CS208440B1 - Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy - Google Patents

Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy Download PDF

Info

Publication number
CS208440B1
CS208440B1 CS22780A CS22780A CS208440B1 CS 208440 B1 CS208440 B1 CS 208440B1 CS 22780 A CS22780 A CS 22780A CS 22780 A CS22780 A CS 22780A CS 208440 B1 CS208440 B1 CS 208440B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
carboxymethyl
isotope
aflatoxin
oxime
aflatoxine
Prior art date
Application number
CS22780A
Other languages
English (en)
Inventor
Karel Veres
Vladimira Dolezalova
Drahomira Pichova
Original Assignee
Karel Veres
Vladimira Dolezalova
Drahomira Pichova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Karel Veres, Vladimira Dolezalova, Drahomira Pichova filed Critical Karel Veres
Priority to CS22780A priority Critical patent/CS208440B1/cs
Publication of CS208440B1 publication Critical patent/CS208440B1/cs

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

(54) Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B1 značené izotopem 125I a způsob jejich přípravy
Vynález se týká amidických derivátů (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-Bj značených izotopem * 125I a způsobu jejich přípravy.
Uvedené látky našly použití v radioimunologické analyse (RIA) jako radioligandy při stanovení aflatoxinů v biologických materiálech.
' Chemické sloučeniny podle vynálezu jsou nové a nebyly dosud připraveny. Látky podobného amidického typu jsou známy z chemie steroidních hormonů jako je na příklad 125I-tyramid 6-(0-karboxymethyl)oximu 17P~estradiolu (Lindberg P., i Edquist L. E., Clin. Chim. Acta 53, 169 (1974) ' nebo 125I-tyramid 3-(0-karboxymethyl)oximu pro- i gesteronu (Allen R. M., Redshaw M. R., Steroids 32 (4) 467, (1978)) a sloužily jako radioligandy při stanovení těchto látek radioimurtoanalysou.
Podstatou vynálezu jsou nové látky, amidické deriváty (O-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-Bj značené izotopem I25I obecného vzorce I.
a způsob jejich přípravy vyznačený tím, že (0-karboxymethyl)oxim aflatoxinu-Bj se kondensuje s aromátickým aminem při teplotě —5 až +5 °G, načež se získaný amid při pH 7 až 8 joduje jodidem sodným 125I za přítomnosti chloraminu T nebo chloraminu B. Jedná se o dvě nové látky se strukturou vyznačenou v obecném vzorci (I).
Přípravu výchozí látky, (O-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-Bj, popsali J. J. Langone a H. Van Vunakisová [J. Nat. Cancer Inst. 56 (3), 591, (1976)]. Kondensaci tohoto oximu s aromatickým aminem, jako je tyramin nebo methylester tyrosinu lze provést metodou aktivních esterů, nebo smíšených anhydridů nebo použitím karbodiimidů.
Takto získaný amidický derivát se podrobí jodaci jodídem sodným-l25í pří pH 7 až 8 za teploty místnosti a použití chloraminu-T nebo chloraminuB. Za těchto podmínek nedochází k jodaci vlastní molekuly aflatoxinu-Bj a při použití beznosiěového jodidu sodného-l2SI se dá získat preparát o specifické aktivitě 7400 až 8880.10s-^mmol-1, který má shodné imunologické vlastnosti jako aflatoxin-Bj a proto se dá výhodně použít jako radioligand při stanovení aflatoxínů radioimunologickou analysou.
Dále jsou uvedeny příklady přípravy amidických derivátů podle vynálezu.
Příklad 1
Příprava 3-/125I/(a-methoxykarbonyl)L-tyramidu (O-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-Bj.
Kondensace:
Do roztoku 1,5 ml absolutního tetrahydrofuranu, obsahujícího 11 mg (30 pmol) (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-By se přidá roztok 7 mg (40 μπιοί) tributylaminu rozpuštěného v 0,1 ml absolutního tetrahydrofuranu a po ochlazení v ledové lázni se přidá 4 mg (33 μπιοί) chloromravenčanu sek.-butylnatého rozpuštěného v 0,1 ml absolutního tetrahydrofuranu. Reakčni směs se udržuje v ledové lázni 20 minut za občasného protřepání a poté se přikape roztok 7,6 mg (33 pmol) L-tyrosin methylesterhydrochloridu ve 2 ml směsi tetrahydrofuran : voda = 1:1. Hodnota pH roztoku se nastaví na 8 až 9 asi 10 mg tributylaminu a reakčni směs se nechá stát 16 hodin v lednici při +4 °C. Tetrahydrofuran se poté odpaří do sucha za sníženého tlaku, zbytek rozpuští asi 5 ml chloroformu a vytřepá nejdříve 5 ml 3% kyseliny chlorovodíkové, potom 5 ml 5% roztoku hydrogenuhličitanu sodného a nakonec stejným objemem vody. Oddělená chloroformová vrstva se vysuší malým množstvím síranu hořečnatého. Po odpaření chloroformu do sucha za sníženého tlaku se zbytek podrobí chromatografií na sloupci z 1 g silikagelu.
Produkt ze sloupce se vymývá chloroformem, jímány jsou frakce o objemu 2 ml. Spojené frakce č. 6 až 14 poskytnou po odpaření rozpouštědla 12 mg produktu, který je nažloutlá látka, netající do 320 °C, nerozpustná ve vodě, rozpustná ve většině organických rozpuštědlech.
Kontrola čistoty se provádí chromatografií na tenké vrstvě v soustavě
CHCI3: CHjOH : H20 = 88 : 14 : 1,5. Hodnoty Rf na desce Silufol (Kavalír, ČSSR) : produkt 0,5; výchozí látka 0,3; aflatoxin-Bj 0,6.
Důkaz složení derivátu:
mg produktu byl hydrolyzován zahříváním v zatavené trubici s 1 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové na 100 °C 6 h a v hydrolyzátu dokázán tyrosin chromatograficky. Látka vykazuje výrazné maximum absorpce při 268 a 360 nm (pH 7; CH3OH).
Jodace:
Do 5 ml zkumavky se postupně přidá roztok 3 pg ί produktu připraveného shora popsaným způso- | ί bem, rozpuštěným v 10 μ1 dioxanu, 10μ1 fosfátové- , ho pufru, (0,05 M; pH 7,4), 20 μΐ roztoku Na I25I | ί o radioaktivitě cca 37.107s_1 a 20 μ10,5% chlora. minu-T v uvedeném pufru. Obsah baňky se jednu minutu intenzívně míchá pomocí vibrační třepačky a poté se přidá 20 μ 0,5 % hydrosiřičitanu sodného ve stejném pufru. Produkt se z vodného roztoku extrahuje dvakrát 100 μ1 ethylacetátu a poté se podrobí preparativní chromatografii na tenké vrstvě (Silufol, ČSSR) v soustavě CHC13 : CH3OH : H2O = 9 : 1 : 0,1
Radioaktivní jodderivát má o něco vyšší Rf než výchozí látka a jeho poloha se zjišťuje jednak v UV světle jednak autoradiografií. (Doba exposice při popsané radioaktivitě a při použití běžného rentgenového filmu 3 až 5 minut). Preparát se nyní vymyje z takto zjištěného pruhu tenkovrstevné folie 2-3 ml methanolu.
Získá se aktivita (1110 až 1480) 104 s-1 preparátu značeného radioizotopem 125I.
Příklad 2
Příprava 3-/12SI/tyramidu (O-karboxymethyl)o; ximu aflatoxinu-Bj.
• Kondenzace:
Způsobem uvedený v příkladu 1 se nechá reago; vat 60 mg (O-karboxymethyl)óximu aflatoxinu-Bj j s 25 mg chloromravenčanu sek.-butylnatého za přítomnosti 30 mg tributylaminu ve 4 ml tetrahydrofuranu a tento roztok se vnese do roztoku 30 mg hydrochloridu tyraminu, 60 až 100 mg tributylaminu vé 4 ml směsi tetrahydrofuranu a vody v poměru 1:1. '
Jodace a čistění se provádí opět stejným způsobem, produkt je vymýván ze sloupce silikagelem i směsi CHC13 : CH3OH = 9:1.
Získá se 52 mg světležluté pevné látky, která má obdobné fysikálněchemickě vlastností jako předchozí derivát (z příkladu 1).
Kontrola čistoty se provádí stejným způsobem, hodnota Rf = 0,4.
Důkaz složení derivátu:
Po hydrolyse vzorku, provedené způsobem podle příkladu 1 se tyramin dokazuje chromatograficky. Látka poskytuje hnědooranžové zabarvení s roztokem chloridu železitého a vykazuje rovněž výrazné maximum UV absorpce pri 268 a 360 nm (pH 7; CH3OH).
Jodace:
Jodace se provádí použitím 3 pg tyramidu v 10 μ dioxanu a * 10 až 20 μΐ (asi 3,7.107s-') roztoku beznosičového jodidu sodného způsobem popsai ným v příkladu 1. aktivita (1110 až 1480).104s_1 125I-tyramidu (O-karboxymethyl)-oximu aflato-

Claims (2)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    1. Amidické deriváty (O-karboxymethyl)oximu ) aflatoxinu-Bj značené izotopem 125I obecného j vzorce
  2. 2. Způsob přípravy amidických derivátů obecného vzorce I podle bodu 1 vyznačený tím, že (O-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-Bj se kondenzuje s aromatickým aminem při teplotě —5 až +5°C, načež se získaný amid při pH 7 až 8 joduje jodidem sodným-125I za přítomnosti chloraminu-T nebo chloraminu-B.
CS22780A 1980-01-10 1980-01-10 Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy CS208440B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS22780A CS208440B1 (cs) 1980-01-10 1980-01-10 Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS22780A CS208440B1 (cs) 1980-01-10 1980-01-10 Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS208440B1 true CS208440B1 (cs) 1981-09-15

Family

ID=5334005

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS22780A CS208440B1 (cs) 1980-01-10 1980-01-10 Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS208440B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4709016A (en) Molecular analytical release tags and their use in chemical analysis
US4650750A (en) Method of chemical analysis employing molecular release tag compounds
Allen et al. The use of homologous and hetebologous 125 I-radioligands in the radioimmunoassay of progesterone
JPH0741482A (ja) アミノメチルフルオレセイン誘導体
US4614823A (en) Aminomethylfluorescein derivatives
PL99574B1 (pl) Srodek do radiologicznego oznaczania zawartosci kwasu foliowego,jego metabolitow lub pochodnych
JP4068137B2 (ja) ビオチニル化した化学発光性標識、結合体、測定法及び測定法キット
CA1071101A (en) Radioimmunoassay method for the determination of cardiotonic glycosides
Shuker et al. The determination of urinary 3-methyladenine in humans as a potential monitor of exposure to methylating agents
Dandliker et al. A fluorescein-labeled derivative of estradiol with binding affinity towards cellular receptors
Imaoka et al. Specific and rapid assay of urinary oxalic acid using high-performance liquid chromatography
JP5288230B2 (ja) ステロイドの高感度測定法
CS208440B1 (cs) Amidické deriváty (0-karboxymethyl)oximu aflatoxinu-B 1 značené izotopem 125 I a způsob jejich přípravy
CN110603059B (zh) 化学发光雄烯二酮缀合物
CA1118409A (en) Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays
CA1119163A (en) Digoxigenin derivatives
Holloway et al. The alleged presence and role of monoiodohistidine in mitochondrial oxidative phosphorylation
US4740476A (en) Immunoassay for estriol-3-sulfate
US4221725A (en) Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays
US4120867A (en) Monoradioiodinated phenolic esters, acids and amines
US4323511A (en) Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays
Evrain et al. The preparation of three fluorescence-labelled derivatives of testosterone
JPH04253991A (ja) 新規ガラクトピラノシド、その製法、該化合物からなるβ−ガラクトシダーゼ基質及びβ−ガラクトシダーゼ活性の定量方法及びそのための試薬
Saisho et al. Determination of 7α-hydroxycholesterol in dog plasma by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection
US4230621A (en) Steroid derivatives and their use in radioimmunoassays