CS227691B2 - Krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce - Google Patents
Krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce Download PDFInfo
- Publication number
- CS227691B2 CS227691B2 CS824512A CS451282A CS227691B2 CS 227691 B2 CS227691 B2 CS 227691B2 CS 824512 A CS824512 A CS 824512A CS 451282 A CS451282 A CS 451282A CS 227691 B2 CS227691 B2 CS 227691B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antibiotic
- aqueous
- weak
- water
- liters
- Prior art date
Links
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 title claims description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title description 11
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 49
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 45
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- BDNDRNLSLGGULA-DYXFHWNWSA-N actaplanin g Chemical compound C=1C2=CC=C(O)C=1C1=C(OC3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C=C(O)C=C1C(C(=O)OC)NC(=O)C1NC(=O)C2NC(=O)C2NC(=O)C(C=3C=C(C(=C(O)C=3)C)OC=3C(O)=CC=C(C=3)C(N)C(=O)N3)NC(=O)C3CC(C=C3)=CC=C3OC(C=3OC4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)=CC2=CC=3OC(C(=C2)Cl)=CC=C2C1OC1C[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O1 BDNDRNLSLGGULA-DYXFHWNWSA-N 0.000 claims description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 27
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 9
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 9
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 9
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 6
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 5
- 244000144972 livestock Species 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 4
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical compound NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 claims description 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 claims description 3
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 claims description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 claims description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 2
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 claims description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims 1
- AEXXXLUWJXUMEG-UHFFFAOYSA-N benzene;styrene Chemical compound C1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1 AEXXXLUWJXUMEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 claims 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims 1
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 claims 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 44
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 19
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 13
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 12
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 12
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 12
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 11
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 11
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 11
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 10
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 8
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 8
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 8
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 8
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 8
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 7
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 7
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 7
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 6
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 6
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 6
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 6
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 5
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 5
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 241000187843 Actinoplanes missouriensis Species 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 244000309464 bull Species 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000187844 Actinoplanes Species 0.000 description 2
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 2
- 229940095079 dicalcium phosphate anhydrous Drugs 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940060367 inert ingredients Drugs 0.000 description 2
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 238000009304 pastoral farming Methods 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 2
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 2
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 240000006927 Foeniculum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000004204 Foeniculum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019738 Limestone Nutrition 0.000 description 1
- 235000006550 Liquidambar Nutrition 0.000 description 1
- 241000208682 Liquidambar Species 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004594 Masterbatch (MB) Substances 0.000 description 1
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000008098 Oxalis acetosella Nutrition 0.000 description 1
- 241000218996 Passiflora Species 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 235000005205 Pinus Nutrition 0.000 description 1
- 241000218602 Pinus <genus> Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219793 Trifolium Species 0.000 description 1
- 244000126309 Trifolium dubium Species 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 150000004648 butanoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-MRCIVHHJSA-N dextrin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)OC1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-MRCIVHHJSA-N 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 1
- 239000006028 limestone Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 1
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N palmitic acid group Chemical group C(CCCCCCCCCCCCCCC)(=O)O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- -1 polyoxyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019832 sodium triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- FEPMHVLSLDOMQC-UHFFFAOYSA-N virginiamycin-S1 Natural products CC1OC(=O)C(C=2C=CC=CC=2)NC(=O)C2CC(=O)CCN2C(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)N(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(CC)NC(=O)C1NC(=O)C1=NC=CC=C1O FEPMHVLSLDOMQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká krmivá pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce, urychlujícího růst, s obsahem antibiotika A-4696, faktoru G.
Antibiotikum A-4696G je glykopeptid, který je možno získat pěstováním kmene Actinoplanes missouriensis, například ATCG 31681 ve vodném živném prostředí v submerzní kultuře za aerobních podmínek.
Po skončené fermentaci se antibiotikum izoluje ze surového fermentačního prostředí adsorpcí na pryskyřice a čistí se chromatografií.
Antibiotikum A-4696G je zásaditá látka, která tvoří s kyselinami ediční soli, jejichž výroba rovněž spadá do oboru vynálezu. Adiční soli antibiotika A-4696G s kyselinami, přijatelné z farmaceutického hlediska jsou zvláště výhodnými sloučeninami.
V průběhu přihlášky se pod pojmem sloučenina A-4696G rozumí antibiotikum A-4696 faktor G nebo některá sůl, přijatelná z farmaceutického hlediska.
Předmětem vynálezu je krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce a drůbež resp. předsměs k jeho vytvoření, vyznačující se tím, že obsahuje 0,01 až 90 hmotnostních % antibiotika A-46960, které je glykopeptidem se dvěma aminoskupinami zásadité povahy, ve formě dihydrochloridu jde o bílou krystalickou sloučeninu, v podstatě rozpustnou ve vodě a nerozpustnou v organických rozpouštědlech jako methylalkoholu, acetonu, chloroformu a benzenu, s přibližným procentuálním prvkovým složením 52(90 % uhlíku, 4,29 % vodíku, 6,39 % dusíku, 30,96 % kyslíku a 5,46 % chloru^ s absorpčním maximem v ultrafialovém světle v bromidu draselném při 3384 (široké),
2924 (slabé), 1730 (hrb), 1659 (intenzívní), 1616 (slabé), 1590 (slabé), 1504 (intenzívní), 1488 (hrb), 1427 (středně silné), 1289 (Slabé), 123f (dublet), 1214 (dublet), 1179 (slabé), 1119 (slabé), 1060 (intenzívní), 1028 (slabé), 1015 (. rb), 986 (slabé), 899 (velmi slabé),
881 (velmi slabé), 815 (slabé), 801 (hrb), 769 (hrb), (hrb), a 711 (slabé) cm-1, s absorpčním maximem v ultrafialovém světle ve vodě při 279 nm (eJ^b = 53), s volnou formou, kterou možno titrovat kontinuálně v rozmezí pH 3,5 až 13,5 při elektrometrické titraci v 66% vodném dimethylformamidu, při hydrelýze po dobu 70 minut v 5% vodném roztoku kyseliny chlorovodíkové při varu pod zpětným chladičem se vytváří pseudoglykon vzorce
nebo jeho adiční soli s kyselinou, přijatelné z farmaceutického hlediska.
Antibiotikum A-4696G je antibakteriélní látka, která je zvláště účinná, proti grampozitivním bakteriím. Mimoto podporuje antibiotikum A-4696G růst u zvířat.
Sloučenina A-4696G nebo její adiční soli s kyselinami, přijatelné z farmaceutického hlediska se připravují tak, že se pěstuje mikroorganismus Actinoplanes misouriensis ATCC 31681 ve vodném živném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlíku, dusíku a anorganických solí v submerzní kultuře za aerobních podmínek do nahromadění antibiotika.
Antibiotikum A-4696G nebo jeho adiční soli s kyselinami, přijatelné z farmaceutického hlediska zvyšují využití krmivá u přežvýkavců při perorálním podání. Sloučeninu je možno podávat přežvýkavcům v krmivu nebo v doplňkovém krmivu, které obsahuje příslušné množství antibiotika A-4696G nebo jeho adiční soli s kyselinami.
Antibiotikum A-4696G nebo jeho sůl s kyselinou, přijatelná z farmaceutického hlédiska může být rovněž použita ke zrychlení růstu u kuřat. V tomto případě ae příslušné množství této látky podává kuřatům v krmivu nebo v pitné vodě.
Antibiotikum A-4696G ve formě dihydrochloridu je bílá krystalická látka. Při elementární analýze dihydrochloridu bylo prokázáno následující přibližné procentuální složení: uhlík 52,90 %, vodík 4,29 %, dusík 6,39 %, kyslík 30,96 %, (vypočítáno jako rozdíl), chlor 5,46 %. Antibiotikum A-4696G má přibližnou molekulovou hmotnost 1700.
Absorpční spektrum v infračerveném světle pro dihydrochlorid antibiotika A-4696G v bromidu draselném je znázorněno na přiloženém výkresu. Absorpční maxima je možno pozorovat při následujících frekvencích v cm-': 3384 (široké), 2924 (slabé), 1730 (hrb), ,659 (intenizívií), 1616 (slabé), 1590 (slabé), 1504 (intenzívní), 1488 (hrb), 1427 (středně silné), 1289 (slabé), 1226 Xdublet), 1214 (dublet), 1179 (slabé), 1119 (slabé), 1060 (intenzivní), 1028 (slabé), 1015 (hrb)Ý 986 (slabé), 899 (velmi slabé), 881 (velmi slabé), 815 (šlsbé),
801 (hrb), 769 (hrb), 751 (hrb) a 7,1 (slabé).
Při elektrometrické titraci antibiotika A-4696G v 66% vodném dimethylformamidu při počátečním pH 7,89 se titruje stoupající množství v rozmezí pH 3,5 až 11,5.
Absorpční spektrum dihydrochloridu antibiotika A-4696G v ultrafialovém světle ve vodě mé absorpční maxima při 279 nm (Ej^m = 53).
Dihydrochlorid antibiotika A-4696G je rozpustný ve voděp avšak nerozpustný v rozpouštěd lach jako methanolu, acetonu, diethyletheru, chloroformu, benzenu a podobně.
Kromě volné látky a hydrochloridů je možno tvořit i další adiční soli antibiotika A-4696G sykyselinami, jejichž výroba rovněž tvoří Součást vynálezu. Vhodnými solemi antibio tiká A-4696G jsou soli, které ja možno získat standardními reakcemi s organickými anorganic JÉými kyselinami, jako jsou kyselina sírová, chlro vodí ková, fosforečná, octová, jantarová, citrénová, mléčná, maleinová, fumarová, palmitová, žlučová, pamoová, mucinová, D-glutanová, d-kafrová, glutarová, glykolová, ftalová, vinná, mravenčí, laurová, stearová, salicylové“, methahaulfonová, benzensulfonová, sorbinová, pikrová, benzoová, skořicová a podobně.
Zvláštní výhodnou skupinu solí tvoří adiční soli, přijatelné z farmaceutického hled Pod tímto pojmem se rozumí soli, které nejsou nežádoucím způsobem toxické pro teplokrevné živočichy.
Antibiotikum A-4696G stejně jako celý komplex tohoto antibiotika a jeho jednotlivé faktory podléhá hydrolýze v případě, že se zahřívá 70 minut na teplotu varu pod zpětným chladičem v 5· kyselině chlorovodíkové, takže vzniká pseudoaglykon, který je mož znázornit následujícím strukturním vzorcem:
OH
Svrchu uvedený pseudoaglykon se při hydrolýze z reakční směsi vysráží.
Jak je zřejmé ze svrchu uvedeného vzorce, obsahuje pseudoaglykon šest fenolových hydroxyskupin a volnou aminoskupinu kromě aminoskupiny na aminooukru, kterým je ristos
Stejně jako v případě dalších faktorů tohoto antibiotika obsahuje faktor G neutrální cukry, vázaná na pseudoaglykonově jádro,přes jednu nebo větěí počet fenýlových skupin.
Právě tyto cukry je možno odstranit hydrolýpůu faktoru G v kyselém prostředí.
•
Z neutrálních cukrů,, které byly identifikovány v hydrolyzátu komplexu celého sntibióv tiká je možno uvést monnózu, glukózu a rhamnózu. Faktor G se od ostatních faktorů zřejmě liší typem a počtem neutrálních cukrů, vázaných na jádro a také místem, v němž jsou tyto cukry vázány. V průběhu hydrolýzy se faktor G chová podobně jako faktory a
Faktor G je možno odlišit od známého faktoru A a od faktorů, popsaných v US patentové přihlášce č. 217 962 svým chováním při vysokotlaké kapalinové chroma£ografii. Dále jsou uvedeny retenční hodnoty K' pro některé faktory antibiotika A-4696 při použití vysokotlaká kapalinové chromatogafie v reverzní fázi C,® (Waters Assoc. /lBondapak Ο,θ) při teplátě místnosti a při použití 2% vodného roztoku kyseliny octové a acetonitrilu v objemovém poměru 90:10 a 2% vodného roztoku kyseliny octové a acetonitrilu v objemovém poměru 70:30 jako rozpouštědla.
| A-4696 faktor | K' |
| Á | 1,60 |
| B1 | 1,99 |
| *2 | 3,84 |
| B3 | 2,50 |
| C,a | 2,92 |
| C3 | 4,23 |
| E1 | 0,38 |
| G | 4,42 |
Mikroorganismus
Nový mikroorganismus, při jehož pěstování se získává svrchu uvedené antibiotikum byl získán mutacemi pomocí nitroseguanidinu z kmene Actinoplanes misouriensis ATCC 23342, to znamená z kmene, který produkuje komplex antibiotika A-4696, popsaný v US patentu číslo 3 952 095. Nový mikroorganismus produkuje faXtor G jako hlavní faktor v množství přibližně 30 % celkové produkce antibiotika. Současně jsou produkovány další faktory antibotika A-4696.
Nový mikroorganismus byl při stanovení svých vlastností srovnáván s původním kmenem ATCC 23342. Obě kultury produkují podobné substráty a primářni mycelia. Sekundární mycelium nebo mycelium na vzduchu se netvoří. Nebylo možno pozorovat sporangia. Bylo užito třináct druhů živných prostředí, jejichž podkladem jsou agarové plotny a mimoto i pyl rostlin Liquidambar, Pinus a Passiflora ke sledování případná tvorby eporangií. V žádném případě nebylo možno světelným mikroskopem ani elektronovým mikroskopem tvorbu sporangií pozorovat.
Dříve byla pozorována sporangia. v kultuře ATCC 23342. Sporangia popsal Dr. John N. Couch z University of North Carolina. Šlo o malé útvary o velikosti 4 až 11 jum, přibližně kulovité, zřídka přesně kulovité, obvykle s nepravidelnou stěnou, to znamená, že itěn* byla na řezu nepravidelně zvlněná.
Zralé spory byly uspořádány ve sporangiu ve formě jedné nebo většího počtu nezřetelných spirál. Sporangia jsou schopna bobtnání zejména v materiálu mezi sporami, přičemž se sporangium zvětší a nabyde téměř hladkého kulovitého tvaru. Přitom se uvolní spory, kt,yé jsou pohyblivé, velikosti 1 až 1,5/im v průměru a mají přibližně kulovitý tvar.
Kultura ATCC 23342 má buněčnou stěnu typu II, vé stěně je možno prokázat kyselinu meso-2,6-diaminopimelovou i kyselinu hydroxydieminopimelovou Beoker B. a další, Rapid Differentiation between Norcardia and Streptomyces by Paper Chromatography of Whole Cell Hydrolysates, Appl. Microbiol. 11: 421 až 423 (1964) .
Kultura ATCC 23342 se od kultury ATCC 31681 liší hlavně pigmentací primárního mycelia. Kultura ATCC 23342 má mycelium oranžově zbarvené a to mírně až hnědooranžové do sytě oranžového až žlutooranžového zbarvení v závislosti na živném prostředí. Kultuře ATCC 31681 nemá žádné vyjádřená zbarvené. Mycelium je obvykle žlutavě šedé. Tato kultura také neprodukuje žádný charakteristický rozpustný pigment.
Kultura ATCC 23342 produkuje červenavě hnědý rozpustný pigment na prostředí ISP 7 a na agaru g protlakem z rajčat a ovesnou moukou (TPC).
Melibióza se využívá kulturou ATCC 23342, avěak nikoli kulturou ATCC 31681.
Při stanoveni vlastnosti kultur bylo užito metod, doporučených International Streptomyces Project (ISP) pro sledování vlastností Streptomyces species E. B. Shirling, a D. Gottlieb, Methods ofi Characterisation of Streptomyces Species. Internal. Journal of Systematic Bacteriology, 16 (3(:313 až 340 £1966) , byla rovněž provedena řada doplňkových Skeušek.
Kmen Actinoplanes missouriensis ATCC 31681, produkující antibiotikum A-4696G je možno získat v čisté, kultuře bez přítomnosti ostatních kmenů tak, že se mikroorganismus pěstuje na šikmém agaru, agarových plotnách nebo ve sterilním vodném živném prostředí. Nový kmen, získaný mutací je možno využit pro výrobu antibiotika A-4696G.
Svrchu uvedený kmen Actinoplanes missouriensis ATCC 31681 produkuje faktor G a další látky s antibiotickým účinkem, přičemž faktor G tvoří přibližně 30 % antibiotik. Nový kmen může růst na celé řadě živnných prostředí, která obsahují využitelné zdroje uhlíku, dusíku a anorganických solí. Vhodnými zdroji uhlíku jsou například uhlohydráty jako škrob, glukóza, dextrin a podobně. Glycerol je rovněž mikroorganismem využíván jako zdroj uhlíku.
Výhodným a levným zdrojem uhlíku je melasa, avšak výhodnější je škrob. Ze zdrojů dusíku je možno uvést aminokyseliny, peptony a kvasinky. Je také možno užít oleje, například eo'jový olej nebo arašídový olej jako zdroje dusíku. Nejvýhodnějším zdrojem dusíku jsou kvasinky, obvykle extrakt z kvasnic.
Stejně jako v případě dalších mikroorganismů, produkujících antibiotika se včlení do živného prostředí anorganické soli. Anorganické soli,· které padají v úvahu jsou ty látky, které jsou zdrojem iontů sodíku, draslíku nebo vápníku a iontů amonných, fosforečnanových, chloridových, síranových a podobně. Je také možno do živného prostředí přidávat stopové prvky, nutné pro růst mikroorganismů, a to jednotlivě nebo spolu s dalšími živinami.
✓
Malá množství stopových prvků, dostatečná k uvedenému účelu se obvykle vyskytují jako nečistoty v ostatních složkách živného prostředí,
K dosažení vyšší produkce faktoru G v živném prostředí je možno do tohoto prostředí přidávat také zdroje růstových faktorů, například lihovarnické výpslky a extrakt z kvasnic.
Nový kmen, produkující faktor O je možno pěstovat, v širokém rozmezí pH, Pro maximální produkci antibiotika, je však výhodné udržovat pH v rozmezí 6 až 8,0, s výhodou v rozmezí 6,5 až 7. V průběhu růstu mikroorganismu se pH živného prostředí obvykle zvyšuje z výhodného rozmezí na pří 7,0 až 7,5.
Malá množství antibiotika je možně získat při pěstování, uvedeného krásné - třepáních lahvích o objemu 250 až 2 000 ml. Pro produkci »·λιι>ιο« •227691 fermentorů o přibližném objemu 10 000 až 200 000 litrů. Nejvýhodnějšl je pěstování v subaerzní kultuře za aerobních podmínek, zejména v případě, že je nutno získat velké množství faktoru G. Stejné jako při produkte! jiných látek se v tomto případě užívá velkých sterilních fermentorů s obsahem živného prostředí, které se oSkuje dostatečným množstvím očkovacího materiálu pro růst a produkci antibiotika v požadovaná době od naočkování.
Očkovací materiál pro velké tanky se získá tak, že se mikroorganismus nejprve pěstuje na šikmém ageru, odkud ee přenese do třepacích lahví s obsahem živného prostředí. Vegetativní prostředí v plném růstu se pak z třepací lahve přenese do většího objemu, který tvoří mezistupeň mezi třepací lahví a reprodukčním tankem. Jakmile růst v tomto mezistupni je optimální přenese se obsah do největšího tanku.
Kmen A. misouriensis ATCC 31681 je možno pěstovat ve fermentačnlm prostředí při teplotách 20 až 40 °C. Výhodná teplota pro maximální produkci faktoru G je přibližně 30 UC.
V průběhu fermentace nového kmene se živným prostředím nechá procházet sterilní vzduch a současně se živné prostředí míché. Přivádí se například 0,1 až 1,0 objemu vzduchu na 1 objem živného prostředí za minutu, výhodná rychlost provzduěňování živného prostředí však je alespoň 0,5 objemu vzduchu na 1 objem živného prostředí za minutu.
Při svrchu uvedených fermentačních podmínkách obvykle dochází k maximální produkci faktoru G v průběhu 4 až 6 dnů. Průběh fermentace je možno sledovat tak, že se odebíréjí vzorky, jejichž antibiotická účinnost se sleduje. Vhodným mikroorganismem pro toto použití je Bacilue subtilis. Zkoušky se provádí standardním způsobem použití ploten s papírovými kotouči nabo miskami na agarových živných prostředcích, naočkovéných zkoumaným mikroorgav nismem.
Při izolaci faktoru G do fermentačního prostředí se s výhodou postupuje'tak, že se živná prostředí chromatografuje na pryskyřici bez funkčních skupin. Pro tento účel je vhodná například pryskyřice Dision HP 20 (Mitsubishi). Dalšími podobnými pryskyřicemi bez funkčních skupin jsou například Ambertlite XAD-4 (Rohm a Haas Co.) a Duolite SES 861 (Diamond Shamrock), tyto pryskyřice mohou být rovněž užity.
Izolace faktoru G se obvykle provádí tak, že se živné prostředí zředí organickým rozpouštědlem, mísitelným a vodou, například acetonem a pH tohoto zředěného fermentačního prostředí se sníží na 1,5 až 2,0, načež se okyselené prostředí zfiltruje k odděleni mycelia a dalšího nerozpustného podílu. K urychlení filtrace je možno použítpomocných prostředků, například infusoriové hlinky nebo dalších běžně dodávaných pomocných prostředků pro filtraci.
Nerozpustný podíl je možno oddělit také odstředěním. Prostředí se pak upraví na j,H 3 až 4 a odpaří k odstranění organického rozpouštědla. Prostředí se pák nechá projít pryskyřicí bez funkčních skupin a antibiotikum se vymývá směsí vody a organického rozpoětědla, například směsí vody a methanolu, vody a ethanolu nebo vody a acetonu. ,
Obvykle1 tvoří organické rozpouštědlo 20 áž 50 objemových % směsi. Frakce eluátu a obsahem antibiotika se zahustí na malý objem a antibiotikum se vysráží z koncentrátu ve volné formě po úpravě pH na 6,5 až 7.
Je také možno postupovat tak, že se po skončené fermentaci faktor G izoluje z fermentačního prostředí běžnými izolačními postupy například adsorpcí na vhodnou iohtoaěniSovou prys kyřici s následným ohromatografickým dělením. Vhodné pryskyřice jsou například katlontoměničová pryskyřice s malým počtem příčných můstků, například Amberlite IR-116.
Jak již bylo uvedeno, antibiotikum A-4696 faktor G je zásaditá látka, která obsahuje dvě zásadité aminoskupiny. Faktor G proto tvoří adiční soli s anorganickými, e organickými kyselinami. Soli faktoru G se připravují běžným způsobem, například dihydrochlorid se připravuje tak, že se volná látka uvede v reakci e kyselinou chlorovodíkovou ve emisi vody a methanolu. Dihydrochlorid se z roztoku vysráží, oddělí se filtrací a usuší. Sulfát je možno získat tak, že se kyselina sírová přidá k roztoku faktoru G ve směsi vody a methanolu nebo ve směsi vody a ethanolu.
Faktor G je možno užít ke zrychlení hmotnostních přírůstků u kuřat tak, že se tento faktor včlení do krmivá nebo pitné vody pro kuřata. Faktor G je možno včlenit do krmivá v koncentraci 2,5 až 100 ppm, v tomto případě zvyěuje přírůstky a zlepšuje využití krmivá ve srovnání s kontrolními zvířaty. Při podávání do pitné vody se obvykle užívá sůl faktoru G, přijatelná z farmaceutického hlediska. Vhodnou solí antibiotika A-4696G pro toto podání je dihydrochlorid. Koncentrace antibiotika A-4696G nebo jeho soli v pitná vodě se obvykle užívá při hladinách 1,5 až 50/ig/ml, s výhodou 10 až 20^ug/ml. Je tedy možno urychlit růst kuřat tak, že se kuřatům podává -účinné množství růstového faktoru S antibiotika A-4696 nebo některá z jeho solí, přijatelných z farmaceutického hlediska.
Jak již bylo uvedeno^ je možno faktor G včlenit do krmivá nebo pitné vody kuřat. Kuřatům je možno podávat krmivo s obsahem antibiotika A-4696G v celém průběhu růstu až do dosažení maximálního přírůstku.
Antibiotikum A-4u9úG je možno včlenit do krmivá pro kuřata. K tomuto účelu je možno užít izolovaný a v podstatě čistý faktor A-4696G. Vysoce hospodárná a pohodlná forma podávání faktoru 3 pro uvedené použití však spočívá v tom, že se usuší celá fermentační prostředí, čímž se získá faktor 3 ve směsi s myceliem. Tato směs s obsahem mycelia a antibiotika A-4696G může být analyzována na obsah faktoru G, aby bylo možno do krmivá pro kuřata přidat příslušné množství tohoto faktoru.
Tímto způsobem je rovněž možno zužitkovat mycelium s příměsí faktoru G jako krmivá, doplňující sacharidy a aminokyseliny do denní dávky kuřat.
Směs mycelia a antibiotika A-4696G je možno získat tak, že se oddělí mycelium od živného prostředí a po odstranění faktoru G živného prostředí svrchu uvedeným způsobem se zahustí eluóty z chromatografických sloupců s obsahem faktoru G a koncentráty se smísí s odděleným myceliem před jeho usušením.
Antibiotikum A-4696 faktor G a jeho soli, přijatelné z farmaceutického hlediska jsou účinné látky, podporující růst také u přežvýkavců například krav, koz a ovcí. Účinnost využití chlorhydrátů u přežvýkavců se zvyšuje v tom případě, že je mikrobiální flóra bachoru podporována k tvorbě sloučenin typu propionátu a nikoli typu acetátu nebo butyrátu při štěpení alifatických kyselin, jak bylo uvedeno v publikaci Church a další, Digestive Physiology and Nutrition of Rumtnants, sv. 2, str. 622 až 625 (1971). Antibiotikum A-4696G ve volné formě nebo s výhodou ve formě soli, přijatelné z farmaceutického hlediska podporuje tvorbu propionátu ve srovnání s tvorbou acetátů a butyrétů v bachorové šíávě.
Například při pokusech prováděných s bachorovou Slávou ve fermentačních lahvích, v nichž je možno napravit činnost bachoru podporuje antibiotikum A-4696 tvorbu propionátu ve srovnání se všemi ostatními alifatickými kyselinami.
Pokusy byly prováděny následujícím způsobem:
K pokusům bylo užito plynotěsných lahví, opatřených vstupním otvorem pro kapaliny a pevné látky a výstupním otvorem pro plyny, které byly spojeny s vaky pro shromažďování fermentačních plynů.
Objemy kapaliny v lahvích byly udržovány na 500 ml vedením, které směřovalo k odběrné nádobě. Obsah baněk byl v průběhu zkoušek stále míchán magnetickým míchadlem. Teplota v baňkách byla udržována v rozmezí 38 až 40 °C.
Do každé baňky bylo přidáno 500 ml Slávy z bachoru, oéfebrané od býků s pištěli, býkům byla podávána tatáž potrava, jaká byla použita ve zkoumaná kapalině. Baňky byly zataveZ ny a byly připojeny vaky pro odběr plynu. Do baněk byl přidáván kapalný pufr o pH 6,8 až 7,0 následujícího složeni rychlosti přibližně 1 litr za den.
| Složka | g/litr |
| hydrogenfosforečnan sodný | 2,2 |
| chlorid hořeínatý | 0,036 |
| hydrogenuhličiten sodný | 5,9 |
| chlorid draselný | 0,34 |
| chlorid sodný | 0,28 |
| močovina | 1,0 |
| chlorid vápenatý | 0,024 |
Dvakrát denně bylo do každé baňky přidáno 10 g krmivá. Po každém přidáni byl uzavřen výstup pro plyn a baňka byla promyta kysličníkem uhličitým. Složení krmivá bylo 50 % sena z vojtěšky a 50 % krmivá následujícího složení:
| Složka | hmotnostní % |
| hrubě mletá kukuřice * | 40,85 |
| mleté kukuřičné stvoly | 35 |
| sojová mouka (50 % proteinu) | 8,1 |
| mouka z vojtěšky | 4 |
| melasa | 10 |
| močovina | 0,65 |
| hydrogenfosforečnan vápenatý | 0,6 |
| uhličitan vápenatý | 0,3 |
| chlorid sodný | 0,3 |
| směs vitamínu A a | 0,07 |
| doplňkové krmivo s vitamínem E | 0,05 |
| stopové prvky | 0,04 |
Býci, jímž byla odebírána bachorová Sláva byli krmeni tímtéž krmivém.
Každý den v průběhu zkoušek byla analyzována kapalina i plyn. Permentace probíhá 4 dny před přidáním antibiotika do krmivá. Po 4 dnech a po dosažení relativně stálého složení odebíraného plynu a kapaliny bylo přidáváno do krmivá antibiotikum A-4696G a fermentace pak byla prováděna ještě 7 dní.
Z každé baňky byla odebírána kapalina, v níž byl plynovou chx-omatografií stanoven obsah acetátu, propionátu a butyrátu. Údaje získané při přidávání antibiotika A-4696G jsou uvedeny v následující tabulce 5· .
Tabulka 5
Vliv antibiotika A-4696G na složení Slávy z bachoru
| Skupina | Dávka1 | Tvorba VFA2 3’ | Celkem/VTA | Produkce Cj v mol. % | |
| C2 °3 | C4 | ||||
| kontrola | 0 | 43,6 15,2 | 5,4 | 64,2 | 23,7 |
| antibiotikum A-4696G^ | 4 | 39,0 21,4 | 3,3 | 63,7 | 33,6 |
1) Koncentrace ve zkoumaném roztoku
2) Těkavé alifatické kyseliny v milimolech/den
3) A-4696G ve volné formě
Důležitým využitím vynálezu je možno zvýěit využití krmivá u přežvýkavců s vyvinutou bachorovou funkcí tak, že se těmto zvířatům podává perorálně takové množství antibiotika A-4696G, které zvýěí produkci propionátu.
Podle vynálezu se postupuje tak, že se podává perorálně zvířatům alespoň takové množství antibiotika A-4696G, aby se zvýSila produkce propionátu v bachoru. Toto množství se pohybuje přibližně v rozmezí 0,1 mg/kg tělesná hmotnosti denně až 5 mg/kg denně. Výhodné rozmezí je 0,25 až 3 mg/kg/den.
Antibiotikum A-469É faktor G a jeho soli, přijatelné z farmaceutického hlediska například síran, hydrochlorid nebo fosforečnan je možno podávat vs~ formě doplňkového krmivá, ve formě krmivá nebo ve formě bloků, popřípadě ve formě tablet, z nichž se antibiotikum pomalu uvolňuje.
Tento poslední způsob je nejvýhodnější pro zvířata, která se pasou. Tablety uvedeného typu je možno připravit s obsahem polymeru, který zejiěluje pomalé uvolňování antibiotika A-4696 po dobu několika dní.
Tablety musí mít dostatečně vysokou specifickou hmotnost, aby se nedostávalo zažívacím ústrojím dále než do bachoru. Tuto vysokou specifickou hmotnost je možno dosáhnout například přidáním částic kovu.
Minerální bloky s obsahem antibiotika A-4696G jsou rovněž velmi vhodným způsobem podávání tohoto antibiotika zvířatům na pastvě. Tyto bloky obsahují ve slisovaném stavu soli, zejména anorganické a další živné látky jako fosforečnany, uhličitany, vápenaté soli, stopové prvky, například zinek, mangan a podobně, vitamíny, steroidy a popřípadě další složky. Antibiotikum A-4696G je možno do těchto bloků včlenit v koncentraci 0,05 až 5
Dalším výhodným způsobem podávání antibiotika Á-4696G je forma doplňkového krmivá. Antibiotikum A-4696G a jeho soli, přijatelné z farmaceutického hlediska je možno zpracovávat na celou řadu krmiv, která jsou nová a rovněž spadají do oboru vynálezu.
Krmivá pro hospodářská zvířata' se obvykle připravují v několika stupních. Nejprve se účiná látka smísí s inertními složkami na předběžnou směs, které se dodává od původního výrobce do podniků, které připravují hotová krmivá pro hospodářská zvířata.
Tyto předběžné směsi mohou být kapalná nebo pevné a mohou obsahovat 1 až .90 % účinné látky. Povaha inertních složek v předběžném krmivu není kritická, může jít o jakýkoli' běžně užívaný nosič, přijatelný z fyziologického hlediska. Kapalnými nosiči mohou být například glykoly, jako polyethylenglykoly e různé molekulové hmotnosti a propylenglykol, Inertní oleje včetně rostlinných olejů a čištěných minerálních olejů a alkoholy, přijatelné z fyziologického hlediska, například ethanol.
Pevné směsi mohou obsahovat nosiče jako vermikulit, infusoriovou hlinku, jiné hlinky přijatelné z fyziologického hlediska, například atapulgit nebo morillonit a granulované nebo práškované součásti krmivá jako hrubě mletou kukuřici, sojovou mouku, vojtěěkovou mouku, rýžové plevy, drcenou kukuřici, drcenou pšenici nebo ověs a další druhy odpadových materiálů při zpracování zrní. Tyto složky pevných předběžných krmivových směsí se často granulují, zpracovávají na pelety nebo ee zpracovávají jinak k zajištění homogenity krmivá.
Dále budou uvedeny typická příklady předběžných krmiv, která obsahují antibiotika A-4696G, vyrobené způsobem podle vynálezu:
I.
mletý oves 84 % propylenglykol 2 lignin 3
A-4696G dihydrochlorid 11
II.
žlutá kukuřice 24 % mletá kukuřice 25 minerální olej 1
A-4696G sulfát 50
III.
sójová mouka 10 %
A-4696G fosfát 90
IV.
polyethylenglykol 90 %
A-4696G dihydrochlorid 9 polyoxyethylenester 1
V.
vermikulit 33 % olej z bavlníkových semen 2
A-4696G 65
VI.
rýžové plevy 22,5 % melasa 2,5
A-4696G sulfát 75 '
VII.
minerální olej 90 % polyglyceroleeter 5
A-4696G 5
VIII.
mletá kukuřice 74 85 sójový olej 1
A-4696G dihydrochlorid 25
Výhodná předběžná krmivá jsou taková, která obsahují 100 g antibiotiky A-4696G nebo jeho soli v 1 kg až 200 g antibiotika A-4696G nebo jeho soli v 1 kg předběžné směsi.
Druhým stupněm výroby krmivá pro hospodářské zvířata je doplňkové krmivo nebo koncentrát. Taková doplňková krmivá obsahují výše uvedenou sloučeninu, ve směsi s dalšími živinami, například anorganickými látkami, solemi, stopovými prvky a vitamíny.
Doplňkové krmivo se často vyrábí tak, že se předběžná směs mísí a ředí s dalšími složkami a většinou se vyrábí ve velkém množství. Doplňkové krmivo pak může být užito při výrobě výsledného krmivá s obsahem antibotika A-4696G nebo je možno jej prostě smísit s krmivém bez obsahu tohoto antibiotika při výsledném dávkování krmivá.
Koncentrace antibiotika A-4696G v doplňkovém J$rmivu se může měnit v širokém rozmezí v závislosti na množství doplňkového krmivá, které mé být podáno jednotlivým zvířatům.
Obecně se může koncentrace v doplňkovém krmivu pohybovat v rozmezí 0,01 až 1 %, s výhodou 0,02 až 0,5 %· Dále budou uvedeny příklady doplňkových krmiv s obsahem antibiotika vyrobených způsobem podle vynálezu.
I.
| mletá kukuřičné palice | 38,5 % |
| sójová mouka | 25,0 |
| mletá kukuřice | 20,0 |
| mletý oves | 10,0 |
| melasa | 2,5 |
| sůl | 0,4 |
| směs vitamínů | 1,1 |
| živočišný tuk | 1,5 |
| A-4696G fosfát | 1,0 |
II.
sójová mouka 64,29 % biuret 10,0 hydrogenfosforečnan vápenatý 4,2 tripolyfosfát sodný 2,1 síra 0,4 melasa 6,0 sůl 12,8 směs anorganických stopových prvků 0,2
A-4696G 0,01
III.
sojové mouka 49,59 % vojtěškové mouka 24,8 močovina 12,4 hydrogenfoaforečnan vápenatý 2,5 mletý vápenec 7,4 sůl 2,5 směs vitamínů 0,8
A-4696G sulfát 0,01
IV.
šíjová mouka 09,55 % hydrogenfosforečnan vápenatý 10,0
A-4696G dihydrochlorid 0,45
V.
šíjová mouka 10,75 % močovina 20,0 hydrogenfoaforečnan vápenatý 16,0 uhličitan vápenatý 24,0 sůl 20,0 hydrogenuhličitan sodný 2,0 směs stopových prvků a vitamínů 7,2
A-4696G 0,05
Krmivá pro přežvýkavce jsou obvykle a s výhodou založena na obilovinách vzhledem k potře bám těchto zvířat. Běžné krmivo pro přežvýkavce obsahující pšenici, oves, ječmen, kukuřici a podobně se mísí s výše uvedenými sloučeninami, běžným způsobem, tak jak tomu je při přidáváni dalších účinných látek do krmiv.
Krmivo se tedy skládá obvykle ze svrchu uvedených základních součástí a doplňků, jako jsou vitamíny, stopové prvky, anorganické soli a další důležité živné složky, které zajišlují správnou výživu přežvýkavců. Krmivo by mělo obsahovat přibližně 5 ppm až 500 ppm antibiotika A-4696G nebo jeho soli, s výhodou 10 až 250 ppm tohoto antibiotika. Dále budou uvedena typická krmivá s obsahem antibiotika nebo jeho solí.
I.
| řezaná vojtěška | 54,88 % |
| proso | 36,20 |
| sojová mouka | 4,10 |
| směs močoviny a obilí, 70 % bílkoviny | 3,60 |
| hydrogenfosforečnan vápenatý, | 0,90 |
| sůl s obsahem stopových prvků | 0,23 |
| vitamíny | 0,09 |
| A-4696G | 5 ppm |
| mleté proso | 60,0 |
| mouka z vojtěšky | 15,0 |
| slupky z bavlníkových semen | 15,0 |
| mouka z bavlníkových semen | 8, 5 |
sůl mletý vápenec A-4696G fosfát
1,0
0,5
250 ppm
III.
pšenice 44,54 % kukuřičné palice 45,00 melasa í třtiny 3,00 sójová mouka 6,40 hydrogenfosforečnan vápenatý 0,65 vápenec 0,38 stopové prvky 0,03
A-4696G 50 ppm
IV.
mleté seno z jetele 15 % mleté seno z vojtěšky 15 drcená kukuřice 50 plnotučná sójová mouka 10 melasa 9 směs stopových prvků, vitaminů a soli 1
A-4696G sulfát 100 ppm
Antibiotikum A-4696 faktor G je možno užít také jako látky, urychlující růst drůbeže a vepřů. K tomuto účelu se antibiotikum A-4696G nebo některá z jeho solí, přijatelných z farmaceutického hlediska podává svrchu uvedeným zvířatům v krmivu nebo v pitné vodě.
S výhodou se podává dihydrochlorid antibiotika A-4696G nebo jiná ve vodě rozpustná sůl v pitné vodě.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady: :
Přikladl
Způsob výroby antibiotika A-4696G
Pro naočkování kmenem, produkujícím antibiotikum A-4696G byl připraven šikmý živný agar následujícího složení:
| Složka | Hmotnostní % |
| cerelóza | 0,5 |
| dextrin z brambor | 2,0 |
| mouka nutriosy | ’,5 |
| extrakt z kvasnic | 0,25 |
| uhličitan vápenatý | 0,1 |
| agar | 2,0 |
živný agar se naočkuje kmenem ATCC 31681, produkujícím antibiotikum A-4696G a pak se inkubuje 6 dní při teplotě 30 °C. Po inkubaci se mycelium na šikmém agaru překryje sterilní destilovanou vodou a uvolní sterilní tyčinkou nebo kličkou za vzniku vodné suspenze mycelia.
Tato vodné suspenze se užije k naočkování 100 ml sterilního vegetativního živného prostředí, které mé stejné složení jako svrchu uvedený Šikmý agar. Takto naočkované živné prostředí se inkubuje 48 hodin při teplotě 30 °C.
V průběhu inkubace ee vegetativní živné prostředí míchá ne rotační třepačce při 250 otáčkách za minutu. Po skončené inkubaci se 10 ml kultury odebere a užije jako očkovací materiál pro další stupeň, v němž má živné prostředí následující složení i.
Složka Hmotnostní % ceřelóza 0,5 kvasnice 0,25 mouka Nutriosy 1,5 kukuřičný škrob 2,Q uhličitan vápenatý 0,1 protipěnivé činidlo (Sag 471 )X 0,05 x Sag 471 = protipěnivé činidlo silikonového typu (Union Carbide)
Toto živné prostředí se inkubuje 24 hodin při teplotě 30 °C za stálého míchání na rotační třepačce při 250 otáčkách za minutu. Po skončené inkubaci se toto prostředí užije k naočkování sterilního produkčního prostředí pro antibiotikum A-4696G následujícího složení.
Složka Hmotnostní % ceřelóza 2,5 kvasnice 2,0 uhličitan vápenatý 0,2 síran amonný 0,025 hydrogenfosforečnan draselný 0,05 glycerin 1,5 melasa 1,5 kukuřičný škrob 3,5 protipěnivé činidlo (Sag 471) 0,03
Fermentace se provádí 143 hodin při teplotě 30 °C za stálého míchání a provzdušňování sterilním vzduchem rychlosti 1/2 objemu vzduchu na 1 objem živného prostředí zá minutu.
V průběhu fermentace se zvýší pH živného prostředí z počátečního pH 6,5 na pH přibližně 8,0.
Část (30 litrů) fermehtačního prostředí se zředí 30 litry acetonu a pH se uprnví na 1,8 přidáním kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 6 N. Okyselené živné prostředí se zfiltruje při použití pomocného prostředku pro filtraci a nerozpustný podíl se promyje na filtru vodou.
Filtrát se upraví na pH 3,5 přidáním.150 ml hydroxidu sodného o koncentraci 50 % a filtrát se zahustí ve vakuu na objem 29 litrů. Pak se pH znovu upraví z 2,2 na 3,1 hydroxidem sodným a směs se znovu zfiltruje k odstranění nerozpustného podílu.
Antibiotikum se vymývá deionizovanou vodou, rychlost průtoku je 30 ml/minutu. Eluce se sleduje chromatografií na tenká vrstvě. Frakce, s obsahem antibiotika A-4696G se zahusti při teplotě 35 °C a tlaku 400 Pa a pak se lyofilizuje.
Usuěené odbarvené antibiotikum A-4696G se pak rozpustí v deionizované vodě. Výsledný vodný roztok se zfiltruje a nanese na vrchol chromatografického sloupce s obsahem polyamidu (Machery a Nagel SC6). Sloupec se vymývá deionizovanou vodou,Eluce se sleduje ultrafialovým světlem a chromatografií na tenké vrstvě. Úěinné frakce se slijí a lyofilizují.
Dalěí čiítění se provádí opakovanou chromatografií.
Claims (1)
- Krraivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce a drůbež, resp. přadsmés k jeho vytvoření, vyznačující se tím, že obsahuje 0,01 až 90 hmotnosních % antibiotika A-4696G které je glykopeptidem se dvěma aminoskupinami zásadité povahy, ve formě dihydrochloridu jde o bílou krystalickou sloučeninu, v podstatě rozpustnou ve vodě a nerozpustnou v organických rozpouštědlech jako methylalkoholu, acetonu, chloroformu a benzenu, s přibližným procentuálním prvkovým složením 52,90 % uhlíku, 4,29 % vodíku, 6,39 % dusí ku, 30,96 % kyslíku, a 5,46 % chloru, s absorpčním maximem v ultrafialovém světle v bromidu draselném při 3384 (široké),2924 (slabé), 1730 (hrb), 1659 (intenzívní), 1616 (slabé), 1590 (slabé), 1504 (intenzívní), 1488 (hrb), 1427 (středně silné), 1289 (slabé), 1226 (dublet), 1214 (dublet), 1179 (slabé), 1119 (slabé), 1060 (intenzívní), 1028 (slabé), 1015 (hrb), 986 (slabé), 899 (velmi slabé), 881 (velmi slabé), 815 (slabé), 801 fhrb), 769 (hrb), 751 (hrb) a 711 (slabé) cm-1,1 % s absorpčním maximem v ultrafialovém světle ve vodě při 279 nm (E1cm = 53);s volnou formou, kterou je možno titrovat kontinuálně v rozmezí pH 3,5 až 13,5 při elek trometrické titraci v 66½ vodném dimethylformamidu, při hydrolýze po dobu 70 minut v 5% vodném roztoku kyseliny chlorovodíkové při varu pod zpětným chladičem se vytváří pseudoaglykon vzorceOH nebo jeho adiční soli s kyselinou, přijatelnéSeverografia, n. p., MOST z farmaceutického hlediska.Cena 2,40 KčsFiltrát s obsahem antibiotika se nechá projit sloupcem o průměru 7,5 cm s obsahem 5 litrů pryskyřice bez funkčních skupin na styrendlvlnylbenzenovém podkladu (Mitsubishi Dlani on HP-20) po předběžném zpracováni methylalkoholem a promytí vodou.Byohlost průtoku je 250 ml za minutu. Po adsorbci antibiotika na pryskyřici se sloupec * promyje 5 litry vody a pak se postupně vymývá 21 litry vodného methylalkoholu o koncentraci 20 %, 15 litry 50% vodného methylalkoholu a 15 litry 50% vodného acetonu. Odebírají se frakce o objemu 4 litry. Frakce 8, 9 a 10 obsahuje větěinu antibiotika a mimoto je prostá větších nečistot.Frakce 8, 9 a 10 ee slijí a odpaří na objem č litrů ve vakuu. Po úpravě koncentrátu na pH 6,8 přidáním vodného roztoku hydroxidu sodného se koncentrát vlije do 60 litrů isopropylalkoholu. Antibiotikum A-4696G se z této směsi vysráií, oddělí se filtrací a usuší. Tímto způsobem se získá 54,2 g antibiotika A-4696G v podstatě v čisté formě.Příklad 2Výroba antibiotika A-4696G ve formě dihydrochloriduAntibiotikum A-4696G ve volné formě se rozpustí ve vodném methanolu a získaný roztok se zředí kyselinou chlorovodíkovou o koncentraci 1 N. Po promíchání se okyselený roztok může zředit acetonem, čímž se vysréží antibiotikum A-4696G ve formě dihydrochloridu.Příklad 3Další možný způsob výroby antibiotika A-4696GFermentační prostředí, připravené stejným způsobem jako v příkladu 1 se zflitruje po přidáni 5 % (hmotnostní/objemová %) pomocného prostředku pro filtraci (Célite -545). Filtrační koláč se znovu uvede v suspenzi ve stejném objemu deionizované vody a JSH takto získaná vodné suspenze se upraví na hodnotu 10,5 přidáním vodného roztoku hydroxidu sodného. Pevný podíl se ze suspenze oddělí filtrací a promyje se vodou. Filtrát se slije s vodou, užitou k promývání a takto získaný výsledný roztok se okyselí přidáním 20% hmotnostní/objemová % vodného roztoku kyseliny sírové na pH 4,5.Okyselený roztok se vyčeří filtrací při použití 1 % pomocného prostředku pro filtraci (Celit 545).Sirý roztok se nechá projít sloupcem, který obsahuje iontoměničovou pryskyřici Amberlite IR-116 (Na+ forma) a sloupec se promyje deionizovanou vodou. Pak se iontoměnič vyjme ze sloupce a po jednotlivých podílebh se vymývá při pH 10,5 vodným roztokem hydroxidu sodného.Získaný eluáť^se neutralizuje na pH 7 přidáním 20 % (hmotnostní/objemová %) vodného roztoku kyseliny sírové, načež se promyje třemi podíly deionizované vody. Voda, užitá k promývání se neutralizuje a slije s neutralizovaným eluátem. Výsledný roztok se koncentruje a pak se lyofilizuje.Takto získaný surový komplex se za energického míchání pomalu přidává k deionizované vodě. Výsledná suspenze se 20 minut míchá a pak se neutralizuje na pH 7 přidáváním 10% vodného roztoku hydroxidu amonného. Nerozpustné antibiotikum A-4696G se oddělí filtrací ve vakuu, pr myje se deionizovanou vodou a pak se lyofilizuje.Takto získané vysušené antibiotikum A-4696G, zbavéné solí se uvede v suspenzi v deionizované vodě a pH suspenze se upraví na 2,7 přidáním 3N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Okyselený roztok se odstřeáuje 40 minut při 2 500 otáčkách za minutu. Supernatant se slije a nanese na vrchol sloupce s obsahem pryskyřice k odbarvení. (Duolit S761).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS824512A CS227691B2 (cs) | 1980-12-18 | 1982-06-17 | Krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US21796080A | 1980-12-18 | 1980-12-18 | |
| CS819461A CS227683B2 (en) | 1980-12-18 | 1981-12-17 | Production method of antibioticum a 4696 factor g |
| CS824512A CS227691B2 (cs) | 1980-12-18 | 1982-06-17 | Krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS227691B2 true CS227691B2 (cs) | 1984-05-14 |
Family
ID=25746646
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS824512A CS227691B2 (cs) | 1980-12-18 | 1982-06-17 | Krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS227691B2 (cs) |
-
1982
- 1982-06-17 CS CS824512A patent/CS227691B2/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0055069A1 (en) | Derivatives of actaplanin | |
| KR840000750B1 (ko) | 폴리에테르 화합물 | |
| EP0100605B1 (en) | A47934 antibiotic and its production | |
| US4548974A (en) | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum shearer | |
| US4885170A (en) | Antibiotic A80509 | |
| US4307194A (en) | Inhibitors, obtained from bacilli, for glycoside hydrolases | |
| US4461723A (en) | Antibiotic A-4696 factor G | |
| US4770876A (en) | Microbiological production of livestock growth-promoting agent | |
| US4537879A (en) | A47934 Antibiotic and process for production thereof | |
| EP0055071B1 (en) | Antibiotic a-4696 factor g | |
| US4670260A (en) | Antibiotic for animal feeds | |
| CS227691B2 (cs) | Krmivo pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavce | |
| US3932619A (en) | Metabolite A-27106 and processes for its preparation and use | |
| US4637981A (en) | Antibiotic A-4696 factor G | |
| EP0063491B2 (en) | Ruminant lactation improvement | |
| US4659660A (en) | A47934 antibiotic and process for production thereof | |
| US4672036A (en) | Pure cultures of Kibdelsporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov. ATCC 39323 and mutants thereof | |
| SU1625317A3 (ru) | Способ получени препарата дл кормлени жвачных животных | |
| IE52407B1 (en) | Polyether and glycopeptide antibiotic compositions for growth promotion in ruminants | |
| IL44065A (en) | Metabolite a-27106 and process for its preparation and its use as coccidiostatic agent and feed additive | |
| US4797280A (en) | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov. ATCC 39323 | |
| CS209848B2 (cs) | Způsob přípravy polyetberických antibiotik A-28086 | |
| CS207694B2 (cs) | Způsob výroby antibiotika A-40104 faktoru A | |
| CS228936B2 (cs) | Předběžné, respektive doplňkové krmivo pra vytvoření krmivá pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavco |