CN219558971U - 一种外泌体过滤浓缩装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种外泌体过滤浓缩装置，涉及外泌体过滤浓缩技术领域，具体方案如下：一种外泌体过滤浓缩装置，包括依次连接的第一过滤装置、第二过滤装置和浓缩装置；第一过滤装置包括过滤器，第二过滤装置包括储液袋，过滤器底部设有滤膜并通过管相连接储液袋，滤膜粒径小于过滤器粒径，储液袋底部通过依次设有排阻柱和过滤除菌装置的管相连接收集袋；储液袋还连接一个带有中空纤维柱的循环管相，中空纤维柱顶部的管相设置分路并连接废液瓶；可以实现大规模提取外泌体，操作简单，所耗时间短，可满足大规模试验需求，提高纯度。

Description

一种外泌体过滤浓缩装置

技术领域

本实用新型涉及外泌体过滤浓缩技术领域，尤其是一种外泌体过滤浓缩装置。

背景技术

外泌体(Exosomes)是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，密度1.13-1.21g/m l，电镜下观察呈杯状或盘状，其内部携带了蛋白质、脂质、mRNA和mi croRNA等多种生物活性物质，外泌体是由细胞分泌并释放出来的，能够在血液等体液内传播，最后又被其他细胞吞噬，外泌体是细胞间通讯的重要介质。

目前常见的外泌体提取的方法有离心法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、色谱法等方法，离心法得到的外泌体量多，但纯度不足，电镜鉴定时会发现外泌体聚集成块，不利于后续实验；密度梯度离心法得到的外泌体纯度高，但梯度液的配置等前期准备工作复杂，耗时间并且量少；免疫磁珠法无需超速离心，但所用的洗涤液会影响外泌体生物活性，得到的外泌体较难进行后续研究；色谱法所收集的外泌体来自血浆，纯度不够高。

实用新型内容

针对现有技术存在的不足，本实用新型的目的是提供一种外泌体过滤浓缩装置，可以大规模提取外泌体，操作简单，所耗时间短，纯度高，可满足大规模试验需求。

为了实现上述目的，本实用新型是通过如下的技术方案来实现：

一种外泌体过滤浓缩装置，包括依次连接的第一过滤装置、第二过滤装置和浓缩装置；第一过滤装置包括过滤器，第二过滤装置包括储液袋，过滤器底部设有滤膜并通过管相连接储液袋，滤膜粒径小于过滤器粒径，储液袋底部通过依次设有排阻柱和过滤除菌装置的管相连接收集袋；储液袋还连接一个带有中空纤维柱的循环管相，中空纤维柱顶部的管相设置分路并连接废液瓶。

作为进一步的实现方式，所述第一过滤装置还包括原液槽，原液槽通过管相连接过滤器顶部。

作为进一步的实现方式，所述过滤器底部为锥形，所述滤膜粒径为0.5-3μm，过滤器过滤孔径为3-10μm。

作为进一步的实现方式，所述过滤器通过管相连接储液袋的第一进液口，所述收集袋通过管相连接储液带的第二出液口，所述循环管相与储液袋的第一出液口和第二进液口连接。

作为进一步的实现方式，所述循环管相通过分路管相连接废液瓶，分路管相上设置第一管夹。

作为进一步的实现方式，所述中空纤维柱的过滤孔径小于外泌体粒径，以除去水和其他小分子杂质。

作为进一步的实现方式，所述循环管相与所述第二进液口之间设置第一蠕动泵。

作为进一步的实现方式，所述第二出液口处的管相上设有第二管夹。

作为进一步的实现方式，所述第二管夹和排阻柱之间设有第二蠕动泵。

作为进一步的实现方式，所述过滤除菌装置的过滤孔径小于滤膜孔径。

上述本实用新型的有益效果如下：

本实用新型经过过滤器的一次过滤可以去除细胞培养上清液中粒径大于所述外泌体粒径的组分；经过滤膜的二次过滤可将其他细胞碎片隔离在滤膜上；第二过滤装置可对第一过滤装置过滤出的滤出液进行循环过滤，进一步排除其它组分干扰。通过设置循环管相，可以及时除去水和其他小分子杂质，提高纯度。浓缩装置中的排阻柱可以实现进一步浓缩，之后进入过滤除菌装置过滤以去除细菌杂质的干扰，整个外泌体过滤浓缩装置操作简单，耗时短，前期准备工作简单，外泌体纯度高，可以大量制备。

附图说明

构成本实用新型的一部分的说明书附图用来提供对本实用新型的进一步理解，本实用新型的示意性实施例及其说明用于解释本实用新型，并不构成对本实用新型的不当限定。

图1是本实用新型实施例中一种外泌体过滤浓缩装置的整体结构示意图。

图中：为显示各部位位置而夸大了互相间间距或尺寸，示意图仅作示意。

其中：1-第一过滤装置、11-原液槽、12-过滤器、13-滤膜、2-第二过滤装置、20-储液袋、21-第一进液口、22-第一出液口、23-第二进液口、24-第二出液口、25-第一管夹、26-废液口、27-废液瓶、28-中空纤维柱、29-第一蠕动泵、3-浓缩装置、31-第二管夹、32-第二蠕动泵、33-排阻柱、34-过滤除菌装置、35-收集袋。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本实用新型提供进一步的说明。除非另有指明，本实用新型使用的所有技术和科学术语具有与本实用新型所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

实施例一

本实用新型的一种典型的实施方式中，参考图1所示，一种外泌体过滤浓缩装置，包括依次连接的第一过滤装置1、第二过滤装置2和浓缩装置3；

第一过滤装置1包括过滤器12和原液槽11，第二过滤装置2包括储液袋20，其中过滤器12选用CHT50过滤器。过滤器12顶部和原液槽11通过管相连接。过滤器12底部为锥形，过滤器12底部设有滤膜13并通过管相连接储液袋20，滤膜13粒径小于过滤器12粒径。

具体的，所述滤膜13粒径为0.5-3μm，过滤器12过滤孔径为3-10μm，过滤器优选的过滤孔径为5μm，可对外泌体的细胞培养上清液进行初步过滤，从而去除细胞培养上清液中粒径大于所述外泌体粒径的组分。

滤膜13设置在过滤器底端端口处，优选的过滤孔径为1μm，滤膜13可对细胞培养上清液进行二次过滤，便于将其他细胞碎片隔离在滤膜13上，进一步排除其他大组分的干扰。

如图1所示，第二过滤装置2包括储液袋20，储液袋20顶部和底部各设置两个开口，顶部为第一进液口21和第一出液口22，底部为第二进液口23和第二出液口24，过滤器12底部滤膜13处通过管相和储液袋20的第一进液口21连接。

进一步的，储液袋20还连接一个带有中空纤维柱28的循环管相，循环管相两端分别连接第一出液口22和第二进液口23。中空纤维柱28顶部的循环管相上设置分路管相并连接废液瓶27，分路管相端部为废液口26，位于废液瓶27顶部。

储液袋20的第一进液口21可收集第一过滤装置1二次过滤的滤出液，储液袋20收集的第一过滤装置1的滤出液可经过第一出液口22滤出并经过中空纤维柱28进行过滤后经第二进液口23流入储液袋20中。

本实施例在靠近中空纤维柱28上端的分路管相一处向右延伸设有一条分路管相，分路管相上设置第一管夹25，第一管夹25可手动开关，打开第一管夹25，废液可经废液口26流入废液瓶27中，以便于及时的废液排出，提高纯度。

本实施例的中空纤维柱28的截留分子量为300Kd，所述中空纤维柱28的过滤孔径小于外泌体粒径，保证外泌体无法通过，从而能够除去水和其他小分子杂质。

循环管相上的中空纤维柱28下端与所述第二进液口之间设置第一蠕动泵29。第一蠕动泵29可将中空纤维柱28滤出的滤出液输入储液袋20中。

储液袋20的第二出液口24处的管相上设有第二管夹31，该管相连接收集袋35，具体为储液袋20底部第二出液口24处通过管相连接收集袋35，该管相上依次设有排阻柱33和过滤除菌装置34。第二管夹31和排阻柱33之间设有第二蠕动泵32，第二管夹31靠近第二出液口24设置。

本实施例的过滤除菌装置34采用含有0.22μm滤膜的过滤器。

第二管夹31可手动开关，可控制由第二过滤装置2滤出的滤出液流入浓缩装置3中。第二蠕动泵32可将第二过滤装置2滤出的滤出液输入排阻柱33中进一步浓缩提高纯度。

过滤除菌装置34的过滤孔径小于滤膜13孔径，本实施例过滤除菌装置34的过滤孔径为0.22μm，流经排阻柱33所得到的浓缩液可经过所述过滤除菌装置34过滤以去除细菌杂质的干扰。

本实施例在对外泌体提取时，首先将溶液注入原液槽，经过过滤器的一次过滤去除细胞培养上清液中粒径大于所述外泌体粒径的组分。之后经过滤膜的二次过滤将其他细胞碎片隔离在滤膜上，以排除其他大组分的干扰。

二次过滤后的滤出液进入储液袋中，第二过滤装置可对第一过滤装置过滤出的滤出液进行循环过滤，进一步排除其它组分干扰。通过设置循环管相，可以及时除去水和其他小分子杂质，提高纯度。

循环过滤后的滤出液进入浓缩装置中，经过排阻柱可以实现进一步浓缩，之后进入过滤除菌装置过滤以去除细菌杂质的干扰，得到的最终外泌体浓缩液可流入收集袋中收集。上述方案中，所述外泌体过滤浓缩装置操作简单，耗时短，前期准备工作简单，外泌体纯度高。

通过以上所述，本实用新型的外泌体过滤浓缩装置所获得的外泌体浓度较高、纯度高、结构清楚，可以用于大规模的外泌体过滤浓缩。

以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，对于本领域的技术人员来说，本实用新型可以有各种更改和变化。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，包括依次连接的第一过滤装置、第二过滤装置和浓缩装置；第一过滤装置包括过滤器，第二过滤装置包括储液袋，过滤器底部设有滤膜并通过管相连接储液袋，滤膜粒径小于过滤器粒径，储液袋底部通过依次设有排阻柱和过滤除菌装置的管相连接收集袋；储液袋还连接一个带有中空纤维柱的循环管相，中空纤维柱顶部的管相设置分路并连接废液瓶。

2.根据权利要求1所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述第一过滤装置还包括原液槽，原液槽通过管相连接过滤器顶部。

3.根据权利要求2所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述过滤器底部为锥形，所述滤膜粒径为0.5-3μm，过滤器过滤孔径为3-10μm。

4.根据权利要求1所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述过滤器通过管相连接储液袋的第一进液口，所述收集袋通过管相连接储液带的第二出液口，所述循环管相与储液袋的第一出液口和第二进液口连接。

5.根据权利要求4所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述循环管相通过分路管相连接废液瓶，分路管相上设置第一管夹。

6.根据权利要求5所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述中空纤维柱的过滤孔径小于外泌体粒径。

7.根据权利要求6所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述循环管相与所述第二进液口之间设置第一蠕动泵。

8.根据权利要求4所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述第二出液口处的管相上设有第二管夹。

9.根据权利要求8所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述第二管夹和排阻柱之间设有第二蠕动泵。

10.根据权利要求9所述的一种外泌体过滤浓缩装置，其特征在于，所述过滤除菌装置的过滤孔径小于滤膜孔径。