CN205710703U - 细胞球收集系统 - Google Patents
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Abstract
本实用新型涉及细胞球收集系统，包括：细胞球收集小室，细胞球收集小室为中空桶状，向上开口，底部开有细孔，细孔为直径为10～30um的圆孔。培养板，培养板为中空桶状，内径大于细胞球收集小室的外径。本实用新型在细胞球收集小室的底部开有细孔，细胞球收集小室内部培养液内，直径小于目标直径的单个细胞或多个细胞聚团会通过细孔进入培养板内，细胞球收集小室外部，使得细胞球收集小室留下的单个细胞或多个细胞聚团大于细孔的直径，从而到达收集的效果，本实用新型结构简单，操作方便，适用于实验室内不同直径细胞的分离。
Description
技术领域
本实用新型涉及医学实验设备领域，特别是用于收集直径较大的细胞球收集系统。
背景技术
Transwell是一种实验技术,Trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器(Membrane filters)，也可认为是一种有通透性的支架(permeablesupports)。这项技术的主要部件是Transwell小室，其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，其关键部分是杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12um，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)。
现有技术如图3，Transwell小室11放入培养板中，Transwell小室内称上室，普通细胞培养板15内称下室，上室内盛装上层培养液12，下室内盛装下层培养液14，上层培养液12和上层培养液14以聚碳酸酯膜相隔13。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜13有通透性，下层培养液14中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液14中的成分对细胞生长、运动等的影响。应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜13，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。当然不同细胞其体积不同，具体选择时要考虑到细胞大小。
共培养体系：小于3um孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择3um以下孔径。常用0.4、3um，将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。趋化性实验：可用5、8、12um膜，上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下室，计数进入下室的细胞量可反映下室成分对上室细胞的趋化能力。①细胞B对细胞A的趋化作用：将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的趋化作用。②趋化因子对细胞的趋化作用：将细胞种于上室，下室加入某种趋化因子，可研究该趋化因子对细胞的趋化作用。肿瘤细胞迁移实验：常用8、12um膜，上室种肿瘤细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑，计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。肿瘤细胞侵袭实验常用8、12um膜，原理与肿瘤细胞迁移实验类似。
Transwell侵袭实验，其实原理简单地说就是用一层膜将高营养的培养液和低营养的培养液隔开，细胞放在低营养的培养液里，为了找吃的，细胞会往高营养的培养液里面跑，但是有膜挡着，所以要穿过膜才行。我们在膜上涂上一层基质胶，模仿细胞外基质，于是细胞要把基质消化了才可以从低营养的培养液跑到高营养的培养液里面，最后我们检测高营养的培养液里细胞量就可以知道细胞的侵袭能力了。
现有的Transwell可实现共培养体系，趋化性实验，肿瘤细胞迁移实验，肿瘤细胞侵袭实验，但是无法实现Sphere formation assay(球形成实验)中，不同直径单个细胞或多个细胞聚团的分离。
实用新型内容
本实用新型的目的是提供一种有效收集悬浮培养的细胞团、过滤掉直径小于目标直径的单个细胞或多个细胞聚团的细胞球收集系统。
细胞球收集系统，包括：
细胞球收集小室，所述细胞球收集小室为中空桶状，向上开口，底部开有细孔，细孔为直径为10～30um的圆孔。
培养板，所述培养板为中空桶状，内径大于细胞球收集小室的外径。
所述培养板的内侧表面设有超低吸附细胞的保护层。
所述细胞球收集小室的底部为圆形或者长方形。
所述细孔均匀分布。
所述细孔直径等于20um。
所述培养板的内侧略大于细胞球收集小室的外侧。
本实用新型在细胞球收集小室的底部开有细孔，细胞球收集小室内部培养液内，直径小于目标直径的单个细胞或多个细胞聚团会通过细孔进入培养板内、细胞球收集小室外部，使得细胞球收集小室留下的单个细胞或多个细胞聚团大于细孔的直径，从而到达收集的效果，本实用新型结构简单，操作方便，适用于实验室内不同直径细胞的分离。
附图说明
图1为本实用新型的剖视图；
图2为圆形细胞球收集小室的示意图；
图3为Transwell小室实验示意图；
图中：1、细胞球收集小室，2、细孔，3、培养板，11、Transwell小室，12、上层培养液，13、聚碳酸酯膜，14、下层培养液，15、普通细胞培养板。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例，对本实用新型做进一步说明。
实施例1：
细胞球收集系统，包括：细胞球收集小室1，细胞球收集小室1为中空桶状，向上开口，底部开有细孔2，细孔2为直径为10～30um的圆孔。培养板3，培养板3为中空桶状，内径大于细胞球收集小室1的外径。
培养板3的内侧表面设有超低吸附细胞的保护层。细胞球收集小室1的底部为圆形或者长方形。细孔2均匀分布。细孔2直径等于20um。培养板3的内侧略大于细胞球收集小室1的外侧。
细胞球在细胞球收集小室1内培养，分离的时候将细胞球收集小室1从培养板3取出即可。
细胞球收集系统(Sphere culture collect system)主要包括两个部分：超低吸附细胞培养板(Ultra-Low AttachmentMicroplates)和细胞球收集小室(Spherecollect well)。主要借鉴现在广泛应用的共培养小室和细胞转移检测的transwell小室。
细胞球收集小室用于收集直径大于目标直径(20um)的单个细胞或多个细胞聚团，直径小于20um的单个细胞或多个细胞聚团，被滤过。目前小室透膜根据用处不同有不同的孔径，比如0.4um和3.0um用于共培养体系，防止细胞穿透；5.0um、8.0um、12.0um用于趋化、转移侵袭实验，细胞能够穿透，但是对于直径较大的单个细胞或多个细胞聚团在Transwell小室中不能穿透。
Transwell小室常规的材质聚碳酸酯膜，细胞可以粘附。在悬浮培养过程中，材料需要是超低吸附材料。目前应用的培养板是6-well Ultra-LowAttachmentMicroplates(Corning,Corning,NY)。细胞球收集系统可以采用相同材质。
以上已对本实用新型创造的较佳实施例进行了具体说明，但本实用新型创造并不限于所述的实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本实用新型创造精神的前提下还可以作出种种的等同的变型或替换，这些等同变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
Claims (6)
1.细胞球收集系统，其特征在于，包括：
细胞球收集小室(1)，所述细胞球收集小室(1)为中空桶状，向上开口，底部开有细孔(2)，细孔(2)为直径为10～30um的圆孔 ,
培养板(3)，所述培养板(3)为中空桶状，内径大于细胞球收集小室(1)的外径。
2.根据权利要求1所述的细胞球收集系统，其特征在于，所述培养板(3)的内侧表面设有超低吸附细胞的保护层。
3.根据权利要求1所述的细胞球收集系统，其特征在于，所述细胞球收集小室(1)的底部为圆形或者长方形。
4.根据权利要求1或3任一所述的细胞球收集系统，其特征在于，所述细孔(2)均匀分布。
5.根据权利要求1所述的细胞球收集系统，其特征在于，所述细孔(2)直径等于20um。
6.根据权利要求1所述的细胞球收集系统，其特征在于，所述培养板(3)的内侧略大于细胞球收集小室(1)的外侧。
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Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN107523483A (zh) * | 2017-09-29 | 2017-12-29 | 天津医科大学总医院 | 检测肿瘤干细胞成球能力和迁移运动能力的装置及方法 |
| CN109060729A (zh) * | 2018-10-29 | 2018-12-21 | 中国人民解放军陆军军医大学第附属医院 | 基于太赫兹衰减全反射技术的transwell检测装置及方法 |
| CN109082379A (zh) * | 2018-09-29 | 2018-12-25 | 五邑大学 | 一种用于高度仿真肿瘤细胞转移的体外培养装置 |
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2016
- 2016-04-27 CN CN201620364907.0U patent/CN205710703U/zh not_active Expired - Fee Related
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