CS198554B1 - Spósob jednostupňovej přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče - Google Patents
Spósob jednostupňovej přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče Download PDFInfo
- Publication number
- CS198554B1 CS198554B1 CS776877A CS776877A CS198554B1 CS 198554 B1 CS198554 B1 CS 198554B1 CS 776877 A CS776877 A CS 776877A CS 776877 A CS776877 A CS 776877A CS 198554 B1 CS198554 B1 CS 198554B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- polyethyleneimine
- isothiocyanate
- polyethylenimin
- single stage
- enzyme carrier
- Prior art date
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 title claims description 4
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 claims description 17
- ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N thiophosgene Chemical compound ClC(Cl)=S ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229920005601 base polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethyl acetate Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000007046 ethoxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
Predmetom vynálezu je nový spósob přípravy enzýmového nosiča na báze polyetylénimínu so substituovanými primárnými aminoskupinami tiofosgénom.
Doteraz známy spósob přípravy izotiokyanátových enzýmových nosičov na báze polyetylénimínu je spósob dvojstupňový tí. Kuniak, J. Zemek, Čsl. pat. č. 159063), kde v prvom stupni póvodne vodorozpustný polyetylénimín sa nechá zosieťovať epicMorhydrínom a v následnom stupni prebieha substitúeia primárných aminoskupín tiofosgénom. Nedostatok uvedeného postupu je v tom, že substitúeia s tiofosgénom prebieha už na nerozpustnom zoaieťovanom polyetylénimíne, t.j. v heterogénnej fáze v dósledku čoho je distribúcia -NCS skupin vo výslednom produkte nie rovnoměrná.
Uvedený nedostatok sa dá eliminovat novým postupom, ktorý je založený na substitúcii primárných aminoskupín polyetylénimínu tiofosgénom v homogenněj fáze, t.j. priamo v roztoku, pričom vhodné zosietenie makromolekúl substituovaného polyetylénimínu prebieha na úrovni reakcie časti vzniklých -NCS skupin s volnými primárnými aminoskupinami v reakčněj zmesi.
Základný polymér polyetylénimínu sa komerčně vyrába pře rózne odvetvia priemyslu e je preto dostupnější a lačnější ako iné typy polymérov. Vlastná reakoia s tiofosgénom je velmi jednoduchá, a preto sú předpoklady, že výsledný nosič bude podstatné lačnější ako preparáty vyrábané podlá doteraz známých postupov (t. Kuniak, J. Zemek, čsl. pat. č. 159063; S. A. Barker, P. J. Somers, E. M. Crook a i., Res. 14, 287, 1970).
198 554
Podstata vynálezu spočívá v tom, Se vodný roztok komerčného polyetylénimínu o koncentrácii 1,0 až 40 % sa nechá reagovat e tiofosgénom v molárnom pomere 1 : 0,25 až 1 : 2 za intenzívneho miešania pri teplote od 10 do 40 °C po dobu 2 až 5 hodin.
Vznikne polyetylénimía izotiokyanát obsahujúci až 150 |iekv. -NCS skupin na 1 gram výchočzieho polyetylénimínu, ktorý je velmi vhodným nosičom pre viazanie rdznych enzýmov a látok a -SH skupinami.
Přípravu enzýmového nosiča a vazbu proteinu možno vyjádřit naaledovnou reakčnou schémou:
B - NH2 + CSC12 —- R - NCS + 2 HC1 (1)
R - NHK
R -NCS + H2N - R -* C = S (2)
R - NH
R - NCS + HS - Protein -*~R - NH - C - S - Protein (3)
B S
R « Polyetylenimín
Výhodou nového spdsobu přípravy vhodného enzýmového nosiča je, že:
- umožňuje přípravu enzýmového nosiča s absoliitne homogénnou distribúciou -NCS skupin,
- umožňuje přípravu preparátov tak rozpustných vo vodě a niektorých organických rozpúšťadlách, ako i nerozpustných,
- umožňuje vyššiu účinnost hlavněj reakcie aminoskupin 9 tiofosgénom.
Příklad 1
1,8 g 50 56-ného vodného roztoku polyetylénimínu (0,02 molu) o strednej molekulovéj váhe 40 000 sa rozpustí v 18 ml deatilovanej vody a vzniklý roztok sa neutralizuje kyselinou solnou. Do roztoku sa přidá 10 g práškového CaCOj a do vzniklej suspenzie sa za intenzívneho miešania na magnetickej miešačke přidá 2,3 g tiofosgénu (0,02 molu). Po hodinovom mieSaní pri teplote 18 °C se do reekčnej zmesi přidá nových 2,3 g tiofosgénu. Po 3elšom dvojhodinovom miešaní sa z reakčnej zmesi odsaje nadbytečný CaCOj. Filtrát sa v deliacom lieviku pretrepe chloroformom (25 ml), vodná vrstva sa zriedi destilovanou vodou (50 ml) a zahustí vo vákuu pri 40 °C na menší objem, čím aa získá vodný roztok surového finálneho produktu, použitelného na impregnáciu vhodných povrchov.
Příklad 2
Postup podlá příkladu 1, s tým rozdielom, že získaný vodný roztok surového produktu sa odpaří vo vákuu do sucha a extrahuje do chloroformu (500 ml). Opatrným oddestilovaním chloroformu ea získá žiadaný produkt vo formě hnedej, vo vodě dobré rozpustnéj pasty, ktorá etátim prechádza do vo vodě nerozpustnej formy. Obsah -NCS skupin sa stanovil titráciou cysteinem (U-^C) na 114 pekv. na 1 g východzieho polyetylénimínu.
Příklad 3
Postup podlá příkladu 1, a tým rozdielom, že vodný roztok polyetylénimínu sa před
198 554 přidáním tiofosgénu neneutralizuje. Získá sa produkt s obsahom síry 6,9 % a s obaahom -NOS skupin 82 pekv. na 1 g východzieho polyetylénimínu.
Vynález má Široké možnosti využitia pre přípravu pútaných enzýmov, a to tak pře účely výskumné, tak i aplikáciu v rdznych odvetviach potravinářského priemyslu.
Claims (1)
- Spdsob přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče vyznačujúci sa tým, že na vodný roztok komerčného polyetylénimínu o koncentrácii 1,0 až 40 % sa pdsobi tiofosgénom v molárnom pomere 1 : 0,025 až 1 : 2 za intenzívneho miešania pti teplote od 10 do 40 °C po dobu 2 až 5 hodin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS776877A CS198554B1 (cs) | 1977-11-24 | 1977-11-24 | Spósob jednostupňovej přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS776877A CS198554B1 (cs) | 1977-11-24 | 1977-11-24 | Spósob jednostupňovej přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS198554B1 true CS198554B1 (cs) | 1980-06-30 |
Family
ID=5427372
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS776877A CS198554B1 (cs) | 1977-11-24 | 1977-11-24 | Spósob jednostupňovej přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS198554B1 (sk) |
-
1977
- 1977-11-24 CS CS776877A patent/CS198554B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO1995017886A1 (en) | Water soluble non-immunogenic polyamide cross-linking agents | |
| US3778339A (en) | Paper containing a polyamidepolyamine-epichlorohydrin wet strength resin | |
| US3813362A (en) | Water-soluble polyamidepolyamines containing phenylene linkages and processes for the manufacture thereof | |
| US7091305B2 (en) | Copolymers of amino acids and methods of their production | |
| US4102827A (en) | Novel polyelectrolytes | |
| US3970597A (en) | Novel substituted polyamides and process for producing them | |
| US3733290A (en) | Polyamidepolyamine-epichlorohydrin wet strength resin | |
| CN101323662A (zh) | 可生物降解超支化脂肪族聚酰胺及其制备方法 | |
| Dragan et al. | Polyelectrolyte complexes. I. Synthesis and characterization of some insoluble polyanion‐polycation complexes | |
| US3927242A (en) | Substrate coated with a layer of polyquaternary polyelectrolytes | |
| Zhuk et al. | Advances in the chemistry of polyethyleneimine (polyaziridine) | |
| CS198554B1 (cs) | Spósob jednostupňovej přípravy polyetylénimín izotiokyanátového enzýmového nosiče | |
| CN107778476B (zh) | 一种超分子水凝胶材料的构建方法及应用 | |
| EP1060208A1 (en) | Production of succinimide copolymers | |
| Lloyd et al. | Coupling of acrylic polymers and collagen by use of a water‐soluble carbodiimide. II. Investigations of the coupling mechanism | |
| JP2745381B2 (ja) | スルホン酸基含有ポリアミドの製造方法 | |
| US6541601B1 (en) | Unsaturated side chain polyamide polymers | |
| CN101906210A (zh) | 用氨基稀土催化剂催化合成聚肽的方法 | |
| RU2781155C1 (ru) | Лактат N,N-диаллилакриламида и способ его получения | |
| CN119528840B (zh) | 含有靛红酸酐官能团的乙烯基化合物、其共聚物及其制备方法和应用 | |
| SU787415A1 (ru) | Способ получени водорастворимых окислительно-восстановительных полимеров | |
| JPH01158003A (ja) | 縮合反応性部位を有する不溶性ポリマー物質およびその製造方法 | |
| RU2781156C1 (ru) | Способ получения N,N-диаллилглутаминовой кислоты | |
| RU2697529C1 (ru) | Способ получения ациклических полиимидов | |
| SU1643043A1 (ru) | Способ сгущени суспензий |