CS203704B1 - Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové - Google Patents
Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové Download PDFInfo
- Publication number
- CS203704B1 CS203704B1 CS84179A CS84179A CS203704B1 CS 203704 B1 CS203704 B1 CS 203704B1 CS 84179 A CS84179 A CS 84179A CS 84179 A CS84179 A CS 84179A CS 203704 B1 CS203704 B1 CS 203704B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- uric acid
- determination
- enzyme preparation
- uricase
- methylglucamine
- Prior art date
Links
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 16
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 16
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 title claims description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 12
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 3
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- -1 ammonium ions Chemical class 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- PKPZZAVJXDZHDW-LJTMIZJLSA-N (2r,3r,4r,5s)-6-(methylamino)hexane-1,2,3,4,5-pentol;hydrochloride Chemical compound Cl.CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO PKPZZAVJXDZHDW-LJTMIZJLSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000001431 Hyperuricemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004144 purine metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Předmětem vynálezu je stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové.
Kyselina močová je hlavním purinem obsaženým v plasmě a u člověka představuje konečný produkt purinového metabolismu. Její nadměrná tvorba nebo nedostatečné vylučování z organismu, hyperurikemie má vztah k celé řadě chorob. Stanovení kyseliny močové v biologických tekutinách, zejména pak v krevním séru, má tedy značný diagnostický význam. Metody stanovení kyseliny močové jsou založeny na její chemické nebo enzymové oxidaci na allantoin. V poslední době převládají metody enzymové s enzymem urikasou, které jsou specifické. Stanovuje se buď allantoin fotometricky v ultrafialové oblasti spektra nebo se využívá stanovení přes souběžně vznikající peroxid vodíku. Do této skupiny lze zařadit stanovení s enzymem katalasou, která za přítomnosti peroxidu vodíku oxiduje methanol na formaldehyd, jež lze stanovit kopulací s acetylacetonem a amonnými ionty jako žlutý 3,5-diacetyl-l,4-dij hydrolutidin.
Enzymové stanovení' s urikasou přináší řadu problémů souvisejících se stabilitou enzymu. Komerčně je enzym urikasa převážně dodáván buď v lyofilisovaném stavu, jako stabilisovaný roztok v glycerolu nebo jako suspenze se síranem amonným. Jak bylo ověřeno, jsou roztoky v glycerolu jen omezeně stálé, neboť i při uchovávání v chladu klesá aktivita- enzymu po několika měsících o 50 až 80 °/o. Suspenze enzymu v síranu amonném je pro fotometrické stanovení kyseliny močové nevhodná, neboť reakční směs by bylo nutno filtrovat. Při fotometrickém stanovení kyseliny močové je obvykle nutné zaručit, aby koncentrace urikasy v reakční směsi byla asi 0,05 U/ml. Běžně dostupné lyofilisované přípravky vykazují obvykle aktivitu 0,5 až 20 U/mg a pro stanovení kyseliny močové je nutné enzym vhodným způsobem ředit, přičemž vodné roztoky rychle ztrácejí účinnost.
K odstranění uvedených nedostatků směřuje stabilní enzymový přípravek .pro stanovení kyseliny močové podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že na 1 U urikasy obsahuje 0,003 až 0,150 g D(—-J-N-methylglukaminu, 0,001 až 0,05 g D( —}-N-methylglukaminiumchloridu. Dále může přípravek obsahovat neutrální plnidla na bázi glycidů, například glukosu, laktosu, sacharosu, maltosu nebo jejich směsi s výhodou v poměru 1 ku 1 v množství 0,002 až 0,100 g na 1 U urikasy. V případě kapalného přípravku obsahuje dále 0,5 až 10 g vody. Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové podle vynálezu může být připraven buď v pevném stavu, nebo v roztoku. Přípravek v pevném stavu je stálý stejně jako například lyofilisovaná urikasa. Kapalný přípravek je stálý podobně jako například stabilisovaný roztok urikasy v glycerolu.
D(,—j-N-methylglukamin s D( —j-N-methylglukaminchloridem představuje slabě alkalický púfr, jehož pH se pohybuje v rozmezí 8,5 až 10,5, jež je optimální pro stabilisaci urikasy ve vodném roztoku. D(—]-N-methylglukamin má současně mohutný solubilisační efekt a usnadňuje převedení urikasy do roztoku. Neutrální plnidla na bázi glycidů slouží jako triturace a usnadňují manipulaci, zejména navažování nebo odměřování pevného přípravku.
Jak bylo ověřeno, lze stabilní enzymový přípravek podle vynálezu výhodně užít pro stanovení kyseliny močové a můžé být snadno vyroben z dostupných surovin.
Pro ilustraci složení stabilního enzymového přípravku ke stanovení kyseliny močové slouží následující příklady.
Příklad 1
Připraví se pevná směs obsahující 1 U urikasy, 150 mg D(—j-N-methylglukaminu, 50 mg D( —j-N-methylglukaminiumchlorldu a 100 mg sacharosy.
Příklad 2 ·; .s
Připraví se pevná sittěs obsahující 7,2 U urikasy, 66 mg D( — j-N-methylglukamřhu, 22 mg D( —j-N-methylglukamlniumchloridu a 200 ing glukosy.
Příklad 3 '
Připraví se pevná směs obsahující 1 U. urikasy, 3 mg D(—j-N-methylglukaminu, 1 mg D( — j-N-methylglukaminiumchloridu a 2 mg směsi laktosy s maltosou v poměru 1 ku 1. Před použitím se rozpustí v '0,5 ml vody.
Příklad 4
Připraví se pevná směs obsahující 10 Ú urikasy, 30 mg D( —)-N- methylglukaminu, 10 mg D(—j-N-methylglukaminiumchloridu. Před použitím se rozpustí v 5 mg vody.
Pro fotometrické stanovení kyseliny močové se ve zkumavce smíchá 0,2 ml vzorku, například séra, přidá se činidlo obsahující enzym katalasu, acetylaceton a methanol ve fosfátovém pufru o pH 6,7, promíchá se a přidají se 3 mg pevné směsi, podle příkladu 2 nebo 4 mg pevné směsi podle příkladu 1 nebo 0,1 ml roztoku urikdzy podle příkladu 3 nebo 4. Inkubuje se při 37 °C po dobu 70 min a změří se absorbahce v kyvetě 1 cm při vlnové délce 420 mm proti vodě. Současně se provede měření standardního roztoku a slepého pokusu. Měření slepého pokusu se provádí běz enzymu urikasy.
PŘEDMĚT
Claims (3)
- PŘEDMĚT1. Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové, vyznačený tím, Že na 1 U urikasy obsahuje 0,003 až 0,150 g D( —j-N-methylglukaminu a 0,001 až 0,05 g D (— ] -N-methylglukaminiumchlo.rídu.
- 2. Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové podle bodu 1 vyznačený tím, že obsahuje 0,002 až 0,1 g nevynalezu utrálních plnidel na bázi glycidů, například glukosu, laktosu, sacharosu, maltosu nebo jejich směsi, s výhodou v poměru 1 ku 1.
- 3. Stabilní enzymový přípravek pro Stanovení kyseliny močové podle hodu 1 vyznačený tím, že obsahuje 0,5 až 10 g vody.Severografia, n.I., závod 7, Most
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS84179A CS203704B1 (cs) | 1979-02-07 | 1979-02-07 | Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS84179A CS203704B1 (cs) | 1979-02-07 | 1979-02-07 | Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS203704B1 true CS203704B1 (cs) | 1981-03-31 |
Family
ID=5341346
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS84179A CS203704B1 (cs) | 1979-02-07 | 1979-02-07 | Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS203704B1 (cs) |
-
1979
- 1979-02-07 CS CS84179A patent/CS203704B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Carroll et al. | A simplified alkaline phosphotungstate assay for uric acid in serum | |
| Ferdinand | The isolation and specific activity of rabbit-muscle glyceraldehyde phosphate dehydrogenase | |
| Haeckel | The use of aldehyde dehydrogenase to determine H2O2-producing reactions. I. The determination of the uric acid concentration | |
| Caraway | Colorimetric determination of serum guanase activity | |
| Masson et al. | Combined enzymic-Jaffé method for determination of creatinine in serum. | |
| Kohlbecker et al. | Direct spectrophotometric determination of serum and urinary oxalate with oxalate oxidase | |
| Pinto et al. | Aldolase: I. colorimetric determination | |
| US4119401A (en) | Total bilirubin assay | |
| Trinder | Oxidase determination of plasma cholesterol as cholest-4-en-3-one using iso-octane extraction | |
| EP0275398A2 (en) | Reagent for the determination of chloride ions | |
| Deeg et al. | Kinetic determination of serum glucose by use of the hexokinase/glucose-6-phosphate dehydrogenase method | |
| US3864085A (en) | Glutathione reagent and test method | |
| JPH01108997A (ja) | 血液又は血液から導出した試料中の血清のフルクトスアミン含量を特異的に測定する方法及び試薬、及び非特異的還元作用を有するか、又は／及び溷濁を惹起する試料成分を除去する方法 | |
| RU2122740C1 (ru) | Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления | |
| Van Pilsum | Determination of creatinine and related guanidinium compounds | |
| CS203704B1 (cs) | Stabilní enzymový přípravek pro stanovení kyseliny močové | |
| Asp | Improved method for the assay of phenylglycosidase activity with a 4-aminoantipyrine reagent | |
| US4247633A (en) | Reagent for colorimetric determination of creative phosphokinase | |
| Lim et al. | Determination of ethanol in serum by an enzymatic PMS-INT colorimetric method | |
| US3778384A (en) | Diagnostic composition for the quantitative determination of glucose | |
| US4030885A (en) | Bilirubin determination | |
| US5229270A (en) | Reagent for the determination of chlorine ion | |
| US4965210A (en) | Stable reagent for determining bilirubin in serum and method of preparation | |
| JP4544598B2 (ja) | 液状試薬および保存方法 | |
| Caraway | Non-urate chromogens in body fluids |