CN206710439U - 一种快速清除血清中高丰度白蛋白的装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型涉及生物制品分离提纯技术领域，具体公开了一种快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，包括固定装置和分离装置，所述固定装置用于固定所述分离装置；所述分离装置包括由下往上依次连接的分离柱、储液管、克莱森接头；所述储液管的出口端设置有第一调节阀，所述分离柱的出口端设置有第二调节阀；所述分离柱中填充有白蛋白分子印迹材料。本实用新型的装置，组建简便，容易操作，对血清中高丰度白蛋白清除效果好。

Description

一种快速清除血清中高丰度白蛋白的装置

技术领域

本实用新型涉及生物制品分离提纯技术领域，具体涉及一种快速清除血清中高丰度白蛋白的装置。

背景技术

随着人类基因组计划的实施和推进，生命科学研究已进入了后基因组时代，而蛋白质组学的研究在这一前沿领域中也受到越来越多的关注。据大量研究报道，血清中总蛋白含量大约为60-80mg/mL，其中约有50种蛋白占到总蛋白量的99％，仅白蛋白就占55％，它是血清中最主要的高丰度蛋白，而其他至少有10000种以上的蛋白仅占到总量的百分之一。然而在这些数以万计的低丰度蛋白质中往往包括诸多在生命过程中起关键性作用的蛋白，如癌症标志物和药物作用的靶蛋白等，分析和鉴定这些低丰度蛋白对蛋白质组学及生命科学具有十分重要的意义。但高丰度蛋白质的大量存在会增加对低丰度蛋白的研究难度，因此，开发一种能快速清除人血清中高丰度白蛋白的装置尤为重要。

实用新型内容

有鉴于此，有必要针对上述的问题，提供一种具有高效、快速、准确、可重复使用等优点的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置。

为实现上述目的，本实用新型采取以下的技术方案：

本实用新型的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，包括固定装置和分离装置，所述固定装置用于固定所述分离装置；

所述分离装置包括由下往上依次连接的分离柱、储液管、克莱森接头；所述储液管的出口端设置有第一调节阀，所述分离柱的出口端设置有第二调节阀；

所述分离柱中填充有白蛋白分子印迹材料。

进一步的，所述克莱森接头的第一管口连接有活塞，第二管口与加压球相连通。

进一步的，所述第二管口与加压球采用带导管的橡皮塞相连通。

进一步的，所述加压球为双联加压球。

进一步的，所述白蛋白分子印迹材料的填充量为2-3g。

进一步的，所述固定装置为铁架台。

本实用新型的有益效果为：

本实用新型快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，组建简便，容易操作，成本低，为一站式样品前处理装置，对血清中高丰度白蛋白清除效果好，大大降低了样品中高丰度白蛋白对低丰度蛋白的检测干扰。而白蛋白分子印迹材料的洗脱简便，可循环使用，节省原材料而降低经济成本。

附图说明

图1为本实用新型装置的结构示意图。

附图标记：1、加压球；2、带导管的橡皮塞；3、克莱森接头；31、第一管口；32、第二管口；4、活塞；5、储液管；6、第一调节阀；7、分离柱；8、白蛋白分子印迹材料；9、第二调节阀；10、接液皿；11、铁架台。

具体实施方式

为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将结合具体实施例以及附图对本实用新型作进一步介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

需要理解的是，术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“水平”、“顶”、“内”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。

术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”、“第三”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本实用新型的描述中，除非另有说明，“一组”的含义是两个或两个以上。

实施例

白蛋白分子印迹材料8，具有高特异识别能力，可提高血清样品中白蛋白的清除效率；其强的稳定性，可大批次生产与长久储存具有强稳定性和高特异识别能力，大批次生产可长久储存，并且可提高血清样品中白蛋白的清除效率；且单次使用后可以进行洗脱，循环使用，有效降低原料成本。

如图1所示，本实用新型为快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，包括固定装置和分离装置，所述分离装置固定于所述固定装置上。

所述分离装置包括由下往上依次连接的分离柱7、储液管5、克莱森接头3；具体地，所述克莱森接头3的下端口套接于所述储液管5上端口上，所述储液管5的下端口套接于所述分离柱7的上端口上，各处的套接均为紧密配合连接，上述分离柱7、储液管5、克莱森接头3套接后相连通，且均为玻璃管。所述储液管5的出口端设置有第一调节阀6，所述分离柱7出口端设置有第二调节阀9；所述分离柱7中填充有白蛋白分子印迹材料8。储液管5可储存50mL液体，第一调节阀6为氟塑材料，密封性好。

所述第一调节阀6用于调节控制待分离样品流出的速度，保证样品充分浸湿白蛋白分子印迹材料8后，再打开第二调节阀9。因为最开始的印迹材料是干燥后装入的，需要与样品液充分作用后才能表现出最强的吸附能力，本实用新型通过调节阀的调节作用，使样品液与印迹材料充分浸湿，以提高印迹材料的吸附能力，并且方便控制实验过程的起止。

作为上述实施方案的进一步改善，为进一步加快分离速度，提高工作效率，所述克莱森接头3的第一管口31连接有玻璃活塞4，第二管口32通过带导管的橡皮塞2与加压球1相连通，优选双联加压球1。所述玻璃活塞4与第一管口31配合连接，以不漏气为准。带导管的橡皮塞2可取下，尺寸与克莱森接头3口径相匹配。

作为进一步优化方案，所述白蛋白分子印迹材料8的的填充量为2.5g。

采用本实用新型装置进行分离操作过程：

本实用新型的白蛋白分子印迹材料8可以采用溶胶凝胶法制备，具体制备方法如下：

将0.5g磁性二氧化硅材料均匀分散于100mL磷酸盐缓冲溶液中，随后加200μL的3-氨丙基三乙氧基硅烷，机械搅拌下反应30min；待反应完毕，用磷酸盐缓冲液洗涤数次，再用100mL 1％(v/v)戊二醛孵化，孵化完成后，用磷酸盐缓冲液清洗两次，随后加入1.5mg/mL的白蛋白溶液，机械搅拌下反应2h；反应完毕，向反应液中依次加入200μL正硅酸四乙酯与150μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，将反应液混匀后于10℃下搅拌反应8h，最后再用磷酸缓冲液洗涤两次，真空干燥；将以上制备的材料均匀分散于甲醇和乙酸(V甲醇：V乙酸＝19:1)混合而成的洗脱液中，30℃下超声10min后，再将上述溶液维持水浴加热30℃下机械搅拌30min，用二次水洗涤，用磁铁分离印迹材料，重复以上洗涤过程多次，直至白蛋白分子洗脱完全，最后用二次水清洗印迹材料，干燥，存储备用。

采用本实用新型的装置进行清除血清中高丰度白蛋白的过程如下：

将2.5g所制备得到的印迹材料装入分离柱7中，用洗耳球轻轻敲打使填料填充平整，再从下往上搭接分离柱7、储液管5、克莱森接头3，并将装置固定于铁架台11上，随后打开玻璃活塞4，关闭第二调节阀9，取20mL离心处理后的人血上清液样品，移至储液管5中，盖上玻璃活塞4，旋转第一调节阀6，使样品液流入分离柱7，控制其流速约为0.5mL/min；待样品液完全浸湿白蛋白分子印迹材料8后，完全打开第一调节阀6和第二调节阀9，使样品液从分离柱7出口端流出，用接液皿10收集，得到清除白蛋白的人血清液用于后续分析；因随着分离量的增加，样品液流出的速度会减小，可以通过挤压双联加压球1来增大储液管5与分离柱7中的气压，从而加快样品液的流出；最后，打开活塞4，取50mL的甲醇：乙酸＝19:1(体积比)的溶液经储液管5流入分离柱7对白蛋白进行洗脱，重复两次，用废液瓶收集洗脱液。回收的白蛋白分子印迹材料8，干燥，储存以便下次循环使用。

本实用新型快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，组建简便，易操作，对血清中高丰度白蛋白清除快速、可控。并能方便快捷地对白蛋白分子印迹材料进行洗脱，并循环使用。增加双联加压球能加快分离速度，从而提高工作效率。

以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本实用新型专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。因此，本实用新型专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (6)

1.一种快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，其特征在于，包括固定装置和分离装置，所述固定装置用于固定所述分离装置；

所述分离装置包括由下往上依次连接的分离柱、储液管、克莱森接头；所述储液管的出口端设置有第一调节阀，所述分离柱的出口端设置有第二调节阀；

所述分离柱中填充有白蛋白分子印迹材料。

2.根据权利要求1所述的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，其特征在于，所述克莱森接头的第一管口连接有活塞，第二管口与加压球相连通。

3.根据权利要求2所述的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，其特征在于，所述第二管口与加压球采用带导管的橡皮塞相连通。

4.根据权利要求2所述的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，其特征在于，所述加压球为双联加压球。

5.根据权利要求1或2所述的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，其特征在于，所述白蛋白分子印迹材料的填充量为2-3g。

6.根据权利要求1或2所述的快速清除血清中高丰度白蛋白的装置，其特征在于，所述固定装置为铁架台。