CS252389B1 - Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy - Google Patents

Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy Download PDF

Info

Publication number
CS252389B1
CS252389B1 CS858238A CS823885A CS252389B1 CS 252389 B1 CS252389 B1 CS 252389B1 CS 858238 A CS858238 A CS 858238A CS 823885 A CS823885 A CS 823885A CS 252389 B1 CS252389 B1 CS 252389B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
equi
capm
inactivated
equine influenza
strains
Prior art date
Application number
CS858238A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Other versions
CS823885A1 (en
Inventor
Tomas Zuffa
Jaroslav Fitzek
Pavol Ragac
Imrich Banda
Original Assignee
Tomas Zuffa
Jaroslav Fitzek
Pavol Ragac
Imrich Banda
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tomas Zuffa, Jaroslav Fitzek, Pavol Ragac, Imrich Banda filed Critical Tomas Zuffa
Priority to CS858238A priority Critical patent/CS252389B1/cs
Publication of CS823885A1 publication Critical patent/CS823885A1/cs
Publication of CS252389B1 publication Critical patent/CS252389B1/cs

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

252389 dehyd (McQueen, J. L. a spol. Imunologyof equine influenza, J. Am. vet. med. Ass.155, 1969, 2, s. 265—271), formaldehyd zmie-šaný v rovnakom pomere s glycerínem (On-ta, T. a spol. Distribution of antibodies agai-nst various influenza A viruses in animals,Jap. J. vet. Sci. 40, 1978, s. 451—454), alebobetapropiolakton (Gazzei, V. A. a spol. Oneday purification of influenza A and B vac-cines using molecular filtnation and otherphysycal metods. Microbiologica, 4, 1981, s.403—412). Najčastejším sposobom inaktivá-cie virusu fyzikálnou cestou je ožiarenle ul-trafialovými lúčmi (Tood, J. D. Commentson the immunology of equine influenza, J.Am. vet. med. Ass. 1955, 1969, 2, s. 272 až277). K postupem purifikácie virusu patria ad-sorbčné, zrážacie, elučné, centrifugačné afiltračně metody. Za účelom dosiahnutia po-žadované] čistoty virusového materiálu sapoužívajú dve i viac metod v rámci jedinéhopurifikačného postupu. K zrážacím meto-dám patří predovšetkým precipltácla virusuvychladeným alkoholem. Precipitáciu po-mocou 12,5 % síranu barnatého použil Mi-zutani 1963 a 5 % kyseliny trichloroctovejWeremowicz, S. Polypeptides of equine in-fluenza virus A (Equi) 2 Warszawa(9)69, zbl.vet. Med. B-27, 1980, s. 549—558). Na otáz-ku ziastúpenia jednotlivých kmeňov vo· vak-cíne a obsahu hemagluttoinu v aglutinačnejdávke sú různé názory. Všeobeone sa poža-duje, aby vakcína obsahovala obidva subty-py chřipkového· virusu (Burki, F. Ein neuerImpfian gegen Pferdinfluemza, Zbl. vet. Med.22, 1975, 2, s. 3—17), a aby obsah viruso-vého hemaglutinínu představoval pri subty-pe A equi 1 najmenej 512 hemaglutinačnýclijednotiek a pri subtype A equi 2 inajmenej1024 hemaglutinačných jednotiek. Aj keďako vakcínu možno použit samostatný vi-rus purifikovaný do různého stupňa, naj-častejšie sa k němu pridávajú rožne adju-vantné látky, ktoré potencujú jeho antigén-ny účinek. Imunogenita vakcíny je totižzávislá ako od obsahu virusových antigénov,tak aj od imunopotencujúceho účinku adju-vantnej látky na ktorú je antigén naviaza-ný. Pri adjuvantných látkách ako· sú fosfo-rečnan vápenatý, fosforečnan hlinitý, hyd-roxid hlinitý a alginát sodný, používané vobsahu 1,0-1,5 objemových percentách.Zriedkavo sa použilo· aj olejové inkomplet-né adjuvans (Tcod, J. D. Comments on theimmunology of equine influenza. J. Am. vet.med. Ass. 155, 1969, 2, s. 272—277), pri kto-rom vzniká riziko vývoja nežiaducich lokál-nych reakcií.
Proti chrípke koní běli v poeledných ro-koch vyvinuté účinné vakcíny, ktoré sa súspechom používajú na účely špecifickejprofylaxie tohto virusového· ochorenia(EQUIFLUR — Anglicko, FLUVACR — USA,PREVACUN — NSR, RESEQUIN" — NDR).Spůsob technologie přípravy uvedených vak-cín sa zakladá na použití špičkových tech- 4 nických, finančně velmi nákladných zaria-dení. Přednost navrhovaného riešenia spočíváv tom, že hol vypracovaný postup izoláciea purifikácie virusového materiálu z injekč-ných vaječných tekutin kombinovaným po-užitím fyzíkálnochemických metod s mini-málnymi nárokmi na 1'ahko dostupné tech-nologické zariadenia, dodržaním ktorého sapřipraví vakcína o vysokých kvaldatívnychparametrech. Táto úloha holá vyriešená následovně:
Bola připravená inaktivovaná adsorbáto-vá vakcína proti chrípke koní s minerálnymnasičom, ktorá obsahuje v 1 ml vakcíny in-aktivované kmene virusu chřipky koní 138-(A)Equi 1(Praha)56 CAPM V-122, o- hema-glutinačnom titre 1280 hemaglutinačnýchjednotiek, 274(A)Equi 2(Miami)63 CAPM V-123 a 245(A)Equi 2(Ditroit)63 CAPM V-304oba o hemaglutinačnom titre 2560 hemaglu-tinačných jednotiek.
Virulentně virusové kmene bolí pomno-žené oddelene na 10 dňových kuřácích zá-rodkoch po dobu 48 hodin pri teplete 35 až37 °C. Odobraté virusové tekutiny b;di inak-tivované 7% roztokom řormaldehydu priteplote 2 až 8 CC po dobu 8 až 10 dní. Inak-tivované virusové tekutiny sa precipitovalietanolom po· dobu 24 až 48 hodin a po od-středění sa resuspenctovali vo fosfátevompufri tak, aby sa dosiahol požadovaný he-maglutinačný titer 1280 hemaglutinačnýchjednotiek u kmeňa 138(A)Equi 1(Praha)56CAPM V-122 a 2560 hemaglutinačných jed-notiek pri kmeňoch 274(A)Equi 2(Miami)63CAPM V-123 a 245(A)Equi 2(Ditroit)63CAPM V-304. Po odstránení nežiadúcich lá-tek sa s výhodou zmiešali v rovnakom obje-movom pomere a naviazali na nrnerálnynosič, ktorý představuje gél hydroxidu hli-nitého vo· výslednej koncentrácii 1 až 2hmolnostných percent hliníka.
Vakcína vykazuje následovně imunobiolo-gické vlastnosti: a. je neškodná pre zvieratá všetkých vě-kových kategorií b. navodí včasnú a dlhotrvajúcu chráne-•noisť očkovaných zvierat proti ochcreniu aimfekcii jednotlivými kmeňmi subtypov Aequi 1 a A equi 2. c. je použitelná na profylaktické aj me-tafy taktické očkovánie d. cestou materinckých protilátek, očko-vaných žrebných kobýl zabezpečí pasívnuchránenosť žriebat až do obdobia, v ktorommůžu byť aktivně imunizované.
Tri kmene virusu chřipky koní subtypov A equi 1 a A equi 2 s označením 138(A)Equi 1( Praha) 56, 274(A)Equi 2(Miami)63 a 245- (A)Equi 2(Ditroit)63 nám poskytla Česko- slovenská chřipková centrála pri Ústave e-pidemiologie a mikrobiologie — Šrobárova48, Praha 10. Kmene 138(A)Equi l(Pnaha)-56 s označením CAPM V-122, 274(A)Equi 2-(Miami}63 s označením CAPM V-123 a 245-(AjEqui 2-(Ditroitj63 s označením CAPMV-304 sú tiež uložené v Československé]zbierke mikroo-rganizmov na Výskumnomústave veterinárneho lekárstva v Brně, Hud-cova 60. Uvedené virusové kmene sa pommo-žujú na 10 až 11 dňových kuřácích zárod-koch po, infekcii do· alantoicke] alebo amni-ove] dutiny. Infekčně alanto-amniové teku-tiny odobraté z vychladených vajec sa kla-rifikujú odstredovaním pri nízkých obrát-kách a vyšetrujú na obsah hemaglutiuinu aiinfekčných jednotiek.
Infekčnosť viruse v vo vaječných tekuti-nách sa inaktivuje přidáním def novanéhomnožstva formaldehydu, a virus z alanto-amniových tekutin vyzráža pcmccou etyl-alkoholu za chladu, získaný precipitát pred-stavujúci virusové částice a vaječné bielko-viny sa resuspenduje v takom objeme fos-fátového pufru definovaného zloženia a pH,aby výsledný hemaglutinačný titer purfi-kátu bol pri kmeni 138(A)Equi 1 [Praha)56CAPM V-122 1280 hemaglutinačných jedne-tiek a pri kmeňoch 274{A)Equi 2(M.'aini)63CAPM V-123 a 245(A)Equi 2 (Ditroit) 63CAPM V-304 2560 hemaglutinačnóých jed-notiek. Příprava jednotlivých purifikátov saukončí dokonalou elúciou virusu do fosfá-tového pufru pri zvýšenej teplote a vyčíre-ním získanej vírusovej suspenzie odstředě-ním pri nízkých obrátkách.
Vakcína sa připraví zmiešaním purif ká-tov připevněných z jednotlivých kmeňov vrovnakom objemovom pomere a přidánímtakého množstva hydroixidu, hlinitéhoA1(OH)3, aby jeho výsledná koncentráciapředstavovala 1,5 objemových percent. Při-dáváme minerálneho nosiča k zmesi purifi-kátov sa robí postupné a v menších cbje-moch, aby nastalo dokonalé naviazanie vi-rusových partlkúl.
Vynález bližšie objasňuje nasledujúci pří-klad praktického prevedeinia: Příklad 10 dnové kuracie zárodky sa očkujú doalantoicke] dutiny dávkou 103 TKIDjo/v 0,1až 0,2 ml inokula a zárodky inkubujú 48hodím pri teploto 35 °C. Vajcia s prežívajú-cimi zárodkami sa po ukončení inkubácieschladia pri -j-2 až -j-8°C a po 24 h.dináchsa z nich odoberajú alanto-amniotické teku-tiny. Infkečné vaječné tekutiny cdobraté aegalizované pri každom vírusovtm kmenisamostatné s požadovaným hemaglutiuač-ným titrem sa inaktivujú přidáním 0,1 ob-jemových percent 7 % roztoku formaldehy- du pri teplete 2 až 8 °C počas 10 dní. Kon-trola účinnosti inaktivácia sa robí očková-ním 10 dňových kuřácích zárodkov vaječ-nými tekutinami odobratými po ukončeníhemaglutiinácie na přítomnost hemaglutini-nu. Inaktivovainé virusové tekutiny každé-ho kmeňa sa použijú na přípravu purifiká-tov. Spracovanie virusových materiálov jezaložené na principe precipitácie viruso-vých preinov pomocou etylalkoholu. K alian-toamniotickej tekutině udržiavanej pri -j-4stupňcch Celsia sa přidává 96 % etylalko-hol vychladený na teplotu —38 CC do vý-sledné j koncemtrácie 30 až 40 %. Po· 48 ho-dinovom státi pri chladmičkovej teplote saobsah fiiaš premieša a odstreďuje pri níz-kých otáčkách počas 60 urin. Supernatantsa kontroluje na obsah hemaglutiuinu a prizistení hemaglutinačných titrov 1 : 80 aviac, sa podrobí opakovanéj precipitácii. Se-diment predstavujúci vyzrážané virusovépartikule a vaječné bielkoviny, sa resuspen-duje v takom objeme fosfátového pufru opH 7,2, aby výsledný hemaglutinačný titerpurifikátu bol 1280 hemaglutinačných jed-notiek pri kmeni 138(A)Equi 1 (Prahaj56CAPM V-122 a 2560 hemaglutinačných jed-notiek pri kmeni 245(A)Equ!. 2(D tro.it)63CAPM V-304 a 274(A)Equi 2(Miami)63CAPM V-123. Stupeň nariadenia závisí pre-to od východiskového hemaglutinačnéhotitru egalizovaných alantoických tekutin, anie od množstva získaného sedimentu. Vi-rus resuspendovaný. to fosfátovom pufre sapretrepáva počas 2 hodin pri 37 °C, čím sadosiahne elúci virusu z nariedeného sedi-mentu. Následnou 60 min. centrifugácioupri nízkých obrátkách 700 g sa odstránia ne-žiadúce částice a prímeesi vyzrážaných biel-kovín. Ako' mónerálny nosič sa použije gélhydroxidu hlinitého (výrobok Biovety, n. p.,Nitraj. Purifikáty kmeňov 138(A)Equi 1-(Praha)56 CAPM V-122, 245(A)Equi 2(Di-troit)63 CAPM V-304 a 274(A)Equi 2(Mia-mi)63 CAPM V-123 sa zmiešajú v rovnakomobjemovom množstve.
Zme·: vírusov sa pře třepáním dokonalepremieša a za stálého pomalého miešaniasa po malých dávkách přidává také množ-stvo gelu hydroxidu hlinitého, aby výslednákoncentrácia hliníka AI vo· vakcíne bola 1,5pere. Po přidaní 0,2 objemových percent 5°/oroztoku tiomerzalu je priprava vakcíny pro-ti chrípke koní ukončená. Oč nnost inaktivovanej adsorbátovej vak-cíny proti chrípke koní, pripnavenej podlávynálezu potvrdzujú výsledky uvedené vnasledujúcej tabufke: Tabulka uvádza tilrenehemaglutinačne-inhibičných proti látekzistované u žriebat a koní rózineho veku poočkovaní vakcínou připravenou podlá vy-nálezu.

Claims (5)

  1. 2S2389 7 HI-titre uvedené v loga 3mesačné 6mesačné žriebátá žriebátá dospělé koně Vysoko žrebné Potomstvokobyly od vakc. K kmen 138 (A] 1 6,0 11,4 kmen 245(A)2 4,4 10,0 kmeň 274(A)2 6,0 10,3 PREDMET
    1. Inaktivovaná adsorbátová vakcína pro-ti chrípke koní s minerálnym nosičom, vy-značujúca sa tým, že obsahuje inaktivova-né kmene virusu chřipky koní 138(A)Equi1-(Praha )56 CAPM V-22, ohemaglutínačnomtitre najmenej 1024 hemaglutinačných jed-notiek, 274(A)Equi 2(Miami)63 CAPM V-123a 245(A]Equi 2(Ditroit)63 CAPM V-304 obao hemaglutiinačnom titre najmenej 2048 he-maglutinačných jednotiek.
  2. 2. Inaktivovaná adsorbátová vakcína, po-dlá bodu 1, vyznačuj úca sa tým, že minerál-ny nosič je gél hydroxidu hlinitého,.
  3. 3. Spósob přípravy vakcíny podl'a bodu1, vyznačujúci sa tým, že virulentně kmenevirusu chřipky koní 138(A)Equi l(Praha)-56 CAPM V-122, 274(A)Equi 2(Miami)63CAPM V-123 a 245(A]Equi 2(Ditroit)63CAPM V-304 sa pomnožujú oddelene na 10až 11-dňových kuřácích zárodkoch po dobu48 až 72 hodin, pri teplote 35 až 37 °C, ná-sledné sa inaktivujú roztokem formaldehy-du pri teplote 2 až 8 °C, po dobu 8 až 10 diní, 9,9 10,1 8,5 6,9 7,6 4,0 7,8 8,6 4,0 VYNALEZU inaktivované virusové tekutiny sa pri tep-lotě 2 až 8 °C precipltujú etanolom vychla-deným na teplotu —38 až — 42 °C po dobu24 až 48 hodím a po odstředění sa resuspen-dujú vo fosfátovém pufri tak, aby sa do-siahol výsledný hemaglutinačný titer 1024až 1280 hemaglutinačných jednotiek u kme-ňa 138(A)Equi 1(Praha)56 CAPM V-122,2048 až 2560 hemaglutinačných jednotiekpri kmeňoch 274(A)Equi 2(Miami]63 CAPMV-123 a 245(A]Equi 2,(Ditroit)63 CAPM V-304 po odstránení nežiadúcich látok sazmiešajú s výhodou v rovnakom objemovompomere a naviažu na minerálny nosič.
  4. 4. Spósob přípravy podlá bodu 3, vyzna-čujúci sa tým, že sa virulentně kmene inak-tivujú 7% roztokom formaldehydu.
  5. 5. Spósob přípravy pódia bodu 3, vyzna-čujúci sa tým, že sa inaktivované virusovétekutiny naviažu na minerálny nosič, kto-rým je gél hydroxidu hlinitého, vo výsled-nej koncentrácii hliníka 1 až 2 hmotnost-ných percent. Severograíla, n. p., závod 7, Most Cena 2,40 Kčs
CS858238A 1985-11-15 1985-11-15 Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy CS252389B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS858238A CS252389B1 (cs) 1985-11-15 1985-11-15 Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS858238A CS252389B1 (cs) 1985-11-15 1985-11-15 Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS823885A1 CS823885A1 (en) 1987-01-15
CS252389B1 true CS252389B1 (cs) 1987-08-13

Family

ID=5432695

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS858238A CS252389B1 (cs) 1985-11-15 1985-11-15 Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS252389B1 (cs)

Also Published As

Publication number Publication date
CS823885A1 (en) 1987-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100186783B1 (ko) 적혈구와 표면-결합된 항원을 포함하는 경구용 백신
CA1204055A (en) Infectious-bronchitis vaccines for poultry, combined infectious-bronchitis vaccines, process for preparing such vaccines, process for preventing infectious bronchitis and infectious-bronchitis virus strain
RU2396976C2 (ru) Вакцины и способы лечения собачьего гриппа
US4117112A (en) Vaccine for prevention of feline leukemia
Lief et al. Antigenic analyses of influenza viruses by complement fixation: I. The production of antibodies to the soluble antigen in guinea pigs
EA010057B1 (ru) Инактивированная полиомиелитная вакцина, полученная из штамма сейбина вируса полиомиелита
Spertzel et al. Recovery and characterization of a herpes-like virus from dog kidney cell cultures
JPS62175426A (ja) 抗体及びこれを有効成分とするスプレ−剤
US3526696A (en) Shipping fever vaccine
WO2002062382A1 (en) Inactive bovine scours vaccines, processes and method of preventing bovine scours
EP0975360B1 (en) Bovine respiratory and enteric coronovirus as a vaccine
WO1998040097A9 (en) Bovine respiratory and enteric coronavirus as a vaccine
CS252389B1 (cs) Inaktivovanú adsorbátová vakcína prati chrípke koní a sposob jej přípravy
Crick The vaccination of man and other animals against rabies
Mukamoto et al. Immunogenicity in Aujeszky's disease virus structural glycoprotein gVI (gp50) in swine
JPH01113321A (ja) ネコ感染性腹膜炎に対しネコを保護するワクチン
AU714418B2 (en) Cross-protective equine herpesvirus preparations and method of making and using the same
RU2268937C1 (ru) Штамм "вниизж" коронавируса крупного рогатого скота для изготовления диагностических, вакцинных и лечебных препаратов
CN117717608B (zh) 一种包含肺炎球菌与流感病毒的联合疫苗、制备方法及其应用
AU2019346177A1 (en) Inactivated whole-virus influenza vaccine and method for preparing same
Rockborn et al. Bovine viral diarrhea virus: Acquired resistance to acriflavine as marker of an attenuated strain
RU2103009C1 (ru) Поливалентная сыворотка против чумы, парвовирусного энтерита и аденовирусных инфекций плотоядных "витакан-с" и поливалентный иммуноглобулин против чумы, парвовирусного энтерита и аденовирусных инфекций плотоядных "витакан"
Fatunmbi et al. Efficacy of avridine and liposomes as adjuvants for avian influenza virus antigens in turkeys
US5667785A (en) Vaccine for protection of cats against feline infectious peritonitis
HU203781B (en) Process for producing inactivated vaccine against infecting bursitis