CS242242B1 - Prívodná matica pre nástrek vzorky do náplně sklenenej kolóny v kvapalinovej chromatografií - Google Patents

Description

242242

Vynález sa týká konštrukcie prívodnej ma-tice pre nástrek vzorky do náplně sklenenejkolony v kvapalinovej chromatografii.

Jedným z rozhodujíicich faktorov určujú-cich použitelnost vysokoúčinnej kvapalinovejchromatografie pre mnohonásobné sériovéanalýzy vzoriek je životnost chromatografie -kej kolony. Je známe, že objem náplně kolo-ny sa vplyvom vysokých tlakov, tlakovýchpulzov a používaných chemikálií po časezmenšuje, pri čom sa na vstupe kolony vy-tvoří tzv. mrtvy objem, ktorý výrazné zhoršu-je účinnost delenia. Súčasne na vstupe ko-lony dochádza k zachytávaniu fyzikálnycha chemických nečistot z elučného roztoku az analyzovaných vzoriek, čím sa postupnévytvoří vrstva stlačenej a silné znečistenejnáplně, ktorá znemožní ďalšie delenie. Skle-něná kolona je konstrukčně riešená akokompaktný systém, kde případné čiastočnévymenenie alebo doplnenie chýbajúcej nápl-ně nie je možné bez poškodenia utesňovacejhlavice. Dosial známe zariadenie pre kolo-ny tohoto typu, ktoré rieši problém znečis-ťovania náplně, pozostáva z krátkej predko-lóny predradenej před chromatografickú ko-lonu, pričom vzorka sa nanáša na čelo ná-plně. Toto zariadenie však neodstraňuje níz-ku účinnost delenia v dósledku vytvořenéhomrtvého objemu a nedokonalý spósob nane-senia vzorky.

Uvedené nedostatky odstraňuje prívodnámatica pre nástrek vzorky do náplně sklene-nej kolony v kvapalinovej chromatografii.Podstata vynálezu spočívá v tom, že v prí-vodnej matici utesňujúcej kolonu je vytvo-řený osový otvor, do ktorého je zasunutá aupevněná kapilára na přívod vzorky z dávko-vacieho zariadenia. Vonkajší priemer kapi-láry je menší ako priemer osového otvoru,pričom kapilára je dlhšia ako čelo maticea je vpichnutá až do náplně kolony. Do o-sového otvoru je zaústěná kapilára, ktoroupreteká len čistý elučný roztok cez osovýotvor na čelo náplně. Vzájomný poměr tokovv oboch kapilárách sa reguluje buď dvomasamostatnými vysokotlakovými pumpami, a-lebo jednou pumpou s deliacim ventilom. Výhodou riešenia podl'a vynálezu je, žeodstraňuje nežiadúce efekty sposobené vy-tvořením mrtvého objemu a svojou podstatoupředstavuje najoptimálnejší a najúčinnejšíspósob nanesenia vzorky na chromatografic-ký stípec. S uvedeným zariadením v spojenís predkolcnou je možné chromatografickúkolonu použit pre 1 000—2 000 analýz zvlášťznečistěných vzoriek, například z biologic-kého materiálu, namiesto bežne dosahova-ných 150 — 200 analýz.

Na pripojenom obr. 1 je znázorněný pří-klad zhotovenia prívodnej matice v spojeníso skleněnou kolónou. Pozostáva z matice 1, ktorá sa svojím čelom 5 pritláča na teflono-vé tesnenie 10 sklenenej kolony 11 a jevskrutkovaná do matice 12. Do prívodnej ma-tice 1 sú upevněné kapiláry 3, 4 pomocouskrutiek 6, 7 a těsnění 8, 9. Kapilára vzorky3 je vpichnutá až do náplně 13 kolony 11. E-lučný roztok z kapiláry 4 vytéká osovým ot-vorom 2 na čelo náplně 13 kolony. Skleněnákolona 11 je ukončená hlavicou 15 s vlisova-nou ocelovou sieťkou 16 pomocou teflonové-ho tesnenia 10 a je uchytená vo vonkajšomplášti 14 maticou 12 a utěsněná je prívodnoumaticou 1.

Vynález je možné využit najma vo vyso-koúčinnej kvapalinovej chromatografii a tohlavně v prípadoch kde sa používajú elučnéroztoky s vysokým obsahom solí, v oblastipH = 6,5—7, kde dochádza k čiastočnémurozpúšťaniu silikagélu, ktorý sa najčastej-šie v roznych úpravách využívá ako sorpčnýmateriál. Použitie je výhodné taktiež v prí-padoch kde je potřebné pracovat pri vyso-kých tlakoch, v prípadoch ked čerpadlo vy-kazuje silné tlakové rázy, ale najma v prí-padoch, ked sú analyzované vzorky silnéznečistěné látkami, ktoré sa nevratné viažuna sorpčný materiál. Typický příklad vzo-riek tohoto typu představuje biologický ma-teriál a jeho rožne extrakty.

Nasledujúci příklad ilustruje přednosti rie-šenia podl'a vynálezu. Příklad

Na analýzu adenínových nukleotidov z ex-traktu mozgového tkaniva potkana sa použi-la skleněná kolona 3 X 100 mm naplněnásorbentom Separon Six Cis, s priemerúm čas-tíc 5 μώ priamo spojená s ochrannou pred-kolónou 3 X 20 mm naplněnou tým istýmsorbentom s priemerom častíc 10 μία. Elučnýroztok obsahoval 25 mmol. I"1 dihydrogen-fosforečnan draselný, 4 % trietylamínu, napH = 6,5 sa upravil s koncentrovanou kyse-linou fosforečnou, nastavený prietok bol 1mililitr . min-1, objem nastreknutej vzorkybol 20 μΐ.

Na obr. 2 je znázorněné rozdelenie extrak-tu tkaniva po niekolkých desiatkach analýzbez použitia zariadenia podl'a vynálezu. Zobrázku je vidieť typické rozdvojovanie sakoncentračných zón — píkov — jednotlivýchkomponentov sposobené mrtvým objemoma znehodnotenou náplňou predkolóny.

Na obr. 3 je znázorněný chromatogram tejistej vzorky po připojení zariadenia podlávynálezu, pričom vzájomný poměr toku vovstupných kapilárách bol 1: 1.· Elučný profilposlednej zóny, ktorý je podobný ideálnejgaussovskej krivke je dokazom úplného od-stránenia predcházajúcich negativných ja-vov.

Claims (2)

1. 242242 PREDMET Prívodná matica pře nástrek vzorky do ná- plně sklenenej kolony v kvapalinovej chro- matografii, vyznačená tým, že pozostáva z matice (1) s osovým otvorom (2), do ktoré- ho je zasunutá a upevněná kapilára vzorky VYNÁLEZU (3), pričom vonkajší priemer kapiláry vzor-ky (3) je menší ako priemer osového otvoru (2), do ktorého je zaústěná kapilára elučné-ho roztoku (4) a kapilára vzorky (3) je dlh-šia ako čelo (5J matice (lj.
2. 2 listy výkresov i