CN207126640U - 用于组织标本rna提取的研磨装置 - Google Patents
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Abstract
本实用新型属于医疗器械技术领域,涉及一种用于组织标本RNA提取的研磨装置,包括研磨杵及与所述研磨杵相配合的研磨桶;所述研磨杵的上端设有防滑部,研磨杵的下端为锥形部,锥形部上端连接圆柱部,锥形部的表面为磨砂结构,圆柱部的直径与研磨桶的筒状部分内径大致相等,研磨桶的内腔底部设有一个与研磨杵下端锥形部相吻合的锥形槽,所述研磨桶外表面贴合设置隔冷层。本实用新型产品结构简单、合理,在研磨作业过程中不会发生液氮蹦溅的现象,同时研磨杵下端工作面为磨砂结构,在工作时,可增加摩擦力,对组织进行有效研磨,同时研磨桶底部的锥形结构可以使得被磨碎的组织可以根据重量作用集聚到底部,方便后续吸取。
Description
技术领域
本实用新型属于医疗器械技术领域,涉及一种用于组织标本RNA提取的研磨装置。
背景技术
组织RNA提取是生物学、医学等科研实验中常见的实验操作过程。该实验的原理是:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70%乙醇洗涤沉淀,这样就可以得到比较纯净的总RNA。
具体实验步骤如下:
① 先在研钵中加入液氮,再将组织剪成小块在液氮中磨成粉末,用液氮预冷的药匙取50~100mg组织粉末加入已盛有1ml的Trizol液的EP管中,充分混合均匀。
② 室温放置5min,然后加入200μl的氯仿,盖紧EP管并剧烈摇荡15秒钟。
③ 12000rpm离心10min,取上层水相于一新的EP管中(千万不要将中间的沉淀层和下层液混入,否则重新离心分离),加入500μl异丙醇,温和颠倒混匀。室温放置10min,12000rpm离心10min。
④ 小心地弃去上清液,加入1ml的75%乙醇,涡旋混匀,4℃下12000rpm离心5min。重复操作一次。
⑤ 弃去上清液(尽量将残余液体除去),室温或真空干燥5~10min(注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度)。用30μl DEPC处理过的水将RNA溶解,必要时可55℃~60℃水浴 10min。RNA可进行mRNA分离,或贮存于70%乙醇并保存于-70℃。
在实际操作中,实验步骤①中,将样本在液氮中研磨成粉末是比较困难的过程。常见的困难点有以下几点,1、样品在离体后常常冷冻在液氮中或者-80°冰箱中,RNA提取过程中实际所用的组织块通常只需要50~200mg,在研磨前要将组织剪碎非常困难。而且剪碎的过程常常难以在液氮环境下操作,所有由于环境温度高,会增加内源性RNA酶的活性,引起组织内的RNA降解。2、常压下,液氮温度为-196℃,温度极低。在当前通用的研钵内进行组织研磨存在安全隐患。第一,研钵经过液氮冷却后表面温度极低,很容易冻伤手。第二,当前广泛使用的研钵存在口部面积大,研钵体的深度低,研钵杵与研钵体接触面积小、研钵的耐寒性差等缺点,在使用过程中存在会发生液氮容易溅出来、研钵破碎、不容易将组织研磨碎、在研磨组织中,液氮冷冻后的组织脆性大,容易溅蹦出来等现象。第三,缺少通用的液氮转移器皿,当前实验室常常使用的是普通玻璃或铁质的保温桶进行少量的液氮转移。
发明内容
本实用新型针对上述系列问题,提供一种用于组织标本RNA提取的研磨装置,该研磨装置在使用过程中不会冻伤手,同时在研磨作业过程中,研磨充分,并且不会发生组织块溅蹦出来现象,另外液氮转移方便快捷安全。
按照本实用新型的技术方案:一种用于组织标本RNA提取的研磨装置,其特征在于:包括研磨杵及与所述研磨杵相配合的研磨桶;所述研磨杵的上端设有防滑部,研磨杵的下端为锥形部,锥形部上端连接圆柱部,锥形部的表面为磨砂结构,圆柱部的直径与研磨桶的筒状部分内径大致相等,研磨桶的内腔底部设有一个与研磨杵下端锥形部相吻合的锥形槽,所述研磨桶外表面贴合设置隔冷层;还包括抽子及液氮转移盒,抽子设置于隔冷层表面的支架上。
作为本实用新型的进一步改进,所述防滑部为螺纹结构或磨砂结构。
作为本实用新型的进一步改进,所述研磨杵和研磨桶使用金属或耐低温和高温的陶瓷制作。
作为本实用新型的进一步改进,每个所述液氮转移盒均设置有两个液氮槽,其中一个液氮槽用于放置待提取组织的冻存管冷却,另一个用于放置液氮,抽子用于将液氮抽取至研磨桶中。
作为本实用新型的进一步改进,所述研磨杵的棒体部分直径为0.5~2cm。
本实用新型的技术效果在于:本实用新型产品结构简单、合理,在研磨作业过程中不会发生组织块蹦溅的现象,同时研磨杵下端工作面为磨砂结构,在工作时,可增加摩擦力,对组织块进行有效研磨,同时研磨桶底部的锥形结构可以使得被磨碎的组织可以根据重量作用集聚到底部,方便后续吸取。
附图说明
图1为本实用新型的结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本实用新型的具体实施方式作进一步的说明。
图1中,包括研磨杵1、防滑部1-1、圆柱部1-2、锥形部1-3、研磨桶2、液氮转移盒3、液氮槽3-1、抽子4、隔冷层5等。
如图1所示,本实用新型是一种用于组织标本RNA提取的研磨装置,包括研磨杵1及与所述研磨杵1相配合的研磨桶2;所述研磨杵1的上端设有防滑部1-1,研磨杵1的下端为锥形部1-3,锥形部1-3上端连接圆柱部1-2,锥形部1-3的表面为磨砂结构,圆柱部1-2的直径与研磨桶2的筒状部分内径大致相等,在研磨作业时,可以防止研磨组织过程中组织块发生溅蹦。
研磨桶2的内腔底部设有一个与研磨杵1下端锥形部1-3相吻合的锥形槽,确保可以有效进行研磨,所述研磨桶2外表面贴合设置隔冷层5,隔冷层5的材料与实验室的防冻手套类似,能有效防止手部冻伤;还包括抽子4及液氮转移盒3,抽子4设置于隔冷层5表面的支架上。研磨杵1和研磨桶2使用金属或耐低温和高温陶瓷制作,可以进行DEPC浸泡和高温灭菌操作,有效的杜绝RNA酶的污染。
防滑部1-1为螺纹结构或磨砂结构,方便手持。研磨杵1整体呈上细下粗的结构,下端的圆柱部1-2与研磨桶2的内径相当,能有效增加研磨效率,并能防止组织块溅蹦,由于组织RNA提取所需要的组织量非常小,杵棒的直径为0.5~2cm,足以满足本实验需要。研磨杵1下端锥形部1-3表面为磨砂结构,增加摩擦力,可以有效对组织进行研磨,同时锥形结构可以使得被磨碎的组织在重力作用下集聚到底部,方便后续吸取。研磨杵1和研磨桶2使用金属或耐低温和高温的陶瓷制作。
每个所述液氮转移盒3均设置有两个液氮槽3-1,其中一个液氮槽3-1用于放置并用于冷却待提取组织的冻存管,另一个用于放置液氮,抽子4用于将液氮抽取至研磨桶2中,研磨杵1的棒体部分直径为0.5~2cm。本实用新型产品中的液氮转移盒3采用隔热塑料装置,并设计了盒盖,两个液氮槽3-1方便实验员安全的进行少量的液氮转移。在使用时,液氮转移盒3和隔冷层5均放置于工作台上。
本实用新型产品的工作过程如下:1、待研磨样品在离体后应迅速冷冻在液氮中,若是比较大块的组织,要尽量把组织剪切成黄豆大小的块(大约50-200 mg),使用液氮迅速冷冻从而防止组织内部的RNA降解。组织放入冻存管中,并做好记号,并储存在液氮中。
2、在抽提RNA前,使用34液氮转移装置,将装有待提取组织的冻存管放入3中进行冷却,同时将3的另一个槽加入液氮。使用4抽取液氮,往研磨桶中反复加入液氮,使研磨桶充分预冷。取出样本后,把组织块放入已预冷的研磨桶中进行研磨,边研磨边加液氮,整个过程都不要使液氮挥干。一次研磨的组织块重量不要超过50-200mg。
3、研磨到组织样品成粉末状后,在液氮基本挥发完时,在每个研钵中加1-2 mlTrizol试剂。由于此时研钵很冷,Trizol加入后会冻结成固体状。可以继续研磨此固体成粉末,随着研钵温度回升到室温,固体状的 Trizol逐步回复到液体状态。由于整个操作过程中都处于极低温状态,并且Trizol试剂中含有强烈的RNA酶抑制剂,因此实验过程中可以保证RNA不被RNA酶降解,保证了实验的质量。
Claims (5)
1.一种用于组织标本RNA提取的研磨装置,其特征在于:包括研磨杵(1)及与所述研磨杵(1)相配合的研磨桶(2);所述研磨杵(1)的上端设有防滑部(1-1),研磨杵(1)的下端为锥形部(1-3),锥形部(1-3)上端连接圆柱部(1-2),锥形部(1-3)的表面为磨砂结构,圆柱部(1-2)的直径与研磨桶(2)的筒状部分内径大致相等,研磨桶(2)的内腔底部设有一个与研磨杵(1)下端锥形部(1-3)相吻合的锥形槽,所述研磨桶(2)外表面贴合设置隔冷层(5);还包括抽子(4)及液氮转移盒(3),抽子(4)设置于隔冷层(5)表面的支架上。
2.如权利要求1所述的用于组织标本RNA提取的研磨装置,其特征在于:所述防滑部(1-1)为螺纹结构或磨砂结构。
3.如权利要求1所述的用于组织标本RNA提取的研磨装置,其特征在于:所述研磨杵(1)和研磨桶(2)使用金属或耐低温和高温的陶瓷制作。
4.如权利要求1所述的用于组织标本RNA提取的研磨装置,其特征在于:每个所述液氮转移盒(3)均设置有两个液氮槽(3-1),其中一个液氮槽(3-1)用于放置待提取组织的冻存管冷却,另一个用于放置液氮,抽子(4)用于将液氮抽取至研磨桶(2)中。
5.如权利要求1所述的用于组织标本RNA提取的研磨装置,其特征在于:所述研磨杵(1)的棒体部分直径为0.5~2cm。
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CN201720864686.8U CN207126640U (zh) | 2017-07-17 | 2017-07-17 | 用于组织标本rna提取的研磨装置 |
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CN110479450A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-22 | 佛山科学技术学院 | 一种骨组织rna研磨提取方法及研磨装置 |
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