CS214342B1 - Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism - Google Patents
Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism Download PDFInfo
- Publication number
- CS214342B1 CS214342B1 CS833180A CS833180A CS214342B1 CS 214342 B1 CS214342 B1 CS 214342B1 CS 833180 A CS833180 A CS 833180A CS 833180 A CS833180 A CS 833180A CS 214342 B1 CS214342 B1 CS 214342B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- production
- ccm
- streptomyces
- nmu
- Prior art date
Links
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 title abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title 1
- 241000186984 Kitasatospora aureofaciens Species 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 20
- ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-N-nitrosourea Chemical compound O=NN(C)C(N)=O ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N chlorotetracycline Natural products C1=CC(Cl)=C2C(O)(C)C3CC4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N chlortetracycline Chemical compound C1=CC(Cl)=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N 0.000 description 15
- 239000004099 Chlortetracycline Substances 0.000 description 14
- 229960004475 chlortetracycline Drugs 0.000 description 14
- 235000019365 chlortetracycline Nutrition 0.000 description 14
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 11
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 11
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011833 salt mixture Substances 0.000 description 2
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- ABNDFSOIUFLJAH-UHFFFAOYSA-N benzyl thiocyanate Chemical compound N#CSCC1=CC=CC=C1 ABNDFSOIUFLJAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010957 calcium stearoyl-2-lactylate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005496 tempering Methods 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Vynález se týká nového kmene Streptomyces aureofaciens CCM 3493, který produkuje v provozních podmínkách ohlortetracyklin ve vyšších výtěžcích než kmen dosavadní.The invention relates to a novel Streptomyces strain aureofaciens CCM 3493, which produces under operating conditions ocortetracycline in higher yields than the current strain.
Description
Vynález se týká kmene mikroorganismu Streptomyces aureofaciens CCM 3493 /NMU XXIV/53/, produkujícího ohlortetracyklin. Chlortetracyklin /CTC/ se získává aerobní kultivací produkčního kmene Streptomyces aureofaciens v tekutých živných půdách za submersních podmínek.The present invention relates to a strain of Streptomyces aureofaciens CCM 3493 (NMU XXIV / 53) producing ohlortetracycline. Chlortetracycline (CTC) is obtained by aerobic cultivation of a production strain of Streptomyces aureofaciens in liquid nutrient media under submersive conditions.
Výroba CTC, která se realizuje ve výrobních fermentačních tancích již více než dvě desetiletí, dospěla postupnými změnami technologie do takového stadia, kdy další zvýšení výroby chlortetracyklinu je-možné bud zásadními změnami v celé technologii výroby /přestavba fermentačních tanků, míchadel, dávkovačích zařízení atd./, které jsou velice nákladné a vyžadují uvolnění vysokých částek ze státního rozpočtu, anebo použitím nových produkčních kmenů, jejichž schopnost produkce CTC je podstatně vyšší.The production of CTC, which has been carried out in production fermentation tanks for more than two decades, has reached a stage where gradual changes in technology have led to a further increase in chlorotetracycline production, possibly through fundamental changes in the entire production technology / remodeling of fermentation tanks, stirrers, dosing equipment etc. / which are very costly and require the release of large sums from the state budget, or by the use of new production strains whose CTC production capacity is significantly higher.
Kmen mikroorganismu Streptomyces aureofaciens CCM-3493 NMU/XXIV/53 byl získán následnou řadou mutagenních zásahů a pasivních selekcí, především působením etylmetansulfonátu, nitrosometylmočoviny, gama/paprsků a UV-světla. Poslední mutagenní zásah bylo působní nitrosometylmočoviny /NMU/ v koncentraci 0,15 M po dobu 80 minut ve fosfátovém pufru pH 6,8 na sporovou suspensi kmene Streptomyces aureofaciens gama X/237, získanou smytím vysporulované kultury vodou s 0,1 % Tweenu 80. Během působení byla mutační směs míchána na elektromagnetickém míchadle při 25 °C. V časových intervalech 30, 45, 60, 80 a 100 minut působení NMU byly odebírány vzorky a ředěny ředicí řadou s koeficientem 10 za současného vyředění NMU na neúčinnou koncentraci. Naředěné vzorky byly vysety na Petriho mlsky se sporulačním dextrinovým agarem se sacharózou a dalšími ingrediencemi tak, aby nedocházelo ke vzájemnému kontaktu kolonií po.jejich nárůstu a po vysporulování byly samostatné kolonie přeočkovány na šikmé agary. Takto získané kultury na šikmých agarech byly výchozí pro celý systém produkčního hodnocení, které se provádí podle následujícího schématu:The strain of Streptomyces aureofaciens CCM-3493 NMU / XXIV / 53 was obtained by a successive series of mutagenic interventions and passive selection, in particular by treatment with ethyl methanesulfonate, nitrosomethylurea, gamma / rays and UV-light. The last mutagenic treatment was treated with 0.15 M nitrosomethylurea (NMU) for 80 minutes in phosphate buffer pH 6.8 on a spore suspension of Streptomyces aureofaciens gamma X / 237, obtained by washing the cultured water with 0.1% Tween 80. During the treatment, the mutation mixture was stirred on an electromagnetic stirrer at 25 ° C. At time intervals of 30, 45, 60, 80 and 100 minutes of NMU treatment, samples were taken and diluted with a dilution series of 10 with the NMU diluted to an ineffective concentration. Diluted samples were plated on Petri mills with sporulating dextrin agar with sucrose and other ingredients so as to avoid colony contact with each other as they grow, and after collapse, single colonies were re-plated on sloping agar. Oblique agar cultures thus obtained were the starting point for the whole production evaluation system, which is carried out according to the following scheme:
I. vegetativní generace -> II. vegetativní generace-“» fermentaceI. vegetative generation -> II. vegetative generation- “» fermentation
Produkce CTC kmenem Streptomyces aureofaciens CCM 3493 /NMU XXIV/53/ byla ve srovnání s dvěma současnými kontrolními kmeny - gama X/237 a NMU XXIII/61 o 25 až 35 %, resp. o 5 až 10 % vyšší.CTC production by Streptomyces aureofaciens CCM 3493 (NMU XXIV / 53) was 25-35% and 25% to 35%, respectively, compared to the two current control strains - gamma X / 237 and NMU XXIII / 61. 5 to 10% higher.
Kmen mikroorganismu Streptomyces aureofaciens CCM 3493 /NMU XXIV/53/ tvoří při kultivaci na dextrinovém agaru kolonie velikosti 10 až 10,5 mm s okrajovou nesporulující zónou 1,3 až 1, 5 mm.The strain of Streptomyces aureofaciens CCM 3493 (NMU XXIV / 53) forms colonies of 10 to 10.5 mm in size on a dextrin agar with a peripheral non-sporulating zone of 1.3 to 1.5 mm.
Vzdušné mycelium je bílé, ale při sporulaci nabývá hnědého až šedivého zabarvení. Hyfy dosahují podle stáří 0,7 až 1,5 u, spory jsou většinou kulovité až elipsoidní o průměru asi 1,5 u.The airy mycelium is white, but when sporulated it becomes brown to gray. Depending on age, hyphae are 0.7 to 1.5 µ, spores are mostly spherical to ellipsoidal with a diameter of about 1.5 µ.
Příklad 1Example 1
Fermentace v laboratorním měřítku na rotačních třepacích strojích:Laboratory scale fermentation on rotary shakers:
Vegetativní inokulum:Vegetative inoculum:
Vegetativní inokulum se připravuje ve dvou stupních,tj. I. a II. vegetativní generace, v 500 ml varných baňkách s 80 ml inokulační půdy /sacharóza, sójová mouka, melasa řepná, kukuřičný extrakt /CSL/ a směs solí/. I. vegetativní generace je očkována kličkou spor ze šikmého agaru a inkubována na rotačních třepacích strojích při 240 obr./min., výstřednost 25 mmThe vegetative inoculum is prepared in two stages, i. I. and II. vegetative generation, in 500 ml boiling flasks with 80 ml inoculation soil (sucrose, soya flour, beet molasses, corn extract (CSL) and salt mixture). I. vegetative generation is inoculated with a loop of sloping agar spores and incubated on rotary shakers at 240 rpm, eccentricity 25 mm
214 342 při 29 °C 24 hodin. XI. vegetativní generace je očkována z I. vegetativní generace 5 %, podmínky kultivace jsou shodné s I. vegetativní generací.214 342 at 29 ° C for 24 hours. XI. vegetative generation is vaccinated from the 1st vegetative generation 5%, cultivation conditions are identical with the 1st vegetative generation.
Produkční hodnocení:Production rating:
Produkční baňky se 40 ml produkční půdy /sacharóza, sójová mouka, CSL, melasa, směs solí a benzylrhodanid/ je zaočkována 10 % vegetativního inokula /II. vegetativní generace/. Fermentace je prováděna na rotačních třepacích strojích při 240 obr./min. /výstřednost 25 mm/ při 29 °C po dobu 120 hod. Vzorky na stanovení produkce CTC a vzájemného poměru produkovaného CTC a TC /tetracyklin/ jsou odebírány v 96. a 120.hodině kultivace. Množství produkovaného antibiotika je stanovováno kolorimetricky s reagenčním roztokem 2 N HC1 a poměr CTC : TC je stanovován chromatograficky.Production flasks with 40 ml of production soil (sucrose, soy flour, CSL, molasses, salt mixture and benzylrhodanide) are inoculated with 10% vegetative inoculum (II). vegetative generation. Fermentation is carried out on rotary shakers at 240 rpm. (eccentricity 25 mm) at 29 ° C for 120 hours. Samples to determine the production of CTC and the ratio of produced CTC to TC (tetracycline) are taken at 96 and 120 hours of culture. The amount of antibiotic produced is determined colorimetrically with 2 N HCl reagent solution and the CTC: TC ratio is determined chromatographically.
Produkční srovnání:Production comparison:
Kmen Streptomyces Produkce CTC Relativní produkce Poměr CTC : TC aureofaciens kontr. izolátuStreptomyces strain CTC production Relative production CTC: TC aureofaciens contr. isolate
/CCM 3493// CCM 3493 /
Příklad 2Example 2
Fermentace v laboratorních tancích objemu 21.Fermentation in laboratory tanks volume 21.
Fermentace se provádí obdobným způsobem podle bodu 1 ve fermentorech objemu 2 000 ml, plněných 750 ml půdy. |The fermentation is carried out in a similar manner as in point 1 in 2 000 ml fermenters filled with 750 ml of soil. |
Příprava vegetativního inokula I. a II. generace izolátu NMU XXIV/53 spolu s dvěma kontrolními izoláty byla provedena stejným způsobem jako v příkladu 1. Z každého izolátu bylo připraveno inokulum II. generace ve 3 baňkách plněných á 80 ml kultury. Vlastní fermentace byla provedena v 9 dvoulitrových skleněných fermentorech. Každý fermentor byl vybaven jednou šestilopatkovou otevřenou turbinou polovičního průměru ve srovnání s průměrm tanku a vzdušnicí tryskou umístěnou pod turbinou. Fermentory byly plněny á 800 ml živné půdy o složení:Preparation of vegetative inoculum I. and II. Generation of NMU XXIV / 53 isolate together with two control isolates was performed in the same manner as in Example 1. Inoculum II was prepared from each isolate. generation in 3 flasks filled with 80 ml culture. The fermentation was carried out in 9 2-liter glass fermenters. Each fermenter was equipped with one six-blade open turbine of half diameter compared to the tank diameter and the air nozzle located below the turbine. Fermenters were filled with 800 ml of broth containing:
% sacharózy, 3, 5 % sójové mouky, 0,7 % CaCO^, 0,6 % corn-steepu, 0,6 % /NH^^SO^, 0,24 % NaCl, 0,22 % melasy, 0,1 % KH2PO4, 0,005 % MgS04, 0,003 % MnSO4, 0,002 % ZnS04, 0,0004 % Co/NO2/2, 0,0002 % benzylrhodanidu. Po 40 min. sterilizace při 120 °C a vytemperování na 29 °C byly půdy očkovány 80 ml inokulační kultury II. generace. Každý izolát byl naočkován do 3 fermentorů. jfermentace probíhala pri 29 °C po dobu 120 hod. za sálého míchání 760 ot./ /min. a vzdušnění 700 ml vzduchu/min. V průběhu fermentace bylo prováděno odpěňování sójovým olejem. Na konci fermentace byly hodnoceny produkce CTC a poměr CTC : TC. Průměrné hodnoty jsou uvedeny v následující tabulce:% sucrose, 3.5% soya flour, 0.7% CaCO3, 0.6% corn steep, 0.6% / NH4SO4, 0.24% NaCl, 0.22% molasses, 1% KH 2 PO 4, 0.005% MgS0 4, 0.003% MnSO 4, 0.002% ZnS0 4, 0.0004% Co / NO 2/2, 0.0002% benzylrhodanidu. After 40 min. by sterilization at 120 ° C and tempering to 29 ° C, the soils were inoculated with 80 ml of inoculation culture II. generation. Each isolate was inoculated into 3 fermenters. The fermentation was carried out at 29 ° C for 120 hours with stirring at 760 rpm. and aeration 700 ml air / min. During the fermentation, soybean oil foaming was performed. At the end of the fermentation, CTC production and CTC: TC ratio were evaluated. The average values are given in the following table:
214 342214 342
Produkční srovnání:Production comparison:
/CCM 3493// CCM 3493 /
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS833180A CS214342B1 (en) | 1980-12-01 | 1980-12-01 | Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS833180A CS214342B1 (en) | 1980-12-01 | 1980-12-01 | Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS214342B1 true CS214342B1 (en) | 1982-04-09 |
Family
ID=5433707
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS833180A CS214342B1 (en) | 1980-12-01 | 1980-12-01 | Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS214342B1 (en) |
-
1980
- 1980-12-01 CS CS833180A patent/CS214342B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khokhlov et al. | Effect of A‐factor on the growth of asporogenous mutants of Streptomyces griseus, not producing this factor | |
| Vézina et al. | Sporulation of filamentous fungi in submerged culture | |
| RU2001949C1 (en) | Strain of fungus trichoderma reesei - a producer of cellulolytic enzymes | |
| JP4132253B2 (en) | Ammonia-resistant L (+)-lactic acid-producing bacterium and L (+)-lactic acid production method | |
| CS217986B2 (en) | Method of making the 2-keto-l-gulonic acid | |
| CS214342B1 (en) | Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism | |
| Pažout et al. | Microcycle conidiation in submerged cultures of Penicillium cyclopium attained without temperature changes | |
| KR100446108B1 (en) | Cephalosporin c-producing microorganism having improved lipase activity and method for producing cephalosporin c using the same | |
| Escamilla-Silva et al. | Selective production of bikaverin in a fluidized bioreactor with immobilized Gibberella fujikuroi | |
| RU2061035C1 (en) | Nutrient medium for micromycetes aspergillus oryzae cultivation - a producer of hydrolytic enzymes | |
| CS208592B1 (en) | Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens | |
| Prochazka et al. | Utilization of a lipid substrate for submerged fermentation of Streptomyces albus | |
| KR100446110B1 (en) | Cephalosporin c-producing microorganism having tolerance against high concentration of glycerol | |
| Nesbit et al. | Influence of cultural conditions on growth and lipolytic activity in Nocardia asteroides | |
| JP4261304B2 (en) | Method for producing α-homonojirimycin by microorganism | |
| US7432080B2 (en) | Process for the production of teicoplanin | |
| SI9800144A (en) | New biotechnological process for producing of 3-hidroxy-ml-236b derivatives known as m-4 and m-4' | |
| CS245153B1 (en) | Strain of acremonium chrysogenum microorganism | |
| CZ281824B6 (en) | Strain of penicillium chrysogenum ccm 8157 micro-organism | |
| RU1092951C (en) | Strain streptomyces erythreus 85-1 - erythromycin producent | |
| JP4248485B2 (en) | Microorganisms and processes for the production of teicoplanin | |
| Zaw et al. | FERMENTATION STUDIES OF CEPHALOSPORIUM SP. ISOLATED FROM HESPERETHUSA CRENULATA (ROXB.) ROEM. | |
| CS262188B1 (en) | Strain of microorganism penicillium chrysogenum ccm f 8012 | |
| CS245182B1 (en) | Strain of streptomyces fradiae ccm 3765 microorganism | |
| SK702019A3 (en) | Preparation of pharmaceutically active substance lipstatin using production microorganism Streptomyces toxytricini NRL |