharply. Some diagnostic manufacturers opt for a different approach to correct the above-mentioned positive interference manifested by increasing the non-specific absorbance of the Reagent alone. For example, they add a predetermined analyte, in this case glucose, to the glucose reaction system, which increases the initial absorbance of the reagent to a defined value, thereby seemingly suppressing the non-specific effect of the interfering substances. However, this solution has several disadvantages. One is the higher initial absorbance value of the complete reagent. The general requirement for analytical methods is that the value of the blank should be as low as possible. In addition, color development in the reagent has an adverse effect on its stability. In the first approximation, the more intense the initial coloring of the reagent, the less stable it is. From the above analysis of the current drawbacks of the analytical systems based on oxidative coupling, it follows that the initial intensive coloring of the reagents adversely affects their properties and those of the analytical method.
Nyní bylo s překvapením zjištěno, že tyto nežádoucí pozitivní interference projevující se intenzivním zbarvením, lze potlačit pomocí některých látek jinak obecně rušících při stanovení i s oxidační kopulací, pokud jsou k analytickému systému přidány specifickým způsobem a v úzce vymezeném koncentračním intervalu.It has now surprisingly been found that these undesirable positive interferences manifested by intense staining can be suppressed by some substances otherwise generally interfering with the assay as well as by oxidation coupling when added to the assay system in a specific manner and within a narrowly defined concentration interval.
Předmětem vynálezu je složení analytického činidla pro stáno- 3 253 602 vení substrátů oxidační kopulací obsahující pufr, kopulační složky a enzymy, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje redukující látky, například kyselinu askorbovou, siřičitan, cystein nebo hydroxylamín v množství 1 až 500/umol/l, vztaženo na roztok kompletního analytického činidla.The subject of the invention is the composition of an analytical reagent for the determination of substrates by oxidative coupling comprising buffer, coupling components and enzymes which comprises reducing substances, for example ascorbic acid, sulphite, cysteine or hydroxylamine, in an amount of 1 to 500. µmol / L, based on the complete analytical reagent solution.
Redukující látka se přidá k jednotlivým činidlům neb o složkám analytického systému nebo k jeho kombinacím před tím, než může dojít ke vzniku nežádoucího zbarvení, s výhodou před přidáním kopulačních složek a enzymů, a nechá se reagovat po dobu potřebnou k odstranění interferujících látek, s výhodou 4 až 48 hodin.The reducing agent is added to the individual reagents or components of the analytical system or combinations thereof before undesired staining may occur, preferably before addition of the coupling components and enzymes, and allowed to react for a period of time necessary to remove interfering substances, preferably 4 to 48 hours.
Složkami, které nejčastěji obsahují pozitivně interferující látky, jsou pufrovací substance, povrchově aktivní látky užívané jako smáčedla nebo i další látky, u nichž se zjistí, že vyvolávají pozitivní interferenci, itostředkem k potlačení pozitivních interferencí může být jedna látka nebo kombinace několika redukujících látek. K objasnění předmětu vynálezu jsou uvedeny následující příklady.The components that most often contain positively interfering substances are buffer substances, surfactants used as wetting agents, or other substances which are found to cause positive interference, and one or a combination of several reducing agents may be a means to suppress positive interference. The following examples are provided to illustrate the invention.
Příklad 1Example 1
Činidlo pro stanovení glukosyReagent for determination of glucose
K 1000 ml roztoku fosforečnanového pufru o koncentraci 0,05 až 0,5 mol/1 a pH 6 až 9 se přidá kyselina askorbová v množství 1/umolXX, roztok se promíchá a nechá se stát do druhého dne. Pak se v tomto roztoku postupně rozpustí fenol v množství 5 až 10 mmol/1, 4-aminoantipyrin v množství 1 až 5 mmol/1 a enzymy glukosaoxidasa v katalytické koncentraci 83 až 340yukat/1 a enzym peroxidasa v katalytické koncentraci 8 až 33/Ukat/l.To 1000 ml of a 0.05 to 0.5 mol / l phosphate buffer solution and a pH of 6 to 9 was added ascorbic acid in an amount of 1 µmolXX, mixed and allowed to stand the next day. Then, 5 to 10 mmol / l, 4-aminoantipyrine at 1 to 5 mmol / l and the enzymes glucose oxidase at a catalytic concentration of 83 to 340yukat / l and the enzyme peroxidase at a catalytic concentration of 8 to 33 / Ukat are gradually dissolved in this solution. / l.
Příklad 2Example 2
Činidlo pro stanovení cholesteroluCholesterol reagent
Připraví se rozpuštěním pevné pufrovací směsi obsahující 0,37 molů hydrogenfosforečnanu diddaselnéh^, 0,35 molů dihydrogenfosforečnanu draselného, 2 g neionogenního tensidu a 500/umolů hydroxylaminu v asi 800 ml destilované vody. Přidá se 70 ml metha-It is prepared by dissolving a solid buffer mixture containing 0.37 moles of dipotassium hydrogen phosphate, 0.35 moles of potassium dihydrogen phosphate, 2 g of non-ionic surfactant and 500 µmoles of hydroxylamine in about 800 ml of distilled water. Add 70 ml of methanol.
253 602 nolu a nechá se stát 48 hodin ve tmě. Pak se k roztoku přidá 8 až 24mmolů fenolu, 0,5 až 4 mmoly 4-aminoantipyrinu, 1 až 5yukat cholesteroloxidasy, 0,8 až 2/ukat peroxidasy a roztok se doplní voduu do 1000 ml.253 602 min and stand for 48 hours in the dark. Then, 8 to 24 mmol of phenol, 0.5 to 4 mmol of 4-aminoantipyrine, 1 to 5-yukate cholesterol oxidase, 0.8 to 2 µg of peroxidase are added to the solution and the solution is made up to 1000 ml with water.
Příklad 3Example 3
Činidlo pro stanovení kyseliny močovéReagent for the determination of uric acid
V destilované vodě se rozpustí 0,061 molů hydrogenfosforečnanu didraselného, 0,39 molů dihydrogenfosforečnanu draselného a 8/umolů cysteinu. Doplní se vodou do 1000 ml. Roztok se nechá stát 24hodia.0.061 moles of dipotassium hydrogen phosphate, 0.39 moles of potassium dihydrogen phosphate and 8 µmol of cysteine are dissolved in distilled water. Make up to 1000 ml with water. The solution is allowed to stand for 24 hours.
Podobně se rozpustí ve vodě 10 g neionogenního teasidu, při dá ee 400^umolů hydrogensiřičitaau sodného, doplní se vodou do 1000 ml a nechá se stát 24 hodin.Similarly, 10 g of a non-ionic teaside are dissolved in water, 400 ml of sodium bisulfite are added, made up to 1000 ml with water and allowed to stand for 24 hours.
Oba roztoky se smíchají a v jejich směsi se rozpustí 0,3 až 3 mmoly 4-aminoantipyrinu, 25 až 50/umolů ferrokyanidu draselného a 0,8 až 2 mkat enzymu urikasa a 15 až 25/ukat enzymu peroxidasa.The two solutions are mixed, and 0.3-3 mmol of 4-aminoantipyrine, 25-50 µmol of potassium ferrocyanide and 0.8-2 mkat of uricase and 15-25 µm of peroxidase are dissolved in the mixture.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS859696A CS253602B1 (en) | 1985-12-21 | 1985-12-21 | Analytic agent for substrates determination by means of oxidative coupling |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS859696A CS253602B1 (en) | 1985-12-21 | 1985-12-21 | Analytic agent for substrates determination by means of oxidative coupling |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS969685A1 CS969685A1 (en) | 1987-03-12 |
| CS253602B1 true CS253602B1 (en) | 1987-11-12 |
Family
ID=5446101
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS859696A CS253602B1 (en) | 1985-12-21 | 1985-12-21 | Analytic agent for substrates determination by means of oxidative coupling |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS253602B1 (en) |
-
1985
- 1985-12-21 CS CS859696A patent/CS253602B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS969685A1 (en) | 1987-03-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR920001449B1 (en) | Colorimetric Measurement Method and Reagents of Specimens by Enzymatic Redox | |
| CA1084393A (en) | Process for the determination of substrates or enzyme activities | |
| US4517287A (en) | Method and reagent for the enzymatic determination of enzyme substrates | |
| US4350762A (en) | Aminopyrine improved Trinder's reagent and dosing process for hydrogen peroxide from enzymatic oxidation of metabolic substrata with the same | |
| JPH0577399B2 (en) | ||
| US5206150A (en) | Composition of, method of producing and method of using a stabilized formulation for assaying peroxidase activity | |
| CS199692B2 (en) | Method of photometric determination of hydrogen peroxides | |
| CA1072868A (en) | Process for enzymatic analysis | |
| EP0121254B1 (en) | Process for determining substrate or enzymatic activity | |
| EP0467978A1 (en) | The use of fluid insoluble oxidizing agents to eliminate interfering substances in oxidation-reduction measuring systems | |
| US5559003A (en) | Assay method for biological components | |
| FI60887B (en) | FORMAL KINETISK ENZYMSUBSTRATBESTAEMNING SAMT REAGENTS FOER GENOMFOERANDE AV FOERFARANDET | |
| JPS5810655A (en) | Reagent and method for detecting hydrogen peroxide or hydrogen peroxide forming substrate | |
| EP0100217A2 (en) | Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase | |
| CS253602B1 (en) | Analytic agent for substrates determination by means of oxidative coupling | |
| US4695539A (en) | Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase | |
| EP0488244B1 (en) | Method of enzymatically measuring hydrogen peroxide and reagent therefor | |
| FR2610409A1 (en) | METHOD AND AGENT FOR THE DETECTION OF THIOL GROUPS | |
| JP2804079B2 (en) | Quantitative method of NAD (P) H | |
| Odo et al. | Determination of hydrogen peroxide by Iron (III) complex of thiacalix [4] arenetetrasulfonate on a modified ion-exchanger with peroxidase-like catalytic activity | |
| US5436133A (en) | Enzyme assay of biochemical substances | |
| US5246836A (en) | Peroxidase catalyzed enzyme assay by sample prg-treatment | |
| Yotova et al. | Kinetic studies and analytical application of cholesterol oxidase and peroxidase immobilized to synthetic polymer | |
| US5439827A (en) | Composition for detecting peroxide active material | |
| JP2534859B2 (en) | Enzyme assay for biological materials |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 19991221 |