CN211453502U - 生物化学衍生检测仪 - Google Patents
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Abstract
本实用新型涉及生物化学衍生检测仪,包括若干个分别与溶液瓶连通的注射泵,各所述注射泵与对应溶液瓶之间的管路上分别设有一电磁阀,各所述电磁阀的第三接口经管路连接到溶液混合器,所述溶液混合器的输出端经三通管连接到反应管,所述反应管的出口经管路依次连接有紫外/可见检测器、荧光检测器。本实用新型提出的生物化学衍生检测仪,具备流动注射、在线反应、紫外和荧光检测功能。与色谱仪连接用于快速筛选复杂基质中生物活性成分,可同时完成复杂基质样品的色谱征集及生物活性成分的确定。
Description
技术领域
本实用新型涉及生物化学、分析化学技术领域,特别是涉及生物化学衍生检测仪。
背景技术
中药是一个多成分、多靶点的复杂体系,如何快速辨识生物活性成分,进而有效地控制中药质量,确保中药产品的有效、安全和稳定可控,是当前中药研究的难点之一。
传统的中药活性成分研究主要以有效化合物经各种仪器及柱分离出单体成分后,再进行生物活性评价,方法耗时、工作量大、花费高。同时,在分离和纯化的过程中由于化合物的分解和稀释等可能导致活性成分的丢失,并且分离纯化过程中使用大量有机试剂存在环境污染。此外,存在资源消耗,大量的人力物力投入到分离已知的和没有意义的化合物。
目前国内外有研究报道高效液相色谱-生物化学(HPLC-BCD)在线分析技术快速筛选复杂基质中的生物活性成分,但没有成型的仪器设备,主要为研究者采用微量注射泵自行构建。而市售的微流量注射泵存在一些问题,包括使用范围窄、针头易断、难以与高效液相色谱仪连接、无法控制生物试剂溶液温度(酶/受体易失活)及反应温度(模拟体内温度),不适合生物化学反应体系。
此外,中国药典收载的柱后衍生仪可与高效色谱分离仪器联用,主要用于黄曲霉毒素的柱后衍生反应,不具备检测功能,不适用于生物化学多种溶液反应体系的要求,无法控制生物试剂溶液的温度,仪器设备管路设计导致生物试剂(价格高)耗费较大,仪器采用六通阀切换流路,存在阀内溶液残留、生物试剂溶液中的缓冲盐堵塞通道和损坏仪器配件导致溶液泄露等问题,影响生物试剂反应稳定性。
实用新型内容
为了克服现有技术的上述不足,本实用新型提出了生物化学衍生检测仪,解决现有衍生检测仪无法控制生物试剂溶液温度、无法实现紫外荧光检测、不适用于生物化学多种溶液反应、且存在生物试剂消耗大、阀体污染、管道阻塞、配件磨损的技术问题。
本实用新型是通过以下技术方案实现的:
生物化学衍生检测仪,包括若干个分别与溶液瓶连通的注射泵,各所述注射泵与对应溶液瓶之间的管路上分别设有一电磁阀,各所述电磁阀的第三接口经管路连接到溶液混合器,所述溶液混合器的输出端经三通管连接到反应管,所述反应管的出口经管路依次连接有紫外/可见检测器、荧光检测器。
进一步的,所述注射泵设有四个,四个所述的注射泵分别与四个溶液瓶连接。
进一步的,各所述注射泵、电磁阀、溶液混合器及相连的管路均位于制冷装置内。
进一步的,所述管路为液相色谱通用PEEK管或聚四氟乙烯管。
进一步的,所述溶液混合器包括位于同一平面的四个进液口及与所述进液口垂直的一个出液口,四个电磁阀的第三接口分别经管路连接到四个进液口,出液口经管路连通到三通管。
进一步的,所述反应管为在线加热反应装置,所述在线加热反应装置为绕设于导热体表面的聚四氟乙烯管。
与现有技术相比,本实用新型的有益效果在于:
本实用新型提出的生物化学衍生检测仪采用四元注射泵,相较于现有的采用二元注射泵,能够完成生物化学反应多种溶液的同时输送,适用于复杂生物试剂的反应体系;注射泵设置电磁阀切换泵中溶液的输入和泵出,防止反应装置试剂溶液的残留及污染,相较于现有的采用六通阀控制溶液的进出,本申请的电磁阀切换显然更加的安全,无漏液现象;各仪器之间的连通管路均采用PEEK或聚四氟乙烯管,生物试剂消耗少,节省实验成本;采用半导体控温装置控制生物试剂溶液温度在0-10℃,确保生物试剂的稳定性及生物化学衍生反应监测的有效性;增加紫外/可见检测器和荧光检测器,两个检测器串联连接,紫外检测器流出液直接进入荧光检测器,可同时实现各种生物反应产生的紫外和荧光信号的实时采集功能;综上,本申请的衍生检测仪集流动注射、在线反应、紫外荧光检测于一体。
附图说明
图1为本实用新型实施例所述生物化学衍生检测仪的结构示意图;
图2为本实用新型实施例所述电磁阀俯视剖面图;
图3为本实用新型实施例所述电磁阀纵向剖面图;
图4为本实用新型实施例所述溶液混合器俯视剖面图;
图5为本实用新型实施例所述溶液混合器纵切面图;
图6为本实用新型实施例所述三通管剖面图;
图7为加兰他敏在相同浓度下的色谱指纹图;
图8为加兰他敏在相同浓度下的抑制乙酰胆碱酯酶活性图;
图9为加兰他敏在不同浓度下的色谱指纹图;
图10为加兰他敏在不同浓度下的抑制乙酰胆碱酯酶活性图;
图11为黄连药材色谱指纹图;
图12为黄连药材抑制乙酰胆碱酯酶活性图;
图13为不同品牌茶叶色谱指纹图;
图14为不同品牌茶叶抑制α-葡萄糖苷酶活性图。
图中:
1、制冷装置;2、注射泵;3、电磁阀;4、液相色谱通用PEEK管或聚四氟乙烯管;5、溶液混合器;6、三通管;7、反应管;8、紫外/可见检测器;9、荧光检测器;10、高效液相色谱仪HPLC。
具体实施方式
展示一下实例来具体说明本实用新型的某些实施例,且不应解释为限制本实用新型的范围。对本实用新型公开的内容可以同时从材料、方法和反应条件进行改进,所有这些改进,均应落入本实用新型的精神和范围之内。
如图1-6所示的生物化学衍生检测仪,包括若干个分别与溶液瓶连通的注射泵2,各所述注射泵2与对应溶液瓶之间的管路上分别设有一电磁阀3,各所述电磁阀3的第三接口经管路连接到溶液混合器5,当注射泵2抽取溶液瓶中的溶液进入注射泵2中时,电磁阀3打开溶液流入泵的阀,当注射泵2开始注射溶液时,电磁阀3关闭与溶液瓶的阀,保持溶液的单向流动;所述溶液混合器5的输出端经三通管6连接到反应管7,三通管6的两输入端位于同一平面,混合后的溶液沿垂直方向流出;所述反应管7的出口经管路依次连接有紫外/可见检测器8、荧光检测器9,用于生物反应信号的实时采集。
在本实施例中,所述注射泵2设有四个,容积为100ml,注射泵2流速范围
0.01-1.0ml/min,四个所述的注射泵2分别与四个溶液瓶连接。
在本实施例中,各所述注射泵2、电磁阀3、溶液混合器5及相连的管路均位于制冷装置1内,采用半导体控制四个注射泵2的溶液温度在0-10℃。
在本实施例中,所述管路为液相色谱通用PEEK管或聚四氟乙烯管4。
在本实施例中,所述溶液混合器5包括位于同一平面的四个进液口及与所述进液口垂直的一个出液口,四个电磁阀3的第三接口分别经管路连接到四个进液口,出液口经管路连通到三通管6,溶液混合器5的内部死体积不超过16μl,材质为不锈钢,耐缓冲盐、酸和碱的腐蚀。
在本实施例中,所述反应管7为在线加热反应装置,所述在线加热反应装置为绕设于导热体表面的聚四氟乙烯管,温度控制范围25~100℃,依据生物反应速度,不同溶液在不同体积(0.25mL~1.0mL)的反应管中充分混合,聚四氟乙烯管的长度决定不同反应溶液体积。
将本申请实施例中所述的生物化学衍生检测仪与高效液相色谱仪HPLC10、超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MS)在线连接,研究筛选中药活性成分,涉及到乙酰胆碱酯酶、α-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶抑制剂、DPPH/ABTS自由基清除剂的筛选,检测色谱如图7-14所示(仅列举记录的部分色谱图)。研究表明联用仪器系统稳定、灵敏度高、分辨率高,能够用于复杂基质中生物活性成分的快速筛选。
以上所述仅为本实用新型的实施例,并非因此限制本实用新型的专利范围,凡是利用本实用新型说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本实用新型的专利保护范围内。
Claims (6)
1.生物化学衍生检测仪,其特征在于,包括若干个分别与溶液瓶连通的注射泵(2),各所述注射泵(2)与对应溶液瓶之间的管路上分别设有一电磁阀(3),各所述电磁阀(3)的第三接口经管路连接到溶液混合器(5),所述溶液混合器(5)的输出端经三通管(6)连接到反应管(7),所述反应管(7)的出口经管路依次连接有紫外/可见检测器(8)、荧光检测器(9)。
2.根据权利要求1所述的生物化学衍生检测仪,其特征在于,所述注射泵(2)设有四个,四个所述的注射泵(2)分别与四个溶液瓶连接。
3.根据权利要求1所述的生物化学衍生检测仪,其特征在于,各所述注射泵(2)、电磁阀(3)、溶液混合器(5)及相连的管路均位于制冷装置(1)内。
4.根据权利要求1所述的生物化学衍生检测仪,其特征在于,所述管路为液相色谱通用PEEK管或聚四氟乙烯管(4)。
5.根据权利要求1所述的生物化学衍生检测仪,其特征在于,所述溶液混合器(5)包括位于同一平面的四个进液口及与所述进液口垂直的一个出液口,四个电磁阀(3)的第三接口分别经管路连接到四个进液口,出液口经管路连通到三通管(6)。
6.根据权利要求1所述的生物化学衍生检测仪,其特征在于,所述反应管(7)为在线加热反应装置,所述在线加热反应装置为绕设于导热体表面的聚四氟乙烯管。
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