CN204789590U - 一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争elisa试剂盒 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，属于生物检测领域。本实用新型以镉、螯合剂和蛋白质形成的免疫抗原对小鼠进行免疫反应得到检测镉的单克隆抗体，基于镉单克隆抗体的间接竞争酶联免疫吸附测定方法适用于以模拟酸性汗液提取的纺织品中镉的快速、准确、高通量测定，实现了纺织品中镉的生物测定方法，并构建试剂盒，试剂盒包括盒盖、盒体、酶标板、盖板膜、固定板和试剂瓶，盒盖与盒体之间通过盒盖卡头与盒体卡槽盖合，结合牢固，使用方便；固定板上同时设有放置试剂瓶的凹槽和放置酶标板的酶标板卡槽，节省了材料且提高了试剂盒的空间利用率，使试剂盒的整体高度降低，便于叠加堆放。

Description

一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒

技术领域

本实用新型属于生物检测领域，更具体地说，涉及一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒。

背景技术

重金属一般以天然浓度广泛存在于自然界中，天然水体中含镉量极少，但由于人类对重金属的开采、冶炼、加工及商业制造活动日益增多，造成不少重金属如镉、汞等进入大气、水、土壤环境，引起严重的环境污染。环境中重金属镉的主要污染来源包括：铅锌矿的开采、选矿和冶炼过程中产生的废水和废气；合金钢的生产和加工过程；电镀镉的生产废水，染料、农药、油漆、玻璃、陶瓷、照相材料等生产和加工过程。镉在环境中的残留通过食物链逐渐富集，极微量的镉就可以对人体造成危害。1993年世界肿瘤研究机构已将镉定义为人类致癌物(groupI)，镉对环境的污染已引起普遍关注。因此对环境中重金属镉的检测工作越来越受到人们的关注。

当前，重金属的检测多采用原子吸收光谱、电感耦合等离子体原子发射光谱法、离子色谱仪、X射线荧光光谱法、气相色谱-质谱联用法等化学仪器方法。这些传统的检测方法虽具有较高的精确度与准确度，但检测仪器昂贵，检测相对费力、费时，且检测工作往往需要相对稳定的实验室环境，不适应现实中对快速简便检测的需求。重金属的免疫检测方法具有快速、廉价、简便、特异的优点，便携而有利于进行现场监测，克服了传统检测方法的缺点。因此，发展用于快速检测重金属镉的新方法和新技术极具现实意义。但是，目前国内外关于这方面的研究进展缓慢，尚未形成行之有效的成熟技术。基于抗原、抗体特异性结合作用的间接竞争酶联免疫吸附测定方法具有检测速度快、费用低廉、仪器简单易携、灵敏度高和选择性强等优点，且能同时分析大量的环境样本，已广泛应用于临床医学、生命科学以及环境中有机有毒物质的检测。ELISA试剂盒的种类有很多，分别适用于不同物质的检测，如中国专利申请号为200810019780.9，公开日为2008年08月13日的专利申请文件公开了一种重金属镉多克隆抗体的制备及酶联免疫吸附测定方法，包括步骤包括(A)完全抗原的合成，完全抗原的合成是多克隆抗体制备的关键；(B)抗体的制备；酶联免疫吸附测定方法步骤包括：(1)采用方阵滴定法确定包被原Cd-ITCBE-OVA与抗体最佳反应浓度，以最佳浓度的包被原Cd-ITCBE-OVA包被96孔酶标板；(2)间接竞争酶联免疫吸附测定试验；(3)考察各种条件对CI-ELISA的影响，优化反应条件；(4)在己优化的反应条件下，建立CI-ELISA，绘制标准抑制曲线。中国专利申请号为201420625733.X，授权公告日为2015年03月18日的专利申请文件公开了一种两用ELISA试剂盒，包括盒体，以及盒体内的酶标板、标准品管、抗体管、稀释液瓶和底物瓶，所述底物瓶包括单组分TMB底物瓶以及两个化学发光底物瓶；所述酶标板包括板体及多个板孔，所述板孔具有非透明的侧壁以及透明的底面，每个板孔的透明底面的外壁上均对应覆盖有一片非透明的不干胶层。由于检测的物质不同，所需的试剂种类及体积也均不相同，因此，ELISA试剂盒的使用对象具有专一性。目前，现有的试剂盒的盒盖与盒体之间通过胶带密封，使用不方便，且无法重复使用；此外，盒体的空间利用率低，且现有的试剂盒检测容量普遍偏低，不适合于批量实验操作。

发明内容

1、要解决的问题

针对现有试剂盒存在的盒体与盒盖密封不牢固、使用不方便、盒体空间利用率低，市场上没有用于检测重金属镉的酶联免疫反应试剂盒等问题，本实用新型提供一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，包括盒盖、盒体、酶标板、盖板膜、固定板和试剂瓶，盒盖与盒体之间通过盒盖卡头与盒体卡槽盖合，结合牢固，使用方便；固定板上同时设有放置试剂瓶的凹槽和放置酶标板的酶标板卡槽，节省了材料且提高了试剂盒的空间利用率，使试剂盒的整体高度降低，便于叠加堆放。

2、技术方案

为解决上述问题，本实用新型采用如下的技术方案。

一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，包括盒盖、盒体、酶标板、盖板膜、固定板和试剂瓶，所述的盒盖上设有盒盖卡头，所述的盒体上设有盒体卡槽，所述的盒盖卡头与盒体卡槽相匹配形成卡合结构；所述的盖板膜为平板结构，其尺寸与酶标板尺寸相匹配；所述的固定板上设有凹槽和酶标板卡槽，所述的凹槽包括第一凹槽、第二凹槽、第三凹槽、第四凹槽、第五凹槽、第六凹槽、第七凹槽和第八凹槽；所述的固定板设置在盒体的底部，所述的试剂瓶位于凹槽中，所述的酶标板位于酶标板卡槽中，所述的盖板膜位于酶标板的上方。

优选地，所述的酶标板为96孔试剂板，是酶联免疫反应的固相载体，包括酶标板外框支架和12条酶标反应微孔条，酶标板外框支架上设有8×12个孔，每条酶标反应微孔条上串联有8个酶标反应微孔，所述的酶标反应微孔中设有预包被镉单克隆抗体，酶标反应微孔条安装在酶标板外框支架上，酶标反应微孔条上的酶标反应微孔相应的置于酶标板外框支架的孔内。

优选地，所述的酶标板真空密封于铝箔袋内。

优选地，所述的酶标板卡槽的大小与酶标板的尺寸相匹配，酶标板卡槽的两侧设有凹槽。

优选地，所述的试剂瓶有15个，其中有8个试剂瓶的容积为2.0mL，分别盛有镉标准储备液、镉梯度浓度的标准品稀释液、镉单克隆抗体溶液和酶标二抗；有5个试剂瓶的容积为7.0mL，分别盛有含EDTA的抗体稀释液、底物缓冲液、双氧水溶液、TMB显色液和终止液；有2个试剂瓶的容积为30.0mL，分别盛有抗体稀释液和30倍浓缩洗涤液。

优选地，所述的试剂瓶的制作材料为PE塑料；固定板的制作材料为泡沫塑料。

优选地，所述的盒盖卡头与盒盖连接处的夹角为90°，盒盖卡头的另一侧设有凸起，凸起的纵截面为直角三角形；所述的盒体卡槽的纵截面为长条形。

3、有益效果

相比于现有技术，本实用新型的有益效果为：

(1)本实用新型的酶标板卡槽设置在固定板上用于放置酶标板，酶标板卡槽的两侧还设有凹槽，便于将酶标板从酶标板卡槽中取出，此外，固定板上还设有15个凹槽，用于放置试剂瓶，酶标板与试剂瓶均放于固定板上，节省了材料且提高了试剂盒的空间利用率，使试剂盒的整体高度降低，便于叠加堆放；

(2)本实用新型的试剂盒的盒盖与盒体通过盒盖卡头与盒体卡槽密封，盒盖卡头的一侧设有凸起，凸起的纵截面为直角三角形，盒体卡槽的纵截面为直线，盒盖卡头与盒体卡槽之间形成卡合结构，使试剂盒的开合更方便，且能重复使用；

(3)本实用新型的试剂盒的固定板上设有15个试剂瓶，分别盛有检测用的试剂，其中盛有镉标准储备液和镉梯度浓度的标准品稀释液的试剂瓶的瓶盖为白色，瓶身为棕色；盛有TMB显色液的试剂瓶的瓶盖为灰色，瓶身为棕色；盛有镉单克隆抗体溶液的试剂瓶的瓶盖为蓝色，瓶身为白色；盛有酶标二抗的试剂瓶的瓶盖为绿色，瓶身为白色；盛有含EDTA的抗体稀释液的试剂瓶的瓶盖为黄色，瓶身为白色；盛有底物缓冲液的试剂瓶的瓶盖为棕色，瓶身为白色；盛有抗体稀释液的试剂瓶的瓶盖和瓶身均为棕色，盛有双氧水溶液的试剂瓶的瓶盖和瓶身均为黑色；盛有终止液的试剂瓶的瓶盖为红色，瓶身为白色；盛有30倍浓缩洗涤液的试剂瓶的瓶盖为黑色，瓶身为白色，试剂瓶及其瓶盖颜色特异，便于识别，提高使用效率；

(4)本实用新型的试剂盒可连续进行多个样品中重金属镉含量的测定，减少了检测样本所需要的时间，检测成本低廉，可以检测水体中重金属镉的含量，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，易于广泛推广应用。

附图说明

图1为本实用新型的俯视图；

图2为本实用新型的立体结构示意图；

图3为本实用新型酶标板的俯视图；

图4本实用新型盖板膜的俯视图；

图5为本实用新型固定板的俯视图；

图6为本实用新型试剂瓶的正视图；

图7为本实用新型盒盖卡头与盒体卡槽卡合状态的侧视图。

图中：1、盒盖；2、盒体；3、酶标板；4、盖板膜；5、固定板；6、试剂瓶；101、盒盖卡头；201、盒体卡槽；301、酶标板外框支架；302、酶标反应微孔条；303、酶标反应微孔；501～508、试剂瓶凹槽；509、酶标板卡槽。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本实用新型进一步进行描述。

实施例1

如图1～7所示，一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，包括盒盖1、盒体2、酶标板3、盖板膜4、固定板5和试剂瓶6，盒盖1上设有盒盖卡头101，盒盖卡头101与盒盖连接处的夹角为90°，盒盖卡头101的另一侧设有凸起，凸起的纵截面为直角三角形；盒体2上设有盒体卡槽201，其纵截面为直线；盒盖卡头101与盒体卡槽201相匹配形成卡合结构；酶标板3为酶联免疫反应的固相载体，包括酶标板外框支架301和12条酶标反应微孔条302，酶标板外框支架301上设有8×12个孔，每条酶标反应微孔条302上串联有8个酶标反应微孔303，预包被镉单克隆抗体设置在酶标反应微孔303中，酶标反应微孔条302安装在酶标板外框支架301上，酶标反应微孔条302上的酶标反应微孔303相应的置于酶标板外框支架301的孔内，酶标板3真空密封于铝箔袋内；盖板膜4为平板结构，其尺寸与酶标板3尺寸相匹配；固定板5的制作材料为泡沫塑料，其上设有凹槽501～508和酶标板卡槽509；固定板5设置在盒体2的底部，酶标板卡槽509的大小与酶标板3的尺寸相匹配，其两侧设有凹槽，酶标板3位于酶标板卡槽509中，试剂瓶6位于凹槽501～508中，试剂瓶6的制作材料为PE塑料，有15个，其中有8个试剂瓶的容积为2.0mL，1个试剂瓶盛有镉标准储备液(瓶盖为白色，瓶身为棕色)，1个试剂瓶盛有镉单克隆抗体溶液(瓶盖为蓝色，瓶身为白色)，1个试剂瓶盛有酶标二抗(瓶盖为绿色，瓶身为白色)，余下5个盛有镉梯度浓度的标准品稀释液(瓶盖为白色，瓶身为棕色)，分别放置在凹槽501中；有5个试剂瓶的容积为7.0mL，分别盛有含EDTA的抗体稀释液(瓶盖为黄色，瓶身为白色，放置在凹槽507中)、TMB显色液(瓶盖为灰色，瓶身为白色，放置在凹槽508中)、底物缓冲液(瓶盖为棕色，瓶身为白色，放置在凹槽504中)、双氧水溶液(瓶盖和瓶身均为黑色，放置在凹槽503中)和终止液(瓶盖为红色，瓶身为白色，放置在凹槽505中)；有2个试剂瓶的容积为30.0mL，分别盛有抗体稀释液(瓶盖和瓶身均为棕色，放置在凹槽502中)和30倍浓缩洗涤液(瓶盖为黑色，瓶身为白色，放置在凹槽506中)。盖板膜(4)位于酶标板(3)的上方。

本实施例的试剂盒中同时附带自封袋、说明书和质检报告各一份。本实用新型的试剂盒的尺寸为17cm×13cm×4cm(长×宽×高)，使用时，轻轻按压盒盖，盒体卡槽即沿着盒盖卡头101的凸起边缘移动滑入盒盖卡头101与盒盖1之间的空隙内，由于凸起的纵截面呈直角三角形，盒体卡槽201沿着直角三角形的斜边滑动阻力小，使用方便，盒盖与盒体呈闭合状态时的局部侧视图如附图7所示；当需要打开盒盖1时，轻轻按压盒体卡槽201所在的盒体2侧面，盒体2侧面发生凹陷变形，盒体卡槽201发生水平位移，同时用手掀起盒盖1即可方便的打开试剂盒。此外，酶标板卡槽509的两侧设有凹槽，便于将酶标板3从酶标板卡槽509中取出。

Claims (7)

1.一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，包括盒盖(1)、盒体(2)、酶标板(3)、盖板膜(4)、固定板(5)，其特征在于：所述的盒盖(1)上设有盒盖卡头(101)，所述的盒体(2)上设有盒体卡槽(201)，所述的盒盖卡头(101)与盒体卡槽(201)相匹配形成卡合结构；所述的盖板膜(4)为平板结构，其尺寸与酶标板(3)尺寸相匹配；所述的固定板(5)上设有凹槽和酶标板卡槽(509)，所述的凹槽包括第一凹槽(501)、第二凹槽(502)、第三凹槽(503)、第四凹槽(504)、第五凹槽(505)、第六凹槽(506)、第七凹槽(507)和第八凹槽(508)；所述的固定板(5)设置在盒体(2)的底部，所述的试剂瓶(6)位于凹槽中，所述的酶标板(3)位于酶标板卡槽(509)中，所述的盖板膜(4)位于酶标板(3)的上方。

2.根据权利要求1所述的一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于：所述的酶标板(3)为96孔试剂板，是酶联免疫反应的固相载体，包括酶标板外框支架(301)和12条酶标反应微孔条(302)，酶标板外框支架(301)上设有8×12个孔，每条酶标反应微孔条(302)上串联有8个酶标反应微孔(303)，所述的酶标反应微孔(303)中设有预包被镉单克隆抗体，酶标反应微孔条(302)安装在酶标板外框支架(301)上，酶标反应微孔条(302)上的酶标反应微孔(303)相应的置于酶标板外框支架(301)的孔内。

3.根据权利要求2所述的一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于：所述的酶标板(3)真空密封于铝箔袋内。

4.根据权利要求1所述的一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于：所述的酶标板卡槽(509)的大小与酶标板(3)的尺寸相匹配，酶标板卡槽(509)的两侧设有凹槽。

5.根据权利要求1所述的一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于：所述的试剂瓶(6)有15个，其中有8个试剂瓶的容积为2.0mL，分别盛有镉标准储备液、镉梯度浓度的标准品稀释液、镉单克隆抗体溶液和酶标二抗；有5个试剂瓶的容积为7.0mL，分别盛有含EDTA的抗体稀释液、底物缓冲液、双氧水溶液、TMB显色液和终止液；有2个试剂瓶的容积为30.0mL，分别盛有抗体稀释液和30倍浓缩洗涤液。

6.根据权利要求5所述的一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于：所述的试剂瓶(6)的制作材料为PE塑料；固定板(5)的制作材料为泡沫塑料。

7.根据权利要求1所述的一种基于镉单克隆抗体检测镉的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于：所述的盒盖卡头(101)与盒盖在连接处的夹角为90°，盒盖卡头(101)的另一侧设有凸起，凸起的纵截面为直角三角形；所述的盒体卡槽(201)的纵截面为长条形。