CS240345B1 - Tylosine antibiotic insulation method - Google Patents

Tylosine antibiotic insulation method Download PDF

Info

Publication number
CS240345B1
CS240345B1 CS847473A CS747384A CS240345B1 CS 240345 B1 CS240345 B1 CS 240345B1 CS 847473 A CS847473 A CS 847473A CS 747384 A CS747384 A CS 747384A CS 240345 B1 CS240345 B1 CS 240345B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
tylosin
filtrate
antibiotic
fermentation
solution
Prior art date
Application number
CS847473A
Other languages
Czech (cs)
Slovak (sk)
Other versions
CS747384A1 (en
Inventor
Stefan Mazan
Henrich Hofbauer
Emil Miklas
Michal Bucko
Dusan Somora
Original Assignee
Stefan Mazan
Henrich Hofbauer
Emil Miklas
Michal Bucko
Dusan Somora
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Stefan Mazan, Henrich Hofbauer, Emil Miklas, Michal Bucko, Dusan Somora filed Critical Stefan Mazan
Priority to CS847473A priority Critical patent/CS240345B1/en
Publication of CS747384A1 publication Critical patent/CS747384A1/en
Publication of CS240345B1 publication Critical patent/CS240345B1/en

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Vynález rieši sposob izolácie antibiotika tylozínu z filtrátu fermentačnej pódy po skončení kultivácie produkčného kmeňa Streptomyces fradiae, alebo z iných vodných roztokov tylozínu, ktorý sa vyznačuje tým, že sa filtrát fermentačnej pódy, alebo iný vodný roztok tylozínu extrahuje butylacetátom, ktorý obsahuje 1 až 30 % obj. vo· vodě obmedzene rozpustného iného organického rozpúšťadla, s výhodou butanolu, z ktorého sa tylozín vyzráža ako sol', napr. acetonovým roztokom kyseliny vínnej. Získaný tylozín-tertarát sa priamo móže použit na přípravu liečebných prípravkov, alebo sa prevedie známými postupmi na tylozín-bázu, ktorá sa používá na přípravu injekci!.The invention provides a method of isolating an antibiotic tylosin from the filtrate of the fermentation post after end of cultivation of the production strain Streptomyces fradiae, or other aqueous ones tylosin solutions that are characterized by the filtrate of the fermentation process, or another aqueous solution of tylosin extracted with butyl acetate, which contains 1 to 30 vol. water-soluble other organic solvent, preferably butanol, from which the tylosin precipitates as a salt, e.g. tartaric acid acetone solution. acquired Tylosin tertarate is directly used for the preparation of medicinal products, or. \ t is carried out by known procedures on tylosin base, which is used to prepare the injection !.

Description

Vynález rieši sposob izolácie antibiotika tylozínu z filtrátu fermentačnej půdy, po skončení kultivácie produkčného kmeňa Streptomyces fradiae, alebo z iných vodných roztokov tylozínu.The invention provides a method for isolating the antibiotic tylosin from the filtrate of the fermentation broth, after cultivation of the production strain Streptomyces fradiae, or from other aqueous tylosin solutions.

Tylozín je makrolidové antibiotikum, sumárneho vzorca C45H77NO17. Má slabo bázický charakter, vo vodě je málo rozpustný, dobré rozpustný jie v polárných a semipolárnych organických rozpúšťadlách a nerozpustný v nepolárných rozpúšťadlách, a ko je hexán, či petroléter. Vodné roztoky tylozínu sú stále v rozmedzí pH 5,5 a 8,5. Kyslou hydrolýzou sa tylozín rozkládá na biologicky obdobné účinný dezmykozín.Tylosin is a macrolide antibiotic of the general formula C45H77NO17. It is poorly basic in nature, poorly soluble in water, well soluble in polar and semi-polar organic solvents, and insoluble in non-polar solvents such as hexane or petroleum ether. Aqueous tylosin solutions are still between pH 5.5 and 8.5. By acid hydrolysis, tylosin breaks down into biologically similar active desmycosine.

S kyselinami tvoří tylozín soli dobré rozpustné vo vodě a v polárných organických rozpúšťadlách.With acids tylosin forms salts soluble in water and in polar organic solvents.

Tylozín je antibiotikum používané vo veterinárnej praxi, najma na potlačenie infekcií vyvolaných gram-pozitívnymi baktériami a mykoplazmózami (Ose E. E.: J. Am. Vet. A. 137, 421—423, 1980). Samotný tylozín sa využívá obzvlášť pri liečbe dyzentérií a pneumónií hospodářských zvierat (Curtíns R, A.: Canad. Vet. J. 3, 285—288, 1962; Doornebal H.: Canad. J. Comp. Med. Sci. 29, 179—182, 1965; Schovánek V.: Veterinářství 25, 505—507, 1975). Široko sú využívané aj kombinácie tylozínu s inými antibakteriálne posobiacimi látkami, ako sú sulfonamidy (Ose E. E.: Vet. Med. Smáli Anim. Clin. 68, 539—543, 1975; Reichel, F.: Biol. Chem. Výž. Zvířat 10, 343—350, 1974), furazolidínom (US 3, 690, 869), colistinom (Ger. offen 2, 327, 392), ako aj s inertnými přísadami ako síranom sodným (US 3, 932, 995 j, polyoxyetylénestermi (Brit. 1, 219, 785), alebo s močovinou (Ger. offen 1, 812, 471). Na přípravu liečebných prípravkov sa využívá buď tylozín vo formě bázy, alebo vo formě solí, ako je tartarát, chlorid, fosfát alebo síran (Bruszewski W.: Now. Wet. 6, 349—352, 1972). V krmných zmesiach sa tiež využívá technický tylozín, připravený vysušením fermentačnej pody (Dvořák, J., Straková, J^, Ševčík, B.: Biol. Chem. Vet. 18, 77—78, 1982).Tylosin is an antibiotic used in veterinary practice, particularly to suppress infections caused by gram-positive bacteria and mycoplasmosis (Ose E. E., J. Am. Vet. A. 137, 421-423, 1980). Tylosine alone is particularly useful in the treatment of dysentery and pneumonia in farm animals (Curtins R, A .: Canad. Vet. J. 3, 285-288, 1962; Doornebal, H .: Canad. J. Comp. Med. Sci. 29, 179). —182, 1965; Schovánek V .: Veterinary 25, 505-507, 1975). Combinations of tylosin with other antibacterial scavengers such as sulfonamides have also been widely used (Ose EE: Vet. Med. Smal. Anim. Clin. 68, 539-543, 1975; Reichel, F .: Biol. Chem. Animal Nutrition 10, 343-350, 1974), furazolidine (US 3, 690, 869), colistin (Ger. Offen 2, 327, 392), as well as inert additives such as sodium sulfate (US 3, 932, 995, polyoxyethylene esters (Brit. 1, 219, 785) or with urea (Ger. Offen 1, 812, 471.) For the preparation of medicinal products either tylosin in the form of a base or in the form of salts such as tartrate, chloride, phosphate or sulphate is used (Bruszewski W Wet., 6, 349-352 (1972) .Technical tylosin prepared by drying a fermentation pod (Dvořák, J., Straková, J., Ševčík, B .: Biol. Chem. Vet. 18, 77-78 (1982).

Doposíal' sa tylozín izoloval z fermentačnej pody tak, že sa odfiltrovalo mycélium, filtrát sa extrahoval chloroformem a po oddestilovaní chloroformu za zníženého tlaku sa z olejovitého zvyšku tylozín vyzrážal hexánom, alebo petroléterom (US 3, 178, 341). Takto připravený tylozín bolo nutné před dalším použitím rekryštalizovať, alebo previesť na sol’, ako například tartarát, z ktorého sa připravila báza čistého tylozínu (Hamill R. L.: Antib. and Chemother. 11, 328—334, 1961). Preparát tylozínu o obsahu 40 % účinnej látky je možné připravit vysolením tylozínu z deproteinizovaného filtrátu fermentačnej pody, alebo extrakciou tylozínu alkoholmi z vysprayovanej fermentačnej půdy, napr. 90 % propanolom (Aut. osv. č. 197 600). Tylozín podobnej čistoty je možné získat tiež azeotropickým oddestilovaním vody z filtrátu fermentačnej pody například s n-hexylaíkoholom (Ger. offen 2, 054, 085). Tylozín vo formě tylozín tartarátu je možné připravit o vysokej čistotě extrakciou tylozínu z filtrátu fermentačnej pody extrakciou do butylacetátu (AO č. 231 279). Nevýhodou tohoto postupu je nutnost volit viacnásobnú extrakciu filtrátu, nakolko pri jednostupňovej extrakci! butylacetátom sa tylozín vyextrahuje s malým výťažkom. Pri extrakcii Ί 000 ml filtrátu fermentačnej pody 200 ml butylacetátu pri pH 9,0 a teplote 25 °C sa vyextrahuje do organické] fázy len cca 53 % tylozínu. S vyšším výťažkom možno tylozín vyextrahovat zmesou chloroform-etylacetát, ale vzhíadom na toxicitu chloroformu je využitelnost tejto metody v priemyselnom meradle značné obmedzená.Up to now, tylosin was isolated from the fermentation pod by filtering off the mycelium, extracting the filtrate with chloroform and, after distilling off the chloroform under reduced pressure, from the oily residue of tylosin precipitated with hexane or petroleum ether (US 3,178,341). The tylosin thus prepared had to be recrystallized or converted to a salt prior to further use, such as the tartrate from which pure tylosin base was prepared (Hamill R.L .: Antib. And Chemother. 11, 328-334, 1961). A 40% tylosin preparation can be prepared by salting tylosin from a deproteinized fermentation pod filtrate, or by extracting tylosin with alcohols from a sprayed fermentation broth, e.g. 90% propanol (Aut. Certificate 197 600). Tylosin of similar purity can also be obtained by azeotropically distilling water from the filtrate of a fermentation pod with, for example, n-hexyl alcohol (Ger. Offen 2,054,085). Tylosin in the form of tylosin tartrate can be prepared of high purity by extracting tylosin from the filtrate of the fermentation pod by extraction into butyl acetate (AO No. 231 279). The disadvantage of this procedure is the necessity to choose multiple extraction of the filtrate, as in the single-stage extraction! Butyl acetate extracts tylosin in a small yield. With extraction of Ί000 ml of fermentation tray filtrate with 200 ml of butyl acetate at pH 9.0 and 25 ° C, only about 53% tylosin is extracted into the organic phase. With higher yield, tylosin can be extracted with chloroform-ethyl acetate, but due to the toxicity of chloroform, the utility of this method on an industrial scale is very limited.

Bolo zistené, že tylozín je možné získat vo vysokej čistotě a výtažku z filtrátu fermentačnej pody, alebo z iných vodných roztokov, ako je napr. vodný roztok technického tylozín-fosfátu, sposobom podía vynálezu, ktorého podstata spočívá v tom, že sa filtrát fermentačnej pody, alebo iný vodný roztok tylozínu extrahuje butylacetátom, ktorý obsahuje 1 až 30% obj. vo vodě obmedzene rozpustného alkoholu, akým je například amylalkohol, izoamylalkohol, izobutylalkohol, benzylalkohol (s výhodou 10 % obj. butanolu) alebo ketonu, ako je napr. metylizobutylkeíón, metyletylketón a pod. Výhodou tohto postupu je, že stačí jednostupňová extrakcia tylozínu týmto postupom, aby sa tylozín vyextrahoval vo vysokom výtažku. Pri extrakcii 1 000 ml filtrátu fermentačnej pody 180 ml butylacetátu a 20 ml benzylalkoholu pri pH — 9,0 a teplota 20 °C sa vyextrahuje do organické} fázy 91 % tylozínu.It has been found that tylosin can be obtained in high purity and extract from the fermentation pod filtrate, or from other aqueous solutions such as e.g. An aqueous solution of technical tylosin phosphate according to the invention, characterized in that the filtrate of the fermentation pod or another aqueous solution of tylosin is extracted with butyl acetate containing 1 to 30% by volume of ethyl acetate. a water-soluble alcohol such as amyl alcohol, isoamyl alcohol, isobutyl alcohol, benzyl alcohol (preferably 10% v / v butanol) or ketone such as e.g. methylisobutyl ketone, methyl ethyl ketone and the like. The advantage of this process is that a single-stage extraction of tylosin by this process is sufficient to extract tylosin in a high yield. Extraction with 1000 ml of fermentation tray filtrate with 180 ml of butyl acetate and 20 ml of benzyl alcohol at pH 9.0 and at a temperature of 20 ° C is extracted into the organic phase of 91% tylosin.

Takto získané extrakty tylozínu na rozdiel od chloroformových extraktov možno priamo zrážať acetonovým roztokom kyseliny, napr. 1 % hmot. obj. roztokom kyseliny vínnej, čím sa získá dobré kryštalizujúca sol — tylozín tartarát. Tento sa može buď priamo využit na přípravu liečebných prípravkov, alebo sa prevedie běžnými postupmi na tylozín — bázu. Výhodou tohto postupu je, že tylozín sa získá vo vysokom výtažku a čistotě z filtrátu fermentačnej pody za použitia netoxických a fahko sa regenerujúcich rozpúšťadiel.Unlike chloroform extracts, the tylosin extracts thus obtained can be directly precipitated with an acetonic acid solution, e.g. 1 wt. vol. with a tartaric acid solution to obtain a good crystallizing sol-tylosin tartrate. This can either be used directly for the preparation of medicaments, or converted to tylosin base by conventional procedures. The advantage of this process is that tylosin is obtained in high yield and purity from the fermentation pod filtrate using nontoxic and readily regenerating solvents.

Nasledujúci příklad prevedenia spĎsob podía vynálezu len dokládá, ale nijako neobmedzuje.The following example illustrates the process according to the invention but does not limit it in any way.

K 500 ml filtrátu fermentačnej pody o účinnosti 7 630 jug/ml sa přidá 100 ml butylacetátu a 25 ml butanolu. Zmes sa za intenzívneho miešania upraví roztokom hydroxidu sodného na pH — 9,0 a nechá sa 15 minút miešať. Po tomto čase sa organická vrstva oddělí, čím sa získá 125 ml organickej fázy s účinnosťou 27 750 ,ug/ml čo je 91 pere. výťažnosť extrakcie. Získaný organický extrakt potom po kvapkách přidáváme do 300 ml acetonu, v ktorom bolo rozpuštěné 3,5 g kyseliny vínnej. Po hodině intenzívneho miešania po přidaní celého množstva organického extraktu sa vylúčený tylozín tartarát odfiltruje, premyje 30 ml acetonu a vysuší volné na vzduchu pri laboratórnej teplote, čím sa získá 4,1 g tylozín tartarátu o účinnosti 850 m. j./mg, čo je 86% výťažnosť, počítané na filtrát fermentačnej půdy.To 500 ml of the fermentation plate filtrate with an efficiency of 7,630 µg / ml was added 100 ml of butyl acetate and 25 ml of butanol. The mixture was adjusted to pH 9.0 with vigorous stirring with stirring and allowed to stir for 15 minutes. After this time, the organic layer was separated to give 125 ml of an organic phase with an efficiency of 27,750 µg / ml which was 91 pens. extraction yield. The organic extract obtained is then added dropwise to 300 ml of acetone, in which 3.5 g of tartaric acid is dissolved. After one hour of vigorous stirring after addition of all the organic extract, the precipitated tylosin tartrate is filtered off, washed with 30 ml of acetone and air-dried at room temperature to give 4.1 g of tylosin tartrate having an efficiency of 850 m. U./mg, which is 86% recovery calculated on the fermentation broth filtrate.

Claims (1)

Sposob izolácie antibiotika tylozínu z filtrátu fermentačnej pódy po skončení kultivácie produkčného kmeňa Streptomyces fradiae, alebo z iných vodných roztokov tylozínu, vyznačený tým, že sa filtrát fermentačnej půdy, alebo iný vodný roztok tylozínu extrahuje butylacetátom, ktorý obsahujeMethod of isolating the antibiotic tylosin from the filtrate of the fermentation broth after the cultivation of the production strain Streptomyces fradiae, or from other aqueous tylosin solutions, characterized in that the filtrate of the fermentation broth or another aqueous tylosin solution is extracted with butyl acetate containing VYNALEZUWe claim: 1 až 30 % obj. vo vodě obmedzene rozpustného organického rozpúštadla, s výhodou butanolu a z extraktu sa tylozín vyzráža ako sol' acetonovým roztokom kyseliny, s výhodou 1 % hmot. obj. roztokom kyseliny vínnej v acetone.1 to 30% vol. % of a water-soluble organic solvent, preferably butanol, and from the extract tylosin precipitates as a salt with an acetonic acid solution, preferably 1 wt. vol. solution of tartaric acid in acetone.
CS847473A 1984-10-03 1984-10-03 Tylosine antibiotic insulation method CS240345B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS847473A CS240345B1 (en) 1984-10-03 1984-10-03 Tylosine antibiotic insulation method

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS847473A CS240345B1 (en) 1984-10-03 1984-10-03 Tylosine antibiotic insulation method

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS747384A1 CS747384A1 (en) 1985-06-13
CS240345B1 true CS240345B1 (en) 1986-02-13

Family

ID=5423935

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS847473A CS240345B1 (en) 1984-10-03 1984-10-03 Tylosine antibiotic insulation method

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS240345B1 (en)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110407893B (en) * 2019-08-14 2023-01-03 齐鲁制药(内蒙古)有限公司 Method for removing D component and improving quality of tylosin tartrate

Also Published As

Publication number Publication date
CS747384A1 (en) 1985-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2126416C1 (en) Erythromycin derivatives, pharmaceutical composition on their basis, method of their preparation and intermediates
KR100486053B1 (en) Novel Erythromycin Derivatives, Method for Preparing Same, and Use Thereof as Drugs
KR930002509B1 (en) Process for preparation of crystalline calcium pseudomonate
US10414746B2 (en) Method and intermediate for preparing tulathromycin
EP0677530B1 (en) Process for the preparation of azithromycin dihydrochloride
DE1166199B (en) Process for the preparation of 7-aminocephalosporaneane derivatives
DD210283A5 (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF 20-AMINOTYLOSINE DERIVATIVES
CN102643295A (en) Preparation method of cefminox sodium
CS240345B1 (en) Tylosine antibiotic insulation method
DE69709732T2 (en) AROMATIC RIBOSE-SUBSTITUTED DERIVATIVES, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND THEIR USE AS A MEDICINAL PRODUCT
CN113173956A (en) Preparation method of clarithromycin lactobionate
CS221510B2 (en) Method of making the anorganic salts of trimethylamonium derivatives of the polyenmarolide
RU2110578C1 (en) Strain amycolatopsis orientalis subspecies eremomycini vkpm-s892 - a producer of antibiotic eremomycin and a method of antibiotic eremomycin producing
US3946013A (en) 1,3-BIS(Beta-ethylhexyl)-5-amino-5-methylhexahydropyrimidine-pyridine-3-carboxylate, process for its preparation and pharmaceutical compositions containing this compound
DE2244915B2 (en) Methoxymethyl ester of hetacillin and process for its preparation
WO2016189549A1 (en) A novel process for the preparation of ethacrynate sodium
CN105461770A (en) Synthesis method of 9-desoxy-9-homoerythromycin A(Z) oxime
US4482545A (en) Isoefrotomycin, process of preparation, pharmaceutical composition and method of using same
US2438209A (en) Reaction product of gramicidin and formaldehyde and method of production
DE2754323C2 (en)
US5091411A (en) Pseudo-primycin complexes, components and acid addition salts thereof as well as a process for the preparation of same
RU2235723C1 (en) Method for preparing n-(6-methyl-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydro-5-pyrimidinsulfon)-n'-isonicotino yl hydrazide
CS231279B1 (en) Isolation method of thylosine antibioticum
DE1795290C3 (en) hydroxyphenyl) acetamido] peniciUanoic acid and 6- [D-0-2,2-dimethyl-4- (3-chloro-4-hydroxyphenyl) -5oxo2H-1-imidazolidinyl] peniciUanoic acid, processes for the preparation of these compounds and pharmaceuticals prepared therefrom
BG61266B1 (en) Method for the preparation of20-dehydro-20-deoxy-20-=(cis-3,5-dimethylpiperidine-1-il)-desmycosin