CN215574156U - 一种一步离心提取浓缩外泌体装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种一步离心提取浓缩外泌体装置，属于医疗器械技术领域，包括离心管、微滤管和超滤管，所述微滤管设置在离心管内，所述超滤管安装在微滤管内。本实用新型通过离心管、微滤管和超滤管一个套一个，直接提取4‑10m l带细胞(全血)样品，并浓缩5‑10倍外泌体，设计离心力方向与过滤和超滤方向相反的微滤管和超滤管多个套在一起的套管，防止细胞随片堵塞滤膜，一次离心获得澄清并浓缩5‑10倍的外泌体，便于后续检测。

Description

一种一步离心提取浓缩外泌体装置

技术领域

本实用新型涉及医疗器械技术领域，尤其涉及一种一步离心提取浓缩外泌体装置。

背景技术

外泌体是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。

现有的提取浓缩外泌体的方法大多分为多次超高速十几小时氯化铯离心，商品化亲和层析捕获和超滤，但是均存在一些问题，比如超速密度梯度离心对不同的体液需要不同的离心步骤虽然能获得较纯的外泌体，费时费钱处理量小；亲和层析对特定标签的外泌体纯度高速度快，但丢失了不带标签外泌体种群；超滤适用大体积样品浓缩富集外泌体，方便后续分析。

实用新型内容

本实用新型实施例提供一种一步离心提取浓缩外泌体装置，已解决现有技术中的问题。

本实用新型实施例采用下述技术方案：一种一步离心提取浓缩外泌体装置，其特征在于，包括离心管、微滤管和超滤管，所述微滤管设置在离心管内，所述超滤管安装在微滤管内；所述微滤管包括微滤膜和两个大环形固定塞，两个所述大环形固定塞设置在微滤管的上，两个所述大环形固定塞上设有若干小孔，所述微滤膜设置在微滤管的底部；所述超滤管包括超滤膜和两个小环形固定塞，两个所述小环形固定塞设置在超滤管上，两个所述小环形固定塞上设有若干小孔，所述超滤膜设置在超滤管的底部。

进一步的，所述离心管的规格为50ml离心管。

进一步的，所述微滤膜的孔径为0.22um。

进一步的，所述超滤膜为500Kda超滤膜。

本实用新型实施例采用的上述至少一个技术方案能够达到以下有益效果：

其一，本实用新型一次离心同时去除了细胞渣滓和外泌体浓缩5-10倍，直接用于后续分析检测，减少多步操作倒换和时间。

其二，本实用新型的离心力与微滤和超滤方向相反，颗粒大分子远离滤膜，防止滤膜堵塞，同时提高外泌体透过微滤膜，提高外泌体收率

其三，本实用新型多个套在一起的套管之间死体积小，容易获得更高的浓缩倍数。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本实用新型的进一步理解，构成本实用新型的一部分，本实用新型的示意性实施例及其说明用于解释本实用新型，并不构成对本实用新型的不当限定。在附图中：

图1为本实用新型的立体结构示意图；

图2为本实用新型的剖视图；

图3为本实用新型的微滤管的立体结构示意图；

图4为本实用新型的超滤管的立体结构示意图；

图5为本实用新型的拆分图；

附图标记：离心管1，微滤管2，微滤膜21，大环形固定塞22，超滤管3，超滤膜31，小环形固定塞32。

具体实施方式

为使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本实用新型具体实施例及相应的附图对本实用新型技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

下面结合图1至图5所示，本实用新型实施例提供了一种一步离心提取浓缩外泌体装置，包括离心管1、微滤管2、超滤管3，所述微滤管2设置在离心管1内，所述超滤管3安装在微滤管2内；将4-10ml细胞液(全血)加入离心管1中，随后放入微滤管2，再将超滤管3放入微滤管2中，形成多个套在一起的套管，滤膜端放在离心管1底，微滤管2、超滤管3保持开口，将多个套在一起的套管放入固定角度离心转子或水平离心转子，4000-6000rpm离心，在惯性作用下，细胞液以及微滤管2和超滤管3甩向离心管1底方向，离心管1底压强远远大于离心管1口，而微滤管2底部下方细胞液压力大于微滤管2内部压力，小于微滤管2滤膜端的澄清液体被压入微滤管2，在微滤管2底部压力大于超滤管3内部压力，导致小于超滤管3滤膜端的液体分子渗入超滤管3，外泌体比超滤管3滤膜端的孔径大不能进入，这样截留在微滤管2中的外泌体浓度增加，被浓缩。

具体的，所述微滤管2包括微滤膜21和两个大环形固定塞22，两个所述大环形固定塞22设置在微滤管2上，两个所述大环形固定塞22上设有若干小孔，所述微滤膜21设置在微滤管2的底部；两个大环形固定塞22可以将微滤管2固定在离心管1内，这样可以防止微滤管2的管壁与离心管1的管壁发生碰撞造成管壁破损，在离心过程中，微滤膜21可以让孔径范围内的物质进入微滤管2，阻挡孔径范围外的物质进入微滤管2。

具体的，所述超滤管3包括超滤膜31和两个小环形固定塞32，两个所述小环形固定塞32设置在超滤管3上，两个所述小环形固定塞32上设有若干小孔，所述超滤膜31设置在超滤管3的底部；两个小环形固定塞32可以将超滤管3固定在微滤管2内，这样可以防止超滤管3的管壁与微滤管2的管壁发生碰撞造成管壁破损，在离心过程中，超滤膜31可以让孔径范围内的物质进入超滤管3，阻挡孔径范围外的物质进入超滤管3。

具体的，所述离心管1的规格为50ml离心管。

具体的，所述微滤膜21的孔径为0.22um。

具体的，所述超滤膜31为500Kda超滤膜。

本实用新型的工作原理：本实用新型在使用时，将4-10ml细胞液(全血)加入50ml离心管1，随后放入微滤管2，再将超滤管3放入微滤管2中，形成多个套在一起的套管。滤膜端放在离心管1底，微滤管2和超滤管3保持开口。将多个套在一起的套管放入固定角度离心转子或水平离心转子，4000-6000rpm离心，在惯性作用下，细胞液以及微滤管2超滤管3甩向离心管1底方向，离心管1底压强远远大于离心管1口，而微滤管2底部0.22um微滤膜21下方细胞液压力大于微滤管2内部压力，小于0.22um微滤膜21的澄清液体被压入微滤管2，其中包括外泌体实现外泌体澄清；同理在微滤管2底部压力大于超滤管3内部压力，导致小于500Kda超滤膜31孔径的液体分子渗入超滤管3，外泌体比500Kd孔径大不能进入，这样截留在微滤管2中的外泌体浓度增加，被浓缩。离心结束后，抽出超滤管3丢弃，用吸管吸出浓缩在微滤管2中的浓缩外泌体，控制离心力和离心时间，和起始样品体积，可以控制最后微滤管2与超滤管3直间的外泌体浓缩体积和浓缩倍数。

以上所述仅为本实用新型的实施例而已，并不用于限制本实用新型。对于本领域技术人员来说，本实用新型可以有各种更改和变化。凡在本实用新型的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的权利要求范围之内。

Claims (4)

1.一种一步离心提取浓缩外泌体装置，其特征在于，包括离心管(1)、微滤管(2)和超滤管(3)，所述微滤管(2)设置在离心管(1)内，所述超滤管(3)安装在微滤管(2)内；所述微滤管(2)包括微滤膜(21)和两个大环形固定塞(22)，两个所述大环形固定塞(22)设置在微滤管(2)上，两个所述大环形固定塞(22)上设有若干小孔，所述微滤膜(21)设置在微滤管(2)的底部；所述超滤管(3)包括超滤膜(31)和两个小环形固定塞(32)，两个所述小环形固定塞(32)设置在超滤管(3)上，两个所述小环形固定塞(32)上设有若干小孔，所述超滤膜(31)设置在超滤管(3)的底部。

2.根据权利要求1所述的一种一步离心提取浓缩外泌体装置，其特征在于：所述离心管(1)的规格为50ml离心管。

3.根据权利要求1所述的一种一步离心提取浓缩外泌体装置，其特征在于：所述微滤膜(21)的孔径为0.22um。

4.根据权利要求1所述的一种一步离心提取浓缩外泌体装置，其特征在于：所述超滤膜(31)为500Kda超滤膜。

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