CN210514032U - 一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置及其检测方法，属于分析检测技术领域。本实用新型提供的装置在使用时，只需将被检测血液样本，滴加到检测卡的加样口中，便能自动同步完成免疫学指标检测和白细胞总数计数，操作简单且检测效率高。并且本实用新型提供的装置结构简单、携带方便，可适用于床旁检测、基层诊疗和特殊环境下的伤病员病情检测。利用该装置的检测方法检测时间窗口长，且不会受到杂质的干扰，增加了检测的准确度。

Description

一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置

技术领域

本实用新型属于分析检测技术领域，具体涉及一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置，能同步进行免疫检测和白细胞总数计数。

背景技术

C-反应蛋白(CRP)以微量的形式存于健康的机体中，并参与全身的炎性反应，出现急性创伤、炎症及感染的状况时，血液中的CRP浓度会迅速上升，是常用的临床急性时相的反应指标，并在炎症开始之后的6h-12h即可检测到，最初CRP的检测主要应用于活动性风湿热的诊断，由于检测结果受到限制，且敏感度比较低，在最初应用时未受到重视，随着近几年免疫学与分析生物学的发展，使更多敏感、简单且准确的检测方法逐渐凸显，CRP逐渐成为临床研究热点。

随着检验医学技术发展，血常规检验中的白细胞计数和感染免疫指标检测已成为诊断病人发热病因的必要指标，目前医院急诊针对发热和感冒患者都要进行白细胞和感染指标的检测，根据综合检验结果判断病因。其中血常规检测中的白细胞计数可以对急性感染进行初步诊断，若患者的白细胞数量升高，则多数情况下为细菌感染，但是白细胞计数易受生理因素、年龄、情绪等因素影响，因此要结合免疫学指标，如CRP或PCT等免疫指标，在发生感染情况下也会明显增高，因此白细胞计数联合免疫学指标，可以更好地为医生判断感染病因提供快速、可靠的判断依据，对指导医生正确用药具有临床意义。

特别是近年来，由于滥用抗生素而造成不良反应的情况逐渐增多，引起了社会的广泛关注，因此，在对患者使用抗生素时，应首先进行细菌感染病症的确诊。免疫指标与白细胞计数的双重检测可以初诊患者是否存在细菌感染病症，并可指导医生临床用药，对于两项指标均有所升高的患者，医生可使用抗生素进行治疗，对于两项指标均处于正常范围，则可不使用抗生素，或减少使用。

目前临床检测时，免疫检测和白细胞计数一般分开进行的，两种不同的仪器进行检测，效率低，成本高，采血需求量大，尤其对于急诊条件下，提高检验效率和速度，对降低患者等待时间和医生的工作量至关重要。

其中白细胞计数检测方法主要有库尔特方法和流式细胞计数法，库尔特方法的原理是根据血细胞的非传导性质，在电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化为检测原理，白细胞、红细胞和血小板等引起的电阻变化不同，从而实现白细胞的识别计数。流式细胞计数法利用激光散射和荧光染色技术，通过在流路中逐个检测单细胞的散射光和荧光，实现白细胞的计数。上述方法的检验设备，具有检测速度快、效率高特点，但其价格高、体积大、维护成本及要求高，适于大医院进行临床化验，难以适用于床旁检测、基层诊疗和特殊环境下的伤病员救治。

另外，现有技术中还存在一种新型的白细胞计数装置——HemoCue，其采用的是溶血计数法原理：先用溶血剂将血液中的红细胞溶解掉，再用亚甲基蓝进行白细胞染色，将染色后的样本放到透射光下，由于白细胞被染色后颜色加深，在透射光的照射下会在图像上表现为暗点，通过计算暗点数量即可计算出白细胞的总数。但HemoCue采用的溶血计数法存在以下缺陷：一是该方法使用的是透射吸收法，易受杂质干扰；二是检测时间窗口短，必须严格控制在2-10min内检测，时间太短红细胞溶解不完全，时间太长部分白细胞也会被溶解掉；以上两点导致该装置检测准确度偏低。

实用新型内容

针对现有技术中存在的问题的一个或多个，本实用新型提供一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置，包括：

壳体；

主控制板，其设置在所述壳体内；

光电检测单元，其设置在所述壳体内，与所述主控制板电连接，包括免疫检测模块和白细胞总数检测模块，每一检测模块均包括图像传感器，用于采集图像；

数据处理单元，其集成于所述主控制板，用于对所述图像传感器采集的图像进行处理和分析；

人机交互单元，其与所述主控制板电连接；和

检测卡，其可安装于所述壳体上设置的用于安装所述检测卡的插卡口内，包括免疫检测片和白细胞总数检测片，分别与所述免疫检测模块和白细胞总数检测模块相适配。

上述检测卡为免疫检测与白细胞计数组合检测卡，包括：

检测卡底壳(200)、检测卡上盖(200’)、以及安装在上盖和底壳所形成的盒体内的免疫检测片(300)和白细胞总数检测片(400)，其中：

检测卡上盖(200’)设有为免疫检测片(300)加样的第一加样孔(216)、为白细胞总数检测片(400)加样的第二加样孔(217)以及用于透出免疫检测片(300)的免疫检测区的第一判读窗(218)和用于透出白细胞总数检测片(400)的白细胞检测区的第二判读窗(219)，检测卡底壳(200)设有用于透出白细胞总数检测片(400)的白细胞检测区的第三判读窗(223)，第二判读窗(219)和第三判读窗(223)对齐；第一加样孔(216)与第二加样孔(217)各自分离，或连通为一总加样口(1c)。

上述白细胞总数检测片(400)包括组装手柄(21)以及设于组装手柄上的测试腔(22)，测试腔(22)为两个有一定间隙的平行的腔体侧壁(23)形成的半开放空腔，具有测试区(24)、进样口(25)以及连通进样口(25)和测试区(24)的引流区(26)，测试区(24)的厚度H_测小于引流区(26)的厚度H_引；进样口(25)与第二加样孔(217)对位，测试区(24)与第二判读窗(219)和第三判读窗(223)对位。

上述测试腔(22)上设置有至少一个排气孔(71或72)，排气孔为连通测试腔内部与外界大气的通孔，其贯穿测试区(24)或引流区(26)的一腔体侧壁或对称贯穿测试区(24)或引流区(26)的两腔体侧壁；所述检测卡底壳(200)和/或检测卡上盖(200’)上设有至少一个贯穿盒体的连通孔(201-204)，所述排气孔通过与其数量与位置匹配的连通孔与外界大气连通。

上述白细胞总数检测片(400)进一步包含以下任一或叠加技术手段：

技术手段一：所述进样口(25)位于测试腔(22)两腔体侧壁(23)上端缘开口处，其中两腔体侧壁(23)中的一个位于进样口(25)处的上端缘设有进样缺口(28)，以通过该进样缺口(28)处注入液体样品；

技术手段二：所述进样口(25)呈凹弧形，其下滑弧线的切线与该进样口(25)的水平基准面之间的夹角α的取值范围为15°～45°；

技术手段三：所述腔体侧壁(23)的端缘内楞设有过渡圆角(210)，过渡圆角值的半径 R的范围为0.2mm-1.5mm。

上述免疫检测片(300)包括：相互重叠固定设置在粘性底衬上的分析膜、结合垫、样品垫、吸水垫，其中在所述分析膜上设置有检测带和质控带，所述检测带和质控带构成所述免疫检测片的免疫检测区。

上述免疫检测模块(104)包括：

光源板(7)，用于发射光；

第一滤光片(6)，用于透过所述光源发射的光中固定波长范围的光；

分光镜(5)，用于透过所述第一滤光片的光源发射的光，并反射免疫检测片发出的荧光；

第二滤光片(4)，用于透过经分光镜反射的免疫检测片发出的荧光中固定波长范围的光；

第一成像镜头(3)，用于将免疫检测片发出的荧光成像；和

第一图像传感器(2)，用于聚焦荧光成像并传送至数据处理单元；

其中所述第一滤光片设置于所述分光镜和光源之间，所述分光镜设置在所述免疫检测片和第一滤光片之间，所述成像镜头设置于可接收到所述分光镜反射的荧光的位置，所述成像镜头设置在所述第二滤光片和图像传感器之间；

优选地，所述光源板(7)由平行排列的数个LED光源构成。

上述白细胞总数检测模块(105)包括：

光源(13)，用于发射光；

第三滤光片(12)，用于透过所述光源发射的光中固定波长范围的光；

反射镜(8)，用于将白细胞总数检测片发出的荧光反射至成像镜头上；

第二成像镜头(9)，用于将白细胞总数检测片发出的荧光成像；

第四滤光片(10)，用于透过成像荧光中固定波长范围的光；和

第二图像传感器(11)，用于聚焦细胞荧光成像并传送至数据处理单元；

其中所述第三滤光片设置于所述白细胞总数检测片和光源之间，所述白细胞总数检测片设置在所述第三滤光片和反光镜之间，所述第二成像镜头设置于可接收到所述反射镜反射的荧光的位置，所述第四滤光片设置在所述图像传感器和第二成像镜头之间。

上述装置还包括打印机，其设置在所述壳体内，与所述人机交互单元通过所述主控制板电连接，用于打印输出所述数据处理单元对图像进行处理和分析的结果；和/或

所述人机交互单元包括显示屏、功能按键和开关按钮；和/或

所述装置还包括插卡底板、硅胶垫、散热口、散热扇、USB接口和电源接口，其中所述插卡底板用于放置所述检测卡。

基于以上技术方案提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置可同步进行免疫检测和白细胞计数，与现有技术相比，具有以下有益效果：

1)本实用新型检测卡集成免疫检测功能和白细胞总数检测功能，在检测时，只需将被检测血液样本，滴加到检测卡的加样口中，通过本实用新型提供的装置就能自动同步完成免疫学指标检测和白细胞总数计数，其操作简单，并提高了检测效率。

2)本实用新型装置结构简单、携带方便，可适用于床旁检测、基层诊疗和特殊环境下的伤病员病情检测。

3)本实用新型装置利用免疫层析技术和荧光染色的基本原理，同步实现免疫检测和白细胞总数计数，其检测时间窗口长，且不会受到杂质的干扰，增加了检测的准确度。

附图说明

图1为本实用新型提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置的系统结构示意图；

图2为本实用新型提供的同步检测装置的内部结构示意图；

图3为插卡底板与检测卡的组装结构示意图；

图4中A幅和B幅为本实用新型提供的同步检测装置的外部结构示意图；

图5为检测卡的上表面结构示意图；

图5A为检测卡的立体结构示意图；

图5B为检测卡的下表面及透视结构示意图；

图6为检测卡的免疫检测片的结构示意图；

图7A为白细胞总数检测片结构示意图；

图7B为图7A中B-B截面图；

图8为光电检测模块的结构示意图；

图9为免疫检测单元的光源板的结构示意图。

具体实施方式

针对现有技术中免疫检测和白细胞总数计数分开进行检测的检测效率低、成本高以及需血量大等缺陷，本实用新型的目的是提供一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置。

如图1所示，示出了本实用新型提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置的系统结构示意图，包括：检测卡、光电检测单元(包括免疫检测模块和白细胞总数检测模块)、数据处理单元和人机交互单元。其中检测卡集成免疫检测区和白细胞总数检测区，可用于同步进行免疫检测喝包细胞总数计数。免疫检测模块主要包括光源、成像光路和图像传感器，对应于检测卡上的免疫检测区，用于对免疫反应信号检测，其中图像传感器用于采集免疫检测荧光图像；白细胞总数检测模块主要包括光源、成像光路和图像传感器，对应于检测卡上的白细胞总数检测区，用于对白细胞总数检测，其中图像传感器用于采集白细胞总数检测荧光图像。数据处理单元主要完成图像处理及结果分析，对于免疫检测荧光图像，数据处理单元识别并计算图中荧光亮带的总荧光强度，根据荧光计算被检测物质浓度；对于包细胞总数检测图像，统计图像中所有荧光亮点的数量，获得白细胞总数。人机交互单元主要包括显示屏、功能按键，完成检测流程控制和结果输出。上述光电检测单元、数据处理单元和人机交互单元通过主控制板相互电连接。

如图2所示，示出了本实用新型提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置的内部结构示意图，主要包括：设置于壳体100内的主控制板101、第二照明光源102、第一照明光源103、第一光学检测模块104、第二光学检测模块105和插卡底板106。其中主控制板101 控制第二照明光源102、第一照明光源103、第一光学检测模块104和第二光学检测模块105 进行工作，第二照明光源102提供白细胞总数检测的光源，与第二光学检测模块105组成白细胞总数检测模块，第一照明光源103提供免疫检测的光源，与第一光学检测模块104组成免疫检测模块，插卡底板106用于放置检测卡，如图3所示，示出了插卡底板106与检测卡 1(详细结构将在下面描述)之间的组装关系示意图，结合图5所示，其中检测卡1上的免疫检测区1b对应于第一光学检测模块104，白细胞总数检测区1d对应于第二光学检测模块105。如图4中A幅和B幅，示出了本实用新型提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置的外部结构示意图，主要包括：壳体100、显示屏107、开关按钮108、插卡口109、硅胶垫110、散热口111(对应在壳体100内设置有散热扇，图中未示出)、打印机112、电源接口113和USB接口114。其中显示屏107(可为触摸屏，包括功能按键)用于显示输出检测结果，与主控制板101电连接；插卡口109设置于壳体100上，用于放置检测卡，与插卡底板106相对应，通过插卡口109将检测卡插入仪器中的插卡底板106上限定位置进行检测；硅胶垫110 可以起到仪器防震的效果以利于保护计数仪；散热口111设置于壳体100上，在壳体100内对应设置有散热扇，用于降低仪器工作时的环境温度；打印机112设置于壳体100内，通过主控制板101与人机交互单元电连接，可用于打印输出检测结果；USB接口114可用于传输数据，电源接口113用于连接电源。

如图5所示，示出了本实用新型提供的免疫检测联合包细胞计数的同步检测装置的检测卡1的结构示意图，包括手持区1a、免疫检测区1b，总加样口1c和白细胞总数检测区1d。免疫检测区1b和白细胞总数检测区1d分别位于加样口1c两侧。在使用时，被测血液样本，直接滴加到总加样口1c中，一部分血液样本自动流入置于检测卡1内的白细胞总数检测片，进入检测区1d处，在此处与白细胞总数检测片测试腔中预封存的试剂(包括细胞荧光染料和表面活性剂，其中细胞荧光染料可为SYTO9染料、碘化丙啶、溴化乙锭、吖啶橙、Hoechst染料、DAPI染料、Cy3、Cy5等荧光染料中的一种或多种。表面活性剂可为季铵盐、胆汁酸、冰醋酸、皂素、TrionX-100、Tween20、Tween80、NP-40等表面活性剂中的一种或多种)进行反应；另一部分血液样本流向置于检测卡1内的免疫检测片，在免疫检测区1b处形成可检测信号带。

图5A和图5B示出了检测卡1的结构，为免疫检测联合白细胞计数的组合检测卡，该检测卡1包括上盖200’、底壳200以及安装在上盖200’和底壳200所形成的盒体内的免疫检测片300和白细胞总数检测片400。检测卡上盖200’设有为免疫检测片300加样的第一加样孔216、为白细胞总数检测片400加样的第二加样孔217以及正对免疫检测片300的分析膜311(参见图6，后面详述)的第一判读窗218和正对白细胞总数检测片400的测试区24(参见图7A，后面详述)的第二判读窗219，检测卡底壳200上设有第三判读窗223；其中，第一判读窗218为贯穿检测卡上盖200’的窗孔，第二判读窗219和第三判读窗223为分别贯穿检测卡上盖200’和检测卡底壳200的窗孔，且两窗孔对齐。该检测卡通过检测卡底壳200 配合检测卡上盖200’形成的盒体结构将免疫检测片300和白细胞总数检测片400集成在一起，其上盖200’上分布的第一加样孔216正对免疫检测片300的样品垫313，第二加样孔 217正对白细胞总数检测片400的进样口25。

图7A和图7B示出了白细胞总数检测片400的结构。白细胞总数检测片400为狭缝微流芯片结构，包括组装手柄21和测试腔22，组装手柄21的前端延伸有弧状边缘的测试腔22，测试腔22为两个有一定间隙且平行的腔体侧壁23形成的半开放空腔，包括进样口25、进样缺口28、测试区24以及连通进样口25和测试区24的引流区26。其中：进样口25位于测试腔22的两腔体侧壁23的上端缘开口处，两腔体侧壁23中的一个位于进样口25处的上端缘设有进样缺口28，便于定位加样用的吸液管；进样口25呈凹弧形，其下滑弧线的切线与进样口25的水平基准面的夹角α，α的优选范围取15°～45°，该角度可决定待测液体样品进入引流区26的流向方位，保证加入的液体样品按照预定方式自发流入测试区24并充满。测试区24位于测试腔22内，其厚度H_测为60μm-120μm，液体样品进入测试区24形成了白细胞检测区，厚度大的测试区，白细胞检测区的单位面积样品承载量大、景深大，适宜于细胞数目的整体精确测量；厚度小，同样体积的液体样品在白细胞检测区的铺展面积大，适宜于细胞型别的精密区分。引流区26位于测试腔22内，与进样口25、测试区24相连通，引流区26的厚度H_引范围一般为120μm～500μm，测试区24的厚度H_测小于引流区26的厚度H_引，能将由进样口25进入经引流区26形成的流路均匀快速导入测试区24并充满，还有利于排出气泡。为了防止移动白细胞总数检测片400时待测液体样品受重力作用而流出，腔体侧壁23 端缘内楞设有过渡圆角20，过渡圆角半径R的范围为0.2mm-1.5mm。当测试腔22进样后，液体样品在两腔体侧壁23端缘过渡圆角20处形成稳定的液桥面，可有效平衡液体的重力而不致其流出。为了进一步避免气泡的产生，测试腔22上设置有至少一个排气孔，图7A示出两个排气孔71和72，排气孔为连通测试腔22内部与外界大气的通孔，可以位于测试区24或引流区26的一侧或两侧，即排气孔贯穿测试区24或引流区26的一侧腔体侧壁或对称贯穿测试区24或引流区26的两腔体侧壁。优选的，排气孔为对称的倒锥形通孔，参见图7B所示，排气孔71和72锥形小端开口朝向引流区26内部，锥形大端开口朝外连通外界大气。

对应白细胞总数检测片400中排气孔的设计，相应的，需要在检测卡1的上盖200’和/ 或底壳200上开设连通孔，如图5A显示了在上盖200’上设计了四个连通孔201、202、203和204，连通孔的数量和分布最好与排气孔匹配对位，利于测试腔22中的气泡能够经排气孔和连通孔逸出。

如图6所示，示出了免疫反应区内的免疫检测片300结构示意图，免疫检测片300为免疫层析试纸条结构，主要包括：分析膜(主要材质为硝酸纤维素膜)311、结合垫(主要材质为玻璃纤维)312、样品垫(主要材质为玻璃纤维或吸水纸)313、吸水垫(主要材质为吸水纸)314，各个部分按照一定的重叠关系粘贴固定于粘性底衬315上。上述各部分之间的相互重叠，保证了液体样品在试纸条上流动的连续性。当进行检测时，将血液样本滴加到总加样口1c处或第一加样口216处，样本流向样品垫313，样本通过渗透与虹吸作用进入结合垫312，使其中的标记物-生物活性分子结合物(例如荧光素、量子点、荧光微球或荧光胶乳微粒等标记的CRP单克隆抗体和荧光素、量子点、荧光微球或荧光胶乳微粒等标记的兔IgG)重新溶解游离，并在吸水垫314的虹吸作用下，离开结合垫312进入分析膜311，在其内部向吸水垫314的方向流动。此过程中结合物、CRP、检测带316(例如包被有与所述荧光素、量子点、荧光微球或荧光胶乳微粒等标记的CRP单克隆抗体处于不同表位的另一种CRP单克隆抗体)、质控带317(例如包被有抗兔IgG)之间将特异地发生一定的免疫反应(其中结合垫312 上的结合物、检测带316和质控带317上的包被物可统称为免疫靶标)，并产生具有指示性的信号，其中检测带316和质控带317处作为免疫检测区1b。

如图8所示，示出了本实用新型提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置的光电检测单元的结构示意图，光电检测单元由免疫检测模块和白细胞检测模块构成，其中：

免疫检测模块主要包括第一图像传感器2，第一成像镜头3，第二滤光片4，分光镜5，第一滤光片6和光源板7(对应于照明光源103)。如图9所示，光源板7由平行排列的LED 光源构成，LED光源数量4-6个，优选贴片封装LED光源。免疫检测模块的工作原理为：LED 光源发光波长与免疫反应荧光标记物相匹配，即LED光源波长为荧光标记物的激发波长。光源板7发出照明光，首先经过第一滤光片6，第一滤光片6的透射波长范围小于40nm，透射光谱中心波长与LED光源中心波长相同。照明光经第一滤光片6后，经由分光镜5透射，照射到检测卡1的免疫检测区1b，分光镜5为二向色分光镜，对于光源板7发出照明光透射率大于90％，对于免疫反应标记物发出荧光的反射率大于90％；分光镜5呈45°安装，因此检测卡1的免疫检测区1b发出的荧光经由分光镜5反射后发生90°偏折，经由第二滤光片4和第一成像镜头3在第一图像传感器2(可为面阵图像传感器，分辨率大于100万像素)中聚焦成像，第二滤光片4为荧光滤光片，对于免疫反应标记物发出荧光透过率大于90％，对于光源板7发出的照明光透过率小于0.01％。

白细胞总数检测模块主要包括光源13(对应于照明光源102)、第三滤光片12、反射镜8，第二成像镜头9，第四滤光片10和第二图像传感器11。光源13为LED型光源，位于检测卡1白细胞总数检测区1d正下方，距离10-30mm；光源13发出光，首先经过第三滤光片12，第三滤光片12透射光谱中心波长与光源13发光中心波长一致；第三滤光片12位于检测卡1 和光源13之间；血液样本中经与试剂反应后的白细胞在光源13照明下发出的信号光，经由反射镜8反射后偏振90°，然后经由第二成像镜头9和第四滤光片10聚焦成像到第二图像传感器11(可为面阵图像传感器，分辨率大于300万像素)。

由数据处理单元对图像传感器采集2和11获得的图像进行处理和分析，对于免疫检测荧光图像，数据处理单元识别并计算图中荧光亮带的总荧光强度，根据荧光计算被检测物质浓度；对于包细胞总数检测图像，统计图像中所有荧光亮点的数量，每一荧光亮点代表一个白细胞，计算白细胞总数；从而分别得到免疫检测结果和白细胞总数检测结果。主控制板控制数据处理单元将检测结果呈现于人机交互单元的显示屏上，用户可根据需要对检测结果进行传输和打印等。

以下结合具体实施例，更具体地说明本实用新型的内容，并对本实用新型作进一步阐述，但并不作为对本实用新型的限制。

实施例1：免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置

该实施例提供的免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置包括壳体、主控制板、检测卡、光电检测单元(包括免疫检测模块和白细胞总数检测模块)、数据处理单元和人机交互单元，其中主控制板设置于壳体内，光电检测单元、数据处理单元和人机交互单元与主控制板电连接，检测卡、数据处理单元和人机交互单元如以上结合附图所描述的，在此不再赘述。

光电检测单元中免疫检测模块的光源板7为阵列排布贴片LED，数量6个，间距4mm，LED发射光中心波长480nm；第一滤光片6的中心波长480nm，带宽30nm；分光镜5为短波通二向分色镜，50％分光波长500nm，500nm以下波长光透射率大于90％，550nm以上波长光的反射率大于90％；因此光源板7发出光经由分色镜5照射到检测卡1的免疫检测区；免疫检测区发出的信号光波长600nm，信号光经由分色镜5反射，进入第二滤光片4，第二滤光片4的中心波长600nm，透射光谱范围50nm，对于500nm以下波长光的透射率小于 0.01％。

光电检测单元中白细胞总数检测采用荧光染色方式，血液样本中的白细胞经荧光染色后激发波长480nm，发射荧光波长530nm，因此照明光源13为中心波长480nm的LED光源，第三滤光片12的中心波长480nm，带宽30nm；在光源激发下，白细胞总数检测区中的经荧光染料(细胞荧光染料和表面活性剂)染色的白细胞发出荧光，荧光信号经反射镜8反射，经过第二成像镜头9和第四滤光片10成像到第二图像传感器11中，第四滤光片10为中心波长540nm的滤光片，对于波长小于500nm的光透过率小于0.01％。

实施例2：免疫检测联合白细胞计数

该实施例采用实施例1提供的免疫检测联合包细胞计数的同步检测装置进行免疫检测联合白细胞计数，具体包括以下步骤：

1)样本制作

用移液器等取样装置取100μL血液样本，加入检测卡1的总加样口1c中，或分别加入第一加样孔216和第二加样孔217中，一部分血液样本(10μL)自动流入白细胞总数检测区1d 处的测试腔中，与预先封装在白细胞总数检测片400测试腔22内部的试剂(该实施例为SYTO9染料和季铵盐)完成溶血、染色反应；其它血液样本将流向免疫反应区，与免疫反应区中免疫靶标(该实施例中结合垫312上固定有量子点标记的CRP单克隆抗体和量子点标记的兔IgG、检测带316包被有与所述量子点标记的CRP单克隆抗体处于不同表位的另一种CRP单克隆抗体、质控带317包被有抗兔IgG)发生免疫反应，反应过程约10分钟。

2)检测成像

样本放置10分钟之后，反应完成，将检测卡1从插卡口109插入检测装置，使白细胞总数检测区1d对应于白细胞总数检测模块，免疫检测区1b对应于免疫检测模块，此时点击显示屏(为触控屏)上的检测按键，启动检测过程。

主控制板101驱动点亮白细胞总数检测模块的激发光源13，在光源激发下，检测卡1中白细胞总数检测区的经染色白细胞发出荧光，荧光信号经反射镜8反射，经过第二成像镜头9和第四滤光片10成像到第二图像传感器11，关闭光源13。之后，主控制板101驱动点亮免疫检测模块的光源板7发出照明光，照射到检测卡1的免疫检测区，检测卡1的免疫检测区发出的荧光经由分光镜5反射后，经由第二滤光片4和第一成像镜头3在第一图像传感器 2中聚焦成像，关闭光源7。

3)图像处理

主控制板101把采集到的白细胞总数检测图像和免疫检测图像数据传输给数据处理单元进行处理，对于白细胞总数检测图像的处理：处理前，预先用分划板标定成像光路的放大率；然后基于所述图像计算样本检测范围内的荧光亮点数量，进而根据所述放大率计算检测范围所对应的白细胞总数检测片的测试腔的腔室面积，并基于白细胞总数检测片的测试腔的腔室厚度，计算出检测范围对应的溶液体积，进而获得白细胞浓度，计算公式如下：

其中：ILNum为最终白细胞总数浓度；N为荧光亮点数量；a为血液样本稀释比例；S为检测范围所对应的白细胞总数检测片的测试腔的腔室面积，单位mm²；d为腔室厚度，单位μm；

对于免疫检测图像的处理：由数据处理单元识别并计算图像中荧光亮带的总荧光强度，根据荧光强度计算血液样本中被测物浓度。

4)结果输出

将检测结果在人机交互单元的显示屏上显示输出，用户也可根据需要对检测结果进行传输和打印等。

最后应说明的是：以上所述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不用于限制本实用新型，尽管参照前述实施例对本实用新型进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种免疫检测联合白细胞计数的同步检测装置，其特征在于，包括：

壳体；

主控制板，其设置在所述壳体内；

光电检测单元，其设置在所述壳体内，与所述主控制板电连接，包括免疫检测模块和白细胞总数检测模块，每一检测模块均包括图像传感器，用于采集图像；

数据处理单元，其集成于所述主控制板，用于对所述图像传感器采集的图像进行处理和分析；

人机交互单元，其与所述主控制板电连接；和

检测卡，其可安装于所述壳体上设置的用于安装所述检测卡的插卡口内，包括免疫检测片和白细胞总数检测片，分别与所述免疫检测模块和白细胞总数检测模块相适配。

2.根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述检测卡为免疫检测与白细胞计数组合检测卡，包括：

检测卡底壳(200)、检测卡上盖(200’)、以及安装在上盖和底壳所形成的盒体内的免疫检测片(300)和白细胞总数检测片(400)，其中：

检测卡上盖(200’)设有为免疫检测片(300)加样的第一加样孔(216)、为白细胞总数检测片(400)加样的第二加样孔(217)以及用于透出免疫检测片(300)的免疫检测区的第一判读窗(218)和用于透出白细胞总数检测片(400)的白细胞检测区的第二判读窗(219)，检测卡底壳(200)设有用于透出白细胞总数检测片(400)的白细胞检测区的第三判读窗(223)，第二判读窗(219)和第三判读窗(223)对齐；第一加样孔(216)与第二加样孔(217)各自分离，或连通为一总加样口(1c)。

3.根据权利要求2所述的装置，其特征在于，所述白细胞总数检测片(400)包括组装手柄(21)以及设于组装手柄上的测试腔(22)，测试腔(22)为两个有一定间隙的平行的腔体侧壁(23)形成的半开放空腔，具有测试区(24)、进样口(25)以及连通进样口(25)和测试区(24)的引流区(26)，测试区(24)的厚度H_测小于引流区(26)的厚度H_引；进样口(25)与第二加样孔(217)对位，测试区(24)与第二判读窗(219)和第三判读窗(223)对位。

4.根据权利要求3所述的装置，其特征在于，所述测试腔(22)上设置有至少一个排气孔，其贯穿测试区(24)或引流区(26)的一腔体侧壁或对称贯穿测试区(24)或引流区(26)的两腔体侧壁；所述检测卡底壳(200)和/或检测卡上盖(200’)上设有至少一个贯穿盒体的连通孔，所述排气孔通过与其数量与位置匹配的连通孔与外界大气连通。

5.根据权利要求3或4所述的装置，其特征在于，所述白细胞总数检测片进一步包含以下任一或叠加技术手段：

技术手段一：所述进样口(25)位于测试腔(22)两腔体侧壁(23)上端缘开口处，其中两腔体侧壁(23)中的一个位于进样口(25)处的上端缘设有进样缺口(28)，以通过该进样缺口(28)处注入液体样品；

技术手段二：所述进样口(25)呈凹弧形，其下滑弧线的切线与该进样口(25)的水平基准面之间的夹角α的取值范围为15°～45°；

技术手段三：所述腔体侧壁(23)的端缘内楞设有过渡圆角(210)，过渡圆角值R的范围为0.2mm-1.5mm。

6.根据权利要求5所述的装置，其特征在于，所述免疫检测片包括：相互重叠固定设置在粘性底衬上的分析膜、结合垫、样品垫、吸水垫，其中在所述分析膜上设置有检测带和质控带，所述检测带和质控带构成所述免疫检测片的免疫检测区。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的装置，其特征在于，所述免疫检测模块(104)包括：

光源板(7)，用于发射光；

第一滤光片(6)，用于透过所述光源板(7)发射的光中固定波长范围的光；

分光镜(5)，用于透过所述第一滤光片的光源发射的光，并反射免疫检测片发出的荧光；

第二滤光片(4)，用于透过经分光镜反射的免疫检测片发出的荧光中固定波长范围的光；

第一成像镜头(3)，用于将免疫检测片发出的荧光成像；和

第一图像传感器(2)，用于聚焦荧光成像并传送至数据处理单元；

其中所述第一滤光片设置于所述分光镜和光源之间，所述分光镜设置在所述免疫检测片和第一滤光片之间，所述成像镜头设置于可接收到所述分光镜反射的荧光的位置，所述成像镜头设置在所述第二滤光片和图像传感器之间。

8.根据权利要求7所述的装置，其特征在于，所述光源板由平行排列的数个LED光源构成。

9.根据权利要求1-4中任一项所述的装置，其特征在于，所述白细胞总数检测模块(105)包括：

光源(13)，用于发射光；

第三滤光片(12)，用于透过所述光源发射的光中固定波长范围的光；

反射镜(8)，用于将白细胞总数检测片发出的荧光反射至成像镜头上；

第二成像镜头(9)，用于将白细胞总数检测片发出的荧光成像；

第四滤光片(10)，用于透过成像荧光中固定波长范围的光；和

第二图像传感器(11)，用于聚焦细胞荧光成像并传送至数据处理单元；

其中所述第三滤光片设置于所述白细胞总数检测片和光源之间，所述白细胞总数检测片设置在所述第三滤光片和反光镜之间，所述第二成像镜头设置于可接收到所述反射镜反射的荧光的位置，所述第四滤光片设置在所述图像传感器和第二成像镜头之间。

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