CS239474B1 - Způsob fermentační přípravy antibiotik - Google Patents

Abstract

Je popsán způsob fermentační přípravy antibiotik, jako jsou penicilín, cnlortetracyklin a fungicidin kultivací příslušných produkčních mikroorganismů v tekutých živných médiích, obsahujících jako standardní zdroje uhlíku asimilovatelné monosacharidy a disacharidy, růstové faktory, minerální soli a jako hlavní komplexní zdroj dusíku jemně mletou psofokarpovou mouku jako náhradu za standardně používanou sojovou nebo arašídovou mouku pro přípravu fermentačních médií, při dosažení odpovídajících produkcí biosyntetických látek·

Description

(54) Způsob fermentační přípravy antibiotik

Je popsán způsob fermentační přípravy antibiotik, jako jsou penicilín, cnlortetracyklin a fungicidin kultivací příslušných produkčních mikroorganismů v tekutých živných médiích, obsahujících jako standardní zdroje uhlíku asimilovatelné monosacharidy a disacharidy, růstové faktory, minerální soli a jako hlavní komplexní zdroj dusíku jemně mletou psofokarpovou mouku jako náhradu za standardně používanou sojovou nebo arašídovou mouku pro přípravu fermentačních médií, při dosažení odpovídajících produkcí biosyntetických látek·

Způsob fermentační přípravy antibiotik spočívá v kultivaci produkčních mikroorganismů v tekutých živných médiích, které obsahují jako zdroje uhlíku asimilovatelné sacharidy, jako jsou glukóza a dalSÍ monosacharidy, déle disacharidy jako sacharozu, laktózu aj; jako komplexní zdroje dusíku se aplikují sojoyé nebo aražídová mouka, dále bavlníková mouka, kukuřičný extrakt a jiné duslkté substance* Fermentační média déle obsahují růstové faktory, vitaminy a minerální látky* V případě fermentační přípravy penicilinu se uplatňují jako uhlíkaté zdroje hlavně glukóza a laktóza, u tetrecyklinových antibiotik jsou to sacharóza, melasa nebo enzymatické hydrolyzéty Škrobu; v případě fermentační přípravy fungicidinu se standardně používá glukóza* Z komplexních dusíkatých zdrojů se při fermentační přípravě uvedených antibiotik aplikují sojová mouka, případně araěídová mouka a kukuřičný extrakt.

Způsob fermentační přípravy některých antibiotik podle vynálezu popisuje fermentaci na bázi psofokarpová mouky v množství 1 až 6 % hmotnostních jako náhrady za sojovou a arašídovou mouku, které se běžně používají pro přípravu fermentačnlch médií. Aminokyselinová složení jemně mletých bobů Fsophocarpus tetragonolobus je podobná složení sojové a arašídové mouky.

Fermentační způsob přípravy penicilinu, chlortetracyklinu (CTC) a fungicidinu podle vynálezu uvádějí následující příklady.

Přikladl

Kmenem Penicilllum chrysogenum CC1Í F-713 se zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 60 ml lnokulačnlho média o tomto složení: kukuřičný extrakt 22,5 g, sacharóza 30 g, CaCO^ g, síran amonný 5 g, voda ad 1 000 ml; pH média 5,2; kultivace probíhá na rotační třepačce při teplotě 25 °C po dobu 48 hodin. Vyrostlou kulturou se v množství ,0 % obj. zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 40 ml fermentačního média o tomto složení: kukuřičný extrakt 27,2 g, sojové mouka 16 g, laktóza 110 g, dihydrogenfosforečnan draselný 6 g, dusičnan amonný 8 g, sirnatan sodný 8 g, síran hořečnatý 1 g, sacharóza 15 g, CaCO^ 10 g, kyselina fenoxyoctová 5,3 % hmot. 150 ml, voda 800 ml; pH média 6,2; kultivace probíhá na rotační třepačce při teplotě 25 °C po dobu 8 dni. U kontrolního postupu se sojovou moukou je dosahována produkce 19 600 j. penicilinu/ml média; při aplikaci 1 % hmot. psofokarpové mouky jako náhrady za sojovou mouku činí produkce penicilinu 20 000 j./ml médie, v případě použití 2 % hmot. psofokarpové mouky dosahuje produkce 20 300 j. penicilinu/ml média a ve fermentačním médiu se 3 % hmot. psofokarpové mouky činí produkce penicilinu 19 100 j./ml médie.

Příklad 2

Kmenem Penicilllum chrysogenum CCM F-679 se zaočkuje 500 ml varné baňka, která obsahuje 60 ml inokulačního média o tomto složení: glukóza 30 g, laktóza 10 g, kukuřičný extrakt 22,5 g, síran amonný 2 g, CaCO^ 5 g, dihydrogenfosforečnan draslený 0,5 g, voda ed 1 000 ml; pH média 5,2. Kultivace probíhá při teplotě 25 °C na rotační třepačce po dobu 48 hodin; vyrostlou kulturou se v množství 10 % obj. zeočkují 500 ml varné baňky, které obsahují 40 ml fermentačního média o tomto složení: bavlníková mouka (Pharmedia) 25 g, laktóza 150 g, síran amonný 10,5 g, CaCO^ 10 g, síran vápenatý 5 g, síran amonný 4 g, dihydrogenfosforečnan draselný 0,5 g, kyselina fenoxyoctová 5,3 % hmot. 150 ml, voda 800 ml; pH média 6,2; kultivace probíhá na rotační třepačce při teplotě 25 °C po dobu 10 dní. V kontrolním postupu s bavlníkovou moukou je dosahováno produkcí 28 300 j. penicilinu/ml média; náhradou tohoto substrátu 2 % hmot. psofokarpová mouky činí produkce 21 800 j. penicilinu/ml média, při aplikaci 3 % hmot. psofokarp. mouky se dosahuje produkce 25 000 j. penicilinu/ml média a se 4 % hmot. psofokarp. mouky produkce penicilinu 26 000 j./ml fermentačního média zn stejnou dobu kultivace.

Příklad 3

Kmenem Streptomyces aureofadens CCM 3406 se zaočkuje 500 ml varné baňka, které obsahuje 80 ml inokulačnlho média o tomto složení: sacharóza 40 g, psofokarpové mouka 20 g, kukuřičný extrakt 4,8 g, síran amonný 5 g, NaCl 2 g, CaCO^ 6 g, voda ad 1 000 ml; pH média 6,4; kultivace probíhá na rotační třepačce při teploté 28 °C podobu 24 hodin; vyrostlou kulturou se v množství ,0 % obj. zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 40 ml fermentačnlho média o tomto složeni: sacharóza 60 g, psofokarpové mouka 30 g, kukuřičný extrakt 8,2 g, kukuřičná mouka 5 g, síran amonný 5 g, NaCl 2,4 g, CaCOj 6 g; voda ad 1 000 ml; pH média 6,5; fermentace probíhá na rotační třepačce při teplotě 28 °C po dobu 96 hodin.

V kontrolním postupu se sojovou moukou je dosahována produkce 6 240 g CTC/ml média, v postupu s psofokarpovou moukou činí produkce CTC 6 000 jug/ml fermentačnlho média za stejnou dobu kultivace.

Příklad 4

Postup popsaný v příkladu 1 s tím rozdílem, že fermentační médium obsahuje psofokarpovou mouku a jako náhradu kukuřičná mouky odpovídající množství řepkového šrotu. V kontrolním postupu se sojovou moukou činí produkce CTC 6 390 yug/ml fermentačnlho mádla za 96 hodin kultivace, v případě experimentálního postupu bylo dosaženo produkce 6 l60jug CTC/ml média za stejnou dobu fermentace.

Příklad 5

Produkčním kmenem Streptomyces noursei se zaočkuje 500 ml varná baňka, která obsahuje 60 ml inokulačnlho média o tomto složení: sojová mouka 10 g, glukóza 30 g, síran amonný 2 g, kukuřičný extrakt 1 g, NaCl 1 g, voda ad 1 000 ml; pH média 6,2; kultivace probíhá ' na rotační třepačce při 28 °C po dobu 24 hodin; vyrostlou kulturou se v množství 5 % obj. zaočkuji 500 ml varná baňky, které obsahují 60 ml fermentačnlho média o tomto složení: sojová mouka 20 g, glukóza 50 g,· síran amonný 3 g, kukuřičný extrakt 2 g, CaCO^ 20 g, voda ad 1 000 ml; pH média 6,8 až 7,2. Kultivace probíhá na rotační třepačce při 28 °C po po dobu 168 hodin. V kontrolním postupu se sojovou moukou je dosahována produkce 59 300 j. fungicidinu/ml média; při náhradě sojové mouky psofokarpovou moukou činí produkce fungicldinu 58 000 j./ml média za stejnou dobu fermentace.

Claims (1)

1. pSidbžt vynálezu

   Způsob fermentační přípravy antibiotik a dalších biosyntetiokých látek kultivací produkčních mikroorganismů v tekutém živném médiu, obsahujícím zdroje asimilovatelnáho uhlíku a dusíku, minerální živná soli, růstové látky a nebo biofaktory, za aerobních podmínek, vyznačující se tím, že tekutá živné médium obsahuje jako hlavní komplexní zdroj asimilovatelnáho dusíku mouku z bobů Psophocarpus tetragonolobus v množství 1 až 6 % hmot.