CN210448755U - 一种胞外囊泡纯化过滤装置 - Google Patents
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Abstract
本申请提供的一种胞外囊泡纯化过滤装置，涉及胞外囊泡纯化技术领域，包括：推注筒体，所述推注筒体的一端为进口，另一端为出口；活塞，所述活塞活动密封安装在所述推注筒体的内筒中；推注杆，所述推注杆的底端与所述活塞连接，用于沿所述推注筒体的长度方向往复移动所述活塞；滤膜，所述滤膜安装在所述推注筒体的内筒并位于所述出口与所述活塞之间。在上述技术方案中，该胞外囊泡纯化过滤装置能够便捷地去除胞外囊泡中的杂质，提高操作效率。并且还可以保证溶液不会在过滤的过程中喷洒到外面，造成样本损失及危及人身安全，不会由于操作问题产生污染。
Description
技术领域
本申请涉及胞外囊泡纯化技术领域，尤其是涉及一种胞外囊泡纯化过滤装置。
背景技术
胞外囊泡是原核/真核生物细胞经过“内吞-融合-外排”等一系列调控过程而形成的细胞外纳米级小囊泡，广泛存在于血液、唾液、尿液、乳汁等体液以及细胞培养上清中。大量的研究表明，胞外囊泡在疾病发生、诊断以及治疗过程中均发挥着重要作用。例如胞外囊泡是多种疾病(肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病、组织损伤修复)发生的重要调控因子。例如，肿瘤细胞分泌的胞外囊泡能够作用于肿瘤微环境中的肿瘤细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、免疫相关细胞，从而调控肿瘤的发生、转移以及复发过程。
胞外囊泡的分离纯化是超速离心法，在离心前后需要进行细胞上清/血浆/尿液等样本进行过滤去除杂质的过程。但是，现有的方式操作繁琐，影响实验效率。
实用新型内容
本申请的目的在于提供一种胞外囊泡纯化过滤装置，以解决现有技术中过滤去除杂质过程操作繁琐的技术问题。
本申请提供的一种胞外囊泡纯化过滤装置，包括：
推注筒体，所述推注筒体的一端为进口，另一端为出口；
活塞，所述活塞活动密封安装在所述推注筒体的内筒中；
推注杆，所述推注杆的底端与所述活塞连接，用于沿所述推注筒体的长度方向往复移动所述活塞；
滤膜，所述滤膜安装在所述推注筒体的内筒并位于所述出口与所述活塞之间。
可能的实现方式中，还包括：
封堵件，所述封堵件封堵在所述进口处；所述封堵件上设置有开口，所述推注杆密封穿过所述开口以伸入至所述推注筒体的内筒。
可能的实现方式中，所述封堵件为皮套。
可能的实现方式中，所述推注筒体的为透明筒体。
可能的实现方式中，所述推注筒体的表面设置有刻度。
可能的实现方式中，所述出口处连通有突出的管状嘴。
可能的实现方式中，还包括底座，所述底座上设置有安装筒，用于与所述管状嘴套接。
可能的实现方式中，所述滤膜包括纳米级滤膜，所述滤膜上分布有均布的纳米级过滤孔。
可能的实现方式中，还包括把手，所述把手设置在所述推注杆的顶端。
可能的实现方式中，所述出口的横截面积小于所述进口的横截面积。
在上述技术方案中，该胞外囊泡纯化过滤装置能够便捷地去除胞外囊泡中的杂质，提高操作效率。并且还可以保证溶液不会在过滤的过程中喷洒到外面，造成样本损失及危及人身安全，不会由于操作问题产生污染。
附图说明
为了更清楚地说明本申请具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本申请的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本申请一个实施例提供的胞外囊泡纯化过滤装置的主视图。
附图标记：
1、推注筒体；
2、活塞；
3、推注杆；
4、滤膜；
5、封堵件；
6、管状嘴；
7、底座；
8、安装筒；
11、进口；
12、出口；
13、刻度；
31、把手。
具体实施方式
下面将结合附图对本申请的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
在本申请的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本申请和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本申请的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
在本申请的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本申请中的具体含义。
如图1所示，本实施例提供的一种胞外囊泡纯化过滤装置，包括：
推注筒体1，推注筒体1的一端为进口11，另一端为出口12；
活塞2，活塞2活动密封安装在推注筒体1的内筒中；
推注杆3，推注杆3的底端与活塞2连接，用于沿推注筒体1的长度方向往复移动活塞2；
滤膜4，滤膜4安装在推注筒体1的内筒并位于出口12与活塞2之间。
在使用之前，推注杆3和推注筒体1是分开放置的，此时可以将收集的细胞上清倒入至推注筒体1的内筒中，然后将推注杆3推入推注筒体1的内筒。然后，在推注筒体1的出口12下面放置收集管，便可以开始进行推注纯化操作，使细胞上清透过滤膜4纯化过滤后从出口12排出至收集管内。
在一个可能的例子中，以纯化过滤293T细胞上清胞外囊泡为例，293T细胞传代至150mm培养皿。待293T细胞密度长至60-70％，吸出培养基，用磷酸缓冲盐溶液(PhosphateBuffer Saline，PBS)洗涤3次，然后每皿加入50ml无胞外囊泡血清培养液，培养24-48h，收集上清备用。在进行超速离心(120000g)分离胞外囊泡之前，则可以采用该胞外囊泡纯化过滤装置进行胞外囊泡杂质去除。由于胞外囊泡直径在40-150nm,所以便可以采用孔径大于150nm的滤膜4进行纯化过滤，使大于150nm的蛋白等物质无法通过滤膜4，从而实现胞外囊泡的纯化。
此时，推注杆3和推注筒体1是分开放置的，首先收集的293T细胞上清倒入推注筒体1，将推注杆3推入推注筒体1，下面放置收集管。此时便可以开始推动推注杆3，利用推注杆3移动活塞2，进行推注纯化操作，细胞上清流经滤膜4，将小粒径的胞外囊泡进行进一步富集，得到去除杂质的细胞上清进行后续超离的实验。
推注筒体1量程可以设置为100ml。每次可以纯化100ml的细胞上清。需要说明的是，该胞外囊泡纯化过滤装置同样可应用于其他场景，例如实验试剂去菌、去杂质的过程，可根据具体实验要求，设置不同孔径的滤膜4及不同容积的推注筒体1。
所以，该胞外囊泡纯化过滤装置能够便捷地去除胞外囊泡中的杂质，提高操作效率。并且还可以保证溶液不会在过滤的过程中喷洒到外面，造成样本损失及危及人身安全，不会由于操作问题产生污染。
可能的实现方式中，还包括：封堵件5，封堵件5封堵在进口11处；封堵件5上设置有开口，推注杆3密封穿过开口以伸入至推注筒体1的内筒。封堵件5采用不影响相应溶液成分的材质，设置封堵件5的目的是防止溶液喷射出来，同时利用其开口还能够保证推注杆3的活动，以推动活塞2。优选的，封堵件5为皮套，也即在皮套上设置开口，皮套的形状可以为圆形、矩形或其他几何形状，以适宜防护和不影响操作为目的可以进行不同选择。皮套具有不透水且结构轻盈、简单的特点，而且还不影响相应溶液成分。
可能的实现方式中，推注筒体1的为透明筒体。透明筒体可以方便观察筒内的过滤过程，使实验人员可以对整个实验过程以及实验速率进行精准的掌控。
可能的实现方式中，推注筒体1的表面设置有刻度13。由于推注筒体1的为透明筒体，所以利用刻度13可以随时观察过滤液体的体积，从而在细胞上清的注入、纯化过滤等过程中均能够精准掌控剂量。
可能的实现方式中，出口12处连通有突出的管状嘴6。突出的管状嘴6能够方便过滤液体的收集，即细胞上清经过纯化过滤后便可以集中从管状嘴6排出，从而集中进行收集。
可能的实现方式中，还包括底座7，底座7上设置有安装筒8，用于与管状嘴6套接。利用安装筒8与管状嘴6之间的插接配合，可以方便推注筒体1的稳定放置。在进行操作时，也可以首先将推注筒体1的管状嘴6插入底座7上的安装筒8内进行放置，待将收集的293T细胞上清倒入推注筒体1的内筒，再将推注筒体1从底座7取出，进行推注操作。
可能的实现方式中，滤膜4可以为纳米级滤膜，滤膜4上分布有均布的纳米级过滤孔，孔径大于150nm。由于胞外囊泡直径在40-150nm，所以当滤膜4的孔径大于150nm时，大于150nm的蛋白等物质将无法通过滤膜4，从而实现胞外囊泡的纯化。优选的，滤膜4还可以采用220nm的孔径，以使大于220nm的蛋白等物质无法通过滤膜4。优选的，注射器筒量程为100ml。每次可以纯化100ml的细胞上清，进行100ml细胞上清的纯化操作。
可能的实现方式中，还包括把手31，把手31设置在推注杆3的顶端。把手31可以方便实验人员手持推注杆3。优选的，出口12的横截面积小于进口11的横截面积。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本申请进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.一种胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，包括：
推注筒体，所述推注筒体的一端为进口，另一端为出口；
活塞，所述活塞活动密封安装在所述推注筒体的内筒中；
推注杆，所述推注杆的底端与所述活塞连接，用于沿所述推注筒体的长度方向往复移动所述活塞；
滤膜，所述滤膜安装在所述推注筒体的内筒并位于所述出口与所述活塞之间。
2.如权利要求1所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，还包括：
封堵件，所述封堵件封堵在所述进口处；所述封堵件上设置有开口，所述推注杆密封穿过所述开口以伸入至所述推注筒体的内筒。
3.如权利要求2所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，所述封堵件为皮套。
4.如权利要求1所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，所述推注筒体的为透明筒体。
5.如权利要求4所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，所述推注筒体的表面设置有刻度。
6.如权利要求1所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，所述出口处连通有突出的管状嘴。
7.如权利要求6所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，还包括底座，所述底座上设置有安装筒，用于与所述管状嘴套接。
8.如权利要求1-7中任意一项所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，所述滤膜包括纳米级滤膜，所述滤膜上分布有均布的纳米级过滤孔。
9.如权利要求1-7中任意一项所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，还包括把手，所述把手设置在所述推注杆的顶端。
10.如权利要求1-7中任意一项所述的胞外囊泡纯化过滤装置，其特征在于，所述出口的横截面积小于所述进口的横截面积。
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