CN213141893U - 一种负压可控式高效纯化平台实验装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种负压可控式高效纯化平台实验装置，包括由装有ProteinA/G填料的纯化柱及连接管组成的纯化平台、蠕动泵、上样管、样品收集瓶和固定装置；所述的纯化平台通过固定装置垂直固定在离实验台一段距离上，所述的纯化平台的液体流入端与上样管相连，放入不同的上样管中，不同的上样液进入纯化平台柱中；所述的纯化平台的液体流出端与蠕动泵相连，通过蠕动泵来调节纯化平台柱中溶液的流速。本实用新型的负压可控式高效纯化平台实验装置能够保证纯化柱的液体的流速恒定，为抗体与ProteinA/G填料的充分结合提供保障，提高抗体纯化的纯度和得率，也实现了清洗过程的半自动化，极大地提高了工作效率。

Description

一种负压可控式高效纯化平台实验装置

技术领域

本实用新型涉及一种抗体纯化实验装置技术领域，具体为一种负压可控式高效纯化平台实验装置。

背景技术

抗体是一种特殊的蛋白质分子,被作为体外诊断的试剂、治疗疾病的药物、免疫亲和层析的配基等。在生命科学研究、生物技术及医学领域中有着广泛的应用。尤其是抗体作为各种免疫分析的核心试剂,对免疫分析结果的灵敏度、特异性起着至关重要的作用。制备高特异性、高效价的抗体是免疫学技术的基础，但无论使用何种制备技术的抗体都需要进行纯化。

制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础，抗体质量的高低将直接影响试验的成败。通过不同方法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在一起，为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途，就需要进行抗体纯化。从成分的角度分析,抗体分子是一类蛋白质分子，与其他蛋白质一样，它有一定的等电点、溶解度、荷电性及疏水性，可以用电泳、盐析沉淀或其他层析技术进行分离、纯化。

然而，现有抗体纯化实验装置在使用过程中存在以下问题：一、抗体纯化耗时长：整个纯化过程需要5个小时，现有装置换液、加样等操作完全依赖人工，费时费力；二、纯化过程流速不能控制：现有装置流速依赖于重力，不能保证流速的恒定，从而影响抗体与填料结合的效率；三、抗体与填料结合结合时间不能控制，从而影响纯化后抗体的纯度。

实用新型内容

本实用新型提供一种负压可控式高效纯化平台实验装置，以解决现有技术中的上述缺陷。

本实用新型的技术方案如下：

一种负压可控式高效纯化平台实验装置，其特征在于：铁架台、试管夹、装有ProteinA/G填料的纯化柱，其中ProteinA/G表示蛋白A或蛋白G，所述纯化柱的上端采用第一连接管与上样管连通设置，所述纯化柱的下端采用第二连接管与蠕动泵连通设置，所述蠕动泵与样品收集瓶连通设置，所述纯化柱固定在所述试管夹上，所述试管夹固定在所述的铁架台中间部位。

优选的，通过蠕动泵来调节液体在纯化柱中的流速来调节纯化速度。

与现有技术相比，本实用新型的有益效果如下：

(1)本实用新型的负压可控式高效纯化平台实验装置，通过设置有 ProteinA/G填料的纯化柱及连接管组成的纯化平台，与不同的上样管连接，实现上样液的输入控制；

(2)本实用新型的负压可控式高效纯化平台实验装置，由蠕动泵提供动力及流速控制，实现纯化柱中液体流速的恒定，同时实现清洗&孵育过程的自动化，提高了工作效率；

(3)本实用新型的负压可控式高效纯化平台实验装置，利用抗体对蛋白的特异性结合特征，通过蠕动泵调节速度，为抗体与Protein A/G填料的充分结合提供保障，从而提高抗体纯化的纯度和得率。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本实用新型的负压可控式高效纯化平台实验装置的结构示意图。

附图标记：1、铁架台；2、试管夹；3、纯化柱；4、第一连接管；5、上样管；6、第二连接管；7、蠕动泵；8、样品收集瓶。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本实用新型。应该理解，这些实施例仅用于说明本实用新型，而不用于限定本实用新型的保护范围。在实际应用中本领域技术人员根据本实用新型做出的改进和调整，仍属于本实用新型的保护范围。

为了更好的说明本实用新型，下方结合附图对本实用新型进行详细的描述。

如图1所示，本实用新型的一种负压可控式高效纯化平台实验装置，其特征在于：铁架台1、试管夹2、装有ProteinA/G填料的纯化柱3，其中ProteinA/G 表示蛋白A或蛋白G，所述纯化柱3的上、下两端分别与第一连接管4、第二连接管6连通设置组成纯化平台，第一连接管4与上样管5连通设置，第二连接管6与蠕动泵7连通设置用于控制流程，所述蠕动泵7与样品收集瓶8连通设置，所述纯化柱3固定在所述试管夹2上，所述试管夹2固定在所述的铁架台1 中间部位，通过蠕动泵7后流出的液体，能够流入样品收集瓶8中，从而达到调节纯化过程中流速的控制，实现高效纯化抗体的目的。

所述上样管5的数目为四个，从左至右分别为第一上样管、第二上样管、第三上样管、第四上样管。

采用上述技术方案，具体包括以下操作步骤：

1.腹水准备

将2ml腹水离心后，EP管4℃保存，备用；

2.抗体孵育纯化

2.1搭建负压可控式高效纯化平台实验装置：如图1所示，装有ProteinA/G 填料的纯化柱3以及第一连接管4、第一连接管4组成的纯化平台通过试管夹2 垂直固定在离实验台一段距离上，第一连接管4放入第四上样管中，流出的第二连接管6与蠕动泵7连接，当蠕动泵7打开后，液体从第四上样管进入第一连接管4，液体按照一定的流速流经纯化柱3，最后流入样品收集瓶8中，通过不同的上样液，实现抗体纯化的功能。

2.2平衡：启动蠕动泵7，调节速度为6ml/min，流尽20％乙醇，然后用60ml washingbuffer对上样管1进行柱平衡。

2.3上样、孵育：对上样管2腹水上样，上样完成后，保持孵育10min,然后调节蠕动泵7流速1ml/min，让液体流尽。

2.4.清洗：150ml washing buffer对第一上样管进行清洗，控制流速 6ml/min。

2.5.洗脱：15ml 100mM甘氨酸pH3.0对第三上样管进行洗脱，控制流速 1ml/min，收集管中加入6ml Tris-HCL pH9.0进行中和。收集的液体即为纯化后的抗体。

3.纯化柱清洗：按照强酸40ml 100mM甘氨酸pH3.0对第三上样管进行洗脱，60mlwashing buffer对第一上样管进行中和，40ml 100mM NaOH对第四上样管碱化，再次对60mlwashing buffer上第一上样管中和、40ml 20％乙醇最后一次清洗，控制流速6ml/min，然后分别进行柱子的清洗操作，清洗的废液均流入样品收集瓶8中，作为废液处理，流尽后加入2倍体积的20％乙醇，4℃保存纯化柱3。

4.制样和检测：收集管样品洗脱样品4ul加16ul 5xSDS loading buffer, 95℃5min处理为SDS样本，进行SDS-PAGE鉴定，确认抗体的纯度和浓度。

以上公开的本实用新型优选实施例只是用于帮助阐述本实用新型。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该实用新型仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本实用新型的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本实用新型。本实用新型仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。

Claims (2)

1.一种负压可控式高效纯化平台实验装置，其特征在于：铁架台(1)、试管夹(2)、装有ProteinA/G填料的纯化柱(3)，其中ProteinA/G表示蛋白A或蛋白G，所述纯化柱(3)的上端采用第一连接管(4)与上样管(5)连通设置，所述纯化柱(3)的下端采用第二连接管(6)与蠕动泵(7)连通设置，所述蠕动泵(7)与样品收集瓶(8)连通设置，所述纯化柱(3)固定在所述试管夹(2)上，所述试管夹(2)固定在所述的铁架台(1)中间部位。

2.根据权利要求1所述的一种负压可控式高效纯化平台实验装置，其特征在于：通过蠕动泵(7)来调节液体在纯化柱(3)中的流速来调节纯化速度。

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