CN204958918U - 一种预装荧光pcr试剂的反应管 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种预装荧光PCR试剂的反应管，其包括反应管体以及至少一根塑料档杆，所述塑料档杆的一端固定在反应管体的敞口端，塑料档杆的另一端从反应管体的敞口端伸入反应管体内部后将反应管体内部分隔为第一放置区和第二放置区，所述第一放置区和第二放置区直接或者间接连通，所述第一放置区内放置有酶颗粒混合冻干物，所述第二放置区内放置有引物、探针、dNTP成分混合冻干物。操作人员只需要添加反应缓冲液和模版进入PCR反应管即可，不仅方便操作；降低了不同实验人员操作时发生错误操作的可能；减少了实验的系统误差，降低了PCR反应的变异系数；将易失活的酶、荧光探针等成分冻干保存，增加试剂的保存时。

Description

一种预装荧光PCR试剂的反应管

技术领域

本实用新型涉及试剂检测研究领域中的一种反应管，特别是一种预装荧光PCR试剂的反应管。

背景技术

eal-timePCR技术自1996年诞生以来，由于它显著的优越性，不仅广泛的应用于分子生物学的各个研究领域，而且也开始作为一种诊断手段应用于临床。其应用涉及到的范围包括DNA、mRNA和病毒荷载量的定量，核酸多态性分析，基因突变分析等多个领域。

正是由于Real-timePCR越来越多地应用于临床检验、出入境检验检疫、养殖动物检验检疫等等与人类健康密切相关的领域，试剂能否稳定地检出病原体，变得尤为重要。

Real-timePCR的稳定性短板主要在酶以及探针这两种组分上。

Taq酶和mmlv酶都是蛋白质，虽然自身都较为稳定，但是却经不起反复冻融时冰晶造成的损伤。试剂在半成品分装、出货、运输过程中，不可避免地会遇到反复冻融或者较长时间未按规定温度存放试剂的情况，此时会对试剂的稳定性产生一定的影响。部分公司会将mmlv酶冻干成颗粒。

荧光探针是标记荧光基团的合成DNA链，当荧光探针溶解之后，标记的基团会慢慢脱落，使得反应结果的荧光强度降低，直至试剂失效。通过增加荧光探针的量可以一定程度延长有效期，但是会增加试剂成本。将荧光探针冻干后，可以稳定存储2年以上。

冷冻干燥是利用冰晶升华的原理，在高度真空的环境下，将已冻结了的食品物料的水分不经过冰的融化直接从冰固体升华为蒸汽。其主要优点是：（1）干燥后的物料保持原来的化学组成和物理性质（如多孔结构、胶体性质等）；（2）热量消耗比其他干燥方法少。缺点是费用较高，不能广泛采用。

实用新型内容

本实用新型的目的，在于提供一种预装荧光PCR试剂的反应管。

本实用新型解决其技术问题的解决方案是：一种预装荧光PCR试剂的反应管，其包括反应管体以及至少一根塑料档杆，所述塑料档杆的一端固定在反应管体的敞口端，塑料档杆的另一端从反应管体的敞口端伸入反应管体内部后将反应管体内部分隔为第一放置区和第二放置区，所述第一放置区和第二放置区直接或者间接连通，所述第一放置区内放置有酶颗粒混合冻干物，所述第二放置区内放置有引物、探针、dNTP成分混合冻干物。

作为上述技术方案的进一步改进，所述塑料档杆的另一端从反应管体的敞口端伸入反应管体内部后固定在反应管体的侧壁。

作为上述技术方案的进一步改进，所述第一放置区位于塑料档杆和反应管体的侧壁之间，所述引物、探针、dNTP成分混合冻干物位于反应管体的底部。

作为上述技术方案的进一步改进，远离所述塑料档杆的反应管体侧壁上设有抽气孔。

作为上述技术方案的进一步改进，所述反应管体的内侧壁设有25ml刻度线。

作为上述技术方案的进一步改进，所述塑料档杆的数量为两根，两根所述塑料档杆之间形成连通第一放置区和第二放置区的间隙。

本实用新型的有益效果是：

a.操作人员只需要添加反应缓冲液和模版进入PCR反应管即可，不仅方便操作；

b.降低了不同实验人员操作时发生错误操作的可能；

c.减少了实验的系统误差，降低了PCR反应的变异系数；

d.将易失活的酶、荧光探针等成分冻干保存，增加试剂的保存时间。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单说明。显然，所描述的附图只是本实用新型的一部分实施例，而不是全部实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他设计方案和附图。

图1是本实用新型的结构示意图。

具体实施方式

以下将结合实施例和附图对本实用新型的构思、具体结构及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本实用新型的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本实用新型的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本实用新型的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本实用新型保护的范围。另外，文中所提到的所有联接/连接关系，并非单指构件直接相接，而是指可根据具体实施情况，通过添加或减少联接辅件，来组成更优的联接结构。

参照图1，一种预装荧光PCR试剂的反应管，其包括反应管体1以及至少一根塑料档杆2，所述塑料档杆2的一端固定在反应管体1的敞口端，塑料档杆2的另一端从反应管体1的敞口端伸入反应管体1内部后将反应管体1内部分隔为第一放置区5和第二放置区6，所述第一放置区5和第二放置区6直接或者间接连通，所述第一放置区5内放置有酶颗粒混合冻干物，T酶颗粒混合冻干物为aq酶、mmlv酶等蛋白成分混合冻干成颗粒状。所述第二放置区6内放置有引物、探针、dNTP成分混合冻干物。

进一步作为优选的实施方式，所述塑料档杆2的另一端从反应管体1的敞口端伸入反应管体1内部后固定在反应管体1的侧壁。

进一步作为优选的实施方式，所述第一放置区5位于塑料档杆2和反应管体1的侧壁之间，所述引物、探针、dNTP成分混合冻干物位于反应管体1的底部。

进一步作为优选的实施方式，远离所述塑料档杆2的反应管体1侧壁上设有抽气孔4。用注射器通过抽气孔4对反应管体1抽气，减少反应管体1中水蒸气含量。

进一步作为优选的实施方式，所述反应管体1的内侧壁设有25ml刻度线3。

进一步作为优选的实施方式，所述塑料档杆2的数量为两根，两根所述塑料档杆2之间形成连通第一放置区5和第二放置区6的间隙。

1.将反应试剂的引物、探针、dNTP按以下比例（10000份计）配制，混匀后分装进八连管，每孔1uL，用冻干机冻干：

2.将广州维伯鑫生物技术有限公司生产的taq酶、mmlv酶按以下比例配制，混匀后分装成1uL一份，用冻干机冻干成颗粒状：

其中，1L的酶储存液配制方法为：

3.将1颗冻干的酶颗粒放置在反应管内2根塑料挡杆间。

4.用注射器通过抽气孔（见图1）对反应管抽气，减少反应管中水蒸气含量。

5.配制1x反应缓冲液：

使用时，

1.将21uL的1x反应缓冲液加入反应管体1内，反应缓冲液将没过酶颗粒；

2.用枪头吹打几下，使冻干的酶颗粒以及管底的引物、探针、dNTP混合物加快溶解混匀；

3.添加扩增模版，上机进行PCR程序。

4.将以此种预装形式预装保存1年的禽流感N9基因荧光PCR试剂，与同样配方现配的N9基因荧光PCR试剂，进行对比。

以上是对本实用新型的较佳实施方式进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本实用新型精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (6)

1.一种预装荧光PCR试剂的反应管，其特征在于：其包括反应管体以及至少一根塑料档杆，所述塑料档杆的一端固定在反应管体的敞口端，塑料档杆的另一端从反应管体的敞口端伸入反应管体内部后将反应管体内部分隔为第一放置区和第二放置区，所述第一放置区和第二放置区直接或者间接连通，所述第一放置区内放置有酶颗粒混合冻干物，所述第二放置区内放置有引物、探针、dNTP成分混合冻干物。

2.根据权利要求1所述的预装荧光PCR试剂的反应管，其特征在于：所述塑料档杆的另一端从反应管体的敞口端伸入反应管体内部后固定在反应管体的侧壁。

3.根据权利要求2所述的预装荧光PCR试剂的反应管，其特征在于：所述第一放置区位于塑料档杆和反应管体的侧壁之间，所述引物、探针、dNTP成分混合冻干物位于反应管体的底部。

4.根据权利要求1所述的预装荧光PCR试剂的反应管，其特征在于：远离所述塑料档杆的反应管体侧壁上设有抽气孔。

5.根据权利要求1所述的预装荧光PCR试剂的反应管，其特征在于：所述反应管体的内侧壁设有25ml刻度线。

6.根据权利要求1所述的预装荧光PCR试剂的反应管，其特征在于：所述塑料档杆的数量为两根，两根所述塑料档杆之间形成连通第一放置区和第二放置区的间隙。