CS208592B1 - Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens - Google Patents
Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens Download PDFInfo
- Publication number
- CS208592B1 CS208592B1 CS710979A CS710979A CS208592B1 CS 208592 B1 CS208592 B1 CS 208592B1 CS 710979 A CS710979 A CS 710979A CS 710979 A CS710979 A CS 710979A CS 208592 B1 CS208592 B1 CS 208592B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- production
- aureofaciens
- streptomyces aureofaciens
- fermentation
- Prior art date
Links
- 241000186984 Kitasatospora aureofaciens Species 0.000 title claims abstract description 14
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title abstract 2
- CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N chlorotetracycline Natural products C1=CC(Cl)=C2C(O)(C)C3CC4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N chlortetracycline Chemical compound C1=CC(Cl)=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000004099 Chlortetracycline Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229960004475 chlortetracycline Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 235000019365 chlortetracycline Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 22
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 4
- ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-N-nitrosourea Chemical compound O=NN(C)C(N)=O ZRKWMRDKSOPRRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 3
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 3
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 3
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 3
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 2
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 2
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 2
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- ABNDFSOIUFLJAH-UHFFFAOYSA-N benzyl thiocyanate Chemical compound N#CSCC1=CC=CC=C1 ABNDFSOIUFLJAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- 238000012854 evaluation process Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Vynález se týká nového kmene mikroorganismu Streptomyces aureofaciens CCM 3406 produkujícího chlortetracyklin.The invention relates to a novel strain of microorganism Streptomyces aureofaciens CCM 3406 producing chlortetracycline.
Description
Vynález se týká kmene mikroorganismu Streptomyces aureofaciens, produkujícího chlortetracyklin. Jak je známo, získává se toto antibiotikum aerobní kultivací vhodného produkčního kmene v tekuté živné půdě, obsahující základní potřebné složky. Průmyslová výroba chlortetracyklinu, která se realizuje již po značně dlouhou dobu, dospěla postupným pokrokem zlepšujícím všechny parametry do takového stadia, kdy další zvýšení produkce jednoduchými zásahy již není možné. Určité východisko představují zásadní změny v technologii výroby (přestavba fermentačních tanků, míchadel, dávkovačích zařízení apod.); to jsou ovšem záležitosti velice nákladné a jejich možnosti jsou omezené. Ani v obměně složení živných půd, v použití nových složek půd nebo ve vedení fermentačního procesu nelze již získat ekonomicky významné rezervy, jednou z mála možností je nalezení, výběr nebo vyšlechtění nového produkčního kmene, který by na půdě obvyklého složení, v běžném zařízení a bez náročných zásahů do průběhu fermentace produkoval chlortetracyklin ve vyšších výtěžcích než dosud a rovněž v příznivém poměru k tetracyklinu, který vzniká současně. Vyšlechtění nového kmene, poskytujícího vysoké výtěžky, je záležitost zdlouhavá a náročná. Mnohem jednodušší a rychlejší je uplatnění jednoduchých mutagenních zásahů na vysokoprodukční kmen, který je k dispozici, s cílem pokusit se tak o získání nového kmene se žádanými vlastnostmi.The present invention relates to a strain of Streptomyces aureofaciens producing chlorotetracycline. As is known, this antibiotic is obtained by aerobic cultivation of a suitable production strain in a liquid culture medium containing the essential components necessary. The industrial production of chlortetracycline, which has been carried out for a considerable period of time, has reached a stage of progressive improvement of all parameters to a point where further increase in production by simple interventions is no longer possible. Certain starting points are fundamental changes in production technology (conversion of fermentation tanks, agitators, dosing equipment, etc.); however, these are very costly matters and their possibilities are limited. Economically significant reserves can no longer be obtained in the variation of nutrient composition, in the use of new soil constituents or in the management of the fermentation process, one of the few possibilities being to find, select or breed a new production strain. By challenging the fermentation process, chlortetracycline was produced in higher yields than hitherto and also in a favorable ratio to tetracycline, which is produced simultaneously. Breeding a new strain yielding high yields is a lengthy and demanding matter. It is much simpler and quicker to apply simple mutagenic interventions to the high-production strain that is available in order to attempt to obtain a new strain with the desired properties.
Uvedeného cíle se podařilo dosáhnout podle vynálezu novým kmenem Streptomyces aureofaciens, označeným NMUXXIII/61, uloženým v Čs. sbírce mikroorganismů University J. E. Purkyně, Brno, tř. Obránců míru 10, pod číslem CCM 3406.This object was achieved according to the invention by a new strain of Streptomyces aureofaciens, designated NMUXXIII / 61, deposited in Cs. collection of microorganisms University of J. E. Purkyně, Brno, tř. Defenders of Peace 10, under CCM 3406.
Tento kmen byl získán z produkčního kmene, který byl používán po řadu let při komerční výrobě chlortetracyklinu s průměrnou výtěžností 6100 až 6300 ^g/ml, pod označením Streptomyces aureofaciens Gamma X/237 (interní označení Výzkumného ústavu antibiotik a biotransformací v Roztokách u Prahy J. Na výchozí kmen bylo působeno následnou řadou mutagenních zásahů a pasivních selekcí, především ethylmethansulfonátem, nitrosomethylmočovinou, paprsky gama a ultrafialovým světlem. Posledním mutagenním zásahem bylo působení nitrosomethylmočoviny v koncentraci 0,15 M po dobu 100 minut ve fosfátovém pufru s hodnotou pH 6,8 na sporovou suspenzi kmene Gamma X/237, získanou smytím vysporulované kultury vodou s 0,1 % neiontogenního smáčedla. Během působení byla mutační směs míchána na elektromagnetickém míchadle při 25 °C. V časových intervalech po 30, 45, 60 a 100 minutách pů2 sobení nitrosomethylmočoviny byly odebírány vzorky a ředěny ředicí řadou s koeficientem 10 za současného zřeďování nitrosomethylmočoviny na neúčinnou koncentraci. Zředěné vzorky byly vysety na Petriho misky se sporulačním dextrinovým agarem se sacharózou tak, aby nedocházelo ke vzájemnému kontaktu kolonií, a po vysporulování byly samostatné kolonie přeočkovány na šikmé agary. Kultury získané na šikmých agarech představovaly výchozí materiál pro celý proces produkčního hodnocení, prováděný podle následujícího schématu:This strain was obtained from a production strain which has been used for many years in the commercial production of chlortetracycline with an average yield of 6100 to 6300 µg / ml, under the name Streptomyces aureofaciens Gamma X / 237 (internal designation of the Research Institute for Antibiotics and Biotransformation in Roztoky u J The initial strain was treated with a series of mutagenic and passive selections, in particular ethyl methanesulfonate, nitrosomethylurea, gamma rays and ultraviolet light, and the last mutagenic treatment was 0.15 M nitrosomethylurea for 100 minutes in phosphate buffer at pH 6.8 to a spore suspension of Gamma X / 237 strain obtained by washing the cultured water with 0.1% non-ionic surfactant, and during the treatment, the mutation mixture was stirred on an electromagnetic stirrer at 25 ° C. nitrosomethylureas were collected samples and diluted with a dilution series of 10 with the dilution of nitrosomethylurea to an ineffective concentration. Diluted samples were plated on sporulated sucrose dextrin agar agar plates to avoid colony contact and, after sporulation, single colonies were re-plated on sloping agar. The cultures obtained on the slanted agar were the starting material for the whole production evaluation process carried out according to the following scheme:
I. vegetativní generace -* II. vegetativní generace -> fermentace.I. vegetative generation - * II. vegetative generation -> fermentation.
Kmen mikroorganismu Streptomyces aureofaciens CCM 3406 převyšuje produkci v současnosti používaných kmenů, včetně kmenů produkčních, například S. aureofaciens Gamma X/237, průměrně o 20 až 30 °/o, při zachování všech vhodných technologických vlastností, i příznivého poměru vznikajícího chlortetracyklinu k tetracyklinu (CTC:TCj.The strain of Streptomyces aureofaciens CCM 3406 exceeds the production of currently used strains, including production strains, for example S. aureofaciens Gamma X / 237, by an average of 20 to 30 ° / o, while maintaining all appropriate technological properties and the favorable ratio of chlorotetracycline to tetracycline. CTC: TCj.
Kmen mikroorganismu S. aureofaciens CCM 3406 tvoří při kultivaci na dextrinovém agaru kolonie velikosti 10,5 mm, s okrajovou nesporulující zónou 1,5 mm.The strain of S. aureofaciens CCM 3406 forms colonies of 10.5 mm in size on a dextrin agar, with a marginal non-sporulating zone of 1.5 mm.
Vzdušné mycélium je bílé, ale při sporulaci nabývá hnědého až šedivého zbarvení. Hyfy dosahují podle stáří velikosti 0,7 až 1,5 μτη, spory jsou většinou kulovité až elipsovitá o průměru 1,97+ 40 ^m.The airy mycelium is white, but in sporulation it becomes brown to gray. Hyphae reach size 0.7 to 1.5 μτη depending on age, spores are mostly spherical to elliptical with a diameter of 1.97+ 40 µm.
Podrobnosti o produkčním hodnocení kmene CCM 3406 vyplývají z následujících příkladů provedení.The details of the production evaluation of the CCM 3406 strain follow from the following examples.
Příklad 1Example 1
Fermentace v laboratorním měřítkuLaboratory scale fermentation
A. Vegetativní inokulumA. Vegetative inoculum
Vegetativní inokulum se připravuje ve dvou stupních, tj. I. a II. vegetativní generace. Do 500 ml varných baněk se umístí po 80 ml inokulační půdy (s obsahem sacharózy, sojové a arašídové mouky, řepné melasy, kukuřičného výluhu a živných solí J, která se naočkuje kličkou spor ze šikmého agaru a inkubuje na rotační třepačce při 240 obr./min., s výstředností 25 mm, po dobu 24 hodin při teplotě 29 °C. II. vegetativní generace se zaočkuje 5 % I. vegetativní generace, podmínky kultivace jsou shodné s I. vegetativní generací.Vegetative inoculum is prepared in two stages, ie I. and II. vegetative generation. Place in 80 ml flasks 80 ml of inoculation medium (containing sucrose, soya and peanut flour, beet molasses, corn steep liquor and nutrient salts J), which are inoculated with a loop of sloping agar spores and incubated on a rotary shaker at 240 rpm. min, with an eccentricity of 25 mm, for 24 hours at a temperature of 29 ° C. The 2nd vegetative generation is inoculated with 5% of the 1st vegetative generation, the cultivation conditions are identical to the 1st vegetative generation.
B. Produkční hodnoceníB. Production evaluation
Produkční baňky se 40 ml produkční půdy (s obsahem sacharózy, sojové a arašídové mouky, kukuřičného výluhu, melasy, živ208 592 ných solí a benzylrhodanidu) byly zaočkovány 10 % vegetativního inokula II. vegetativní generace. Fermentace probíhala na rotačních třepačkách pri 240 obr./min. (výstřednost 25 mm) při 29 °C po dobu 120 h. Vzorky pro stanovení produkce chlortetracyklinu a jeho poměru k tetracyklinu byly odebrány v 96. a 120. hodině kultivace. Množství produkovaného antibiotika bylo stanovováno kolorometricky s reagenčním roztokem 2N kyseliny chlorovodíkové a poměr antibiotik byl stanovován chromatograficky.Production flasks with 40 ml of production soil (containing sucrose, soy and peanut flour, corn steep liquor, molasses, live salts and benzylrhodanide) were seeded with 10% vegetative inoculum II. vegetative generation. Fermentation was carried out on rotary shakers at 240 rpm. (eccentricity 25 mm) at 29 ° C for 120 h. Samples to determine the production of chlortetracycline and its ratio to tetracycline were taken at 96 and 120 hours of culture. The amount of antibiotic produced was determined colorimetrically with a 2N hydrochloric acid reagent solution and the antibiotic ratio was determined by chromatography.
Produkční srovnání:Production comparison:
Produkční srovnání:Production comparison:
Příklad 3Example 3
Fermentace v tancích objemu 20 litrůFermentation in 20 liter tanks
Fermentace byla prováděna obdobně jako v příkladu 1 v tancích objemu 20 litrů, plněných po 10 litrech produkční půdy.The fermentation was carried out analogously to Example 1 in 20-liter tanks filled with 10-liter production soil.
Příklad 2Example 2
Fermentace v laboratorních tancích objemu 2 litryFermentation in 2 liter laboratory tanks
Fermentace byla prováděna obdobně jako v příkladu 1 v tancích objemu 2 litry, plněných po 750 ml půdy.The fermentation was carried out analogously to Example 1 in 2-liter tanks filled with 750 ml of soil.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS710979A CS208592B1 (en) | 1979-10-19 | 1979-10-19 | Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS710979A CS208592B1 (en) | 1979-10-19 | 1979-10-19 | Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS208592B1 true CS208592B1 (en) | 1981-09-15 |
Family
ID=5419613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS710979A CS208592B1 (en) | 1979-10-19 | 1979-10-19 | Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS208592B1 (en) |
-
1979
- 1979-10-19 CS CS710979A patent/CS208592B1/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Backus et al. | The production and selection of a family of strains in Penicillium chrysogenum | |
| Patel et al. | Indole-3-acetic acid (IAA) production by endophytic bacteria isolated from saline dessert, the little Runn of Kutch | |
| US2576932A (en) | Fermentation process for production of vitamin b12 | |
| JPH07106155B2 (en) | Manufacturing method of antibiotic compounds | |
| Raper et al. | The production of penicillin X in submerged culture | |
| US5212078A (en) | Process for producing a lactone | |
| US3909352A (en) | Production of yeast biomass | |
| CN113502282A (en) | Method for producing pectinase preparation by solid-state fermentation of penicillium | |
| CS208592B1 (en) | Strain of the microorganism streptomyces aureofaciens | |
| GB1604782A (en) | Selection process for obtaining a fungal microorganism of the genus trichoderma having advantageous characteristics | |
| US3073749A (en) | Preparation of microbial insecticide | |
| US20030036177A1 (en) | Single colonies of myxobacteria cells | |
| Dulaney | Observations on Streptomyces griseus. VI. Further studies on strain selection for improved streptomycin production | |
| Bakli et al. | Isolation of fluorescent Pseudomonas spp. strains from rhizosphere agricultural soils and assessment of their role in plant growth and phytopathogen biocontrol | |
| DE69839248T2 (en) | PROCESS FOR THE PREPARATION OF INHIBITORS OF HMG-CoA REDUCTASE. | |
| Št̆astná et al. | Production, long term preservation and synchronous germination of aerial spores of Streptomyces | |
| CS214342B1 (en) | Strain of streptomyces aureophaciens ccm microorganism | |
| CN103865845B (en) | A kind of streptomyces hygroscopicus and preparing the application in voglibose | |
| Verma et al. | Antagonistic potential of salt tolerant bacteria and optimization of their culture conditions for enhancement of the activity. | |
| Vezina et al. | ANTIMYCIN A FERMENTATION I. PRODUCTION AND SELECTION OF STRAINS | |
| CS201719B1 (en) | Process for preparing l-isoleucine | |
| KR100216996B1 (en) | Microbiological preparation of 6-hydroxynicotinic acid | |
| CS245153B1 (en) | Strain of acremonium chrysogenum microorganism | |
| US2938835A (en) | Production of mutants of the genus penicillium | |
| Abou-Zeid et al. | The fermentative production of oxytetracycline on industrial by-products by Streptomyces rimosus 12907 |