CS196162B1 - Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type - Google Patents

Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type Download PDF

Info

Publication number
CS196162B1
CS196162B1 CS775977A CS775977A CS196162B1 CS 196162 B1 CS196162 B1 CS 196162B1 CS 775977 A CS775977 A CS 775977A CS 775977 A CS775977 A CS 775977A CS 196162 B1 CS196162 B1 CS 196162B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
agar
conidia
citric acid
sporulation
acid
Prior art date
Application number
CS775977A
Other languages
English (en)
Inventor
Jindrich Leopold
Jaroslav Ulc
Original Assignee
Jindrich Leopold
Jaroslav Ulc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jindrich Leopold, Jaroslav Ulc filed Critical Jindrich Leopold
Priority to CS775977A priority Critical patent/CS196162B1/cs
Publication of CS196162B1 publication Critical patent/CS196162B1/cs

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

SOCIALISTICKÁ I POPIS VYNÁLEZU K AUTORSKÉMU OSVĚDČENÍ 196162 (H) (Bl)
/22/ Přihlášeno 24 11 77/21/ /PV 7759-77/ (51) jint. Cl.3C 12 N 1/16
ÚftAD pro vynálezyA OBJEVY (40) Zveřejněno 29 06 7 9(45) Vydáno 15 06 8 2 (75)
Autor vynálezu LEOPOLD JINDŘICH doc. dr. ing., PLZEŇ a ULC JAROSLAV ing., ČERNICE (54) Pevná kultivační půda indukující intensivní produkci konidií u hubdruhu Aspergillus niger 1
Vynález se týká intensivní produkce ko-nidií u takových kmenů houby druhu Aspergil-lus niger, které na doposud známých pevnýchsporulačních půdách tvoří spory jen obtíž-ně nebo spory se z těchto půd nedají získatnebo pouze s obtížemi, použitím minerálnísporulační půdy obsahující vedle sladujako zdroj uhlíku a energie glycerol neboglycerol a kyselinu citrónovou.
Houby tvořící Tnyceliuro, ke kterým patříhouba druhu Aspergillus niger, lze kulti-vovat v laboratoři po naočkování frukti-fikačních orgánů /konidií/ nebo vegetativ-ních částí houby /mycelíálních fragmentů/v poměrně malém množství do kultivačníhomédia. Používá-li se však houba za účelemprodukce nějakého metabolítu, jako kyseli-ny citrónové, kyseliny glukonové a podob-ně, v provozním měřítku, lze použít jakoinokulační materiál pouze konidie produkčníhouby, které musí být k dispozici při kaž-dém startu kvasného cyklu v dostatečnémmnožství. Za určitých podmínek vyrůstajíz tak zvaných patních buněk mýcelia jakoasexuální fruktifikační orgány konidioforyse sterigmaty, na jejichž koncích se vytvo-ří řetězce konidií.
Aby se konidie daly získat škrabánímnebo odsáváním, jsou dotyčné kultury kulti-vovány na pevných, tzn. agarových půdách,Předpokladem poměrně rychlé, předevšímvšak intensivní produkce konidií je určitésložení kultivační /sporulační/ půdy, kterébývá někdy specifické pro jednotlivé kmenyAspergillus niger. Pro průmyslové kmenydruhu Aspergillus niger a jiných byla vy-pracována řada předpisů pro složení spo- 2 rulačních půd, které byly z Části uveřej-něny v literatuře /na příklad C.Booth,Methods in microbiology,Vol.4,Acad.Press,London-New York 1971; W . F .Harrigan, M.F.
Mc Cance,Laboratory methods in microbiolo-gy,Acad.Press London-New,York 1966; G.SmithAn íntroduction to industrial mycology.6.Ed.Arnold Ltd. London 1969/. Obvykle jsoupoužívána nutričně chudá média, která prýlépe podporují sporulaci než bohatá média.Několik speciálních sporulačních médií proAspergillí doporučili Moyer,Wells,Stubbs,Herrick.a Mey /cit.dle Thom C.M. a R.B.Raper,A. manual of the Aspergillí.The Wil-liams- Wi lkins Comp.,Baltiraore 1945/. Jsouto obvykle materiální média obsahujícídraslík /někdy i sodík/, hořčík, fosfát,dusík /obvykle ve formě dusičnanu amonné-ho/ a glukosu s přísadou sladu nebo autoly-sátu kva-sinek; jiná sporulační média obsa-hují místo glukosy sacharosu a dusík veformě peptonu. Většina kmenů houby Ásper-gillus niger na těchto médiích vytváří vel-mi husté a stejnoměrně sporulující kultury,jejichž značné množství konidií se dásnadno získat škrabáním nebo odsáním.
Vyskytují se však kmeny houby· Aspergil-lus niger, které za zmíněných osvědčenýchsporulačních agarových půdách sporulujíneuspokojivě; sporulace je řídká, nestej-noměrná, hlavičky jsou malé a konidie senedají získat nebo jen s obtížemi, jeli-kož se kultura při doteku škrabadla nebotrubice vysavače rozmaže. Jindy zase jemyceliální vrstva, nesoucí konidiofory,krabatá, takže nelze konidie získat škra-báním, nebot mycel se trhá od agaru. Tako- 196162

Claims (3)

196162 vý nedostatek je velmi závažný, nebot pronedostačující množství inokulačního mate-riálu nelze dotyčnou kulturu aplikovatv provozu, i když má sebelepší produkčníschopnost i . Výše uvedené nedostatky běžných pevnýchsporulačních pud, projevující se při pěsto-vání některých kmenů houby Aspergillus niger,jsou odstraněny u agarových sporulačníchpůd podle vynálezu, jejichž podstatou jeobsah /vedle sladu/ glycerolu, někdy téžkyseliny citrónové jako zdroje uhlíkua energie. Byly zkoušeny alkoholy s jednou/methanol, ethanol/ a s dvěma /ethylengly-kol/ OH-skupinami, které neměly na sporula -ci houby efekt; teprve glycerol, dále sor-bitol a mannitol byly účinné. Z organickýchkyselin působily příznivě na sporulaci ky-seliny s dvěma karboxylevými skupinami/kyselina malonová, jantarová, glutarová/a s třemi karboxylovýrai a hydroxyskupinarai/kyseliny mléčná, jablečná/ a 3 třemikarboxylovýi/ii skupinami a jedziou hydroxy-skupinou /kyselina citrónová/. Na, půdách,které obsahují jednu nebo dvě 2 tec/htosloučenin, vyrůstají nezkrabatělé, s aga- „rem pevně spojené mycely s nesčíselnýmikonidiofory s černými hlavičkami, kterése dají bez obtíží seškrabat. Jako příklady jsou uvedeny následujícípůdy /'chemikálie jsou čisté pro analysy,sladový výtažek je uschován v ledničce,jinak začne brzo kvasit a je neupotřebi-telný/: Glycerol /100%/ 105 g /rfísp. to- muto množstvíodpovídaj ícímnožství méněkoncentrovanéhoglycerolu/ sladový extrakt /80%/ 45 g ΝΗχΝ03 0,45 g MgSO4-7H2O 0^06 g NaCl 15 CuSO^.S ll20 0,001 5g agar 30 g Doplnit destilovanou vodou na 11. U některých kmenů houby A. niger lze vynechat přísadu síranu mednatého. Jsou kmeny houby A. niger, u kterých s výhodou doplníme uvedenou půdu se 4 %kyseliny citrónové, zčásti neutralizovanés KOH tak, aby pH půdy bylo 4,8 až 5,0;zaručíme tím, že půda po vychladnutí ztuh- ne. Konidie získané z agarových půd podlevynálezu, lze použít pro hlubinné kvašeníjako takové nebo pro povrchovou fermentac.ive směsi se sterilním aktivním uhlím nebote sterilním uhličitanem vápenatým nebos oběma. Konidie vyklíčí v obou případechnormálně a výtěžky kyseliny citrónové zůstá-vají kultivací konidií na agarových pů-dách podle vynálezu nedotčeny. Z konzervydotyčného produkčního kmene Aspergillusniger přeneseme malé množství konidií dovhodné tekuté sporulační půdy a teprve
1. Pevná kultivační půda indukující in-tenzívní produkci konidií u hub druhuAspergillus niger, obsahující jako uhlíka-tý zdroj sladový výtažek, vyznačená tím,že jako další zdroj oblíku obsahuje 8 až12 % hmotnostních vícemocného alkoholuv rozmezí 3 až 6 C atomů a/nebo 1 až 5 %hmotnostních vícemocné kyseliny nebohydroxykyše 1iny v rozmezí 3 až 7 C atomů. 4 zde vytvořené konidie slouží k očkováníagarových sporulačních půd podle vynálezu.Tímto postupem se značně prodlouží Život-nost konzervy kmene houby Aspergillusniger . Agarová sporulační půda podle vynálezubyla zkoušena na řadě různých kmenů houbyAspergillus niger a osvědčila se na 60 %žních. Dále jsou uvedeny příklady sporulačníchagarových půd podle vynálezu. Byl zkoušenmorfologický vzhled kultur, snadnost sní-mání konidií z kultur a jejich biochemic-ká aktivita kvasnými pokusy na produkcikyseliny citrónové naočkováním na kvasnýmelasový substrát a stanovením kyselinycitrónové po ukončení kvasného pokusu. Příklad 1 Rozpustíme v destilované vodě množstvíglycerolu odpovídající 105 g 100% glyce-rolu, dále 45 g sladového výtažku /s 80 %sušiny/, 0,45 g dusičnanu amonného, 0,06 gsíranu horečnatého /se 7 H2O/» 15 g chlo-ridu sodného, 0,0015 g síranu mednatého/s 5 H2O/, 30 g agaru a dopídíme do 1 1vodou. Roztok se povaří ve smaltované ná-době, až je agar rozvařen, odpařená vodase doplní a agarový roztok se naleje například po 100 ml do 300 ml Erlenraeyefco-vých baněk, které se po uzavření vatovýmizátkami 1/2 hodiny sterilizují při pře-tlaku 0,5 atmosféry., nebo do misek, přičemžnemá být výška agarové půdy nižší 2 mm. Po vychladnutí se ztuhlé agarové půdynaočkují v Hansenově skřínce konidiemi hou-by Aspergillus niger a ínkubují se 8 až10 dnů při 32 °C. Na povrchu tenkého bí-lého mycelia se tvoří hustý porost vyso-kých konidioforů, nesoucích hustý koberecčerných hlaviček s nesčetnými konidiemi,které se dají snadno seškrabat nebo odsát.Po jejich naočkování na kvasné melasovéroztoky vyrostla normální, vrásněná a bí-lá mycelia a po týdenním kvašení byl vý-těžek kyseliny citrónové v průměru 77,5 %, . vztažen na nasazený cukr. Příklad 2 Byla připravena agarová sporulační pů-da jako u příkladu 1, která však byla do-plněna g kyseliny citrónové a takovýmmnožstvím hydroxidu draselného, aby pHpůdy bylo asi 5. Jinak bylo postupovánostejně jako u příkladu 1. Při sterilizacije třeba dbát na to, aby baňky s agaro-vou půdou byly co nejdříve po ukončenísterilizace vyjmuty z autoklávu; jinakhrozí nebezpečí, že agarová půda změkne.Vzhled kultur houby A. niger byl, po naoč-kování a inkubaci při 32 °, stejný jakou příkladu 1. Konidie se daly snadno se-škrabat. Při kvasných pokusech byl průměr-ný výtěžek kyseliny citrónové 78,1 %, po-čítáno na nasazený cukr. VYNÁLEZU
2. Pevná kultivační půda podle bodu 1,vyznačená tím, že jako vícemocné alkoholylze použít glycerol, sorbitol, manítol.
3. Pevná kultivační půda podle bodu 1,vyznačená tím, že jako organických více-mocných kyselin nebo hydroxykyselin lzepoužít kyseliny malonové, jantarové, glu-tarové, mléčné nebo citrónové. &*vrro£rafiA- p. sšvod 7. Mott
CS775977A 1977-11-24 1977-11-24 Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type CS196162B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS775977A CS196162B1 (en) 1977-11-24 1977-11-24 Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS775977A CS196162B1 (en) 1977-11-24 1977-11-24 Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS196162B1 true CS196162B1 (en) 1980-03-31

Family

ID=5427262

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS775977A CS196162B1 (en) 1977-11-24 1977-11-24 Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS196162B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US3634195A (en) Production of lipase
US20100086979A1 (en) Production of omega-3 fatty acids in microflora of thraustochytriales using modified media
JP3170644B2 (ja) 脂肪酸エステルまたは油の連続供給を用いる発酵によるソホロサイドの生産方法
CN107699556A (zh) 利用枯草芽孢杆菌制备d‑阿洛酮糖差向异构酶的方法
CN117511755A (zh) 一种扣囊复膜酵母及其用途
CN1067725C (zh) 一种利用微生物发酵生产α、ω-长链二元酸的方法
SK280654B6 (sk) Kmeň mikroorganizmu penicillium oxalicum var. arme
CN103074243B (zh) 一株伯克霍尔德氏菌qz7及其产生生物表面活性剂的应用
CS196162B1 (en) Solid cultivating medium inducing the intensive production of conidies at fungi of aspergillus niger type
Arnstein et al. Kojic acid biosynthesis from 1-C14-glucose
George et al. Improvement of tannase production under submerged fermentation by Aspergillus niger FBT1 isolated from a mangrove forest
US2121533A (en) Method of carrying out certain oxidative fermentation processes by bacteria
YANAGITA et al. Kinetic analysis of the region of protease formation in the hypha of Aspergillus niger
Krishnan et al. Some observations on the growth of Aspergillus niger from spore inoculum
Hopkins et al. FERMENTATION REACTIONS OF THE RINGWORM FUNGI: I. DIFFERENTIATION OF THE TRICHOPHYTA AND ALLIED GENERA FROM OTHER FUNGI
CA1140878A (en) Preparation of 2,5-diketogluconic acid
JP2523700B2 (ja) エステル加水分解酵素の製造方法
EP0570593B1 (en) Process for producing optically active norborneol
US6406904B1 (en) Process for preparing optically active 4-halogeno-1,3-butanediol and its derivative using pseudomonas
Scheld et al. Induction of dimorphism in the basidiomycete Lenzites saepiaria
RU2747583C1 (ru) Способ получения (2r, 3s)-изолимонной кислоты из подсолнечного масла с помощью дрожжей yarrowia lipolytica
IL30058A (en) Process for preparing antibiotic a10388(pyrrolnitrin)
JP4066287B2 (ja) 新規微生物およびそれを用いたエリスリトールの製造方法
Willershausen et al. Production of ligninases in stirred tank fermentors
JPH03247291A (ja) 発酵法によるメチルケトン及び/またはその対応アルコールの製造法、及び培養液の使用