CN206467234U - 检测口蹄疫病毒的荧光定量pcr试剂盒及系统 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供了一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒及系统，涉及生物检测技术领域。本实用新型提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，包括盒体和盒盖；盒体内设有固定垫，固定垫上设有用于放置试剂瓶和枪头盒的凹槽；盒盖内壁设有用于固定说明书的说明书固定装置。操作简便，成本较低，内置用于放置移液枪枪头的枪头盒，可以避免实验前对枪头进行处理，省时省力，同时，盒盖内壁设有的用于固定说明书的说明书固定装置，可使说明书不易丢失，且便于操作人员阅读说明书。

Description

检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒及系统

技术领域

本实用新型涉及生物检测技术领域，尤其是涉及一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒及系统。

背景技术

口蹄疫(Foot and Mouth Disease，FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种高度接触性传染病，对易感的偶蹄动物具有严重的潜在经济危害。口蹄疫病毒能够感染猪、牛、羊等偶蹄兽引起急性、烈性、接触性传染病。其特征是在口、舌、唇、鼻、蹄、乳房发生水泡，并溃烂形成烂斑。牲畜感染口蹄疫病毒后，会造成牲畜进食量下降，机体抵抗力和免疫力降低，容易继发其他病毒性疾病和细菌性疾病，从而造成感染动物的生产性能下降，危害畜牧业正常生产和发展。世界动物卫生组织(OIE)将口蹄疫列为必须报告的动物传染病，我国2008年修订的《一、二、三类动物疫病病种明录》将其列为一类动物疫病。

目前，口蹄疫病毒检测主要以病原学检测和血清学检测为主，酶联免疫吸附试验、荧光标记试验、荧光RT－PCR用于检测猪口蹄疫病毒的抗体。

(1)酶联免疫吸附试验

利用抗原和抗体能与固相载体表面结合并能保持其免疫性，抗原或抗体与酶结合物后的标记物既能保持抗原或抗体的免疫活性，又能保持酶的活性，受检物中的抗原或抗体与固相表面的抗体或抗原发生免疫反应并结合在固相表面，此抗原抗体复合物又能结合相应的酶标记物，洗涤除去未结合的酶标记物，加入酶反应底物，底物被酶催化为有色产物的过程。

(2)荧光标记试验

利用荧光色素与标记物结合后，并不影响标记物的免疫活性，可与标本中特异性抗原或抗体特异性结合且这种结合较为牢固，用缓冲液洗涤时除去游离的荧光素标记标记物后，用荧光显微镜观察的免疫学示踪技术。

(3)动物实验或鸡胚接种实验。

应用上述方法对口蹄疫病毒进行检测时，存在耗时长，操作步骤繁琐，容易发生交叉污染，设备造价较高，很难普及应用，动物实验成本较高等缺点。

相比之下，普通荧光定量PCR方法特异性好，检测灵敏度高，但应用荧光定量PCR的方法进行检测时，经常出现实验中说明书阅读不方便或说明书丢失的问题，同时，实验中需要用到的无核酸移液枪枪头需要提前进行去核酸处理，费时费力。

因此，开发一种操作简便，省时省力，成本较低，便于操作人员阅读说明书，且易普及应用的，用于检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒也日益成为研究的重点。

有鉴于此，特提出本实用新型。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，以缓解现有技术中存在的操作繁琐，费时费力，实验中说明书阅读不方便的技术问题。

本实用新型提供的一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，包括：

盒体和盒盖；

所述盒体内设有固定垫，所述固定垫上设有用于放置试剂瓶和枪头盒的凹槽；

所述盒盖内壁设有用于固定说明书的说明书固定装置。

进一步地，所述固定垫为弹性材料固定垫，可拆卸地固定在所述盒体内部。

进一步地，所述试剂瓶包括瓶身和瓶盖，所述瓶身上设有用于标记内部试剂的标签，所述瓶盖上也设有用于标记内部试剂的标签。

进一步地，所述试剂瓶为内置阴性对照的阴性对照试剂瓶，内置阳性对照的阳性对照试剂瓶，内置反应液的反应液试剂瓶，内置引物探针的引物探针试剂瓶，内置酶的酶试剂瓶，内置无核酸水的无核酸水试剂瓶。

进一步地，所述引物探针试剂瓶为避光包装。

进一步地，所述枪头盒包括枪头盒体和枪头盒盖，所述枪头盒体内设有用于装载移液枪枪头的枪头孔架。

进一步地，所述枪头孔架上设有80－100个枪头孔。

进一步地，所述枪头孔内放置有10μl的无核酸移液枪枪头。

进一步地，所述说明书固定装置为插槽或透明插袋。

另外，本实用新型还提供了一种检测口蹄疫病毒的系统，应用上述的荧光定量PCR试剂盒。

本实用新型提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，操作简便，成本较低，内置用于放置移液枪枪头的枪头盒，可以避免实验前对枪头进行处理，省时省力，同时，盒盖内壁设有的用于固定说明书的说明书固定装置，可使说明书不易丢失，且便于操作人员阅读说明书。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本实用新型的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本实用新型实施例1提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒的固定垫结构示意图；

图2为本实用新型实施例1提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒的整体示意图；

图3为本实用新型实施例1提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒的内部构造示意图；

图4为本实用新型实施例1提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒的盒体示意图。

图标：1－盒体；2－盒盖；3－固定垫；4－枪头盒；41－枪头盒体；42－枪头盒盖；43－枪头孔架；51－阴性对照试剂瓶；52－阳性对照试剂瓶；53－反应液试剂瓶；54－引物探针试剂瓶；55－酶试剂瓶；56－无核酸水试剂瓶；6－说明书固定装置。

具体实施方式

下面将结合附图对本实用新型的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

在本实用新型的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。

本实用新型提供了一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，包括：

盒体1和盒盖2；

盒体1内设有固定垫3，固定垫3上设有用于放置试剂瓶和枪头盒4的凹槽；

盒盖2内壁设有用于固定说明书的说明书固定装置6。

其中，盒体1与盒盖2可以是铰接的，也可以是相互独立的。

在本实用新型中，固定垫3为弹性材料固定垫，可拆卸地固定在盒体1内部。

固定垫3为弹性材料，可以有效缓冲在荧光定量PCR试剂盒被移动的过程中产生的撞击力。

在一个优选的实施方式中，固定垫3为海绵固定垫。

在另一个优选的实施方式中，固定垫3为泡沫固定垫。

在本实用新型中，试剂瓶包括瓶身和瓶盖，瓶身上设有用于标记内部试剂的标签，瓶盖上也设有用于标记内部试剂的标签。

在瓶身上设有用于标记内部试剂的标签，便于在试剂瓶拿出试剂盒后进行不同试剂的区分，同时，在瓶盖上也设有用于标记内部试剂的标签，便于在试剂瓶放置在试剂盒内时，不用取出试剂瓶即可对装有不同试剂的试剂瓶进行区分，便于操作。

在本实用新型中，试剂瓶为内置阴性对照的阴性对照试剂瓶51，内置阳性对照的阳性对照试剂瓶52，内置反应液的反应液试剂瓶53，内置引物探针的引物探针试剂瓶54，内置酶的酶试剂瓶55，内置无核酸水的无核酸水试剂瓶56。

其中，反应液试剂瓶53内的反应液为荧光定量PCR反应液。

引物探针试剂瓶54内的引物的核苷酸序列为：

上游引物：5’－ACTGGGTTTTACAAACCTGTGA－3’；

下游引物：5’－GCGAGTCCTGCCACGGA－3’。

引物探针试剂瓶54内的探针的核苷酸序列为：

探针：5’－TCCTTTGCAGCCGTGGGAC－3’。

探针的5’端荧光报告基团是FAM，3’端荧光淬灭基团是BHQ。

在本实用新型中，引物探针试剂瓶54为避光包装。

在一个优选的实施方式中，引物探针试剂瓶54为棕色瓶。

在另一个优选的实施方式中，引物探针试剂瓶54外部设有锡纸包裹。

在本实用新型中，枪头盒4包括枪头盒体41和枪头盒盖42，枪头盒体41内设有用于装载移液枪枪头的枪头孔架43。

其中，枪头盒体41与枪头盒盖42可以是铰接的，也可以是相互独立的。枪头盒体41单独配有枪头盒盖42，在盒盖2打开的情况下，枪头盒盖42依然可以保证枪头盒4内部不被核酸污染，保证了本实用新型提供的荧光定量PCR试剂盒检测结果的准确性。

在本实用新型中，枪头孔架43上设有80－100个枪头孔。

在一个优选的实施方式中，枪头孔架43上设有90个枪头孔。

在本实用新型中，枪头孔内放置有10μl的无核酸移液枪枪头。

在本实用新型中，说明书固定装置6为插槽或透明插袋。

在实验操作人员使用本实用新型提供的荧光定量PCR试剂盒时，将说明书放入盒盖2内壁上的说明书固定装置6内，在操作过程中方便阅读，同时，可以避免说明书易丢失的问题。

本实用新型还提供了一种检测口蹄疫病毒的系统，应用了上述的荧光定量PCR试剂盒。

本实用新型提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，操作简便，成本较低，内置用于放置移液枪枪头的枪头盒4，可以避免实验前对枪头进行处理，省时省力，同时，盒盖2内壁设有的用于固定说明书的说明书固定装置6，可使说明书不易丢失，且便于操作人员阅读说明书。

为了更清楚的理解本实用新型提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，现结合具体实施例，对本实用新型进行详细介绍。

实施例1

如图1和图2所示，本实施例提供的一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，包括：

盒体1和盒盖2；

盒体1内设有固定垫3，固定垫3上设有用于放置试剂瓶和枪头盒4的凹槽；

盒盖2内壁设有用于固定说明书的说明书固定装置6。

在本实施例中，盒体1与盒盖2为铰接。

在本实施例中，说明书固定装置6为插槽。

固定垫3为弹性材料固定垫，可拆卸地固定在盒体1内部。

在本实施例中，固定垫3为海绵固定垫。

在本实施例中，上述试剂瓶包括瓶身和瓶盖，瓶身上设有用于标记内部试剂的标签，瓶盖上也设有用于标记内部试剂的标签。

如图3所示，试剂瓶为内置阴性对照的阴性对照试剂瓶51，内置阳性对照的阳性对照试剂瓶52，内置反应液的反应液试剂瓶53，内置引物探针的引物探针试剂瓶54，内置酶的酶试剂瓶55，内置无核酸水的无核酸水试剂瓶56。

在本实施例中，引物探针试剂瓶54为避光包装。

在本实施例中，引物探针试剂瓶54为棕色瓶。

枪头盒4包括枪头盒体41和枪头盒盖42，枪头盒体41内设有用于装载移液枪枪头的枪头孔架43。

在本实施例中，枪头孔架43上设有90个枪头孔。

枪头孔内放置有10μl的无核酸移液枪枪头。

实施例2

本实施例提供的一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，包括：

盒体1和盒盖2；

盒体1内设有固定垫3，固定垫3上设有用于放置试剂瓶和枪头盒4的凹槽；

盒盖2内壁设有用于固定说明书的说明书固定装置6。

在本实施例中，盒体1与盒盖2为相互独立的。

在本实施例中，说明书固定装置6为透明插袋。

固定垫3为弹性材料固定垫，可拆卸地固定在盒体1内部。

在本实施例中，固定垫3为泡沫固定垫。

在本实施例中，上述试剂瓶包括瓶身和瓶盖，瓶身上设有用于标记内部试剂的标签，瓶盖上也设有用于标记内部试剂的标签。

试剂瓶为内置阴性对照的阴性对照试剂瓶51，内置阳性对照的阳性对照试剂瓶52，内置反应液的反应液试剂瓶53，内置引物探针的引物探针试剂瓶54，内置酶的酶试剂瓶55，内置无核酸水的无核酸水试剂瓶56。

其中，引物探针试剂瓶54为避光包装。

在本实施例中，引物探针试剂瓶54外部设有锡纸包裹。

枪头盒4包括枪头盒体41和枪头盒盖42，枪头盒体41内设有用于装载移液枪枪头的枪头孔架43。

在本实施例中，枪头孔架43上设有80个枪头孔。

枪头孔内放置有10μl的无核酸移液枪枪头。

在使用上述实施例1或实施例2提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒时，实验操作人员首先打开盒盖2，将试剂盒说明书固定于盒盖2内壁的说明书固定装置6上，分别从相应的试剂瓶中取2μl阴性对照，0.5μl酶，1.8μl引物探针，10μl反应液，以及应用试剂盒内无核酸枪头吸取5.7μl无核酸水加入荧光定量PCR反应板中，作为阴性对照组；分别取2μl阳性对照，0.5μl酶，1.8μl引物探针，10μl反应液，以及应用试剂盒内无核酸枪头吸取5.7μl无核酸水加入荧光定量PCR反应板中，作为阳性对照组；分别取2μl待测样本，0.5μl酶，1.8μl引物探针，10μl反应液，以及应用试剂盒内无核酸枪头吸取5.7μl无核酸水加入荧光定量PCR反应板中，作为实验组。每个组设6个重复。之后，将荧光定量PCR反应板放于荧光定量PCR仪器中，设置反应条件为：45℃15min；95℃2min；95℃15s，60℃1min，40个循环；60℃设置采集荧光信号。待反应结束后，观察实验结果并依据以下判定规则进行判定：

1、阳性对照孔：CT值＜30并有明显的扩增曲线；阴性对照孔：无CT值或者CT值＞37，线性为直线或者轻微斜线，无明显扩增曲线。以上要求需同时满足，否则本次实验无效，需要重新进行。

2、CT值＜30并有明显的扩增曲线，则判定为口蹄疫阳性。

3、CT值＞37并无扩增曲线，则判定为口蹄疫阴性。

4、30＜CT值＜37可疑，需重复检测。若第二次检测CT值仍为30－37并有明显扩增曲线则判定为阳性，否则为阴性。

试验结束后，将盒盖2盖合于盒体1上，如图4所示，并将本实施例提供的荧光定量PCR试剂盒于－20℃保存。

实施例1或实施例2提供的检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，操作简便，成本较低，内置用于放置移液枪枪头的枪头盒4，可以避免实验前对枪头进行处理，省时省力，同时，盒盖2内壁设有的用于固定说明书的说明书固定装置6，可使说明书不易丢失，且便于操作人员阅读说明书。

实施例3

本实施例提供了一种检测口蹄疫病毒的系统，包括荧光定量PCR仪，计算机，移液枪，以及本实用新型提供的荧光定量PCR试剂盒。

使用本实施例提供的检测口蹄疫病毒的系统检测口蹄疫病毒，在同一实验地点即可完成口蹄疫病毒的检测，操作方便，同时可以避免试剂及待测样本在移动过程中被污染，减少误差，提高检测的准确性。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本实用新型的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本实用新型进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本实用新型各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种检测口蹄疫病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括：

盒体(1)和盒盖(2)；

所述盒体(1)内设有固定垫(3)，所述固定垫(3)上设有用于放置试剂瓶和枪头盒(4)的凹槽；

所述盒盖(2)内壁设有用于固定说明书的说明书固定装置(6)。

2.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述固定垫(3)为弹性材料固定垫，可拆卸地固定在所述盒体(1)内部。

3.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂瓶包括瓶身和瓶盖，所述瓶身上设有用于标记内部试剂的标签，所述瓶盖上也设有用于标记内部试剂的标签。

4.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂瓶包括内置阴性对照的阴性对照试剂瓶(51)，内置阳性对照的阳性对照试剂瓶(52)，内置反应液的反应液试剂瓶(53)，内置引物探针的引物探针试剂瓶(54)，内置酶的酶试剂瓶(55)，内置无核酸水的无核酸水试剂瓶(56)。

5.根据权利要求4所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述引物探针试剂瓶(54)为避光包装。

6.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述枪头盒(4)包括枪头盒体(41)和枪头盒盖(42)，所述枪头盒体(41)内设有用于装载移液枪枪头的枪头孔架(43)。

7.根据权利要求6所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述枪头孔架(43)上设有80－100个枪头孔。

8.根据权利要求7所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述枪头孔内放置有10μl的无核酸移液枪枪头。

9.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述说明书固定装置(6)为插槽或透明插袋。

10.一种检测口蹄疫病毒的系统，其特征在于，应用权利要求1－9任一项所述的荧光定量PCR试剂盒。