CS199986B1 - Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací - Google Patents
Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací Download PDFInfo
- Publication number
- CS199986B1 CS199986B1 CS251778A CS251778A CS199986B1 CS 199986 B1 CS199986 B1 CS 199986B1 CS 251778 A CS251778 A CS 251778A CS 251778 A CS251778 A CS 251778A CS 199986 B1 CS199986 B1 CS 199986B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- fermentation
- ccm
- alkaloids
- elymoclavin
- agroclavin
- Prior art date
Links
- DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N elymoclavine Natural products C1=CC(C2C=C(CO)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 28
- XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N Agroclavine Natural products C1=CC(C2C=C(C)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 17
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 11
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 title description 17
- UPKBEIIDYOMDQW-UKRRQHHQSA-N agroclavine Chemical compound C1=CC=C2[C@H]3C=C(C)CN(C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 UPKBEIIDYOMDQW-UKRRQHHQSA-N 0.000 title description 2
- IAOSEBXZNXDPEE-UKRRQHHQSA-N elymoclavine Chemical compound C1=CC=C2[C@H]3C=C(CO)CN(C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 IAOSEBXZNXDPEE-UKRRQHHQSA-N 0.000 title 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 4
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N beta-keto-glutaric acid Natural products OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 claims description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 claims 2
- 150000003627 tricarboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethoxyethane Chemical compound CCO.CCOCC PSLIMVZEAPALCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 241001225321 Aspergillus fumigatus Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- DAVNRFCJMIONPO-UKRRQHHQSA-N Elymoclavine Chemical compound C1=CC([C@H]2C=C(CO)CN([C@@H]2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940091771 aspergillus fumigatus Drugs 0.000 description 1
- OJHAHQJRQIOCFK-UHFFFAOYSA-N azane;chloroform;methanol Chemical compound N.OC.ClC(Cl)Cl OJHAHQJRQIOCFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- WGXZDYPGLJYBJW-UHFFFAOYSA-N chloroform;propan-2-ol Chemical compound CC(C)O.ClC(Cl)Cl WGXZDYPGLJYBJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(54) Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací
Vynález se týká způsobu výroby alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu submersní fermentací ta použití vysokoprodukčních mutantů houby Claviceps purpurea CP7/5, CP7/63 a CP7/274 uložených v československé sbírce mikroorganismů University J.E. Purkyně v Brně pod δ. CCM F-630, CCM F-631, CCM F-632.
Agroklavin ( M.Abe et al., strukturního vzorce I
Jap. Pat. 178 336 )
199 986
199 986 a elymoklavln ( M.Abe et al., US Pat. 2 835 675 ) strukturního vzorce II
HOCH,
N
H se vyskytují především ve sklerociu různých druhů houby 0laviceps paraaltujíoíoh na divokých travách.Dálného Východu a Afriky. Ve stopových množstvíoh jsou oba alkaloidy obsaženy také v saprofytníeh kulturách Clavioeps purpurea, 0. paepali, Aspergillus fumigatus a některých kmenů fyko-, basldlo- a deuteromycet. Slymoklevin byl isolován 1 ze semen určitých rostlin čeledi Convolvulaeeae ( A· Hofmann, Planta Med. 2, 354 (1961)· Tento alkaloid je prekursorem derivátů kyseliny lyeergové a parasitníoh 1 saprofytníeh kulturách argotových hub ( S. Agurell a M. Johaneson, Acta Chem. Seand. 18. 2285 ( 1964)» H.G. Plose et.al., Z. Baturfořech. ^lb. 128 (1966 )| H.Q.Ploas, J.Org. Chem. 3£χ 2249 ( 1973 )· Agroklavin inhibuje lektaci ( P.G. Mantle, Proč. Royal Soc. S 170. 423 (1968 ) a preventivné působí ne implantaci fertlllsovanáho vajíčka (P.G· Mantle, J. Reprod. Pertility 18. 81 ( 1969 )· Oba uvedené alkaloidy slouží současně jako stíbstráty pro pnrelální aynthesu komerčně významných derivátů kyseliny lyeergové ( Tung-Ohung Choong a H«R· Shough,Tetrahedron Letters 19. l62f ( 1977 )) a dalších farmakologicky výsnamnýoh látek ( M. Semonaký a H· Kuchařozyk, Coli. Czeoh. Chem. Commun. 33. 577 ( 1968 )| J. Křepelka et.al.,Coll.Czeeh. Chem. Commun. 42341-2 ( 1977 ))·
Příprava agroklavinu ani elymoklavinu není dosud uspokojivě vyřešena. Chemická příprava těchto alkaloidů je ekonomicky neaohůdná a fermentační příprava al již povrchová ( M.Abe a S.Yamatodani, Progr. Ind. Microbiol.,^.205 ( 1964 ) nebo aubmeraní ( L.C. Tining a P.M. Bair, Can. J. Microbiol. 12. 915 ( 1966 )t A. Tonolo a B. Udvardy-Bagy,
Aota Microbiol.Aoad.8oi. Hung. 15. 29 ( 1968 ) je zatížena nízkou výtěžností a dálkon procesu, a neumožňuje tak výrobu agroklavinu a elymoklavinu ani v rozsahu obdobném výrobě derivátů kyseliny lyeergové ( R.A. Bassett et al·, Bloohem. J. 134. 1 ( 1973 ))·
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob podle vynálezu vyznačený tím, že mutant houby Clavioeps purpurea CP7/5 ae Inkubuje na živnýeh mediích o pH 5,2 až 5,5 v temnu při 24 χ 1 °C, přičemž se získají spory kultury vyrostlé na agarovám mediu·která jsou přeneseny do tekutého lnokulačního media obsahujícího saoharosu 10%, L-aaparagin 1%, L-eysteln 0,01%, Ca ( HOj )g. 4HgO 0,1 %, kvasničný extrakt 0,01%, KH2 PO^ 0,02% a dalSí anorganické sole ve stopových množstvích, a ss kterýoh po 7 až 9 denní submersní kultivaci vyrůstá inokulum. Jímž se naočkuje fermentaění medium obsahující saoharosu 8 až 12%, meziprodukt oyklu trikaTboxylovýoh kyselin 0,04 až 0,08 M, ( a výhodou kyselinu
199 986 citrónovou, 2-ketoglutarovou nebo fumarobou, nebo asparagin 0,04 až 0,08 M, déle Ca Z+ 5 až lOmM, KHg P04 0,025%, MgS0^.7Hg0 0,025%, KC1 0,012% a další anorganické sole ve stopových mnižstvích načež po 14 až 21 denní submersní fermentaci se z fermentačního media Isolují konečné produkty* Stejným způsobem se agroklavin a elymoklavin vyrábějí za použití dalších mutant CP7/63 a CP7/274.
Pro vysokou produkci alkaloidů je nutné použít fermentační půdu, která obsahuje saoharosu v komblnaol s kyselinou oitronoVou 2- ketoglutarovou nebo fumarovou nebo asparagin a ionty CA · Naproti tomu glukosa i fruktosa snižují výtěžek alkaloidů o 50 až 70 % a navíc v případě mutant CP7/5 a CP7/63 podporují nežádoucí tvorbu extracelulárních glukanů. Na půdě se sorbltem nebo mannitem se všechny mutanty vyznačují chudjnn růstem a nízkou produkční aktivitou. Permentace alkaloidů na produkční půdě CS2 je dvoufázová. Pro první fázi je příznačný paralelní nárůst alakloidů, biomasy a počtu spor* Druhou fázi fermentaoe charakterizuje nárůst produkce alkaloidů, téměř setrvaly stav objemu biomasy, počtu spor a hladiny extracelulárních glukanů.
Dále je uveden příklad způsobu výroby alkaloidů agroklavinu a elymoklavinu podle vynálezu.
P Ř t K 1 1 D
Příprava inokula. Výohozí inokulum pro submersní fermentaci alkaloidů se připraví smytím spor z 30 denní kultury produkčního mutanta vyrostlého na agarové půdě T2 ( C. Spalla, Genetice of IndUBtrial Microorganisms. Eds. Z.Vaněk, Z. Hoolálek a J. Cudlín. Elsevier, Amsterdam 1973, p.393). Získané suspense spor se upraví na přibližnou koncentra-
| β 7 % *·Π ol 10 až 10' spor.ml. . Z této suspense se přenese 1,5 až 2 ml do 60ml tekute živné půdy TI ( A.Stolí et al. Helv. Chim. Acta 37. 1815 ( 1954 )) v Erlenmeyerových bankách ( 300 ml ) a Inkubuje se 7 až 9 dnů v temnu při 24£l °C na rotačním třepacím stroji | |
| ( 240 ot.min. *·, | exoent 5,5 om i. Výsledné submersní inokulum je tvořeno krátkými fr»g- |
| menty vláken, sporami * chomáčky mledého myceli^,. Indikátorem kvalitního inokul* je rů - | |
| žová pigmentace. | |
| Půd. T2 ( g.l 1 ) | Púda-Tl g.l |
| SeCharos* 100 | Batcharosfc 100 |
| L-asparagin 10 | L-asparagin 10 |
| Ca <IO3)2.4H2O | 1 L-cyetein.HCl 0,1 |
| kvasničný extrakt | 0,1 Ca(N03)2.4H20 1,0 |
| KH2P°4 | 0,25 kvasničný extrakt 0,1 |
| MgS04.7H20 | 0,25 KH2?94 0.25 |
| KC1 | 0,12 MgS04.7H20 0,03 |
| PeS04.7H20 | 0,02 ZnS04.7H20 0,02 |
| ZnS04.7H20 | 0,015 dest. H20 |
| _____________________________ | |
| agar Difce | 20 |
| pH 5,5 po 15 min sterilizaci v autoklávu | |
| dest. H-0 | Λ |
| £ | při 105 C |
pH 5,5 po 15 min sterilizaci v autoklávu při 105 °C
199 986
K úpravě ρΗ půd ΤΙ a Τ2 se použije 2,5M NaOH.
Vlastni fermentace alkaloidů» Submersní inokulum se v množství 3 až 5 ml přenese do Erlenmeyerových baněk (300 ml) s 60 ml níže uvedeného fermentacního media CS2 a inr kubuje se 14 až 21 dnů v temňu při 24χ1 °C na rotačním třepacím stroji ( 240 ot.min“\ excentr 5,5 cm).
Půda CS2 sacharosa 100 g kyselina citrónové 0tQ8M ( nh4)2so4 lOg
CeClg l,2g
KH2PO4 O,25g
MgS04.7H20 O,25g
KOI 0,12g
PeS04.7H20 0,02g
ZnS04.7H20 0,015g dest.HgO ad lOOOml pH 5,5 po sterilizaci media v autoklávu 15 min při 105°C a úpravě pomocí 2,5M NaOH.
Extrakce směsi agroklavinu a elymoklavinu z fermentaoní tekutiny. Fermentační tekutina zbavené myoelia filtrací nebo eentrifugaci se upraví amoniakem na pH 9. Přidá se k ní dvojnásobné množství diethyletheru, a po 30 min extrakci na magnetickém míohadle se oddělí etherové vrstva. K oddělené fermentační tekutině se přidá stejný objem směsi chloroform-isopropanol (80χ20 ) a znovu se 30 min extrahuje. Po oddělení chloroformové vrstvy se extrakce opakuje. Získané extrakty se spojí a suší síranem amonným. Po odstranění sušidla ee roztok při těplotě 30 °C a za sníženého tlaku odpaří do sucha. Účinnost takto provedené extrakce dosahuje přibližně 99% z celkového množství alkaloidů ( měřeno fotometricky ). Obsahuje-li fermentační tekutina nadměrné množství glukanů, tyto se před extrakcí alkaloidů odstraní vysrážením ethanolem ( 1 díl fermentační tekutiny + 1 díl ethanolu )· Po odstranění glukanů oentrifbgeeí, se směs za sníženého tlaku zahustí na původní objem a alkaloidy se extrahuji výše popsaným způsobem. Výtěžnost celkových alkaloidů a percentuální zastoupení agroklavinu a elymoklavinu v alkaloidové směsi 14 denní submersní kultury jsou znázorněny v Tabulce 1.
TABULKA 1
| Mutant | celkové alkaloidy (g.agroklavinu ) -1 | Agroklavin | Blymoklavin |
| % | |||
| CP7/5 | 3,9 | 77 | 23 |
| CP7/63 | 3,2 | 94 | 6 |
| CP7/274 | 1.8 | 70 | 30 |
199 986
Dělení agroklavlnu a elymoklavinu, Surový agroklavin a elymoklavin se oddělí sloupcovou ohromatograflí na silikagelu o velikosti ěástlo 100 až 200 nm ( Serva ). Jako eluční soustavy se používá směsi ohloroform-methanol-amoniak ( 80:20:0,02), Jednotlivé frakce se analyzují metodou ohromatografie na tenké vrstvě v téže soustavě. Frakce s jednotlivými alkaloidy se spojí a za sníženého tlaku odpaří do sucha. Krystallzaoe agroklavlnu se provádí z etheru, krystallzaoe elymoklavinu z methanolu.
Stanoveni agroklavlnu a elymoklavinu. Kvantitativní analysa jednotlivých vzorků se provádí pomooí vysokoúěinné kapalinové ohromatografie ( HPLC). Alakloidy se extrahují výěe popsaným postupem. Vzorky surovýoh alkaloidů se ponechají v suohém stavu. Těsně před měřením se rozpustí v soustavě ether-ethanol (84:16). Takto upravené Vzorky se přímo dávkují do kolony kapalinového ohromatografu ( Varian LC 8500). Detekce se provádí při vlnovýoh dálkách 225, 240 a 282 nm na UV detektoru. Stacionární fází HPLC je modifikovaný silikagel ( Liohrosorh NH2, Merok) o velikosti ěástlo 10 um umístěný v koloně 250 nm dlouhé o vnitřním průměru 2 mm. Mobilní fázi tvoří soustava diethyléther-ethanol (84:16).
Relativní retenční čas agroklavlnu odpovídá hodnotě 1,00, v případě elymoklavinu hodnotě 3,22. Uvedené hodnoty dokumentují dokonalé rozdělení agroklavlnu a elymoklavinu. Relativní koncentrace obou složek směsi alkaloidů jsou vypočítány metodou vnitřní aormallzaoe na základě známýoh speoifiokýoh absorpčních koeficientů.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1.Způsob výroby alkaloidů agroklavlnu a elymoklavinu submersní fermentací,vyznačený tím,že se mutant houby Clavloeps purpurea CCM F-630 a/nebo CCM F-631 a/nebo CCM F-632 O * inkubuje na živných mediíoh o pH 5,2 až 5,5 v temnu při 24+1 0,přičemž se získají spory kultury vyrostlé na agarovém mediu,které jsou přeneseny do tekutého lnokulačního media, obsahujícího saoharosu 10%,L-asparagin 1 %,L-oystein.HCl 0,01 %,Ca(N0^)2.4H20 0,1 %, kvasniční extrakt 0,01 %,KH2P0^ 0,02 % a dalěí anorganické sole ve stopových množstvích, a ze kterých po 7 až 9denní submersní kultivaci vyrůstá inokulum,jímž se zaočkuje fermentační medium obsahujíoí saoharosu 8 až 10 %,meziprodukt oyklu trikarboxylových kyselin 0,04 až 0,08 M,s výhodou kyselinu oitronovou,2-ketoglutarovou nebo fumarovou,nebo asparagin 0,04 až 0,08 M,dále Ca2+ 5 až 10mM,KH2P04 0,025 %, MgS04.7H20 0,025 %,KC1 0,012 % a dalěí anorganické sole ve stopových množstvích,načež po 14 až 21denní submersní fermentaol se z fermentačního media isolují konečné produkty.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS251778A CS199986B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS251778A CS199986B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS199986B1 true CS199986B1 (cs) | 1980-08-29 |
Family
ID=5362555
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS251778A CS199986B1 (cs) | 1978-04-19 | 1978-04-19 | Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS199986B1 (cs) |
-
1978
- 1978-04-19 CS CS251778A patent/CS199986B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20080175927A1 (en) | Method for preventing plant diseases | |
| CN106978350B (zh) | 一株黑曲霉及其在普洱茶素类化合物的制备中的应用 | |
| KR102140050B1 (ko) | 갈란타민 생산을 위한 석산 부정근의 생산방법 | |
| US20210238538A1 (en) | Endophytic fungus from gingko, metabolite product and use thereof | |
| Fox et al. | The formation of roccellic acid, eugenitol, eugenetin, and rupicolon by the mycobiont Lecanora rupicola | |
| CN113480587B (zh) | 一种高效提取蝉花虫草子实体中n6-(2-羟乙基)腺苷的方法 | |
| Subrahmanyam et al. | Occurrence of aflatoxins and citrinin in groundnut (Arachis hypogaea L.) at harvest in relation to pod condition and kernel moisture content | |
| Ohmomo et al. | Detection of roquefortines in Penicillium roqueforti isolated from moulded maize silage | |
| Mazars et al. | Phomozin, a phytotoxin from Phomopsis helianthi, the causal agent of stem canker of sunflower | |
| Kamimura et al. | Growth and alkaloid production of the cultured cells of Papaver bracteatum | |
| CS199986B1 (cs) | Způsob výroby alkaloidů agrolclavinu a elymoklavinu submersní fermentací | |
| Kozlovsky et al. | Penicillium aurantiogriseum dierckx 1901: producer of diketopiperazine alkaloids (roquefortine and 3, 12-dihydroroquefortine), isolated from permafrost | |
| Holzmann-Wirth et al. | Anti-fungal substances extracted from Neotyphodium endophytes | |
| Jimenez et al. | Detection and quantification of patulin and griseofulvin by high pressure liquid chromatography in different strains of Penicillium griseofulvum Dierckx | |
| Katayama et al. | Isolation of Sclerosporin, a Sporogenic Substance, from Sclerotinia fructicola | |
| CN107603922B (zh) | 海绵共生链霉菌及其发酵生产星形孢菌素的方法和应用 | |
| Pertot et al. | Lyophilization of nonsporulating strains of the fungus Claviceps | |
| Reshetilova et al. | Synthesis and metabolism of roquefortine in Penicillium species | |
| EP3086794B1 (en) | Process for the conversion of colchicinoids to their 3-glycosylated derivatives via their respective 3-demethyl analogues | |
| CN113527247A (zh) | 一种嗜氮酮类多聚体化合物及其制备方法和应用 | |
| CN119591568B (zh) | 一种单萜Trichodesmic acid的制备方法及其应用 | |
| CN107043795B (zh) | 利用喜树悬浮细胞生产喜树碱和10-羟基喜树碱的方法 | |
| KR850001939B1 (ko) | A-32724 항생물질의 제조방법 | |
| EP0472186A2 (en) | Antibiotics AB-023 and process for preparing them | |
| CN101275116A (zh) | 一种混合内生菌,以及用该内生菌制备石杉碱甲的方法 |