CS209268B1 - Polymere ion exchanger for liquid chromatography and method of its preparation - Google Patents
Polymere ion exchanger for liquid chromatography and method of its preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS209268B1 CS209268B1 CS536579A CS536579A CS209268B1 CS 209268 B1 CS209268 B1 CS 209268B1 CS 536579 A CS536579 A CS 536579A CS 536579 A CS536579 A CS 536579A CS 209268 B1 CS209268 B1 CS 209268B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- formula
- liquid chromatography
- polymer
- compound
- preparation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 7
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 title claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims description 4
- DBCAQXHNJOFNGC-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-1,1,1-trifluorobutane Chemical compound FC(F)(F)CCCBr DBCAQXHNJOFNGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 101150065749 Churc1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 102100038239 Protein Churchill Human genes 0.000 claims description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 3
- STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol dimethacrylate Substances CC(=C)C(=O)OCCOC(=O)C(C)=C STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 2-(cyclohexen-1-yl)cyclohexan-1-one Chemical compound O=C1CCCCC1C1=CCCCC1 GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 13
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 12
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- -1 carboxymethylsulfonyl phosphoryl dimethyl dimethylaminoethyl Chemical class 0.000 description 4
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 4
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine Natural products O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQFCJASXJCIDSX-UHFFFAOYSA-N 14C-Guanosin-5'-monophosphat Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O RQFCJASXJCIDSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OLXZPDWKRNYJJZ-UHFFFAOYSA-N 5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 OLXZPDWKRNYJJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-XVFCMESISA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 229920002818 (Hydroxyethyl)methacrylate Polymers 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PXBUCIJWSA-N 1-[(2r,3r,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PXBUCIJWSA-N 0.000 description 1
- UTQUILVPBZEHTK-ZOQUXTDFSA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1N(C)C(=O)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UTQUILVPBZEHTK-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- HWDMHJDYMFRXOX-XVFCMESISA-N 2',3'-cyclic UMP Chemical compound N1([C@@H]2O[C@@H]([C@H]3OP(O)(=O)O[C@H]32)CO)C=CC(=O)NC1=O HWDMHJDYMFRXOX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- YKBGVTZYEHREMT-UHFFFAOYSA-N 2'-deoxyguanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1CC(O)C(CO)O1 YKBGVTZYEHREMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-BIIVOSGPSA-N 2'-deoxythymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 2'‐deoxycytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- 102100027324 2-hydroxyacyl-CoA lyase 1 Human genes 0.000 description 1
- AOIDYWIUVADOPM-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl 2,3-dimethylbut-2-enoate Chemical compound CC(C)=C(C)C(=O)OCCO AOIDYWIUVADOPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSLQFBVNOFBPRJ-UHFFFAOYSA-N 3-(6-aminopurin-9-yl)propane-1,2-diol Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2CC(O)CO GSLQFBVNOFBPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTQUILVPBZEHTK-UHFFFAOYSA-N 3-Methyluridine Natural products O=C1N(C)C(=O)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UTQUILVPBZEHTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUUBODMNDCMSEU-UHFFFAOYSA-N 3-[6-amino-3-(3-hydroxypropyl)-2,4,5,9-tetrahydropurin-2-yl]propan-1-ol Chemical compound NC1=NC(CCCO)N(CCCO)C2N=CNC12 IUUBODMNDCMSEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALRHLSYJTWAHJZ-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypropionic acid Chemical compound OCCC(O)=O ALRHLSYJTWAHJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N BROMODEOXYURIDINE Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- HELIWWOGJYUTRY-UHFFFAOYSA-N C1=CC(=CC=C1CCl)OCC(COCC(COC2=CC=C(C=C2)CCl)O)O Chemical compound C1=CC(=CC=C1CCl)OCC(COCC(COC2=CC=C(C=C2)CCl)O)O HELIWWOGJYUTRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKTSBUTUHBMZGZ-UHFFFAOYSA-N Deoxycytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1OC(CO)C(O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 101001009252 Homo sapiens 2-hydroxyacyl-CoA lyase 1 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- UBORTCNDUKBEOP-UHFFFAOYSA-N L-xanthosine Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC(=O)NC2=O)=C2N=C1 UBORTCNDUKBEOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229920005601 base polymer Polymers 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRQGCQVOJVTVLU-UHFFFAOYSA-N bis(chloromethyl) ether Chemical compound ClCOCCl HRQGCQVOJVTVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 239000005549 deoxyribonucleoside Substances 0.000 description 1
- VGONTNSXDCQUGY-UHFFFAOYSA-N desoxyinosine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 VGONTNSXDCQUGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 125000006222 dimethylaminomethyl group Chemical group [H]C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- XXBDWLFCJWSEKW-UHFFFAOYSA-N dimethylbenzylamine Chemical compound CN(C)CC1=CC=CC=C1 XXBDWLFCJWSEKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- SUPCQIBBMFXVTL-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)C(C)=C SUPCQIBBMFXVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000004452 microanalysis Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical group 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 238000000954 titration curve Methods 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- UBORTCNDUKBEOP-UUOKFMHZSA-N xanthosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NC(=O)NC2=O)=C2N=C1 UBORTCNDUKBEOP-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
Description
Vynález popisuje vlastnosti, způsob přípravy i a způsob použití nového polymeru ionexového : typu, který je založen na kepelymeru ethybnetakrylátu a ethylengiykoldimetakrylátu (vyráběného jak© Separon H neb© Spheron).
Polymerni anex se připraví jednoduchou reakei a meziproduktu, který je předmětem samostatné přihláSky, Reakee přebíhá s vysokou konversí a bez mimořádných nároků na chemikálie a zařízení a poskytuje materiál s vhodnými parametry pro”; vysoké ůěinnou kapalinovou ehromategrafii,
Použití je dokumentován© vysokou dělící schopností směsí přirozených látek ae skupiny složek nukleovýeh kyselin a slibuje praktickou aplikaci v oboru biochemie a klinických analýz,
Vynález se týká polymemího ionexu pro kapalinovou chromatografii a způsobu jeho přípravy.
Polymemí materiály ionexového charakteru se používají pro analytické a preparativní dělení směsí anorganických a organických sloučenin. Zvláštní význam mají v poslední době ionexy pro tzv. vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (HPLC), která umožňuje ve spojení s vhodnými citlivými detektory rychlou a účinnou analysu směsí. Použitý polymemí materiál musí pro tento účel splňovat ještě další podmínky, např. homogenní změní, malou stlačitelnost při vysokých provozních tlacích, malou objemovou změnu při změně iontové sily, polarity a pH eluentu a konečně musí být chemicky stabilní v extrémních podmínkách. Tyto parametry závisí jednak na vlastnostech základní polymemí matrice, jednak na vlastnostech a způsobu vazby skupin na této matrici vázaných. λ
Vhodným polymerem pro přípravu takových ionexů je makroporesní glykol-metakrylátový gel. tj. kopoíymer 2-hydroxyethylmethakrylátu a ethylenglykoldimethakrylátu (Separon H nebo též Spheron) viz dále jen Separon H, jehož matrice obsahuje chemicky stabilní jednotky typu 2-hydroxyethylesterů karboxylových kyselin (čs. autorské osvědčení 150 819).
Dosavadní práce uváděly přípravu některých ionexů na bázi Separonu H (karboxymethyl sulfonyl fosforyl dimethylaminoethylderivát) (O. Mikeš, J. Zbrožek, J. Čoupek: J. Chromatogr. 119, 339 (1976): O. Mikeš, P. Strop, J. Čoupek: J. Chromatogr. 153, 23 (1978)). K dosažení dostatečně vysokého stupně modifikace základního polymeru bylo však nutno reakci provádět opakovaně a s použitím méně snadno dostupných nebo nákladných činidel. Tyto nevýhody odstraňuje předmětný vynález nového polymemího ionexu, ktprý dosahuje maximální substituce polymemího materiálu a to v jedné reakci a za mírných podmínek.
Podstatou vynálezu je nový polymemí ionex pro kapalinovou chromatografii, jehož strukturní jednotka má obecný vzorec I (I)
ZCH2
CH,—C —COOCH-CH.OCH.CHCH, O^yCH2N/CH3/2
CH„ I 2
OH
Podstatou přípravy thoto ionexu je, že se l-(4-chlormethylfenyloxy)-2-hydroxy-3-propylether kopolymeru 2-hydroxyethylmetakrylátu a ethy“ lenglykoldimethakrylátu, jehož strukturní jednotka má obecný vzorec II (Π) /
I
I
CH,
CH3— C~COOCH2CH2OCH2— CHCH2O-^“^-CH2Cl ?H2
OH nechá reagovat s dimethylaminem bez rozpouštědla nebo v prostředí dioxanu, methanolu, ethanolu, chloroformu, dimethylformamidu nebo vody a při teplotách 20 °C až 100 °C, načež se výsledný produkt odfiltruje a promyje, případně suší.
Výchozí polymemí sloučenina vzorce II je snadno dostupná ze Separonu H postupně reakcí s fenylglyddyletherem a chlormethyletherem (čs. autorské osvědčení ě. 209267) a obsahuje prakticky všechny substituovatelné funkční skupiny etherifikované ligandem s chlormethylskupinou, která je dostatečně stálá v nepřítomnosti silných nukleofilních činidel, je však dostatečně reaktivní vůči amoniaku a aminům. Proto probíhá reakce látky obecného vzorce II s dimethylaminem za poměrně mírných podmínek. Dimethylamin může být pro reakci použit v běžně dostupném koncentrovaném vodném roztoku, případně přímo jako rozpouštědlo se snadnou možností regenerace nebo může být konečně ředěn dalšími, vůči němu inertními rozpouštědly (methanol, ethanol, chloroform, dioxan, dimethylformamid a další). Reakce probíhá s výhodou při mírně zvýšené teplotě, čímž se reakční doba zkracuje. Vzhledem k těkavosti dimethylaminu je také vhodné reakci provádět v uzavřené nádobě, případně v tlakové nádobě.
Po skončení reakce se polymemí materiál promyje k odstranění rozpouštědel a solí zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, vodou a vodu odnímajícími rozpouštědly. Získaný polymemí ionex na bázi Separonu H vzorce I je v chloridovém cyklu. Obsah dusíku, který určuje přítomnost dimethylaminoskupíny, odpovídá úplné konversi chlormethylskupin v látce vzorce II na dimethylaminomethylskupiny.
Charakter takto připraveného polymemího ionexu vzorce I je určen přítomností kovalentně (etherově) vázaných skupin nesoucích terciární aminoskupinu typu benzyldimethylaminu: látka vzorce I je středně basický anex s hodnotou pK v oblasti 7.7 (titrační křivka je uvedena na obr.l). ' Proto může být s výhodou použit pro vzájemné dělení látek zásáditých, neutrálních a středně ' kyselých. Protože tento materiál dále obsahuje aromatické skupiny fenyletherové, mohou být pro : dělení využity i neiontové interakce se složkami dělených směsí. Konečně, vzhledem k markopo- , resnímu charakteru nosiče může být využita i kapacita ionexu vzorce I k dělení látek na základě jejich molekulových hmotností. f
Při reakci látky vzorce II s dimethylaminem se nemění významně fyzikální parametry pro použití při chromatografii a zvláště HPCL (velikost částic, relativní rychlost průtoku apod.) ve srovnání se ! základním (nesubstituovaným) Separonem H. Ionex je stálý ve vodných roztocích pufrů, ve zředěných anorganických a organických kyselinách a v roztocích zásad, dále v organických rozpouštědlech (např. ethanol, methanol, aceton, 2-propanol, dioxan, dimethylformamid, ether). Při změně tlaku, iontové síly, pH roztoku nedochází na kolonách s nosičem vizorce I k podstatným objemovým změnám. Jeho regeneraci lze provádět 2N kyselinou chlorovodíkovou a 2N hydroxidem sodným nebo draselným. '
Použitelnost polymerního ionexu vzorce I pro dělení směsí organických látek je dokumentována analysami směsí složek nukleových kyselin (heterocyklických basí, ribonukleosidů, 2'-deoxyribonukleosidů a jejich nukleotidových derivátů), jakož i některých jejich derivátů (viz obr. 2). Tento příklad analysy má význam v oblasti chemie a biochemie nukleových kyselin, molekulární genetiky a v klinické biochemii. Uvedené hodnoty elučních časů (tabulka 1) a diagramy dělení některých směsí (obr. 2) dokazují vysokou dělicí schopnost připraveného ionexu vzorce I, zvláště při použití borátového elučního roztoku, v němž se uplatňuje jako další faktor tvorba kyselých komplexů s látkami obsahujícími cis-diolové seskupení. Tyto údaje dokumentují vhodnost ionexu vzorce I pro účely mikroanalysy směsí z přirozeného materiálu i pro účely enzymové kinetiky.
V dalším je předmět vynálezu osvětlen na příkladech provedení přípravy a použití, aniž se tím jakkoliv omezuje. i
Příklad 1
Směs 20 g látky obecného vzorce II (připravené ze Separonu H-40) (10-15 μ), 100 ml dioxanu a 40 g bezvodého dimethylaminu se zahřívá v tlakové nádobě 6 hodin na 70 °C, pak se ponechá stát přes noc pri teplotě místnosti, vzniklá suspense se odsaje a produkt na filtru promyje postupně (2 x 100 ml) dioxanem, směsí vody a dioxanu (1 : 3), vodou a ponechá stát 2 hodiny v 2 N kyselině chlorovodíkové. Pak se znovu odsaje, promyje vodou do neutrální reakce filtrátu a ponechá stát 1 hodinu s 2 N hydroxidem sodným. Po promytí vodou do neutrální reakce se postup s 2 N kyselinou chlorovodíkovou opakuje, nakonec se promyje vodou do neutrální reakce, acetonem, etherem a suší se nad kysličníkem fosforečným ve vakuu. Získá se 20 g látky I v chloridovém cyklu. Obsah dimethylaminoskupin 1,9 mekv/g suché hmotnosti.
Příklad 2
Směs 2 g látky obecného vzorce II (připravené ze Separonu H-1000) (25—63 μ) a 20 ml 2 M roztoku dimethylaminu v methanolu se zpracuje stejně jako je uvedeno v Příkladu 1. Získá se 2,0 g látky vzorce I v chloridovém cyklu, obsah dimethylaminoskupin 1,95 mekv/g suché hmotnosti.
Příklad 3
Směs 2 g látky obecného vzorce II (připravená ze Separonu H-1000) (25—63 μ) a 20 ml bezvodého dimethylaminu se ponechá stát v uzavřené nádobě 48 hod. pri teplotě místnosti. Pak se dimethylamin oddestiluje a zbytek se zpracuje stejně jako je uvedeno v Příkladu 1. Získá se 2 g látky vzorce I v chloridovém cyklu, obsah 1,87 mekv. dimethylaminoskupin/g suché hmotnosti.
Příklad 4
Směs 2 g látky obecného vzorce II (připraveného se Separonu H-40) (10—15 μ), 20 ml chloroformu a 5 g dimethylaminu se zahřívá v tlakové nádobě 8 hodin na 50 °G a zpracuje stejně jako je uvedeno v Příkladu 1. Získá se 2 g látky vzorce I s obsahem 1,92 mekv. dimethylaminoskupin/g suché hmotnosti.
Dále je uveden příklad využití polymerních ionexů podle vynálezu pro dělení látek na koloně, která je naplněná látkou vzorce I. Kolona 0,8 x 10,5 cm byla plněna suspensní metodou z 15% suspense nosiče připraveného podle Příkladu 1 v 1 M pufru kyselina boritá-hydroxid sodný pH 8,60 a eluce provedena tímtéž pufrem (koncentrace uvedena v tab. 1 a obr. 2) (průtok 124 ml/hod). Pracovní tlak 1 MPa (proporcionální programové mikročerpadlo PPM 68005, Výv. dílny ČSAV), teplota 20 °C ± 0,1 °C, nástřik 10 až 20 μΐ. Detekce býla prováděna na přístroji UV III Monitor 1203 (LDC, USA) pri 257 nm; citlivost 0,256 a 0,512 absorbačních jednotek na rozsah stupnice, s použitím zapisovače TZ 21 S (rychlost posunu 12 cm/hod). Údaje elučních časů jsou uvedeny v tabulce 1, diagramy některých dělených směsí na obrázku 2.
Obrázek 2 (obr. 2) obsahuje Grafy ABGD, na kterých je znázorněno dělení směsi látek na sloupci polymerního ionexu vzorce I.
Graf A, eluent 0,0025 M pufr; Graf B, eluent 0,01 M pufr, v 8,5 min lineární gradient 0,01 až 0,1 M pufr během 30 min. Graf C, eluent 0,001 M pufr, v 10 min lineární gradient 0,01 až 0,05 M pufr během 30 min, GrafD, eluent 0,15 Mpufr.
DHPA znamená 9-(2,3-dihydroxypropyl)adenin. Ostatní zkratky uvedené v Grafech jsou vysvětleny v tabulce 1.
Tabulka 1
Eluční časy některých sloučenin. (Čas t v minutách.) Podmínky viz příklad využití.
| Látka | Koncentrace eluentu (x 10 3 M) | |||||||
| 1 | 2,5 | 5 | 10 | 50 | 100 | 150 | 200 | |
| Cytosin (Cyt) | 2,25 | 2,25 | 2,25 | |||||
| Uráčil (Ura) | 6,0 | 5,50 | 4,0 | |||||
| Thymin | 5,25 | 4,0 | ||||||
| Adenin (Ade) | 11,50 | 10,50 | 10,50 | 9,5 | 7,25 | |||
| Guanin (Gua) | 8,0 | 7,0 | 6,0 | |||||
| Hypoxanthin (Hx) | 17,50 | 13,50 | 11,75 | 9,5 | 6,75 | |||
| Xanthin (Xan) | 23,75 | 15,0 | 9,50 | |||||
| Cytidin (Cyd) | 5,50 | 4,50 | ||||||
| Uridin (Urd) | 13,75 | 9,50 | 3,75 | |||||
| 3-Methyluridin | 10,0 | |||||||
| Adenosin (Ado) | 8,0 | 9,0 | 8,50 | 7,25 | 4,00 | |||
| Guanosin (Guo) | ||||||||
| Xanthosin (Xao) | 18,00 | |||||||
| Inosin (Ino) | 7,5 | |||||||
| 2'-Deoxycytidin | 2,0 | |||||||
| 2'-Deoxyuridin | 5,25 | |||||||
| 2'-Deoxythymidin | 4,5 | |||||||
| 2'-Deoxyadenosin | 4,5 | |||||||
| 2'-Deoxyguanosin | 8,0 | |||||||
| 1 -(α-L-Lyxofuranosyl) uráčil | 4,25 | |||||||
| J -(β-D-Lyxofuranosyl) uráčil | 3,50 | |||||||
| J -(β-D-Ribopyranosyl) uráčil | 3,25 | |||||||
| 1 -(β-D-Xylofuranosyl) uráčil | 3,75 | |||||||
| 1 -(β-D-Arabinofuranosyl) uráčil | 3,25 | |||||||
| 5 -Brom-2' -deoxyuridin | 9,0 | |||||||
| Cytidin-5'-fosfát (CMP) | 15,50 | 7,50 | 6,50 | |||||
| Adenosin-5'-fosfát (AMP) | 25,0 | 10,5 | 8,50 | |||||
| Guanosin-5'-fosfát (GMP) | 21,50 | 17,0 | ||||||
| Uridin-5'-fosfát (UMP) | 33,0 | 16,25 | 13,50 | |||||
| Uridin-2',3 '-cyklofosfát | 7,0 | |||||||
| Methylester uridin-3'-fosfátu | 5,5 | - |
PŘEDMĚT VYNÁLEZU
Claims (2)
1. Polymemí ionex pro kapalinovou chromatografii, jehož struktyrní jednotka má vzorec I I ’ (I)
ZCH2
CH —C—COOCH„CH„OCH„CHCH
CH-N/CH-/
3' 2
CHI 2
OH
2. Způsob přípravy polymemích ionexů podle bodu 1, vyznačený tím, že se l-(4-chlormethylfenyloxy)-2-hydroxy-3-propylether kopolymeru 2hydroxyethylmetakrylátu a ethylenglykoldimethakrylátu, jehož strukturní jednotka má obecný vzorec II /Ch2 ch3~ c—cooch2ch2 och2chch2o ' fH2 )-CH2Cl
OH (II) nechá reagovat sdimethylaminem bez rožpouštěd- teplotách 20 °C až 100 °C, načež se výsledný la nebo v prostředí dioxanu, methanolu, ethanolu, produkt odfiltruje a promyje, případně suší. chloroformu, dimethylformamidu nebo vody a při
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS536579A CS209268B1 (en) | 1979-08-03 | 1979-08-03 | Polymere ion exchanger for liquid chromatography and method of its preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS536579A CS209268B1 (en) | 1979-08-03 | 1979-08-03 | Polymere ion exchanger for liquid chromatography and method of its preparation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS209268B1 true CS209268B1 (en) | 1981-11-30 |
Family
ID=5398422
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS536579A CS209268B1 (en) | 1979-08-03 | 1979-08-03 | Polymere ion exchanger for liquid chromatography and method of its preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS209268B1 (cs) |
-
1979
- 1979-08-03 CS CS536579A patent/CS209268B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK171822B1 (da) | Modificerede nucleotider og fremgangsmåder til deres fremstilling og påvisning | |
| Spivak et al. | Evaluation of binding and origins of specificity of 9-ethyladenine imprinted polymers | |
| EP1960078B1 (en) | Anion-exchange displacement chromatography process | |
| Dale et al. | Direct covalent mercuration of nucleotides and polynucleotides | |
| EP0101985B1 (en) | Oligonucleotide derivatives and production thereof | |
| FI105555B (fi) | Infrapuna-väriaineella merkityt nukleotidit ja niiden käyttö nukleiinihappojen osoittamiseksi | |
| US4997927A (en) | Improved process for the purfication of synthetic oligonucleotides | |
| US4591614A (en) | Preparation of oligodeoxyribonucleoside alkyl or arylphosphonates | |
| WO2021216998A1 (en) | Modified nucleotides and uses thereof | |
| JPH01158001A (ja) | 架橋したポリスチレンおよびデキストランから誘導されたポリマーと、その製造方法と、生物起源の分子の分析と精製へのこのポリマーの応用 | |
| CN101547928B (zh) | 合成和纯化寡核苷酸的化合物和方法 | |
| EP1088035A1 (en) | Efficient activated cyanine dyes | |
| Bahl et al. | Chemical and enzymatic synthesis of lactose operator of Escherichia coli and its binding to lactose repressor. | |
| CS195162B1 (en) | Method of preparing amphoteric ion exchangers | |
| Randerath | Two-dimensional separation of nucleic acid bases on cellulose layers | |
| Agarwal et al. | Polynucleotides. CII. Use of aromatic isocyanates for selective blocking of the therminal 3'-hydroxyl group in protected deoxyribooligonucleotides | |
| KR20140004749A (ko) | 치환 방향족 화합물, 히드로겔화제, 히드로겔, 및 수계 시료의 겔화 방법 | |
| CN110997133A (zh) | 色谱用载体、配体固定载体、色谱柱、靶物质的纯化方法和色谱用载体的制造方法 | |
| CS209268B1 (en) | Polymere ion exchanger for liquid chromatography and method of its preparation | |
| JP4629660B2 (ja) | マルチモードアニオン交換リガンドの製造法 | |
| JPS59502025A (ja) | オリゴヌクレオシドホスホネ−トの製造法 | |
| US3778393A (en) | Gels for use in gel chromatographic procedures and processes for producing the same | |
| Cashion et al. | Use of trityl-and. alpha.-naphthylcarbamoylcellulose derivatives in oligonucleotide synthesis | |
| Minganti et al. | Comparison of controlled pore glass and Kieselguhr-polydimethylacrylamide composite as supports for solid-phase synthesis of 23-residue oligodeoxyribonucleotides in milligram amounts | |
| US4056666A (en) | Process for producing polyion complex having nucleic acid bases |