CN209768655U - 一种新型昆虫病原线虫扩散仪 - Google Patents
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Abstract
本实用新型的一种新型昆虫病原线虫扩散仪,本实用新型的一种新型昆虫病原线虫扩散仪,包括圆形透明的载玻板,所述载玻板的边缘设置有向上凸起的围坝,载玻板底部中心标出有圆形的线虫释放区,所述线虫释放区外侧的载玻板底部依次标出有若干圆形且与线虫释放区同心的区域线,载玻板底部表面边缘均匀标出有四个圆形的寄主固定区。它提高了检测准确度,减少了检测时间,减轻了多次过筛对线虫的伤害。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种新型昆虫病原线虫扩散仪。
背景技术
昆虫病原线虫是一类专门寄生昆虫的线虫,通过3龄感染期幼虫对害虫身体的自然开口或节间膜侵入的方式进入寄主体内,并释放携带的共生细菌,使其在害虫体内繁殖,产生毒素,最终导致害虫死亡。因EPNs具有寄主范围广泛,主动寻找寄主,对非靶标生物安全,对环境无副作用,能与许多农药、肥料混用等优点,已广泛应用于防治蛴螬、地老虎、桃小食心虫、天牛等多种农林地下害虫。
然而,与化学杀虫剂相比,昆虫病原线虫杀虫效果缓慢且不稳定。研究表明,其杀虫效果受到生物因素(昆虫病原线虫品系和剂量、不同品系昆虫病原线虫混合、寄主虫态及龄期等)、环境因素(温度、湿度、杀虫剂等)以及施用方法(喷施、大水漫灌等)等因素的影响。其中,昆虫病原线虫对寄主昆虫或寄主昆虫植物的扩散能力的强弱则直接影响昆虫病原线虫致病力的强弱。
当前在研究线虫扩散能力时主要采用土壤沙柱法。具体步骤为:采用自制PCV圆柱,圆柱内填入灭菌的沙土。将圆柱平分为几段并标号,将线虫放在圆柱的一段,寄主放在圆柱的另一端。处理不同时间后,调查线虫在圆柱内的扩散情况。此种方法需要对不同段内的线虫进行清洗,而清洗的过程则是十分繁琐,需要将土壤进行100、200、400和600目的筛网冲洗,最后才能得到需要的线虫。且在筛选过程中,很多线虫在过筛中死亡或被沙土破碎,在统计结果时造成很多的误差,况且筛选过程,费时费力,极大地限制开展线虫远距离扩散能力的研究。
因此,针对现有技术的不足,有必要研发一种新的昆虫病原线虫扩散仪,从而扩大应用前景。
实用新型内容
为解决以上技术上的不足,本实用新型提供了一种新型昆虫病原线虫扩散仪,它提高了检测准确度,减少了检测时间,减轻了多次过筛对线虫的伤害。
本实用新型是通过以下措施实现的:
本实用新型的一种新型昆虫病原线虫扩散仪,包括圆形透明的载玻板,所述载玻板的边缘设置有向上凸起的围坝,载玻板底部中心标出有圆形的线虫释放区,所述线虫释放区外侧的载玻板底部依次标出有若干圆形且与线虫释放区同心的区域线,载玻板底部表面边缘均匀标出有四个圆形的寄主固定区。
上述载波板采用圆形的透明塑料板,直径为16cm,厚度为1.5mm,线虫释放区直径为1cm,区域线为圆形实线,自内到外划分为4个区域,每个区域长4cm,区域范围为0-2cm、2-4cm、4-6cm和6-8cm。
上述相邻的两条区域线中间标出有一条圆形同心的区分线,所述区分线采用短虚线。
上述主固定区直径为1.5cm。
本实用新型的有益效果是:1.本实用新型分为不同型号圆形载波板,且根据其型号的不同划分不同扩散距离的装置,可研究不同线虫对同一昆虫及寄主植物、或相同线虫对不同昆虫及寄主植物的扩散。2.本实用新型分一体性结构,其目的在使用时不用拼装,便于开展试验研究。3.本实用新型整体为聚乙烯、聚丙烯、聚甲基丙烯酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚碳酸树酯、聚苯乙烯等类型塑料材料制作,具有使用寿命长、耐热性能高,不易于老化等优点,且塑料材料更容易在装置背面划定不同颜色加以区分。4.本实用新型依据寄主昆虫的大小及不同线虫扩散能力的差异,可选择不同型号的线虫扩散仪,有效减少常规PCV管土壤检测费时费力,降低了实验误差。5.本实用新型设计构思巧妙,结构简单实用,作用明显,使用效果显著,具有良好的市场前景和推广应用价值。
附图说明
图1为本实用新型昆虫病原线虫扩散仪示意图。
其中,1、载玻板;2、围坝;3、线虫释放区;4、寄主固定区;5、区域线;6、区分线。
具体实施方式
下面结合附图对本实用新型做进一步详细的描述:
如图1所示,本实用新型的一种新型昆虫病原线虫扩散仪,包括圆形透明的载玻板1,载玻板1的边缘设置有向上凸起的围坝2,载玻板1底部中心标出有圆形的线虫释放区3,线虫释放区3外侧的载玻板1底部依次标出有若干圆形且与线虫释放区3同心的区域线5,载玻板1底部表面边缘均匀标出有四个圆形的寄主固定区4。载波板采用圆形的透明塑料板,直径为16cm,厚度为1.5mm,线虫释放区3直径为1cm,区域线5为圆形实线,自内到外划分为4个区域,每个区域长4cm,区域范围为0-2cm、2-4cm、4-6cm和6-8cm。相邻的两条区域线5中间标出有一条圆形同心的区分线6,区分线6采用短虚线。主固定区直径为1.5cm。
利用上述昆虫病原线虫远距离扩散能力检测装置研究昆虫病原线虫对寄主的扩散能力的方法,包括步骤如下:
(1)首先将配好的50mL的琼脂液(1.6%的25mL琼脂,5mM K2SO4、1mM CaCl2和1mMMgSO4)加入圆形载波板内,其厚度为2.0~2.5mm,低于圆柱瓶底12部小孔10,防止琼脂液堵塞小孔10。
(2)待琼脂液凝固后,在4个寄主固定区4内分别放置加入相同数量的寄主昆虫。寄主昆虫的数量根据寄主昆虫的大小确定。
(3)将不同昆虫病原线虫悬浮液在不同容器中充分混合均匀后,用移液器各自吸取50μL的线虫悬浮液(大约350条左右),加入到载波板的线虫释放区33。
(4)处理后的检测装置置于温度22±1℃、相对湿度60%±10%的培养箱内,光周期为24h全暗。处理不同时间后,将检测装置放置-20℃冰箱内3min,用来固定线虫,并于体式显微镜下观察不同区域线55内的线虫数量,计算此不同线虫运动到各个区域的百分率。
(5)利用统计分析软件,检验不同线虫品系对相同寄主昆虫,或相同线虫品系对不同寄主昆虫的扩散能力的差异。
本实用新型的计数装置适用于所有线虫品系,包括斯氏线虫属和异小杆线虫属的所用线虫品系,昆虫病原线虫品系包括在室内高致病力品系的筛选、繁殖方法、保存方法,田间应用杀虫范围以及致病机理等所有研究中所出现的线虫品系。步骤(1)中,所用的琼脂液配方试剂均为分析纯试剂,各生物制剂公司均有售。步骤(2)中,寄主昆虫的数量根据寄主昆虫的大小确定。如大蜡螟等大型昆虫幼虫可加入3~4头,韭蛆等小型昆虫幼虫可放入10~15头。步骤(3)中,应用的昆虫病原线虫通过体式显微镜镜检,其存活率均应为95%以上,转移采用移液器吸取线虫悬浮液转移载玻板11线虫释放区33上,在吸取线虫之前,用移液器对线虫悬浮液应充分混合2~3次。步骤(4)中温湿度条件可以根据不同的研究目的自由选择。步骤(5)中,统计分析软件为SPSS、DPS等软件。
以上所述仅是本专利的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本专利技术原理的前提下,还可以做出若干改进和替换,这些改进和替换也应视为本专利的保护范围。
Claims (4)
1.一种新型昆虫病原线虫扩散仪,其特征在于:包括圆形透明的载玻板,所述载玻板的边缘设置有向上凸起的围坝,载玻板底部中心标出有圆形的线虫释放区,所述线虫释放区外侧的载玻板底部依次标出有若干圆形且与线虫释放区同心的区域线,载玻板底部表面边缘均匀标出有四个圆形的寄主固定区。
2.根据权利要求1所述新型昆虫病原线虫扩散仪,其特征在于:所述载玻板采用圆形的透明塑料板,直径为16cm,厚度为1.5mm,线虫释放区直径为1cm,区域线为圆形实线,自内到外划分为4个区域,每个区域长4cm,区域范围为0-2cm、2-4cm、4-6cm和6-8cm。
3.根据权利要求1所述新型昆虫病原线虫扩散仪,其特征在于:相邻的两条区域线中间标出有一条圆形同心的区分线,所述区分线采用短虚线。
4.根据权利要求1所述新型昆虫病原线虫扩散仪,其特征在于:所述主固定区直径为1.5cm。
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2019
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