CS224347B1 - Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B - Google Patents
Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B Download PDFInfo
- Publication number
- CS224347B1 CS224347B1 CS268582A CS268582A CS224347B1 CS 224347 B1 CS224347 B1 CS 224347B1 CS 268582 A CS268582 A CS 268582A CS 268582 A CS268582 A CS 268582A CS 224347 B1 CS224347 B1 CS 224347B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hbs
- immunoglobulin
- concentration
- prevention
- solution
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 5
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 title 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 22
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 18
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 claims description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 6
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 claims description 3
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 claims description 3
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N cyclopentene-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CCCC1 PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- YEUAOTZWAWUYBH-UHFFFAOYSA-N hexanethioic s-acid Chemical compound CCCCCC(S)=O YEUAOTZWAWUYBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000003186 pharmaceutical solution Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
(54) Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B
224 347
- 1 224 347
Vynález se týká způsobu výroby imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B ze sušiny imunoglobulinu, která se rozpustí ve stabilizovaném pasteurizovaném roztoku albuminu v optimálním množství podle obsahu specifických anti-HBs protilátek.
U doposud známého způsobu přípravy specifického imunoglobulinu anti-HBs se sušina imunoglobulinu, získaná etanolovou frakcionací lidské krevní plasmy s vysokým obsahem anťi-HBs protilátek, rozpouští v roztoku obsahujícím glukózu, kyselinu epsilonamiiiokapronovou a chlorid sodný. Výsledná koncentrace bílkoviny v konečném roztoku se pohybuje v rozmezí 140 až 180 g/1.
Nevýhodou této metofly je nízká stabilita finálního roztoku, provázená vypadáváním nerozpustných bílkovin, což nutí provádět opakované filtrace, které způsobují nežádoucí ztráty a tím snižují výtěžnost hotového produktu. Případným dalším snižováním koncentrace bílkoviny v konečném roztoku pod hranici 140 g/1, která je dolním limitem dosavadního produktu, se stabilita bílkovin v roztoku dále zhoršuje. Tento faktor zamezuje využít možnosti eventuálního ředění výsledného roztoku imunoglobulinu v případě, jestliže to umožňuje dostatečně vysoký obsah specifických anti-HBs protilátek.
Úkolem vynálezu je vytvořit postup, který umožní přípravu specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B s podstatným snížením uvedených nevýhod. Podstatou vynálezu je, že sušina imunoglobulinu anti-HBs se rozpustí v roztoku, který obsahuje stabilizovaný pasteurizovaný lidský
224 347 albumin v koncentraci 30 až 150 g/1, β výhodou 50 g/1, kyselinu aminooctovou v koncentraci 15 až 30 g/1, chlorid sodný ▼ koncentraci 3 až 9 g/1 a thiomersal v koncentraci maximálně 0,1 g/1· Sušina imunoglobulinu se přidá v takovém množství, aby výsledný roztok byl při ředění 1/25000 positivní na obsah protilátek anti-HBs technikou radioimunoanalýzy (RIA).
Systém radioimunoanalytického průkazu protilátek anti-HBs spočívá v tom, že na kuličkách z umělé hmoty je vázán lidský povrchový antigen hepatitidy B (HBsAg). Kuličky se umístí do jamek z umělé hmoty a přidá se příslušně ředění vyšetřovaného roztoku imunoglobulinu· Je-li v příslušném ředění imunoglobulinu přítomna protilátka anti-HBs, naváže se na antigen HBsAg na kuličce během inkubace. Po inkubaci se roztok odsaje, kuličky se promyjí a přidá se HBsAg značený radioaktivním iodem (12^I), který se naváže na protilátku na kuličce. Kuličky se znovu promyjí a měří se stupeň radioaktivity na gama počítači. Čím vyšší je počet naměřených impulsů, tím více je přítomno protilátek anti-HBs ve vyšetřovaném vzorku imunoglobulinu.
Předmětem vynálezu se dosahuje vyššího účinku tím, že vzhledem ke stabilizačnímu efektu albuminu, nedochází k nežádoucímu vypadávání bílkovin v roztoku a to i při značně nízké koncentraci imunoglobulinu anti-HBs. Tohoto efektu lze s výhodou využít při přípravě roztoku imunoglobulinu anti-HBs, jehož koncentrace může být podstatně nižší než u dosavadního preparátu a to v přímé závislosti na obsahu specifických gnti-HBs protilátek, zjištěných technikou radioimunoanalýzy (RIA). Uplatnění navrženého postupu se projeví zejména optimálnějším využitím sušiny imunoglobulinu anti-HBs.
Příklad postupu výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs jjfcro prevenci virové hepatitidy typu B podle vynálezu.
Sušina imunoglobulinu anti-HBs o elektroforetické čistotě minimálně 95% získaná etanolovou frakcionací lidské krevní plasmy s vysokým obsahem anti-HBs protilátek, se rozpustí v roztoku obsahujícím stabilizovaný lidský albumin v koncentraci
224 347 g/1, který byl předem pasteurizován minimálně 10 hodin při 60°C, dále kyselinu aminooctovou v koncentraci 22,5 g/1, chlorid sodný v konoentraoi 7 g/1 a thiomersal τ koncentraci 0,1 g/1 Popsaným způsobem se nejprve připraví zkušební vzorky s postupně klesající konoentraoi imunoglobulinu anti-HBs v roztoku a to od 160 g/1 až po <0 g/1. V jednotlivých vzorcích se technikou radioimunoanalýzy (RIA) stanoví obsah specifických protilátek anti-HBs. Na základě výsledků se zvolí definitivní navážka sušiny pro přípravu vlasního farmaceutického roztoku a to podle toho vzorku, ve kterém je při minimální váhové koncentraci imunoglobulinu stále ještě vyhovující obsah protilátek anti-HBs technikou radioimunoanalýzy (RIA), to jest positivní hodnota při ředění vzorku 1/25000.
U takto vyrobeného roztoku se provede úprava pH na hodnotu 7,0 a dále se roztok sterilně filtruje přes azbestooelulózové vrstvy. U tohoto produktu se provedou příslušná chemická a biologické zkoušky včetně definitivního ověření obsahu anti-HBs protilátek technikou radioimunoanalýzy (RIA), přičemž hodnoty musí být positivní ještě při ředění 1/25000. Nakonec se provede rozplnění po 5 ml, případně po 1 ml.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU224 347Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B ze sušiny imunoglobulinu anti-HB^^tlzf&šií v roztoku, obsahujj^ftabilizovaný pasteurizovaný lidský albumin v koncentraci 30 až 150 g/1 a kyselinu aminooctovou v koncentraci 15 až 30 g/l?vyznačující se tím, že tento roztok dále obsahuje chlorid sodný v koncentraci 3 až 9 g/1 a thiomersal v koncentraci maximálně 0,1 g/1, přičemž množství rozpouštěné sušiny se určí podle předběžného vyšetření obsahu protilátek anti-HBs technikou radioimunoanalýzy (RIA.) tak, aby konečný roztok imunoglobulinu byl na tyto protilátky positivní ještě v ředění 1/25000·
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS268582A CS224347B1 (cs) | 1982-04-15 | 1982-04-15 | Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS268582A CS224347B1 (cs) | 1982-04-15 | 1982-04-15 | Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS224347B1 true CS224347B1 (cs) | 1984-01-16 |
Family
ID=5364660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS268582A CS224347B1 (cs) | 1982-04-15 | 1982-04-15 | Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS224347B1 (cs) |
-
1982
- 1982-04-15 CS CS268582A patent/CS224347B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McMillan et al. | Antibody against megakaryocytes in idiopathic thrombocytopenic purpura | |
| US4433059A (en) | Double antibody conjugate | |
| Speich et al. | Reference values for ionized, complexed, and protein-bound plasma magnesium in men and women. | |
| US4108974A (en) | Radioimmunoassay for thyroid hormone | |
| EP0013930B1 (de) | Immunogen, Antikörper für ein Thymus-Hormon, markiertes Thymus-Hormon und Verfahren zur Bestimmung dieses Thymushormons | |
| Schäfer et al. | Polypeptides of mammalian oncornaviruses: II. Characterization of a murine leukemia virus polypeptide (p15) bearing interspecies reactivity | |
| IE44471B1 (en) | Stable preparation of erythrocytes process for preparing it and its use | |
| Sell et al. | Isolation and characterization of rat α1-fetoprotein | |
| EP0722087A1 (en) | Measurement system using whole blood | |
| Nakamura et al. | Relationship between molecular size and intra-and extravascular distribution of protein antigens | |
| DE69711749T2 (de) | Verfahren zur Vorbereitung eines diagnostischen Reagenz für Hepatitis C Virusinfektion | |
| US4299814A (en) | Radioimmunoassay of MIF | |
| JPS59224565A (ja) | 抗原検出用試薬 | |
| GB1589107A (en) | Immunologic compositions | |
| US4223002A (en) | Isolation of alpha1 -fetoprotein | |
| EP0001812A1 (de) | Verfahren zur Herstellung gereinigten Alpha-1-Fetoproteins und dessen Verwendung | |
| US4132767A (en) | Preparation of α-L antibody, purification of α-L antigen and reagent for detection of α-L antibody and α-L antigen | |
| CS224347B1 (cs) | Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B | |
| AT397580B (de) | Laktoferrin enthaltendes inkubationsmedium für festphasen-immunometrische verfahren und seine verwendung | |
| Gärtner et al. | A new Principle of Thyroxine (T4) and Triiodo-thyronin (T3) Radioimmunoassay in unextracted Serum using Antisera with binding Optima at extreme pH ranges | |
| Schrohenloher et al. | Ultracentrifugal Studies of the Reaction of IgM Anti-γ-Globulin Subunits with Human IgG | |
| EP0322813A2 (de) | Verfahren zur Bestimmung einer immunologisch aktiven Substanz | |
| US3925541A (en) | Method of coating stabilized erythrocytes | |
| JPS6118699B2 (cs) | ||
| Boenisch et al. | Hepatitis-associated antigen (HAA). I. Quantitation by electrophoresis in antibody-containing agarose gel by use of a primary standard of purified HAA |