CN208989232U - 一种小鼠灌注固定装置 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种小鼠灌注固定装置,其包括:一固定装置和一输液装置;所述的固定装置为有机玻璃制成的透明长方状盒体,并设有操作台、器械盒和收集盒;所述的输液装置设有输液瓶、输液泵、输液管和输液针。本实用新型所述的小鼠灌注固定装置,集操作台、器械盒和废液收集盒为一体,具有功能多样、安全、高效、便捷等优点。
Description
技术领域
本实用新型属于医学技术领域,特别是涉及一种小鼠灌注固定装置。
背景技术
组织化学技术被广泛应用于生物医药的基础和临床研究的各个领域,通过相应的组织化学方法,在组织细胞内原位显示其中的各种化学成分,并对其进行定性、定位和定量研究,从而分析生理或病理状态下生物体的代谢、机能及形态变化规律。一般而言,组织样品需要经过取材、固定、包埋和切片等步骤,才能进行相应的组织化学染色。为了更好地保持组织和细胞的固有形态结构、化学成分的分布和反应性等,组织样品经过取材后要迅速固定,这样能够有效抑制自溶、阻止溶解、防止腐败、减少损伤、硬化组织、改变折光率和增强染色等。因此,在制备切片的过程中,固定是非常重要的步骤。对于不同类型的组织应选择合适的固定剂和固定方法,针对中枢神经系统和肝脏等器官的取材,通常选用多聚甲醛作为固定剂,配合灌注固定法,通过心血管途径将固定剂迅速灌注到全身各组织,使细胞在原位被快速均匀固定,从而有效保存酶的活性及组织细胞的细微结构。同时,灌注冲洗还能排除血液中红细胞内假过氧化物酶的干扰。
多聚甲醛是甲醛以聚合物形式存在的一种白色固体试剂,多作为固定剂替代甲醛使用,可以减少甲醛溶液中的稳定剂甲醇对酶反应的影响。由于多聚甲醛具有组织穿透力强、组织收缩小、固定均匀、能保存脂肪和类脂质及价格低廉等优点,常用于动物灌注固定及灌注后固定。虽然多聚甲醛是良好的固定剂,但它易挥发、有刺激性气味、有腐蚀性、可致癌。如果在灌注过程中无法有效回收多聚甲醛,其在室内达到一定浓度时,会刺激实验人员产生眼痒、流泪、咳嗽及头痛等不适反应,并且长期接触多聚甲醛对呼吸道有致敏作用(MSDS)。因此,如何在灌注固定过程中最大程度的回收多聚甲醛并进行后续处理,对于保护实验人员人体健康和环境安全至关重要。
目前,小鼠灌注固定装置多为手工自制,缺乏有效的操作、收集和储存装置。同时,灌注固定过程中无法有效回收多聚甲醛,灌注固定后的废液通常直接倒入下水道,直接危害人体健康和环境安全。另外,实验操作需要至少两人同时配合,且每次只能灌注一只小鼠,整个过程耗时耗力。
实用新型内容
基于此,本实用新型的目的在于,提供一种简易、安全、高效的小鼠灌注固定装置。
本实用新型的技术方案如下:
一种小鼠灌注固定装置,其包括一固定装置和一输液装置;所述的固定装置为有机玻璃制成的透明长方状盒体,并设有操作台、器械盒和收集盒;所述的输液装置设有输液瓶、输液泵、转换阀、输液管和输液针。
进一步地,所述的操作台和器械盒并排设置,并置放在所述收集盒的顶部;所述的操作台设有收集孔、固定孔、固定绳和固定扣,所述收集孔与所述收集盒相连通,所述固定绳缠绕安装在所述固定孔上,所述固定扣安装在所述固定绳上;所述的收集盒设有进水孔、出水孔以及两个密封塞,所述两个密封塞分别过盈配合安装在所述进水孔、出水孔中。
进一步地,所述的操作台与器械盒均呈凹字形,且两者之间通过一侧壁相隔,所述的侧壁上设有卡槽;所述的输液管可拆卸地安装在所述的卡槽上。
进一步地,所述收集孔、固定孔均设置在所述操作台的底侧,并与所述收集盒相连通;所述进水孔位于所述收集盒一端的上表面,所述出水孔位于所述收集盒另一端的侧面。
进一步地,所述的操作台设有两组收集孔、四组固定孔、四组固定绳和四组固定扣;每组固定孔均设有两个以上的固定孔,每组固定孔分别安装有一组固定绳和一组固定扣;所述四组固定孔的分布位置分别与小鼠四肢的展开位置相对应,所述两组收集孔的位置分别位于小鼠躯干固定位置的两侧。
进一步地,所述的操作台包括并排设置的第一操作台和第二操作台,所述的器械盒包括并排设置的第一器械盒、第二器械盒和第三器械盒。
进一步地,所述的第一操作台与第一器械盒通过第一侧壁相隔并排设置,所述的第二操作台与第三器械盒通过第二侧壁相隔并排设置;所述的第一侧壁上设有第一卡槽,所述的第二侧壁上设有第二卡槽。
进一步地,所述输液管的一端安装有与之相连通的输液针,另一端通过所述输液泵、转换阀与所述输液瓶相连通。
进一步地,所述的输液装置设有若干个输液瓶,所述若干个输液瓶的液体通过所述转换阀轮流输送至所述输液管。
本实用新型所述的小鼠灌注固定装置,集操作台、器械盒和废液收集盒为一体,具有功能多样、安全、高效、便捷等优点。本小鼠灌注固定装置只需放置在实验平台即可操作,也可放置在通风橱等环境中操作,可移动性强,可满足教学和科研的各种条件使用。灌注操作后的废液,能够快速收集至收集盒中,能有效避免多聚甲醛等固定剂的挥发,避免多聚甲醛等固定剂对实验人员的身体和环境造成危害。通过并排设置两个操作台,能够交替进行实验小鼠的灌注固定,有效提高实验效率。通过配置若干个输液瓶,并与转换阀、输液泵配合使用,能够有效减少灌注固定的时间和耗液量,从而有效提高灌注固定的效果。
附图说明
图1为本实用新型所述小鼠灌注固定装置的固定装置结构示意图;
图2为本实用新型所述小鼠灌注固定装置的输液装置结构示意图;
图3为本实用新型所述小鼠灌注固定装置的操作台结构示意图;
图4为本实用新型所述小鼠固定灌注装置的固定绳结构示意图。
具体实施方式
实施例一:小鼠灌注固定装置
如图1至图4所示,本实用新型所述的小鼠灌注固定装置,包括一固定装置和一输液装置。该固定装置为一有机玻璃制成的透明长方状盒体,其设有第一操作台11、第二操作台12、第一器械盒21、第二器械盒22、第三器械盒23和收集盒30。该输液装置设有第一输液瓶41、第二输液瓶42、转换阀43、输液泵44、输液管45和输液针46。
收集盒30位于长方状盒体的底部,第一操作台11、第二操作台12、第一器械盒21、第二器械盒22、第三器械盒23均位于收集盒30的顶部,且均呈凹字形。第一器械盒21和第三器械盒23可用于存放手术器械,第二器械盒22可用于存放动脉夹。
收集盒30的一端上表面设有进水孔31,另一端侧面设有出水孔32,进水孔31和出水孔32上分别过盈配合安装有密封塞33,密封塞33为一弹性橡胶塞。
第一操作台11和第二操作台12横向并排设置,第一器械盒21、第二器械盒22和第三器械盒23依次横向并排设置。第一操作台11和第一器械盒21纵向并排设置,两者之间通过第一侧壁13相隔;第二操作台12和第三器械盒23纵向并排设置,两者之间通过第二侧壁14相隔。第一侧壁13和第二侧壁14上分别设有一个用于安装输液管45的卡槽15。
第一操作台11和第二操作台12各设有两组收集孔51、四组固定孔52、四组固定绳53以及四组固定扣54。收集孔51和固定孔52分别设置在第一操作台11和第二操作台12的底侧,并分别与收集盒30相连通。两组收集孔51的位置分别位于小鼠躯干固定位置的两侧,四组固定孔52的分布位置分别与小鼠四肢的展开位置相对应。每组固定孔52均设有两个固定孔,固定绳53缠绕安装在同一组的两个固定孔52上,固定扣54安装在固定绳53上。
输液管45的一端安装有与之相连通的输液针46,另一端通过转换阀43、输液泵44分别与第一输液瓶41、第二输液瓶42相连通,第一输液瓶41、第二输液瓶42的液体通过转换阀43轮流输送至输液管45中。
实施例二:小鼠灌注固定方法
1、配制溶液
磷酸盐缓冲液:先分别配制1mol/L的K2HPO4溶液和1mol/L的KH2PO4溶液,然后取80.2mL的K2HPO4溶液和19.8mL的KH2PO4溶液,混合均匀,得到0.1mol/L的磷酸盐缓冲液,pH=7.4,于4℃保存备用。
多聚甲醛溶液:称取4g多聚甲醛,溶解于100mL 0.1mol/L的磷酸盐缓冲液中,于磁力搅拌器上搅拌加热,滴加1mol/L的NaOH溶液至澄清,调整pH值至7.4,定性滤纸过滤,得到质量浓度为4%的多聚甲醛溶液,于4℃避光保存备用。
水合氯醛溶液:称取4.3g水合氯醛,溶解于100mL 0.1mol/L的磷酸盐缓冲液中,搅拌均匀,得到质量浓度为4.3%的多聚甲醛溶液,于4℃避光保存备用。
2、麻醉
采用SPF级体重为20~30g的BALB/c小鼠作为采集体,雌雄不限。
取水合氯醛溶液,以0.01mL/g体重的剂量,对小鼠进行腹腔注射麻醉,2~3分钟后夹捏小鼠后肢,如无反应,说明麻醉程度合适,如有肢体抽动反应,追加少许麻醉剂,以避免手术疼痛引起肌肉痉挛压迫血管,影响灌注效果。
3、固定
取实施例一的小鼠灌注固定装置,分别将磷酸盐缓冲液、多聚甲醛溶液装入实施例一所述的小鼠灌注固定装置的第一输液瓶41、第二输液瓶42中,并将输液管45安装在第一卡槽15中。将手术器械、动脉夹等分别放置在第一器械盒21、第二器械盒22中。
将麻醉后的小鼠放置在第一操作台11的两组收集孔51中间,小鼠腹面朝上,分别将小鼠的前肢和后肢分别穿入四组固定绳53内,对应拉紧固定扣54,进而将小鼠的四肢固定在第一操作台11上。然后,将小鼠的舌头拉出,防止舌头后缩阻塞呼吸道。
4、穿刺
从小鼠的后肢中线剪开腹部皮肤,分离皮下组织至两侧腋前线,剪开肌肉层及膈肌,沿左右肋缘横向剪开两胸侧壁,用止血钳夹住剑突将胸壁翻向头部,切勿横断。打开胸腔,剪开心包膜,暴露心脏,将输液针46插入左心室中,用动脉夹固定心尖及输液针46,操作时间控制在60秒以内,避免输液针46刺破心室壁,避免动脉夹夹闭输液针46的针尖。
5、灌注
开启输液泵44,设定输液程序(20mL,5分钟),先将磷酸盐缓冲液注入心脏内,右心耳充盈后用眼科剪剪开,开放体循环通道。调整转换阀43,将多聚甲醛溶液注入心脏,设定输液程序(20mL,5分钟;30mL,15分钟)。此时,小鼠出现强烈反应,尾巴向上翘起抖动。灌注固定的废液通过位于小鼠身体两侧的收集孔51流入收集盒30内进行暂存。
当第一操作台11的小鼠进行灌注固定后,可以在第二操作台12进行第二只小鼠的灌注固定。通过两个操作台的交替灌注,可以有效提高灌注效率,节约实验操作时间。
6、取样
沿小鼠两耳中线剪开头部皮肤,在枕骨大孔后方剪断颈椎,分离除去后颈部肌肉,用手术刀刀尖沿头骨中缝划开头骨,注意避免损伤大脑,用尖镊子从枕骨大孔处开始,逐步剔除颅骨,注意清理脑表面的脑膜和两侧的断骨,用眼科剪于两侧剪断视神经并探到颅底,可将整个脑组织取出。灌注固定成功的脑组织具有相当的硬度和弹性,呈白色,且无血色。
将完整取下的脑组织置于含有多聚甲醛溶液的离心管中,于4℃继续固定4~6小时,然后将离心管内的多聚甲醛溶液置换成质量浓度为30%的蔗糖溶液,于4℃脱水至脑组织沉入离心管底部。最后,将脱水后的脑组织放入冻存管中,在液氮中迅速冰冻20秒以上,于-80℃保存。
7、清洗
待灌注固定结束后,打开收集盒30的出水孔32,将灌注固定后的废液倒入贮液桶中进行回收处理,然后打开进水孔31,通入自来水清洗灌注固定装置的内部和表面。
以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对实用新型专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本实用新型构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本实用新型的保护范围。
Claims (9)
1.一种小鼠灌注固定装置,其特征在于:包括一固定装置和一输液装置;所述的固定装置为有机玻璃制成的透明长方状盒体,并设有操作台、器械盒和收集盒;所述的输液装置设有输液瓶、输液泵、转换阀、输液管和输液针。
2.根据权利要求1所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述的操作台和器械盒并排设置,并置放在所述收集盒的顶部;所述的操作台设有收集孔、固定孔、固定绳和固定扣,所述收集孔与所述收集盒相连通,所述固定绳缠绕安装在所述固定孔上,所述固定扣安装在所述固定绳上;所述的收集盒设有进水孔、出水孔以及两个密封塞,所述两个密封塞分别过盈配合安装在所述进水孔、出水孔中。
3.根据权利要求2所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述的操作台与器械盒均呈凹字形,且两者之间通过一侧壁相隔,所述的侧壁上设有卡槽;所述的输液管可拆卸地安装在所述的卡槽上。
4.根据权利要求2所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述收集孔、固定孔均设置在所述操作台的底侧,并与所述收集盒相连通;所述进水孔位于所述收集盒一端的上表面,所述出水孔位于所述收集盒另一端的侧面。
5.根据权利要求4所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述的操作台设有两组收集孔、四组固定孔、四组固定绳和四组固定扣;每组固定孔均设有两个以上的固定孔,每组固定孔分别安装有一组固定绳和一组固定扣;所述四组固定孔的分布位置分别与小鼠四肢的展开位置相对应,所述两组收集孔的位置分别位于小鼠躯干固定位置的两侧。
6.根据权利要求2所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述的操作台包括并排设置的第一操作台和第二操作台,所述的器械盒包括并排设置的第一器械盒、第二器械盒和第三器械盒。
7.根据权利要求6所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述的第一操作台与第一器械盒通过第一侧壁相隔并排设置,所述的第二操作台与第三器械盒通过第二侧壁相隔并排设置;所述的第一侧壁上设有第一卡槽,所述的第二侧壁上设有第二卡槽。
8.根据权利要求1所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述输液管的一端安装有与之相连通的输液针,另一端通过所述输液泵、转换阀与所述输液瓶相连通。
9.根据权利要求8所述的小鼠灌注固定装置,其特征在于:所述的输液装置设有若干个输液瓶,所述若干个输液瓶的液体通过所述转换阀轮流输送至所述输液管。
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CN108514462A (zh) * | 2018-06-11 | 2018-09-11 | 新乡医学院 | 一种小鼠灌注固定装置及其灌注固定方法 |
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2018
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