CS225684B1 - Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací - Google Patents
Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací Download PDFInfo
- Publication number
- CS225684B1 CS225684B1 CS433781A CS433781A CS225684B1 CS 225684 B1 CS225684 B1 CS 225684B1 CS 433781 A CS433781 A CS 433781A CS 433781 A CS433781 A CS 433781A CS 225684 B1 CS225684 B1 CS 225684B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- disintegration
- suspension
- cell
- decompression
- mechanical
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 30
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 14
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 26
- 230000006837 decompression Effects 0.000 claims description 22
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 24
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 8
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 8
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 4
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 2
- 235000021245 dietary protein Nutrition 0.000 description 2
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 2
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 1
- IMSOBGJSYSFTKG-PKPIPKONSA-N Lysinoalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNCC(N)C(O)=O IMSOBGJSYSFTKG-PKPIPKONSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000223252 Rhodotorula Species 0.000 description 1
- 239000003570 air Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000498 cooling water Substances 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000013021 overheating Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací, a to za účelem izolace jednotlivých frakcí nebo jejich směsí.
Např. při přípravě koncentrátů potravinářského proteinu z mikroorganismů je nutno v
uvolnit vnitrobuněčný protein rozrušením buněčné stěny, a to bud mechanickým, biochemickým nebo chemickým způsobem. Využívá se přitom účinku celulolytických enzymů nebo hydrolysy v silně kyselém či alkalickém prostředí, což však působí destruktivně na nativní bílkovinu. Alkalická hydrolysa umožňuje např. vznik toxických složených aminokyselin /lyzinoalaninu/, případně racemizovaných aminokyselin, čímž se hodnota bílkoviny z potravinářského hlediska podstatně snižuje.
Na enzymové rozrušení buňky je nutno předem připravit potřebné lytické enzymy či směs enzymů; vlastní proces je tak časově náročný a tedy i nevýhodný vzhledem k tomu, že izolace jednotlivých enzymů je nákladná a vesměs jsou přítomny i proteázy, které mohou štěpit bílkoviny / Vršanská M., Bielý P. und Krátký Z.: Zechr. Allg. Mikr. 17» 465, 1977; Funatsu M., Aizono O.H. and Shinioda T.s Agr. Biol. Chem. 42, 1975, 1978/. Přestože v oboru enzymové degradace buněčných stěn bylo v posledním desítiletí patentováno několik postupů, tento způsob se v průmyslovém měřítku dosud nevyužívá /brit. patent č. 1, 281.618 /1972/, japonský patent č. 56.682 /1978/ ).
Použití mechanických způsobů rozrušení buněčných stěn umožní získat protein, vhodný
235 684
225 684 pro potravinářské účely (aut. osv. ČSSR Nr. 161299). Kromě toho odpadů při takové výrobě je možno využít k izolaci jiných, z biologického hlediska oennýoh komponent buněk, např. ergosterolu.
Z mechanických způsobů rozrušování buněk se jeví jako nejpřijatelnější metoda extrusivní, balotinová dezintegrace a rozrušování cestou rychlé dekomprese.
Extrusivní dezintegrace je založena na protlačování suspenze buněk z oblasti vysokého tlaku přes mikro-štěrbinu dezintsgračního zařízení do oblasti normálního tlaku. Základními faktory, podmiňujícími dezintegraci buněk, jsou - hodnota hydrostatického tlaku, její gradient a rychlost změny tlaku.
Ze zařízení na dezintegraci, ve kterých se využívá tohoto způsobu, jsou nejznámější hydraulické vysokotlaké homogenizátory firmy gaulin (USA) (Gaulin Teohnioal Bulletin, 1968, 7» Hetherington P.J. et al. Trans. Inst. Chem. Engrs., 1971, 49.2. 142). Proces rozrušování buněk v extrusivních homogenizátořech je charakterizován vysokými hodnotami pracovního tlaku (50 až 80 MPa) a poměrně nevysokou produktivitou (50 až 200 l.hod“^·).
Pro získání vysokého stupně rozrušení buněk (80 až 90%) je třeba několikrát opakovat pracovní cyklus, což vede k získání fragmentů buněk nestejné velikosti a k potížím při dělení pevné a kapalné fáze získané suspenze» kromě toho vyšší teplota jako následek opakované komprese může působit částečnou nebo úplnou inaktivaci intracellulárních složek. Na podobném principu pracuje i upravené vysokotlaké čerpadlo (Brookman J.S., Davies M. Biotechnol. Bioeng. 1973, 15,, 693), s produktivitou suspenze 15 l.hod”·*· při pracovním tlaku do 310 MPa.
Při použití balotinových dezintegrátorů je možné v průmyslovém měřítku při kontinuální technologii dosáhnout libovolného žádaného stupně rozrušení buněk, ovsem při odpovídajícím prodloužení doby zpracování materiálu. Nedostatky tohoto způsobu jsou lokální přehřívání zpracovávané látky, což nutně vyžaduje intenzivní chlazení» opakované drcení již získaných buněčných fragmentů s vytvářením příliš drobných částic (od jednotek do setin mikrometru) navíc značně komplikuje následující rozdělení pevné a kapalné fáze. Toto vše dohromady, tj. zvýšená spotřeba vody na chlazení elektrické energie, delší doba zpracování biomasy prodražuje proces a odráží sena konečné ceně produktu.
Je znám rovněž způsob a zařízení kontinuální dezintegrace s využitím efektu dekomprese (aut. osv. SSSR Nr. 477742 /1973/» aut. osv. SSSR Nr. 492118 /1973/$ aut. osv. SSSR Nr, 602550 /1974/» aut. osv. SSSR Nr, 602551 /1975/$ patent USA Nr, 4084757» Franc,patent Nr. 7624795), jehož funkce spočívá na principu rychlé dekomprese. Suspenze mikroorganizmů je sycena plynem pod tlakem ( dusíkem, vzduchem, kys. uhličitým), který nesmí reagovat s intracelulárními komponentami a také,nesmí inhibovat enzymy, zvláště endofenní nukleázu využitelnou pro degradaci nukleových kyselin v miktobiální bílkovině. Přitom se plynem sytí i buňky až do vyrovnání parciálního tlaku.z obou stran buněčné stěny, načež se suspenze náhle převede na úroveň atmosferického tlaku. Výsledkem je gradient tlaku plynu v buňce, směrovaný do vnějšího prostředí. Jelikož rychlost úniku plynu z buňky je vyšší než rychlost difúze buněčnou stěnou, dochází k roztržení stěny.
Dezintegrace způsobem rychlé dekomprese probíhá v zařízení, jehož podstatou je kom3
225 684 presor plynu, vysokotlaké dávkovači čerpadlo suspenze mikroorganizmů a dva vysokotlakové válce na sycení a převádění suspenze. Nesporná výhoda dekompresní dezintegrace spočívá v tom, že buňky resp. buněčné stěny zůstávají po dezintegraci celé nebo vykazují jen malý stupeň rozdrcení a lze je tudíž snadno oddělit separací od protoplazmy.
Popsaný postup nevede k inaktivaci intracelulárních enzymů a umožňuje izolovat chemické komponenty buňky v nativním stavu. Energetická spotřeba při dekompresní dezintegra ci je nízká a činí 0,06 kWh. kg\ zatímco při extrusivním nebo balotinovém rozdrcení buně ke spotřebuje 0,2 až 0,4 kWh.kg\
Proces dekompresní dezintegrace sám o sobě však nezabezpeěuje dostatečně vysoký stu peň uvolnění vnitrobuněčných komponent do vnějšího prostředí a protože je podstatně ovlivněn hodnotou pH zpracovávané suspenze, je třeba postup doplnit extrakcí biomasy dezintegrovaných buněk.
Toto je dokumentováno v Tab. č, 1, kde je udána hodnota pH suspenze kvasinek Sacharomyces cerevisiae v závislosti na uvolňování ve vodě rozpustných bílkovin do mímobuněčného prostředí (supernatantu) z buněk narušených dekompresním způsobem. Pro srovnání jsou uvedeny hodnoty pro jedno a šestinásobnou dezintegraci.
Množství vodorozpustné bílkoviny v neporušené buňce činí 20 % z celkového obsahu proteinu (N χ 6,25),.
Tabulka 1.
Vliv hodnoty pH na stupen extrakce vodorozpustné bílkoviny z buněk kvasinek Sacharomyces cerevisiae, rozrušených dekompresí.
hodnota pH Stupen extrakce vodorozpustné bílkoviny v %
| jednonásob. dezintegrace šestinásob. dezintegrace | |
| 4,5 | 8,0 5l’° |
| 7,0 | 12,0 68,3 |
| 9,0 | 18,1 96,5 |
| 11,0 | 24,9 124,0 |
Jak je zřejmé z tabulky, prakticky celé množství ve vodě rozpustné bílkoviny se v ** uvolňuje z dezintegrovaných buněk jenom při pH = 9,0. Stupen extrakce při pH = 11,0, převyšující 100% lze vysvětlit dodatečným· rozpuštěním frakcí proteinu, rozpustných v alkáliích. Destrukční působení dekomprese na stěnu buňky trvá setiny sekundy. Poté buňka již není mechanicky namáhána, takže z ní vyteče jen část protoplazmy, obsahující protein. Při opakovaném dekompresním působení do mezibuněčného prostoru přechází další část bílkoviny, jejíž množství závisí na pH vnějšího prostředí a počtu dezintegrací. Buněčná stěna se však již více nenarušuje. Existuje tak proporcionalita mezi množstvím bílkoviny, uvolněným z buňky, a počtem jednotlivých operací dezintegrace, a rovněž hodnotou pH suspenze.
Nevýhodou tohotozpůeobu je nízký výtěžek bílkovin z dezintegrace suspenzí při pH
225 684 okolo 7,0, eventuelně nutnost používání vyššíoh pH pro rychlejší uvolňování až extrakci bílkovin z narušených buněk a dále okolnost, že aktivní nukleáza potřebná pro degradaci nukleovych kyselin se uvolňuje v menši míre nez pri dezintegraci balotinovými dezintegrátory.
Uvedené nevýhody odstraňuje předmět vynálezu, jehož podstatou je, že se mikrobiální suspenze o koncentraci 1 až 20 % hmotnostních při pH 4,5 až 9,5 a za teploty 0 až 70 °C nejprve podrobí dezintegraci dekompresí s pracovním přetlakem 3 až 30 MPa, načež se před drcená suspenze zpracovává mechanickým drcením a uvolněné nativní frakce se izolují obecně známým způsobem.
Cílem vynálezu je izolace intracelulárních chemických komponent v nativním stavu biomasy mikroogranismů za kratší dobu a při nižší spotřebě energie s vysokým výtěžkem a získání suspenze, obsahující dostatečně velké buněčné fragmenty, jejichž izolace na standardních separátorech nedělá potíže.
Toho, e dosahuje použitím kombinované mechanické dezintegrace, kdy suspenze buněk mikroorganismů je jedenkrát nebo i vícekráte dezintegrována dekompresí při teplotě 0 až 70 °C, pH = 4,5 až 9,5, pracovním tlaku v systému 3 až 30 MPa, a poté zpracována v balotinovém dezintegrátoru, obsahujícím balotiny, (sypný objem balotinů je k objemu suspenze s výhodou v poměru 1,7 s l).
Přitom mohou být podrobeny dezintegraci kvasinky např. rodu Sacharomyces cerevisiae, Candida torulopsis, Rhodotorula, Ovidium, Pichia, Hansenula, bacterie rodu Megaterium, Medtanomonas, Eacherichia coli, plísně a řasy.
Navrhovaný způsob spočívá v následujícím!
Izolace nativních frakcí z jednobuněčných mikroogranismů se provádí z jejich vodní suspenze s koncentrací buněk 1 až 20 % hmotnosti o teplotě O až 70 °C a pH = 4,5 až 9,5. Suspenze je zpracována jednou nebo několikráte v periodickém nebo kontinuálním dezintegrátoru. Jako pracovní plyn je používán vzduch, dusík nebo jakýkoliv jiný plyn chemicky inertní ve vztahu k buňkám, Do suspenze je přiváděn stlačený vzduch protlakem 3 až 30 MPa, je udržována pod tlakem 15 až 60 sek·', a převedena do oblasti barometrického tlaku. Přitom probíhá dekompresní dezintegrace buněk mikroorganismů.
Dále je suspenze zpracovávána v balotinovém dezintegrátoru, obsahujícím balotiny o průměru 0,40 až 0.60 mm s výhodou při poměru sypného objemu suchých balotin k objemu suspenze buněk 1,7 i 1. Přitom za 5 až 10 min. dezintegrace přechází do roztoku 80 až 95 % ve vodě rozpustných buněčných frakcí v nativním stavu, které jsou izolovány a čištěny známými metodami.
Níže jsou uvedeny příklady využití způsobu dezintegrace pro izolaci nativní bílkoviny z buněk mikroorganismů podle vynálezu.
Příklad 1
Vodní suspenze kvasinek Sacharomyces cerevisiae s koncentrací buněk 9,8 hmotnostních % o teplotě 20 °C a pH = 8,4 byla jednorázově zpracována v laboratorním dekompresním dezintegrátoru s periodickým působením, sestávajícím z cylindrické komory - měniče vysokého tlaku o pracovním obsahu 35 ml, opatřené uzavíracím ventilem, z cýklonu-expanderu a
225 684 sběrné nádoby. Suspenze byla vpravena do komory, nasycena stlačeným dusíkem pod přetlakem 9 až 10 MPa, a po 25 sek. sycení plynem vystřelována přes uzavírací ventil do cyklonu-expanderu. Dezintegrovaná suspenze buněk byla jímána do sběrné nádoby a dále zpracována v jednodiskovém balotinovém vertikálním dezintegrátoru s rychlostí otáček disku 180 m-sek.”1 a skleněnými halotinami o průměru 0,40 až 0,56 mm; poměr objemu suspenze sypného objemu suchých kuliček v dezintegrátoru činil 1 : 1,7. Efektivnost dezintegrace byla hodnocena dle rychlosti uvolňování vodorozpustné bílkoviny do mezibuněčného prostředí.
Pro srovnání byl prováděn pokus, ve kterém byla biomasa zpracovávána jenom v balotinovém dezintegrátoru.
Graf na obr. 1 znázorňuje výsledky dezintegrace na balotinovém mlýnu ve srovnání s postupem podle vynálezu v závislosti na čase. Křivka č. 1 zachycuje.průběh kombinovaného drcení podle vynálezu s jedním předdrcením, křivka č. 2 s dvěma předdrceními a křivka č, 3 bez předdrcení.
(VRB = vodorozpustné bílkoviny a AKS = absolutní kvasniěná sušina).
Jak je zřejmé z obr. 1, v pokuse s předběžnou dekompresní dezintegrací prakticky celá vodorozpustná bílkovina přechází do roztoku během 5 minut balotinové dezintegrace; při balotinové dezintegraci bez předběžného dekompresního zpracování je pro uvolnění téhož množv ství bílkoviny zapotřebí 24 min. Tak předběžná dekompresní dezintegrace umožňuje zkrátit dobu balotinové dezintegrace na 21 %,
Příklad 2
Pokus byl prováděn v téže suspenzi a v tšehže podmínkách jako v Příkladě 1, ale předběžná dekompresní dezintegrace byla prováděna dvourázově. Časový průběh pokusu a výtěžnost jsou vyjádřeny křivkou č. 2 na obr. 1,
Příklad 3
Vodní suspenze Sacharomyces cerevisiae s Koncentrací buněk 15 % hmotnostních o teplotě 50 °C a pH 7,5 byla jednorázově zpracována v dekompresním dezintegrátoru při tlaku 19 až 20 MPa. Ostatní podmínky jsou stejné jako v příkladu 1. Výtěžnost bílkoviny za totéž časové období činí l6 % na sušinu kvasinek (jako v příkladu l).
Příklad 4
Místo suspenze kvasinek Sacharomyces cerevisiae byla dezintegraci podrobena suspenze bakterií Métharibmonas. Podmínky dezintegrace byly stejné jako v příkladu 1. Výtěžnost bílkoviny za totéž časové období činila 19 % na sušinu bakterií.
Způsobu dezintegrace jednobuněčných mikroorganismů podle vynálezu lze používat v případech, kdy je zapotřebí efektivní dělení pevné a kapalné fáze vytvořené suspenze rozrušených buněk ve standardních odstředivkách nebo separátorech nebo isolovat v nativním stavu intracelulární chemické komponenty, které se dezaktivují při vyšší teplotě či v příliš kyselé# nebo alkalickém prostředí. Způsobu může být použito např. při získání potravinářských bílkovinných látek z hiomasy jednobuněčných mikroorganismů, když současně s bílkovinami je nutno izolovat v aktivním stavu intracelulární nukleázy, využívané pro snížení obsahu nukleových kyselin v získaném produktu.
Využití navrhovaného způsobu ukazuje, že doba zpracován.! buněk v balotinovém dezinte225 684 grátoru se zkracuje 4 až 5 krát', jestliže suspenze byla předběžné podrobena dekompresní dezintegraci. Přitom se významně snižuje stupen ohřevu suspenze, což přispívá ke zvýšení produktivity balotinového dezintegrátoru, úspoře chladící vody a energie.
V případě izolace jakýchkoli termolabilních frakcí buněčného obsahu zvyšuje se jejich výtěžnost a uchovává aktivita. Použití způsobu podle vynalezu umožňuje izolovat buněčně enzymy v aktivním stavu, anpř. intracelulární nukleázu a dále ji využít na rozrušení nukleových kyselin, nacházejících se v buňkách mikroorganismů.
Claims (2)
1. Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací vyznačený tím, že se mikrobiální suspenze o koncentraci 1 až 20 % hmotnostních, při pH 4,5 až 9,5 a za teploty 0 až 70. °C nejprve podrobí dezintegraci dekompresí s pracovním přetlakem 3 až 30 MPa, načež se předdrcená suspenze zpracovává mechanickým drcením a uvolněné nativní, frakee se izolují obecně známým způsobem.
2. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím, že se mikrobiální suspenze podrobí dezintegraci dekompresní nejméně dvakrát.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS433781A CS225684B1 (cs) | 1981-06-10 | 1981-06-10 | Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací |
| SU827772257A SU1291603A1 (ru) | 1981-06-10 | 1982-02-01 | Способ выделени нативных фракций из одноклеточных микроорганизмов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS433781A CS225684B1 (cs) | 1981-06-10 | 1981-06-10 | Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS225684B1 true CS225684B1 (cs) | 1984-02-13 |
Family
ID=5385876
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS433781A CS225684B1 (cs) | 1981-06-10 | 1981-06-10 | Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS225684B1 (cs) |
| SU (1) | SU1291603A1 (cs) |
-
1981
- 1981-06-10 CS CS433781A patent/CS225684B1/cs unknown
-
1982
- 1982-02-01 SU SU827772257A patent/SU1291603A1/ru active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SU1291603A1 (ru) | 1987-02-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Roukas | Ethanol production from non-sterilized beet molasses by free and immobilized Saccharomyces cerevisiae cells using fed-batch culture | |
| CN102154423B (zh) | 一种紫菜活性肽的制备方法 | |
| JP2017521084A (ja) | 微細藻類バイオマスから可溶性タンパク質を抽出する方法 | |
| Acquah et al. | Potential applications of microalgae-derived proteins and peptides in the food industry | |
| US20230174921A1 (en) | Method And System Of Pre-Treating Biomass, In Particular Biomass That Is Resistant To Cell Disruption, For Improving The Accessibility Of Cellular Compounds Therefrom | |
| Sharma et al. | Enzymes and their production strategies | |
| Vogels et al. | Combination of enzymatic and/or thermal pretreatment with mechanical cell disintegration | |
| Tom et al. | Effect of reaction conditions on hydrolysis of chitin by Serratia marcescens QMB 1466 chitinase | |
| Li et al. | Unit operations applied to cell disruption of microalgae | |
| CN109206475B (zh) | 一种利用单步酶解同时提取油体及蛋白的方法 | |
| Jiang et al. | Effects of pH and temperature on recombinant manganese peroxidase production and stability | |
| Duarte et al. | Increased expression of keratinase and other peptidases by Candida parapsilosis mutants | |
| EP2971049B1 (en) | Production of squalene and/or sterol from cell suspensions of fermented yeast | |
| CN104293750A (zh) | 一种高效提取无菌木瓜蛋白酶的方法 | |
| CS225684B1 (cs) | Způsob uvolňování nativních frakcí z jednobuněčných mikroorganismů mechanickou dezintegrací | |
| Linko et al. | Ethanol production from whey with immobilized living yeast | |
| Jin et al. | Improvement of resveratrol production from waste residue of grape seed by biotransformation of edible immobilized Aspergillus oryzae cells and negative pressure cavitation bioreactor using biphasic ionic liquid aqueous system pretreatment | |
| Kostyleva et al. | A new Bacillus licheniformis mutant strain producing serine protease efficient for hydrolysis of soy meal proteins | |
| WO1981000857A1 (fr) | Procede de production d'alcool ethylique a partir d'un materiau d'amidon brut | |
| CN113186102B (zh) | 一种新型的细菌裂解的方法 | |
| Lindblom | Properties of intracellular ribonuclease utilized for RNA reduction in disintegrated cells of Saccharomyces cerevisiae | |
| US3801461A (en) | Process for the extraction of enzymes from microorganisms | |
| Kula et al. | Cell disintegration for the purification of intracellular proteins | |
| JP4693157B2 (ja) | 微生物培養基材 | |
| US5981212A (en) | Way of increasing the riboflavin content in spray-dried discharges from riboflavin fermentations |