CN219284990U - 一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,属于医用试剂盒技术领域,具体技术方案为:包括上承载盒和下承载盒,上承载盒至于下承载盒的上方,上承载盒与下承载盒通过旋转轴相连,上承载盒内螺纹连接有四根螺旋释液器,下承载盒内通过隔板分割为四个反应盒,每个反应盒内布置有离心管,离心管的外壁与反应盒之间形成浸润槽,四个螺旋释液器内分别注入洗涤液、裂解液、终止液和预混液,试剂盒一次使用即可完成4组样本检测,减少外界因素对试剂本身的影响,本实用新型作为利用外周血进行糖尿病肾病早期筛查试剂盒,提高了疾病早期检出率和筛查准确率。
Description
技术领域
本实用新型属于医用试剂盒技术领域,具体涉及一种旋转式的糖尿病肾病早期诊断试剂盒。
背景技术
糖尿病肾病是糖尿病常见的慢性并发症之一,是导致肾衰竭的常见原因。糖尿病肾病主要见于糖尿病病程较长,病情较重,长期血糖、血压控制差的人群。研究表明,我国与糖尿病相关的慢性肾脏疾病的百分比超过了与肾小球肾炎相关的慢性肾脏疾病的百分比,并且它们之间的差距还在逐年增大,而糖尿病患者中约21.3%被归为患有慢性肾脏疾病。因此,早期诊断能显著减少糖尿病肾病的发生,特别是可延缓糖尿病肾病进展为终末期肾病。
目前,临床上对糖尿病肾病的早期筛查主要方法为肾功能指标检测、尿微量白蛋白检测和肾脏穿刺活检等。其中,肾功能指标检测在糖尿病肾病早期诊断具有较大的局限性;尿微量白蛋白检测中微量蛋白尿仅是肾小球损伤的一个标志,对糖尿病肾病并无特异性;而肾脏穿刺活检是一种创伤性检查且检查条件苛刻,需掌握好适应症和禁忌症。这些检查方法都具有较大的局限性的同时,市面上已有的相关试剂盒,其检测结果对于糖尿病肾病不具有特异性,仍需后期排查其他病因,繁琐复杂且容易漏诊,漏诊风险极大,易错过最佳治疗时间,只能作为糖尿病肾病的辅助检测手段。
RT-qPCR(实时荧光逆转录-聚合酶链式反应)是实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质标记每次PCR循环后产物总量的方法,通过内参对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析。然而市场上相关试剂盒设计甚少,无法普及基层病理科,原因是试剂盒仅提供反应试剂,例如无外界污染的无菌环境、适宜的反应温度以及定量添加反应试剂的试剂盒无法提供。以RNA为模板进行定量PCR反应,在实验过程中逆转录和PCR反应可在一管内进行,不需要额外的开管和移液操作简化操作流程,降低了样本交叉感染的风险。
非编码RNA作为标志物进行糖尿病肾病疾病检测与病情评估的检测方法,因荧光定量PCR的敏感度极高,能够实现对痕量物质的高精度定量,即使是非编码RNA含量极微的血清样本,也能实现非编码RNA定量。同时,因非编码RNA在人体内分布广泛,不仅存在于器官、骨骼和肌肉,在外周血、尿液和组织液也普遍存在,且其稳定性高,相较于其他容易被机体代谢的物质,不容易受到检测时间的影响。
现有筛查技术具有检查项目针对糖尿病肾病特异性低、操作繁琐、创伤性较大的问题。目前市面上已存在的试剂盒基本只能存放一组样本所需检测试剂,对一组样本进行检测,一个试剂盒无法实现对多组样本的检测,无法对受试者样本进行检验试剂的定量添加。
病理科医生采用RT-qPCR技术对外周血样本中的非编码RNA进行检测时,需移液枪等器械完成对样本的多次移液、混匀和试剂添加工作,操作繁琐,并且过程中会造成对样本的损耗,降低实验准确率。
现有的试剂盒大多采用普通塑料作为主体材料,使用完毕后需采用焚烧或掩埋等手段处理,将对环境造成严重损害。
在试剂的反应过程中,多项步骤需要使反应液和试剂在存放和反应的过程中保持合理且适宜的温度,以免影响反应的速率,目前需要对该技术进行一定的技术攻关和突破。
现有的糖尿病肾病早期诊断的试剂盒在使用过程中需要医护人员将试纸插入血清中进行检测,试纸和血清都暴露在外部环境中,易造成检测结果的误差,且需要较高的检测难度,不便于普通人员操作,进而限制了糖尿病肾病早期诊断的试剂盒的普及率,不利于对糖尿病肾病防治,需解决操作度和普及率的问题。
发明内容
为解决现有技术存在的技术问题,本实用新型提供了一种旋转式的糖尿病肾病早期诊断试剂盒,操作简便,错配率低,成本大大降低。
为实现上述目的,本实用新型所采用的技术方案为:一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,包括上承载盒和下承载盒,上承载盒至于下承载盒的上方,上承载盒与下承载盒通过旋转轴相连,上承载盒相对于下承载盒可转动,上承载盒相对于下承载盒可分离。
上承载盒内布置有四个承载模块,四个承载模块大小一致,每个承载模块上均竖向开有螺纹通孔,螺纹通孔至于对应承载模块的中心,每个螺纹通孔内螺纹连接有螺旋释液器,螺旋释液器的顶端设有旋钮,旋钮旋入至螺旋释液器内实现螺旋释液器顶端的密封,螺旋释液器的底端设有滴液口,液体通过滴液口向下滴出。
通过计算各个反应试剂添加量,设计相应释液器管身横切面直径,使用者旋转旋钮固定周数,即可向下方反应离心管中添加定量试剂,同时当螺旋释液器中储存足够试剂时,单个试剂盒即可满足对多组样本的试剂添加。
下承载盒内通过隔板分割为四个反应盒,四个反应盒大小一致,每个反应盒内布置有离心管,离心管竖直布置,离心管至于对应反应盒的中心,离心管的上端开口。离心管的外壁与反应盒之间形成浸润槽,在浸润槽内注入水,创造反应所需的温度条件,减少温度对反应速率的影响。
离心管直接采用适配于常见规格离心机大小的离心管,反应全程可在一管中完成,避免试剂的移液操作所带来的损耗。
四个螺旋释液器为洗涤液释液器、裂解液释液器、终止液释液器和预混液释液器,从上至下看,洗涤液释液器、裂解液释液器、终止液释液器和预混液释液器按照顺时针方向等角度间隔布置,试剂盒一次使用即可完成4组样本检测。试剂盒上下两部分分离后,即可将离心管快速拿出进行离心和混匀操作,试剂盒中的螺旋释液器和反应离心管均可拿出。
螺旋释液器管身、螺旋释液器中间部螺旋式吻合处采用一种具有特殊结构的超疏水和抗菌性能优异的弹性体医用复合材料。该材料通过将疏水性纳米银粒子负载碳纳米管微球与医用弹性体混合,经过复型硫化后得到。该弹性体材料具有抗静电、防尘、防污染和除菌的功能,可满足血液样品的实验环境要求。其超疏水性质能极大程度减少试剂的挂壁残留,保证实验过程的高度准确性,同时能够有效隔离细菌接触,避免释液器中试剂被污染。
上承载盒与下承载盒均为正方形截面的方块形结构,上承载盒与下承载盒的横截面积大小一致。
旋转轴的顶端开口,在旋转轴内放入封口膜,封口膜的顶端可略高于旋转轴的顶端,方便封口膜取出,旋转轴的上端口通过上端盖密封,保证封口膜的清洁。
封口膜为一种灭菌性易撕复合层状金属材料,作为封口膜,具有密封性好、易撕等优点,同时具有抗腐蚀、抗氧化、耐酸解、可长期保存等特性。该材料包含但不限于印刷基层和热封层,两层之间通过双组份聚氨酯粘合剂粘合而成,使复合膜表面具有耐高温灭菌性能。其次,试剂盒储存封口膜设置有热封层和预撕线,不需大力就能够做到对膜的平顺剥撕,同时揭开无残留,避免离心管口实验试剂残留,提高测验结果准确性,并且满足多组样本离心操作需要。
上承载盒、旋转轴和下承载盒均为可降解的二氧化碳共聚物材料,具有良好的阻隔性、阻氧性和可完全生物降解的优点,使用后可填埋焚烧处理,只产生水和二氧化碳。该材料在通过多种改性剂与提纯后可达到医用标准的医用二氧化碳共聚物共同作用,提高了力学性能与机械性能,满足对试剂盒的强度要求,同时使试剂盒成品具有抗菌性能。
本实用新型与现有技术相比,具体有益效果体现在:
一、本实用新型作为利用外周血进行糖尿病肾病早期筛查试剂盒,提高了疾病早期检出率和筛查准确率。
二、采用一步法RT-qPCR,使逆转录和PCR反应在一管内进行,简化操作流程,比起传统的先RT后PCR减少了试剂盒成分的冗杂,也更加节省时间,在cDNA合成与扩增之间不需要打开盖板,减少污染机会,减少了RNA二级结构, 聚合酶具有校正活性,减少 PCR 反应的错配率。
三、本试剂盒运用可旋转式分离盒体,相比传统的试剂盒,旋转式的设计满足单个试剂盒对多组样本的试剂添加。同时试剂盒上下两部分分离后,可将离心管快速拿出进行离心和混匀等操作,总体方便快捷,大大节省了操作时间,降低了时间成本。
四、螺旋释液器采用螺旋式设计,采用弹性体医用复合材料以及与中间部采用螺旋式吻合结构连接旋钮与管体,两者吻合度高,减少外界因素对试剂本身的影响,并且使用者旋转旋钮固定周数,即可向下方反应离心管中添加定量试剂,有效的保证了对本检测的反应液添加剂量,提高检测的稳定性和有效性。
五、为了避免对环境造成二次污染,我们将试剂盒的整体材料采用了可降解的二氧化碳共聚物材料,该材料既可以起到防菌作用,也避免在丢弃后对环境造成的二次污染。
六、本试剂盒配套足量封口膜,内置于试剂盒中央的中空旋转轴中,用于离心等需密封离心管口的操作中,该膜采用一种灭菌性易撕复合层状金属材料,作为封口膜,具有密封性好、易撕、抗氧化、耐酸解、可长期保存等特性。同时,试剂盒储存封口膜设置有热封层和预撕线,不需大力就能够做到对膜的平顺剥撕,并且揭开无残留,避免离心管口实验试剂残留,提高测验结果准确。
七、下承载盒中内置4个浸润式试管架,可向下承载盒凹槽内注水,创造反应所需温度条件,减少温度对反应速率的影响。
八、反应离心管共四个,直接采用适配于常见规格离心机大小的离心管,反应全程可在一管中完成,避免试剂的移液操作所带来的损耗,也增加本试剂盒与离心机的适配度。
九、储液仓和离心管均可替换,并配置替换装,极大提高单个试剂盒的利用率,也降低成本,满足绿色发展。
附图说明
图1为本实用新型的结构示意图。
图2为本实用新型在分离状态下的结构示意图。
图3为图1中螺旋释液器的结构示意图。
图中,1为上承载盒,2为下承载盒,3为旋转轴,4为承载模块,5为螺纹通孔,6为螺旋释液器,7为旋钮,8为隔板,9为反应盒,10为离心管,11为浸润槽,12为上端盖。
具体实施方式
为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
如图1-3所示,一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,包括上承载盒1和下承载盒2,上承载盒1至于下承载盒2的上方,上承载盒1与下承载盒2通过旋转轴3相连,上承载盒1相对于下承载盒2可转动,上承载盒1相对于下承载盒2可分离。
上承载盒1内布置有四个承载模块4,四个承载模块4大小一致,每个承载模块4上均竖向开有螺纹通孔5,螺纹通孔5至于对应承载模块4的中心,每个螺纹通孔5内螺纹连接有螺旋释液器6,螺旋释液器6的顶端设有旋钮7,旋钮7旋入至螺旋释液器6内实现螺旋释液器6顶端的密封,螺旋释液器6的底端设有滴液口,液体通过滴液口向下滴出。
通过计算各个反应试剂添加量,设计相应螺旋释液器6管身横切面直径,使用者旋转旋钮7固定周数,即可向下方反应离心管10中添加定量试剂,同时当螺旋释液器6中储存足够试剂时,单个试剂盒即可满足对多组样本的试剂添加。
下承载盒2内通过隔板8分割为四个反应盒9,四个反应盒9大小一致,每个反应盒9内布置有离心管10,离心管10竖直布置,离心管10至于对应反应盒9的中心,离心管10的上端开口。离心管10的外壁与反应盒9之间形成浸润槽11,在浸润槽11内注入水,创造反应所需的温度条件,减少温度对反应速率的影响。
离心管10直接采用适配于常见规格离心机大小的离心管10,反应全程可在一管中完成,避免试剂的移液操作所带来的损耗。
四个螺旋释液器6为洗涤液释液器、裂解液释液器、终止液释液器和预混液释液器,从上至下看,洗涤液释液器、裂解液释液器、终止液释液器和预混液释液器按照顺时针方向等角度间隔布置。试剂盒一次使用即可完成4组样本检测。试剂盒上下两部分分离后,即可将离心管10快速拿出进行离心和混匀操作,试剂盒中的螺旋释液器6和反应离心管10均可拿出。
螺旋释液器6管身、螺旋释液器6中间部螺旋式吻合处采用超疏水和抗菌性能优异的弹性体医用复合材料。该材料通过将疏水性纳米银粒子负载碳纳米管微球与医用弹性体混合,经过复型硫化后得到。该弹性体材料具有抗静电、防尘、防污染和除菌的功能,可满足血液样品的实验环境要求。其超疏水性质能极大程度减少试剂的挂壁残留,保证实验过程的高度准确性,同时能够有效隔离细菌接触,避免释液器中试剂被污染。
上承载盒1与下承载盒2均为正方形截面的方块形结构,上承载盒1与下承载盒2的横截面积大小一致。
旋转轴3的顶端开口,在旋转轴3内放入封口膜,封口膜的顶端略高于旋转轴3的顶端,方便封口膜取出。旋转轴3的上端口通过上端盖12密封,保证封口膜的清洁。
封口膜为一种灭菌性易撕复合层状金属材料,作为封口膜,具有密封性好、易撕等优点,同时具有抗腐蚀、抗氧化、耐酸解、可长期保存等特性。该材料包含但不限于印刷基层和热封层,两层之间通过双组份聚氨酯粘合剂粘合而成,使复合膜表面具有耐高温灭菌性能。其次,试剂盒储存封口膜设置有热封层和预撕线,不需大力就能够做到对膜的平顺剥撕,同时揭开无残留,避免离心管10口实验试剂残留,提高测验结果准确性,并且满足多组样本离心操作需要。
上承载盒1、旋转轴3和下承载盒2均为可降解的二氧化碳共聚物材料,具有良好的阻隔性、阻氧性和可完全生物降解的优点,使用后可填埋焚烧处理,只产生水和二氧化碳。该材料在通过多种改性剂与提纯后可达到医用标准的医用二氧化碳共聚物共同作用,提高了力学性能与机械性能,满足对试剂盒的强度要求,同时使试剂盒成品具有抗菌性能。
本实用新型的工作过程为:
分别取500ul受试者的外周血置入4个反应离心管10中,从试剂盒空心旋转轴3中取出封口膜,沿封口膜预撕线撕取适宜大小封口膜,除去封口膜的防污染层,用封口膜层将反应离心管10管口封闭,将其以5000×转速离心10分钟使样本分层,用移液器弃去上清液,保留沉淀层。向离心管10的外壁与反应盒9之间的浸润槽11内注入适宜温度的水。
将反应离心管10分别置于4个浸润式试管架中,之后将上承载盒1穿过试剂盒旋转轴3归位,洗涤液、裂解液、终止液和预混液分别置于螺旋释液器61、螺旋释液器62、螺旋释液器63、螺旋释液器64中。
旋转螺旋释液器61的旋钮7固定圈数,添加定量洗涤液进入正下方反应离心管10内。之后将上承载盒1顺时针旋转90°,旋转螺旋释液器61的旋钮7固定圈数,添加定量洗涤液进入正下方反应离心管10内。此步骤重复3次,确保洗涤液定量添加至4个反应离心管10内。取下试剂盒上部上承载盒1,将反应离心管10从浸润式试管架中取出。用封口膜将管口封闭,将反应离心管10置于涡旋器上直至沉淀溶解,再将反应离心管10以5000×离心2分钟,用移液器弃去上清液。
将反应离心管10分别置于4个浸润式试管架中,之后将上承载盒1穿过试剂盒旋转轴3归位,旋转螺旋释液器6的旋钮7固定圈数,添加定量洗涤液进入正下方反应离心管10内。之后将上承载盒1顺时针旋转90°,旋转螺旋释液器6的旋钮7固定圈数,添加定量洗涤液进入正下方反应离心管10内。此步骤重复3次,确保洗涤液定量添加至4个反应离心管10内。取下试剂盒上部上承载盒1,将反应离心管10从浸润式试管架中取出。用封口膜将管口封闭,将反应离心管10置于涡旋器上直至沉淀溶解,再将反应离心管10以5000×离心2分钟,用移液器弃去上清液。
将反应离心管10与上承载盒1归位,旋转螺旋释液器6的旋钮7固定圈数,添加定量裂解液进入正下方反应离心管10内,之后将上承载盒1顺时针旋转90°并添加裂解液的操作重复3次。取下试剂盒上部上承载盒1,将反应离心管10从浸润式试管架中取出,用移液器抽吸5次以混匀沉淀与裂解液。
将反应离心管10与上承载盒1归位,旋转螺旋释液器6的旋钮7固定圈数,添加定量终止液进入正下方反应离心管10内,之后将上承载盒1顺时针旋转90°并添加终止液的操作重复3次。取下试剂盒上部上承载盒1,将反应离心管10从浸润式试管架中取出,用移液器抽吸5次以混匀沉淀与终止液。
将反应离心管10与上承载盒1归位,旋转螺旋释液器6的旋钮7固定圈数,添加定量预混液进入正下方反应离心管10内,之后将上承载盒1顺时针旋转90°并添加预混液的操作重复3次。最后将反应离心管10从浸润式试管架中取出,在荧光定量PCR扩增仪中进行PCR扩增反应,可一次性得到4组结果。
反应结果可得到特异性miRNA在受试者外周血中的表达量,将检测结果与正常范围对照,即可对受试者进行早期诊断。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包在本发明范围内。
Claims (4)
1.一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,其特征在于,包括上承载盒(1)和下承载盒(2),所述上承载盒(1)至于下承载盒(2)的上方,所述上承载盒(1)与下承载盒(2)通过旋转轴(3)相连;
所述上承载盒(1)内布置有四个承载模块(4),每个承载模块(4)上均竖向开有螺纹通孔(5),所述螺纹通孔(5)至于对应承载模块(4)的中心,每个螺纹通孔(5)内螺纹连接有螺旋释液器(6),所述螺旋释液器(6)的顶端设有旋钮(7),所述螺旋释液器(6)的底端设有滴液口;
所述下承载盒(2)内通过隔板(8)分割为四个反应盒(9),每个反应盒(9)内布置有离心管(10),所述离心管(10)的外壁与反应盒(9)之间形成浸润槽(11),所述离心管(10)至于对应反应盒(9)的中心,所述离心管(10)的上端开口。
2.根据权利要求1所述的一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,其特征在于,四个所述螺旋释液器(6)为洗涤液释液器、裂解液释液器、终止液释液器和预混液释液器,洗涤液释液器、裂解液释液器、终止液释液器和预混液释液器按照顺时针方向等角度间隔布置。
3.根据权利要求1所述的一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,其特征在于,所述上承载盒(1)与下承载盒(2)均为正方形截面的方块形结构,所述上承载盒(1)与下承载盒(2)的横截面积大小一致。
4.根据权利要求1所述的一种糖尿病肾病早期诊断试剂盒,其特征在于,所述旋转轴(3)的顶端开口,所述旋转轴(3)的上端口通过上端盖(12)密封。
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