CS224347B1 - Method of preparing specific anti-hbs imunoglobulin for prevention of b-type virus hepatitis - Google Patents
Method of preparing specific anti-hbs imunoglobulin for prevention of b-type virus hepatitis Download PDFInfo
- Publication number
- CS224347B1 CS224347B1 CS268582A CS268582A CS224347B1 CS 224347 B1 CS224347 B1 CS 224347B1 CS 268582 A CS268582 A CS 268582A CS 268582 A CS268582 A CS 268582A CS 224347 B1 CS224347 B1 CS 224347B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hbs
- immunoglobulin
- concentration
- prevention
- solution
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 5
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 title 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 22
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 18
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 claims description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 6
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 claims description 3
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 claims description 3
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N cyclopentene-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CCCC1 PYRZPBDTPRQYKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- YEUAOTZWAWUYBH-UHFFFAOYSA-N hexanethioic s-acid Chemical compound CCCCCC(S)=O YEUAOTZWAWUYBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000003186 pharmaceutical solution Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
(54) Způsob výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B(54) A method of producing a specific immunoglobulin anti-HBs for the prevention of viral hepatitis B
224 347224 347
- 1 224 347- 1 224 347
Vynález se týká způsobu výroby imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B ze sušiny imunoglobulinu, která se rozpustí ve stabilizovaném pasteurizovaném roztoku albuminu v optimálním množství podle obsahu specifických anti-HBs protilátek.The invention relates to a method for the production of immunoglobulin anti-HBs for the prevention of viral hepatitis B from immunoglobulin dry matter, which is dissolved in a stabilized pasteurized albumin solution in an optimal amount according to the content of specific anti-HBs antibodies.
U doposud známého způsobu přípravy specifického imunoglobulinu anti-HBs se sušina imunoglobulinu, získaná etanolovou frakcionací lidské krevní plasmy s vysokým obsahem anťi-HBs protilátek, rozpouští v roztoku obsahujícím glukózu, kyselinu epsilonamiiiokapronovou a chlorid sodný. Výsledná koncentrace bílkoviny v konečném roztoku se pohybuje v rozmezí 140 až 180 g/1.In the hitherto known method for the preparation of a specific immunoglobulin anti-HBs, the immunoglobulin dry matter, obtained by ethanol fractionation of human blood plasma with a high content of anti-HBs antibodies, is dissolved in a solution containing glucose, epsilonium thiocaproic acid and sodium chloride. The final protein concentration in the final solution is in the range of 140-180 g / l.
Nevýhodou této metofly je nízká stabilita finálního roztoku, provázená vypadáváním nerozpustných bílkovin, což nutí provádět opakované filtrace, které způsobují nežádoucí ztráty a tím snižují výtěžnost hotového produktu. Případným dalším snižováním koncentrace bílkoviny v konečném roztoku pod hranici 140 g/1, která je dolním limitem dosavadního produktu, se stabilita bílkovin v roztoku dále zhoršuje. Tento faktor zamezuje využít možnosti eventuálního ředění výsledného roztoku imunoglobulinu v případě, jestliže to umožňuje dostatečně vysoký obsah specifických anti-HBs protilátek.The disadvantage of this metophly is the low stability of the final solution, accompanied by the loss of insoluble proteins, which forces repeated filtration to cause undesirable losses and thereby reduce the yield of the finished product. By further reducing the protein concentration in the final solution below 140 g / l, which is the lower limit of the prior art product, the stability of the protein in the solution further deteriorates. This factor avoids the possibility of eventual dilution of the resulting immunoglobulin solution if the content of specific anti-HBs antibodies is sufficiently high.
Úkolem vynálezu je vytvořit postup, který umožní přípravu specifického imunoglobulinu anti-HBs pro prevenci virové hepatitidy typu B s podstatným snížením uvedených nevýhod. Podstatou vynálezu je, že sušina imunoglobulinu anti-HBs se rozpustí v roztoku, který obsahuje stabilizovaný pasteurizovaný lidskýSUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a process which allows the preparation of a specific immunoglobulin anti-HBs for the prevention of viral hepatitis B with a substantial reduction in the above disadvantages. It is an object of the invention that the dry matter of anti-HBs immunoglobulin is dissolved in a solution containing stabilized pasteurized human
224 347 albumin v koncentraci 30 až 150 g/1, β výhodou 50 g/1, kyselinu aminooctovou v koncentraci 15 až 30 g/1, chlorid sodný ▼ koncentraci 3 až 9 g/1 a thiomersal v koncentraci maximálně 0,1 g/1· Sušina imunoglobulinu se přidá v takovém množství, aby výsledný roztok byl při ředění 1/25000 positivní na obsah protilátek anti-HBs technikou radioimunoanalýzy (RIA).224 347 albumin at a concentration of 30 to 150 g / l, preferably β 50 g / l, aminoacetic acid at a concentration of 15 to 30 g / l, sodium chloride at a concentration of 3 to 9 g / l and thiomersal at a maximum concentration of 0.1 g / 1 · Add the immunoglobulin solids in such a quantity that the resulting solution is positive for the anti-HBs antibody content by radioimmunoassay (RIA) at a dilution of 1/25000.
Systém radioimunoanalytického průkazu protilátek anti-HBs spočívá v tom, že na kuličkách z umělé hmoty je vázán lidský povrchový antigen hepatitidy B (HBsAg). Kuličky se umístí do jamek z umělé hmoty a přidá se příslušně ředění vyšetřovaného roztoku imunoglobulinu· Je-li v příslušném ředění imunoglobulinu přítomna protilátka anti-HBs, naváže se na antigen HBsAg na kuličce během inkubace. Po inkubaci se roztok odsaje, kuličky se promyjí a přidá se HBsAg značený radioaktivním iodem (12^I), který se naváže na protilátku na kuličce. Kuličky se znovu promyjí a měří se stupeň radioaktivity na gama počítači. Čím vyšší je počet naměřených impulsů, tím více je přítomno protilátek anti-HBs ve vyšetřovaném vzorku imunoglobulinu.The radioimmunoassay system for the detection of anti-HBs antibodies is based on the binding of human hepatitis B surface antigen (HBsAg) to plastic beads. The beads are placed in the plastic wells and the dilutions of the immunoglobulin to be tested are added accordingly. If an anti-HBs antibody is present in the appropriate immunoglobulin dilution, it will bind to the HBsAg antigen on the bead during incubation. After incubation, the solution is aspirated, the beads washed, and radiolabeled HBsAg ( 12 µL) is added, which binds to the antibody on the bead. The beads are washed again and the degree of radioactivity is measured on a gamma counter. The higher the number of measured pulses, the more anti-HBs antibodies are present in the immunoglobulin sample under investigation.
Předmětem vynálezu se dosahuje vyššího účinku tím, že vzhledem ke stabilizačnímu efektu albuminu, nedochází k nežádoucímu vypadávání bílkovin v roztoku a to i při značně nízké koncentraci imunoglobulinu anti-HBs. Tohoto efektu lze s výhodou využít při přípravě roztoku imunoglobulinu anti-HBs, jehož koncentrace může být podstatně nižší než u dosavadního preparátu a to v přímé závislosti na obsahu specifických gnti-HBs protilátek, zjištěných technikou radioimunoanalýzy (RIA). Uplatnění navrženého postupu se projeví zejména optimálnějším využitím sušiny imunoglobulinu anti-HBs.The object of the invention is to achieve a higher effect in that due to the stabilizing effect of albumin, undesirable protein loss in solution does not occur, even at a very low concentration of immunoglobulin anti-HBs. This effect can be advantageously used in the preparation of an anti-HBs immunoglobulin solution whose concentration may be substantially lower than that of the prior art, in direct dependence on the content of specific gnti-HBs antibodies as determined by radioimmunoassay (RIA) techniques. The application of the proposed procedure will be manifested in particular by the optimal use of the immunoglobulin dry matter of anti-HBs.
Příklad postupu výroby specifického imunoglobulinu anti-HBs jjfcro prevenci virové hepatitidy typu B podle vynálezu.An example of a method for producing a specific anti-HBs immunoglobulin is to prevent viral hepatitis B according to the invention.
Sušina imunoglobulinu anti-HBs o elektroforetické čistotě minimálně 95% získaná etanolovou frakcionací lidské krevní plasmy s vysokým obsahem anti-HBs protilátek, se rozpustí v roztoku obsahujícím stabilizovaný lidský albumin v koncentraciAnti-HBs immunoglobulin dry matter of at least 95% electrophoretic purity, obtained by ethanol fractionation of human blood plasma containing a high content of anti-HBs antibodies, is dissolved in a solution containing stabilized human albumin at a concentration of
224 347 g/1, který byl předem pasteurizován minimálně 10 hodin při 60°C, dále kyselinu aminooctovou v koncentraci 22,5 g/1, chlorid sodný v konoentraoi 7 g/1 a thiomersal τ koncentraci 0,1 g/1 Popsaným způsobem se nejprve připraví zkušební vzorky s postupně klesající konoentraoi imunoglobulinu anti-HBs v roztoku a to od 160 g/1 až po <0 g/1. V jednotlivých vzorcích se technikou radioimunoanalýzy (RIA) stanoví obsah specifických protilátek anti-HBs. Na základě výsledků se zvolí definitivní navážka sušiny pro přípravu vlasního farmaceutického roztoku a to podle toho vzorku, ve kterém je při minimální váhové koncentraci imunoglobulinu stále ještě vyhovující obsah protilátek anti-HBs technikou radioimunoanalýzy (RIA), to jest positivní hodnota při ředění vzorku 1/25000.224 347 g / l, which was previously pasteurized for at least 10 hours at 60 ° C, followed by aminoacetic acid at 22.5 g / l, sodium chloride at conoentraoi 7 g / l and thiomersal τ at 0.1 g / l Initially, test samples are prepared with a gradually decreasing conjugation of anti-HBs immunoglobulin in solution, ranging from 160 g / l to <0 g / l. The content of specific anti-HBs antibodies is determined by radioimmunoassay (RIA) in individual samples. On the basis of the results, a definitive dry weight for the preparation of the hair pharmaceutical solution is selected according to the sample in which at the minimum immunoglobulin concentration by weight the anti-HBs antibody content is still satisfactory by radioimmunoassay (RIA), i.e. 25000.
U takto vyrobeného roztoku se provede úprava pH na hodnotu 7,0 a dále se roztok sterilně filtruje přes azbestooelulózové vrstvy. U tohoto produktu se provedou příslušná chemická a biologické zkoušky včetně definitivního ověření obsahu anti-HBs protilátek technikou radioimunoanalýzy (RIA), přičemž hodnoty musí být positivní ještě při ředění 1/25000. Nakonec se provede rozplnění po 5 ml, případně po 1 ml.The solution thus prepared is adjusted to pH 7.0 and sterile filtered through asbestos-cellulosic layers. Appropriate chemical and biological tests shall be carried out on this product, including definitive verification of the anti-HBs antibody content by radioimmunoassay (RIA) techniques, with values still to be positive at a dilution of 1/25000. Finally, a 5 ml or 1 ml filling is carried out.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS268582A CS224347B1 (en) | 1982-04-15 | 1982-04-15 | Method of preparing specific anti-hbs imunoglobulin for prevention of b-type virus hepatitis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS268582A CS224347B1 (en) | 1982-04-15 | 1982-04-15 | Method of preparing specific anti-hbs imunoglobulin for prevention of b-type virus hepatitis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS224347B1 true CS224347B1 (en) | 1984-01-16 |
Family
ID=5364660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS268582A CS224347B1 (en) | 1982-04-15 | 1982-04-15 | Method of preparing specific anti-hbs imunoglobulin for prevention of b-type virus hepatitis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS224347B1 (en) |
-
1982
- 1982-04-15 CS CS268582A patent/CS224347B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McMillan et al. | Antibody against megakaryocytes in idiopathic thrombocytopenic purpura | |
| US4433059A (en) | Double antibody conjugate | |
| Speich et al. | Reference values for ionized, complexed, and protein-bound plasma magnesium in men and women. | |
| US4108974A (en) | Radioimmunoassay for thyroid hormone | |
| EP0013930B1 (en) | Immunogene, antibody for a thymus hormone, labelled thymus hormone and process for the determination of this thymus hormone | |
| Schäfer et al. | Polypeptides of mammalian oncornaviruses: II. Characterization of a murine leukemia virus polypeptide (p15) bearing interspecies reactivity | |
| IE44471B1 (en) | Stable preparation of erythrocytes process for preparing it and its use | |
| Sell et al. | Isolation and characterization of rat α1-fetoprotein | |
| EP0722087A1 (en) | Measurement system using whole blood | |
| Nakamura et al. | Relationship between molecular size and intra-and extravascular distribution of protein antigens | |
| DE69711749T2 (en) | Procedure for preparing a diagnostic reagent for hepatitis C virus infection | |
| US4299814A (en) | Radioimmunoassay of MIF | |
| JPS59224565A (en) | Reagent for detecting antigen | |
| GB1589107A (en) | Immunologic compositions | |
| US4223002A (en) | Isolation of alpha1 -fetoprotein | |
| EP0001812A1 (en) | Process for the preparation of purified alpha-1-fetoprotein and its application | |
| US4132767A (en) | Preparation of α-L antibody, purification of α-L antigen and reagent for detection of α-L antibody and α-L antigen | |
| CS224347B1 (en) | Method of preparing specific anti-hbs imunoglobulin for prevention of b-type virus hepatitis | |
| AT397580B (en) | INCUBATION MEDIUM CONTAINING LACTOTRINE FOR SOLID-PHASE IMMUNOMETRIC METHODS AND ITS USE | |
| Gärtner et al. | A new Principle of Thyroxine (T4) and Triiodo-thyronin (T3) Radioimmunoassay in unextracted Serum using Antisera with binding Optima at extreme pH ranges | |
| Schrohenloher et al. | Ultracentrifugal Studies of the Reaction of IgM Anti-γ-Globulin Subunits with Human IgG | |
| EP0322813A2 (en) | Method for the determination of an immunologically active substance | |
| US3925541A (en) | Method of coating stabilized erythrocytes | |
| JPS6118699B2 (en) | ||
| Boenisch et al. | Hepatitis-associated antigen (HAA). I. Quantitation by electrophoresis in antibody-containing agarose gel by use of a primary standard of purified HAA |