CS219418B1 - Způsob izolace ergokryptinů s žádaným poměrem a a β složky - Google Patents

Abstract

Způsob izolace ergokryptinů s žádaným poměrem a a β složky 1 : 1 až 2,5 : 1 vyznanémý tím, že se surová směs alkaloidů po přečištění krystalizací a úpravě poměru ergotoxinových složek na žádaný poměr, obvykle ergokonnin : ergokryptin : ergokristin 1:1:1, chromatografuje na sloupci silikagelu za použití eluční směsi chlorovaných, uhlovodíků méthanu nebo ethanu v poměru 1 : 2 až 2 : 1 s benzenem nebo diethyletherem, nebo se zpracuje na čistou směs o? a β ergokryptinů, která se krystaluje z methanolu nébo ethanolu, ethylacetátu, dioxanu, benzenu, směsi methanol nebo ethanol — voda 8 : 2, nejvýhodněji ze směsi ethylacetát, méthanol, voda 10 : 1 : 2, případně se čis,tá směs a a β ergokryptinů po hydrogenaci vazby 9,10-kyseliiny lysergové, krystaluje z dioxanu, nebo ethylacetátu, butylacetátu nebo vodného alifatického alkoholu Cí až C3 (8 : 2).

Description

Vynález se týká. způsobu přípravy ct a β ergokryptinu v žádaném poměru, izolací ze surové směsi alkaloidů ergotoxinové skupiny ergokriblinu, erg-okorninu, a a β ergokryptinu a jejich směsí, provázených omezeným množstvím alkaloidů skupiny ergotaminu (ergotamin, a a β ergosin) ve formě 1-evo i právo,točivých enantiomerů a další skupinou pep-tidických alkaloidů necyklolové struktury {např. N-[N-( d-Lysergyl )-L-valyl ] -L-fenyl-alanyl-D-prolin laktam, Ν- [ N- (d-Lysergyl) -L-valyl ] -L-leucyl-D-pr olin laktam a Ν- [ N- (d-Lysergyl) -L-valyl] -L-valyl-D-prolin laktam], jejich štěpných produktů a balastních látek.

Postup izolace alkaloidů dále popisovaný umožňuje nastavení žádaného poměru jednotlivých ergotoxinových alkaloidů poměru a a β ergokryptinu, spolehlivě odděluje ostatní doprovodné alkaloidy a řeší odstranění laktamových alkaloidů.

V poslední době je do terapie prosazován dihydroergotoxin a jeho soli v přesně definovaném složení, prakticky odpovídajícím zastoupení dihydroergokristinu, dihydroergdkornitnu a dihydroergokryptinu 33,3 % hmot. + 10 %', s tím, že optimálních farmakologických účinků je dosaženo u substance a z ní připravovaných lékových forem, v jejímž dihydroergokryptinovém podílu jsou «-dihydroergokryptin a /3-dihydr oergokryptin zastoupeny v poměru 1,5 : 1 až 2,5 : 1.

První zmínka o alkaloidu s velmi blízkými vlastnostmi ergokryptinu s pracovním označením EK 115 byla publikována Beranem a Semonským Cs. farmacie 11. (1962). V roce 1968 Schlientz a spol. Pharm. Acta Helvetiae 43,497 [1968) popsali izolaci, fyzikální, chemické i farmakologické vlastnosti ^-ergokryptinu. Surová směs alkaloidů získána extrakcí švýcarského námele, po oddělení hlavní části ergokorninu obsahující převahu ergokryptinu byla převedena na adiční sůl s kyselinou di-p-toluyl-D-vinnou a opakovaně krystalována z vodného methanolu. V matečných louzích zkoncentrovaný /2-ergokryptin po· přečištění chromatografií na sloupci silikagelu byl překrystalován z benzenu. Frakční krystalizace směsi provedená popsaným způsobem je náročná surovinově (nutná příprava opticky aktivní substituované kyseliny vinné) i pracnosti a je spíše použitelná pro laboratorní účely než průmyslovou výrobu.

Parciální syntézou byl /3-ergokryptiin získán Stadlerem a spol., Helv. chem. Acta 52, 1563 (1969). Z reakční směsi byl získán přímou krystalizaci z methanolu. Další podíl z matečných louhů byl izolován po chromatografii na sloupci kysličníku hlinitého a krystalizaci ze směsi methylenchlorid — — methanol.

Fyzikální i chemické vlastnosti /3-ergokryptinu jsou velmi blízké vlastnostem ostatních ergotoxinových alkaloidů a zejména samotnému «-ergokryptinu. Je známo, že při dosud používané technologii čištění ergotoxinových alkaloidů přesto dochází k částečnému oddělování /3-ergokryptinu spolu s doprovodnými alkaloidy, štěpnými produkty a balastními látkami do matečných louhů. Proto byla nejdříve hledána metoda umožňující odstranění doprovodných alkaloidů tak, aby bylo možno alkaloidů včetně přítomného /3-ergokryptinu efektivně využít.

Po odstranění doprovodných alkaloidů a balastních látek bylo přistoupeno k separaci jednotlivých ergotoxinových alkaloidů a poté k hledání postupů dělení & a /3-ergokryptinu ták, aby bylo možno připravit bázi nelbo adiční sůl dihydroergotoxinia s žádaným poměrem « a /3-ergokryptinu a daným zastoupením jednotlivých ergotoxinových alkaloidů.

Autoři vynálezu zjistili, že částečného obohacení směsi o /3-ergokryptin lze dosáhnout chromatografií na sloupci silikagelu za užití směsi chlorovaných uhlovodíků methanu nebo ethanu s aromatickým uhlovodíkem nebo diethyletherem jako elučním činidlem.

V prvních frakcích dochází ke zkoncentrování především pravotočivých enantiomerů, eluce dále pokračuje /3-ergokryptinem, «-ergokryptinem, ergokorninem a ergokristinem. Získaného materiálu obohaceného β-ergokryptinem lze s výhodou použít ke korekci ergotoxinu na žádaný poměr složek.

Velmi významný dělicí efekt « a /3-ergokryptinu vykazují nově vypracované krystalizační postupy v nehydrogenavané i hydrogenované formě námelových alkaloidů. Určitého stupně oddělení /3-ergokryptinu od «-ergokryptinu lze dosáhnout krystalizaci z methanolu, ethanolu, benzenu, octanu ethylnaté-ho, dioxanu jejich vzájemných -směsí a směsí s vodou. Zvláště výhodnou se jeví krystalizace z vodného methanolu (90%) a směsi eťhylacetátu, methanolu a vody.

a a /3-dihydroergokryptin obsahující omezené množství ostatních ergotoxinových alkaloidů a dalších doprovodných alkaloidů lze rovněž rozdělit krystalizačními postupy užívajícími jako krystalizační médium dioxan, směs methanolu nebo ethanolu s vodou; zvláště dobrých výsledků lze dosáhnout krystalizaci z octanu ethylnatého. Podle vynálezu je možno zpracovat surovou alkáloidní směs obsahující mimo « a /3-ergokryptin i ostatní ergotoxinové složky až 15 proč. alkaloidů skupiny ergotaminu, 15 % alkaloidů laktamové struktury, 5 % alkaloidů ergoxinové skupiny v levo i pravotočivých formách a až 30 % balastních látek nealkaloidního charakteru. Výše uvedené krystalizace je možno realizovat po izolaci čisté směsi « a /3-ergokryptinu zbavené balastních látek i ostatních doprovodných alkaloidů.

Surová -směs alkaloidů se převede na adiční sůl s kyselinou fosforečnou, uvolněné bá2 19 ze po chromatografii na silikagelu se krystalují z methanolu za účelem separace ergokorninu od ostatních ergotoxinových alkaloidů. V matečných louzích /koncentrovaný a a 0-ergokryptin po překrystalování z benzenu je žádané čistoty pro výše uvedené krystalizace k dělení ct a /S-ergokryptinu.

Tuto čistou -směs obou isomerů ergokryptinu je možno po hydrogenování vazby Δ 9,10 dělit vpředu uvedenými krystalizacemi.

Popsanými postupy lze dosáhnout posunu poměru a : /S-ergokryptinu až na 20 : 1 v krystalu a až 1 : 1 v matečných louzích. Takto získané koncentráty lze po homogenizaci s bázemi ergokristinu a ergokorninu použít k přípravě terapeuticky účinných solí ergotoximia s daným poměrem ergotoxinových složek i poměru « a β-ergokryptinu. Koncentrát a a β-ergokryptinu lze použít i pro přípravu parciálně-syntetických derivátů těchto· alkaloidů.

Způsob podle vynálezu je v následujících příkladech blíže popsán přičemž uvedené příklady neomezu jí rozsah vynálezu.

Příklad 1 g surové směsi alkaloidů s poměrem a : β ergokryptinu 4 : 1 po převedení v hydrofosforečnan a opětovné uvolnění báze se krystaluje z octanu ethylnatého, přičemž zastoupení ergotoxinových složek (ergokristin, ergokornin, ergokryptin) se upraví na žádaný poměr přidáním bází jednotlivých alkaloidů. Z ethylacetátu získaný krystal se chromatografuje na sloupci silikagelu (30-ti násobek vztaženo na hmotnost výchozí házej ve směsi chloroform — diethylether 1 : 1. Na základě analýz tenkovrstevnou chromatografii se frakce spojují.

V tomto pokuse bylo získáno v prvních 250 ml eluátu 2,9 g chloroformového odpar1 8 ku ergotoxinu s poměrem & : /J-ergokryptinu

2,5 : 1 a ze zbylých frakcí bylo získáno 3,7 gramu odparku s poměrem a : β ergokryptinu 8 : 1. Získané odparky byly použity po hydrogenování vazby 9, 10 pro přípravu methansulfonanu dihydroergotoxinia.

Příklad 2 g surové směsi alkaloidů (celkový obsah alkaloidů 83 °/o, ergokornin : ergokryptin 3 : 2, a : β-ergokryptin 3,8 : 1, ergotamin 5 %, laktamové alkaloidy 8 %) se převede v hydrofosforečnan a po uvolnění báze se chloroformový odparek chromatografuje na sloupci silikagelu (3násobek vztaženo na hmotnost výchozí házej ve směsi chloroform — benzen 4 : 1.

K eluci se použije celkem 1200 ml uvedené směsí. Získaný chloroformový odparek (16 gj zbavený alkaloidů skupiny ergotamřnu a částečně necyklolových alkaloidů se krystaluje z 50 ml methanolu. V matečných louzích zkoncentrovaný « a β-ergokryptin (6 gj se po krystalizaci z benzenu krystaluje ze směsi ethylacetát — methanol — voda (10 : 1 : 2]. Získá se 2,3 g krystalu obsahujícího cca 90 % ergokryptinu s poměrem a : β 25 : 1 a 1,9 g matečných louhů s obsahem 60 % ergokryptinu s poměrem a : β 1 : 1 a 40 % ergokorninu.

Příklad 3 g benzenové báze ergokryptinu, získané stejným postupem jako v příkladu 2 se po hydrogenaci vazby Δ 9,10 katalytickou hydrogenaci na Raneyo-vě niklu podrobí krystalizaci ze 70 ml dioxanu. 4,1 g krystalu obsahuje 87 % ergokryptinu s poměrem a : β složky 35 : 1 v matečných louzích (5,6 gramu] je poměr a : β-ergokryptinu 1,5 : 1, 86 % ergokryptinu a 34 % ergokorninu.

Claims (1)

1. Způsob izolace ergokryptlnů s žádaným poměrem « a (3 složky 1 : 1 až 2,5 : 1 vyznačený tím, že se surová směs alkaloidů po přečištění krystalizaci a úpravě poměru ergotoxinových složek na žádaný poměr, obvykle ergokornin : ergokryptin : ergokristin 1:1:1, chromatografuje na sloupci silikagelu za použití eiuční směsi chlorovaných uhlovodíků methanu nebo ethanu v poměru 1 : 2 až 2 : 1 s benzenem nebo diethyletherem, nebo se zpracuje na čistou směs

   YNALEZU a a β-ergokryptinů, která se krystaluje z methanolu nebo ethanolu, ethylacetátu, dioxanu, benzenu, směsi methanol nebo, ethane!— voda 8 : 2, nejvýhodněji ze směsi ethylacetát, methanol, voda 10 : 1 : 2, případně se čistá směs- a a β-ergokryptinů po hydrogenování vazby 9,10-kyseliny lysergové, krystaluje,z dioxanu, nebo ethylacetátu, butylacetátu nebo vodného alifatického alkoholu C_t až C₃ (8 : 2).