CN205941568U - 诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡 - Google Patents
诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡 Download PDFInfo
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Abstract
本实用新型公开了一种诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，包括相互卡合的上盖和卡槽板，卡槽板上设置三个测试条卡槽，三个测试条卡槽中分别放置N‑末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条；N‑末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条包括样本垫、包被垫和吸收垫，样本垫的一端搭接于包被垫的一端上，吸收垫的一端搭接于包被垫的另一端上；样本垫上覆有标记物；包被垫上设有检测线和质控线；上盖对应三个测试条卡槽的位置均设有样品孔和显示窗，上盖与卡槽板卡合，样品孔显露出样本垫，显示窗显露出包被垫的检测线和质控线。本实用新型帮助医生快速、方便的对急性心肌梗塞患者进行诊断治疗。
Description
技术领域
本实用新型属于体外诊断技术领域，具体涉及一种用于定量检测N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）、肌红蛋白(MYO)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)的一种诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡。
背景技术
N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）是BNP激素原（proBNP）分裂后无活性的N端片段，主要在心肌细胞受到容量负荷和压力负荷增高时由左心室分泌。人血清和血浆中NT-proBNP的测定可作为一种对疑似患充血性心力衰竭个体的诊断和监测轻度心脏功能障碍的辅助手段，还可辅助评估罹患充血性心力衰竭患者的严重程度及急性冠状动脉综合征和充血性心力衰竭患者的危险等级，也可用于左室功能不全患者的治疗监测。
肌红蛋白（Myoglobin）是一种存在于心肌和骨骼肌细胞质的蛋白质。它为肌细胞运送氧气，同时也可以作为一个储氧囊。肌红蛋白分子量为17.8kD,因此肌细胞受损后该蛋白可迅速进入血液循环。测定血清中的肌红蛋白是诊断急性心肌梗塞(AMI)、再梗塞以及溶栓治疗后成功再灌入诊断的指标之一。浓度在症状出现后约两个小时肌红蛋白浓度升高，因此可作为诊断心肌梗塞的早期指标。根据不同的再灌入治疗措施，在梗塞形成开始之后，血液循环中的肌红蛋白浓度在梗塞发生后4到12小时可达到高峰，约24小时之后下降至正常水平。骨骼肌受损后以及肾功能严重障碍也可导致肌红蛋白浓度升高。
心肌肌钙蛋白I(cTnI)是目前诊断心肌损伤和心肌坏死时特异度最强、敏感度较高的生物标志物。cTnI在心肌损伤后4～12h升高且保持升高4～10d。cTnI随不可逆的缺血心肌细胞损伤后进入血流，较长时间保持升高。cTnI升高还可见于不稳定性心绞痛(UAP)和充血性心力衰竭(CHF)，已经明确是急性冠状动脉综合症（ACS）患者的预后标志物，可以预测近期、中期甚至长期预后。
以胶体金为代表的层析技术已发展了20多年，目前仍然广泛应用，但由于只能用于定性或半定量的检测，难以满足临床检测指标定量化的要求；同时检测结果靠肉眼判断，特别是在检测结果呈弱阳性时，极易造成人为漏检现象，因此存在灵敏度较低等问题，需要进一步完善。而新型免疫层析技术如采用乳胶荧光微球标记的荧光免疫层析技术不存在胶体金需大量聚集才能显色的缺点，其以特有的光电磁信号放大系统提高检测灵敏度，减少样品的本底干扰，拥有传统标记物所无法比拟的优势。免疫层析技术正朝着定量、高灵敏度、多标记检测等方向发展。
荧光微球是指直径在纳米级至微米级范围内，通过物理和化学等方法负载荧光物质，受激发光源刺激后激发出荧光的固体微粒。荧光微球具体体表面积大，表面吸附能力强，稳定而高效的发光效率等优点，并且受外界条件如溶剂、热、电、磁等的影响比纯粹的荧光化合物要小，其作为一种新型的载体材料已广泛应用于生物医学领域。相比胶体金等传统标记物须大量聚集肉眼辨别，它的发光强度可以随激发光的强度增强而增强，所以荧光微球标记有望提高免疫层析技术的检测限。为识别不同待测物，可通过标记不同颜色荧光素的微球结合特定单抗，实现多标记检测的目的。因此荧光微球作为标记物的免疫层析技术有较高的研究价值与前景。
而且现有技术中，现有各厂家检测卡通常都是单项目单卡（即一个检测卡中装置一个测试条进行一个项目检测）。面对急性病发患者逐项检查无疑是延长了治疗时间，也造成了资源的浪费。也有厂家将不同项目放在同一个检测卡的同一测试条检测，但由于抗体之间的互相干扰，分子量不同也决定了移行速率的不同。检测结果往往没有专条专项（即一个测试条一个项目）检测理想，特别是对于急性病发患者而言，检测结果的准确与否极为重要。
目前急性心肌梗塞发病率呈逐年增高趋势，是遍及全球的常见病和多发病。N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）/肌红蛋白(MYO)/心肌肌钙蛋白I(cTnI)这三种标志物在患者体内的变化，不仅能预示着疾病的发生还可以对患者进行治疗后的监测，以判断治疗方法的效果。逐项检测不仅浪费时间也浪费耗材，联合检测能够帮助医生更快更准确的判断这些疾病的变化。
实用新型内容
为了解决上述技术问题，本实用新型提供一种诊断早期急性心肌梗塞标志物联合检测卡，所述的检测卡中包含三个检测项目的测试条，分别为N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）（荧光免疫层析法）测试条、肌红蛋白(MYO)（荧光免疫层析法）测试条、心肌肌钙蛋白I(cTnI)（荧光免疫层析法）测试条；每个测试条均为独立测试条；三个检测项目的测试条平行排列；测试条排列顺序不限定。同时进行N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）/肌红蛋白(MYO)/ 心肌肌钙蛋白I(cTnI)三个项目的检测，以帮助医生实现快速、方便的对急性心肌梗塞患者进行诊断治疗。
本实用新型提供的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，包括相互卡合的上盖和卡槽板，
卡槽板上设置三个测试条卡槽，三个测试条卡槽中分别放置N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条；
所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条均包括样本垫、包被垫和吸收垫，样本垫的一端搭接于包被垫的一端上，吸收垫的一端搭接于包被垫的另一端上；样本垫上覆有标记物；包被垫上设有检测线和质控线；
上盖对应三个测试条卡槽的位置均设有样品孔和显示窗，上盖与卡槽板卡合，样品孔显露出样本垫，而显示窗显露出包被垫的检测线和质控线。
作为优选技术方案，所述样本垫为玻璃纤维素膜，所述包被垫为硝酸纤维素膜，所述吸收垫为吸水纸。
作为优选技术方案，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的尺寸以及检测线和质控线的位置均相同，所述N-末端脑钠肽前体测试条的样本垫为厚度0.381±0.05mm、克重70±10g/m2的玻璃纤维素膜，所述肌红蛋白测试条的样本垫为厚度0.3±0.05mm、克重55±10g/m2的玻璃纤维素膜， 所述心肌肌钙蛋白I测试条的样本垫为厚度0.41mm±0.05、克重77.8±10g/m2的玻璃纤维素膜。
作为优选技术方案，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的样本垫长度为24mm，包被垫长度为25mm，吸收垫长度为26mm，样本垫与包被垫的搭接段长度为3 mm，吸收垫与包被垫的搭接段长度为2 mm；检测线和质控线设于包被垫上的两个搭接段之间；标记物覆于样本垫上，对应位于样品孔与样本垫的搭接段之间，优选地，标记物距样本垫与包被垫的搭接段2mm，标记物沿反应膜长度方向的长度为5mm。
作为优选技术方案，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条对应样品孔的中心与其检测线之间的距离为7~9mm。
作为优选技术方案，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的宽度为4mm。
作为优选技术方案，所述三个测试条卡槽平行设置。
作为优选技术方案，所述显示窗处设有覆盖显示窗的透明膜。
作为优选技术方案，所述联合检测卡为矩形。
作为优选技术方案，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条还包括底板，所述包被垫、样本垫和吸收垫均固定于所述底板上。
本实用新型具有以下有益效果：
1、通过项目组合对早期急性心肌梗塞患者进行诊断治疗；
2、通过项目组合防止医生遗漏检验项目；
3、组合项目操作更简单便捷，无论肉眼判读还是仪器判读都比传统的单卡单项更方便高效；
4、节省了检测卡外壳的使用，降低生产成本。
5、测试条区域独立，免疫层析过程中项目间没有任何影响，比在同一个测试条上实现多项目检测准确度要高。
6、测试条区域独立，项目标识更清楚，不容易发生误判和混淆。
附图说明
图1为本实用新型的上盖结构示意图。
图2为本实用新型的检测卡卡槽板结构示意图。
图3为本实用新型的测试条结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本实用新型并能予以实施，但所举实施例不作为对本实用新型的限定。
结合图1~3所示，本实用新型公开了一种诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，包括相互卡合的上盖1和卡槽板2，
卡槽板2上设置三个测试条卡槽，三个测试条卡槽中分别放置N-末端脑钠肽前体测试条5、肌红蛋白测试条6和心肌肌钙蛋白I测试条7（放置顺序不做限定，附图只示意出其中一种放置方式）。
所述N-末端脑钠肽前体测试条5、肌红蛋白测试条6和心肌肌钙蛋白I测试条7均包括样本垫10（一般为玻璃纤维素膜）、包被垫9（一般为硝酸纤维素膜）、吸收垫8（一般为吸水纸）和底板11（一般为PVC板），样本垫10的一端搭接于包被垫9的一端上，吸收垫8的一端搭接于包被垫9的另一端上；样本垫10上覆有标记物；包被垫9上设有检测线T和质控线C；包被垫9、样本垫10和吸收垫8均粘合固定于底板11上。
上盖1对应三个测试条卡槽的位置均设有样品孔3和显示窗4，上盖1与卡槽板2卡合，样品孔3显露出样本垫10，而显示窗4显露出包被垫的检测线T和质控线C。
为使N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）（荧光免疫层析法）测试条5、肌红蛋白(MYO)（荧光免疫层析法）测试条6、心肌肌钙蛋白I(cTnI)（荧光免疫层析法）测试条7反应时间一致，采用玻璃纤维素膜作为标记物喷涂的样本垫，由于三种标志物的分子量大小不同，层析速率也不同。如果使用同种规格的玻璃纤维素膜，样品与标记物结合后，到达检测线T和质控线C的时间不一致。先到达检测线T和质控线C的，先与包被抗体反应，一般标本在照射超过3min，就有荧光减弱现象，经乳胶荧光微球标记的标本最好及时观察，随着时间的延长，荧光强度会逐渐下降。最好是三个测试条的反应时间一致，方便同时检测。为此，本实用新型提供以下方式达到上述效果：通过选择不同规格的玻璃纤维素膜(纤维结构的紧密程度不同)使反应时间达到一致，方便同时检测。即，N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的尺寸以及检测线和质控线的位置均相同的情况下，所述N-末端脑钠肽前体测试条的样本垫为厚度0.381±0.05mm、克重70±10g/m2的玻璃纤维素膜，所述肌红蛋白测试条的样本垫为0.3±0.05mm、克重55±10g/m2的玻璃纤维素膜， 所述心肌肌钙蛋白I测试条的样本垫为0.41mm±0.05、克重77.8±10g/m2的玻璃纤维素膜。
以下列举一具体方式：N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的宽度为4mm，样本垫长度为24mm，包被垫长度为25mm，吸收垫长度为26mm，样本垫与包被垫的搭接段长度为3 mm，吸收垫与包被垫的搭接段长度为2mm；检测线和质控线设于包被垫上的两个搭接段之间；标记物覆于样本垫上，对应位于样品孔与样本垫的搭接段之间，优选地，标记物距样本垫与包被垫的搭接段2mm，标记物沿反应膜长度方向的长度为5mm。
在优选实施方式中，本实用新型的联合检测卡为矩形，三个测试条卡槽平行设置。
显示窗4处设有覆盖显示窗的透明膜12。因为包被垫9处于显示窗下，是检测器检测的区域，所以极为重要，为防止显示窗下的包被垫在运输过程与干燥剂发生直接接触，因此在检测卡上覆盖一层四周有粘性的薄膜，不仅可以起到保护包被垫的作用还可以在检测滴加完试样后，重新贴上，避免外界干扰的作用。
本实用新型的联合检测卡通过如下方法制备：
取PVC底板11，撕掉中间位置的油纸，将硝酸纤维素膜贴入中间位置，进行包被、干燥制成包被垫9。另取玻璃纤维素膜进行标记、干燥制成样本垫10。取样本垫10，撕掉PVC底板11靠近包被垫9的检测线T一侧的油纸，将样本垫10贴在与包被垫9重合3mm的PVC底板上。取吸水垫8，撕掉PVC底板11靠近包被垫9质控线一侧的油纸，将吸水垫8贴在与包被垫9重合2mm的PVC底板上。按切条机标准操作规程进行操作，切成4mm±0.1mm宽的试纸条。将切好的试纸条按要求安装到塑料卡壳的底壳上，然后扣好上壳。装在铝箔袋中加入干燥剂，封好口。
本实用新型的测试原理及方法简述如下：
N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）（荧光免疫层析法）测试条：本检测卡用一株鼠抗人NT-proBNP单克隆抗体在硝酸纤维素膜上划线包被，作为检测线T，用羊抗兔多抗在硝酸纤维素膜上划线包被制成质控线C。将另一株鼠抗人NT-proBNP单克隆抗体标记上乳胶荧光微球与兔IgG标记的乳胶荧光微球混匀后喷涂在玻璃纤维素膜上制备成样本垫10。硝酸纤维素膜靠近质控线C的一端覆盖上吸水垫，靠近检测线T的另一端覆盖样本垫。往样本垫上加入已经准备好的标准品或待测血样，抗原就会与标记物混合反应并沿着硝酸纤维素膜层析，分别与检测线T和质控线C反应。当测试结果有效时，质控线C显示一定光强度。这时检测线上的光信号强度比质控线光信号强度的比值（T/C)与样本浓度成正相关，通过标准曲线计算即可得出待测样品浓度。
肌红蛋白(MYO)（荧光免疫层析法）测试条：本试剂用一株鼠抗人肌红蛋白单克隆抗体在硝酸纤维素膜上划线包被，作为检测线T，用羊抗兔多抗在硝酸纤维素膜上划线包被制成质控线C。将另一株鼠抗人肌红蛋白单克隆抗体标记上乳胶荧光微球与兔IgG标记的乳胶荧光微球混匀后喷涂在玻璃纤维素膜上制备成样本垫。硝酸纤维素膜靠近质控线的一端覆盖上吸水垫，靠近检测线的另一端覆盖样本垫。往样本垫上加入标准品或待测血样，抗原就会与标记物混合反应并沿着硝酸纤维素膜层析，分别与检测线和质控线反应。当测试结果有效时，质控线显示一定光强度。这时检测线上的光信号强度比质控线光信号强度的比值（T/C)与样本浓度成正相关，通过标准曲线计算即可得出待测样品浓度。
心肌肌钙蛋白I(cTnI)（荧光免疫层析法）（荧光免疫层析法）测试条：本试剂用一株鼠抗人cTnI单克隆抗体在硝酸纤维素膜上划线包被，作为检测线T，用羊抗兔多抗在硝酸纤维素膜上划线包被制成质控线C。将另一株鼠抗人cTnI单克隆抗体标记上乳胶荧光微球与兔IgG标记的乳胶荧光微球混匀后喷涂在玻璃纤维素膜上制备成样本垫。硝酸纤维素膜靠近质控线的一端覆盖上吸水垫，靠近检测线的另一端覆盖样本垫。往样本垫上加入已经稀释好的标准品或待测血样，抗原就会与标记物混合反应并沿着硝酸纤维素膜层析，分别与检测线和质控线反应。当测试结果有效时，质控线显示一定光强度。这时检测线上的光信号强度比质控线光信号强度的比值（T/C)与样本浓度成正相关，通过标准曲线计算即可得出待测样品浓度。
本实用新型每个检测项目均由相对应的荧光免疫层析测试条通过加入测试样品后完成抗原抗体反应，并通过仪器完成对检测结果的判断及分析。
本实用新型实现了同一个检测卡上能够同时完成针对早期急性心肌梗塞的三个重要标志物的检测，可以帮助医生对早期急性心肌梗塞患者进行诊断，相比较单卡单测节省了时间，提高了检测效率。
以上所述实施例仅是为充分说明本实用新型而所举的较佳的实施例，本实用新型的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本实用新型基础上所作的等同替代或变换，均在本实用新型的保护范围之内。本实用新型的保护范围以权利要求书为准。
Claims (10)
1.一种诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，包括相互卡合的上盖和卡槽板，
卡槽板上设置三个测试条卡槽，三个测试条卡槽中分别放置N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条；
所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条均包括样本垫、包被垫和吸收垫，样本垫的一端搭接于包被垫的一端上，吸收垫的一端搭接于包被垫的另一端上；样本垫上覆有标记物；包被垫上设有检测线和质控线；
上盖对应三个测试条卡槽的位置均设有样品孔和显示窗，上盖与卡槽板卡合，样品孔显露出样本垫，而显示窗显露出包被垫的检测线和质控线。
2.根据权利要求1所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述样本垫为玻璃纤维素膜，所述包被垫为硝酸纤维素膜，所述吸收垫为吸水纸。
3.根据权利要求2所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的尺寸以及检测线和质控线的位置均相同，所述N-末端脑钠肽前体测试条的样本垫为厚度0.381±0.05mm、克重70±10g/m2的玻璃纤维素膜，所述肌红蛋白测试条的样本垫为厚度0.3±0.05mm、克重55±10g/m2的玻璃纤维素膜， 所述心肌肌钙蛋白I测试条的样本垫为厚度0.41mm±0.05、克重77.8±10g/m2的玻璃纤维素膜。
4.根据权利要求1所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的样本垫长度为24mm，包被垫长度为25mm，吸收垫长度为26mm，样本垫与包被垫的搭接段长度为3 mm，吸收垫与包被垫的搭接段长度为2 mm；检测线和质控线设于包被垫上的两个搭接段之间；标记物覆于样本垫上，对应位于样品孔与样本垫的搭接段之间。
5.根据权利要求4所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条对应样品孔的中心与其检测线之间的距离为7~9mm。
6.根据权利要求4所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条的宽度为4mm。
7.根据权利要求1所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述三个测试条卡槽平行设置。
8.根据权利要求1所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述显示窗处设有覆盖显示窗的透明膜。
9.根据权利要求1所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述联合检测卡为矩形。
10.根据权利要求1所述的诊断早期急性心肌梗塞标志物的联合检测卡，其特征在于，所述N-末端脑钠肽前体测试条、肌红蛋白测试条和心肌肌钙蛋白I测试条还包括底板，所述包被垫、样本垫和吸收垫均固定于所述底板上。
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|---|---|---|---|---|
| CN111638371A (zh) * | 2020-04-30 | 2020-09-08 | 吉林省格瑞斯特生物技术有限公司 | 一种心肌标志物的荧光微球联合检测装置及其制备方法 |
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2016
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| CN111638371B (zh) * | 2020-04-30 | 2021-03-30 | 吉林省格瑞斯特生物技术有限公司 | 一种心肌标志物的荧光微球联合检测装置及其制备方法 |
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Address after: 101111 Four Floor F4E of Building No. 2, Kechuang East Five Street, Tongzhou District, Beijing Patentee after: Beijing Huaketai Biotechnology Co., Ltd. Address before: 100070 Room 501, 2 building, 8 Haiying Road, Science City, Fengtai District, Beijing (Park) Patentee before: Beijing Elcoteq Bio-Technology Co., Ltd. |